DEDICATORIADedico este trabajo aquellas personas que me ensearon que la mejor libertad del ser humano est en la superacin personal e intelectual, estas personas son mis padres, que con la ayuda e iluminacin de Dios, me dieron su apoyo a diario para culminar con xito y responsabilidad la presente trabajo investigativo.

AGRADECIMIENTOPor medio de este presente trabajo doy a conocer mis sinceros agradecimientos primeramente a mis Padres quienes me han brindado todo su apoyo y que con sus sabios consejos me supieron orientar e inculcar principios morales, para que as siga adelante y culminen mis estudios.Tambin al docente en curso, quien con paciencia y conocimientos nos ha sabido guiar en el transcurso del presente trabajo investigativo y de esta manera culminar el mismo.

OBJETIVOSEste trabajo monogrfico pretende los siguientes objetivos: Conocer el trmino de anticuerpos.

Saber las clases de anticuerpos que se han descubierto en el transcurso de los ltimos aos.

Dar a conocer las reacciones de cada anticuerpo y los beneficios que estos poseen.

De cierta manera conocer los anticuerpos monoclonales y policlonales y los diversos estudios de laboratorio que se han llevado a cabo.

ndiceDedicatoria....2Agradecimiento....3Objetivos....4ndice...5Introduccin......6

MARCO TERICOCAPITULO IANTICUERPOS MONOCLONALES Y ANTICUERPOS POLICLONALESLos Anticuerpos.....7Divisin de Anticuerpos8

CAPITULO IIANTICUERPOS MONOCLONALESDefinicin..9Cmo se obtienen los anticuerpos monoclonales?Aplicaciones de los anticuerpos monoclonales.....11Perspectivas de los anticuerpos monoclonalesSistemas de produccin masivas de los anticuerpos monoclonales..13

CAPITULO IIIANTICUERPOS POLICLONALES

Definicin..15Uso de las propiedades de anticuerpos policlonales.17

Bibliografa..18Anexos..19

INTRODUCCINEl reconocimiento de un componente protector (anticuerpos) en el suero de pacientes convalecientes de enfermedades infecciosas, marc los inicios del desarrollo de la medicina preventiva. El uso de estos anticuerpos protectores como fracciones de inmunoglobulinas crudas que se unen a los antgenos represent el primer tratamiento efectivo de numerosas enfermedades infecciosas.Los anticuerpos, tambin denominados inmunogloblulinas (Ig), son glucoprotenas especializadas que hacen parte de la inmunidad humoral; son producidas por las clulas del sistema inmune llamadas clulas B, que tienen la capacidad de reconocer otras molculas especficas llamadas antgenos.La respuesta inmunolgica especfica se desarrolla cuando un organismo ha sido expuesto a uno o varios antgenos, originando una respuesta policlonal, es decir, la produccin de anticuerpos contra un rango amplio de estructuras presentes en los antgenos. Por el contrario, la respuesta monoclonal se da por la seleccin de un solo clon activado de clulas B que produce un anticuerpo para un determinante antignico nico.

MARCO TERICOCAPITULO IANTICUERPOS MONOCLONALES Y ANTICUERPOS POLICLONALES1. Los anticuerpos.Un anticuerpo se define como una inmunoglobulina (Ig) capaz de una combinacin especifica con el antgeno que ha causado su produccin en un animal susceptible. Ellos son producidos en respuesta a la invasin de molculas forneas en el cuerpo. Los anticuerpos existen como una o ms unidades en forma de Y, compuesta por cuatro cadenas polipeptdicas. Cada Y contiene dos copias idnticas de una cadena pesada (HC, heavy chain), y dos copias idnticas entre s de una cadena ligera (LC, light chain), llamadas as por sus pesos moleculares relativos que son de aproximadamente 50kDa la cadena pesada y de cerca de 25kDa la cadena ligera. Estas cadenas se mantienen unidas mediante enlaces disulfuros intercatenarios. Estas cadenas pueden separarse por reduccin de los enlaces S-S y acidificacin. Estructura de un Anticuerpo

1.1 Divisin de anticuerpos.Los anticuerpos pueden ser divididos en cinco clases: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE, basado en el nmero de unidades Y y en el tipo de cadena pesada. Las cadenas pesadas de IgG, IgM, IgA, IgD e IgE, son conocidas como gamma, mu, alpha, delta y psilon. Las cadenas ligeras de cualquier anticuerpo pueden ser clasificadas como tipo kappa o lambda, basadas en pequeas diferencias estructurales polipeptdicas; sin embargo, las cadenas pesadas determinan la subclase de cada anticuerpo.Tabla 1. Propiedades fisicoqumicas de inmunoglobulinas humanas

