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Citotecnología

Centrifugación Centrifugas

Centrifugación

Se habla de centrifugación cuando tenemos partículas de distinto tamaño en un medio acuoso, éstas sedimentan hacia el fondo a una velocidad que depende de su peso. Es un método por el cual se pueden separar sólidos de líquidos de diferente densidad mediante una centrifugadora.

Centrifuga

Es una maquina que pone en rotación una muestra para separar por fuerza centrifuga sus componentes o fases las que son generalmente una solida y una liquida, en función de su densidad.

CENTRIFUGA NORMAL

Tipos de centrifugas

Centrifugas de baja velocidad o clínicas: son útiles para partículas grandes como células, precipitados de sales insolubles.

Centrifugas de alta velocidad: son útiles en la separación de fracciones celulares insuficientes para la separación de ribosomas, virus, macromoléculas.

• Ultracentrífugas: son de 2 tipos. - Analíticas: obtención de datos precisos de propiedades de sedimentación

- Preparativas: aislamiento de partículas de bajo S (coeficiente de sedimentación)

Tipos de centrifugas

Centrifugadora de baja velocidad

Centrifugas de alta velocidad

Ultracentrífugas

Tipos de Centrifugación

Centrifugación Diferencial : es el método mas común de separación. En este método el tubo de centrifuga se llena con una mezcla uniforme. Tras la centrifugación se obtienen dos fracciones: un tubo que contiene el material sedimentado y un sobrenadante con el material no sedimentado. El método es bastante inespecifico y no se puede saber si la partícula buscada quedara en el sobrenadante, en el tubo o repartido entre ambos ; sin embargo es una técnica muy útil para aislamiento de organeras subcelulares.

Centrifugación en Gradiente de Concentración: este método es algo mas complicado que la centrifugación diferencial. La técnica no solo permite la separación de varios sino de todos los componentes de la muestra, también permite realizar medidas analíticas. Este método implica la utilización de un soporte fluido cuya densidad aumenta desde la zona superior a la inferior.

Existen 2 variaciones dentro de la centrifugación en gradiente de densidad:

Centrifugación de equilibrio en gradiente o isopicnica: esta técnica se emplea para separar partículas similares en tamaños pero distintas en densidad. Puestos que las proteínas poseen casi la misma densidad, este método no suele utilizar para su separación, sin embargo, en situaciones donde intervienen diferentes densidades, la centrifugación isopicnica es el método adecuado.

Centrifugación zonal: la muestra a analizar se deposita en la parte superior de un gradiente de densidad preformado. Bajo fuerza centrifuga las partículas comenzaran a sedimentar a través del gradiente, moviéndose cada partícula a diferentes velocidades dependiendo de su masa.