Tabla 2. Propiedades fisicoqumicas de inmunoglobulinas de ratn

CAPITULO II2. ANTICUERPOS MONOCLONALES2.1 Definicin: Los anticuerpos monoclonales (AcMc) estn asociados a Innumerables acontecimientos, siendo los ms Importantes: su obtencin, sus diferencias con los anticuerpos policlonales (AcPc) su produccin a gran escala, por ltimo. las perspectivas que ellos nos ofrecen en la moderna medicina y en la Investigacin.Son inmunoglobulinas homogneas secretadas por un slo clon celular (clulas B y plasmticas), en las que todas sus reacciones con un antgeno (Ag) definido son siempre las mismas.

2.2 Cmo se obtienen los Anticuerpos Monoclonales?Fue en 1975 cuando George Khler y Csar Milstein demostraron que la hibridizacIn (fusin) de linfocitos inmunes de ratn con clulas de mieloma originaban clulas hbridas las cuales podan secretar inmunoglobulinas homogneas de especificidad predefinida los (anticuerpos monoclonales).

La tecnologa convencional de produccin de AcMc en animales, consta de una serie de etapas que van desde la seleccin del animal donante de linfocitos y su esquema de inmunizacin, hasta la adecuada conservacin de los hbridos seleccionados. Estas etapas deben ser objeto de un cuidadoso anlisis previo, el cual, garantice la obtencin exitosa del AcMc deseado.

De forma general esta tecnologa se encuentra basada en los siguientes aspectos:

Los linfocitos inmunizados sintetizan su DNA por dos vas: endgena o del Novo y exgena o del Salvamento. Estas clulas de Bazo mueren en periodos cortos cuando se encuentran en cultivo. La lnea de mieloma utilizada en hipoxantinguanidin fosforribosil - transferasa negativas (HGPRT) caracterstica por la cual no sintetizan DNA por la va exgena, realzndose nicamente la sntesis por la va endgena. Estas clulas en cultivo se mantienen viables y se reproducen rpidamente.

2.3 APLICACIONES DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.En la actualidad los AcMc presentan aplicaciones muy tiles en la Inmunologa. Bioqumica, Histologa. Biologa celular y otras especialidades.

Definicin de sub-poblaciones celulares. Tipificacin de antgenos de tejido y grupo sanguneo. Diagnstico y tratamiento de enfermedades infecciosas y parasitarias. Deteccin de los niveles circulantes de hormonas y otros factores sricos. Demostracin de daos tisulares. Deteccin de txicos, mutgenos y drogas. Fabricacin de antivenenos. Diagnstico, seguimiento y tratamiento de tumores malignos. Facilitacin de trasplante de rganos y tejidos.

2.4 PERSPECTIVAS DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.La aplicacin de AcMc Murinos (fusin de linfocitos y mielomas de ratn). Se ha visto limitada cuando stos son administrados en los seres humanos de manera repetitiva. Provocndose respuestas colaterales indeseadas. Es as que las investigaciones se han intensificado en la produccin de AcMc Humanos con objeto de superar estos problemas y penetrar as. En el conocimiento de los mecanismos de la respuesta humoral humana, su relevancia en el caso del cncer, en las enfermedades autoinmunes y en los procesos alrgicos.No obstante, la tecnologa de obtencin de AcMc Humanos est menos desarrollada que para el caso de los AcMc Murinos, siendo el principal problema, la dificultad de obtener los linfocitos inmunes. En la actualidad, la produccin de AcMc Humanos se viene realizando por las siguientes opciones:Procedimientos de inmunizacin y estimulacin in vitro de Linfocitos humanos. Fucionados con una lnea de mieloma humana.

Con Linfocitos humanos transformados con el virus Epstein Barr (EBV) fusionados con una lnea de mieloma humana. Con Linfocitos B humanos fundidos con lneas de mieloma de ratn o rata (Heterohibridonas).Otra alternativa para evitar los problemas asociados al uso teraputico de los AcMc Murinos, son los Anticuerpos Quimricos, los cuales se obtienen a base de manipulaciones genticas. De forma general se construyen por el ensamblado de secuencia de genes, que codifican las regiones variables de las cadenas ligeras y pesadas de un Ac de ratn, con las regiones constantes de las cadenas de inmunoglobulina humana. Posteriormente, se procede a la transfeccin de esos genes a un determinado mieloma.

2.5 SISTEMAS DE PRODUCCIN MASIVAS DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.Los sistemas de produccin AcMc se han catalogado de acuerdo a la cantidad de Ac que se obtienen, en pequea, mediana y gran escala; estos sistemas pueden ser elaborados in vivo y en vitro respectivamente.In vivo se produce a partir de ascitis tumoral de ratones o ratas, procedimiento por el cual se obtienen pequeas cantidades (alrededor de 30 mg por raton). Es lgico pensar que para un escalado hasta niveles de Kg., que son necesarios para estudio de tratamiento e imgenes de grandes grupos de pacientes afectados de cncer, se consumiran decenas de miles de ratones, lo cual, elevara los costos tanto econmicos, como de trabajo.Como una alternativa se tiene el cultivo celular in vitro, donde las clulas pueden mantenerse inmovilizadas o en suspensiones homogneas, requirindose siempre una contante perfusin de medio frasco, el cual, permitir la viabilidad de las clulas por tiempos prolongados. Para este fin, se han propuesto los siguientes mtodos: Cultivo estacionario en botella roller. Encapsulacin en Alginato de sodio. Perfusin en fibras huecas. Bioreactores de burbujeo. Bioreactores de agitacin constante.Los cuales han permitido obtener grandes cantidades de Ac en forma ms econmica y menos trabajosa, y que en la actualidad estn siendo consideradas.

3. ANTICUERPOS POLICLONALES3.1 Definicin: Anticuerpos policlonalessonanticuerposderivados de diferentes lneas declulas B, los linfocitos encargados de la respuesta ante elementos ajenos (antgenos) mediante anticuerpos.Los anticuerpos policlonales son una mezcla deinmunoglobulina, secretados en contra de un antgeno especfico, cada una reconociendo diferentes epitopes.Habitualmente se obtienen de lo que se denomina unantisuero. Obtenido de la inyeccin reiterada de unantgenoen un animal, con el fin de generar una respuesta inmune. De este animal se toma una muestra de sangre y de esta muestra es obtenido el suero que finalmente es purificado para obtener la variedad de anticuerpos policlonales de inters.

Los anticuerpo policlonales son tiles en la deteccin de protenas que tienen niveles de expresin ms bajos, pues ms de un anticuerpo puede unirse a una nica protena, aumentando con ello, la seal producida. Los policlonales generados contra la secuencia completa de protenas recombinantes se recomiendan especficamente parainmunoprecipitacionesy otras tcnicas que implican la conformacin nativa de la protena. Al llevar a cabo unainmunoprecipitacin, unin maximizada del anticuerpo es necesaria para garantizar la precipitacin de la diana y cualquier potencial asociado, a pesar de que las regiones diana pueden ser bloqueadas por estos asociados.

Una caracterstica de grandes molculas antignicas es que ellas inducen la activacin de muchas clulas B productoras de anticuerpos en el animal inmunizado. Esta mezcla de anticuerpos policlonales resultantes puede entonces reconocer una variedad de eptopes sobre el antgeno, el cual puede ser una caracterstica de uso especial en algunos procedimientos experimentales (Figura 5). Debido a que esta mezcla de anticuerpos policlonales reacciona con mltiples eptopes sobre la superficie del antgeno, ellos pueden ser ms tolerantes de cambios menores en el antgeno, por ejemplo, polimorfismo, heterogeneidad de glicosilacin o ligera desnaturalizacin, que los anticuerpos monoclonales (homogneos).

3.2 USO DE LAS PROPIEDADES DE ANTICUERPOS POLICLONALES.

Los anticuerpos policlonales frecuentemente reconocen mltiples eptopes hacindolos ms tolerantes a pequeos cambios en la naturaleza del antgeno. Son frecuentemente la opcin preferida para la deteccin de protenas desnaturalizadas. Pueden ser generados en una variedad de especies, incluyendo conejos, cabras, ovejas,asnos, gallinas y otros, dndole al usuario muchas opciones en el diseo experimenta. Los anticuerpos policlonales son a veces usados cuando la naturaleza del antgeno en una especie no estudiada no se conoce. Los anticuerpos policlonales se une a mltiples eptopes y as ellos generalmente proveen una deteccin ms robusta.

Bibliografa

1. Sindelar RD. Pharmaceutical biotechnology. An introduction for pharmacists and pharmaceutical Scientists. 1st ed. Amsterdam: Harwood Academic Publisher; 1997. p.288-9.2. Rojas W, Cano LE. Inmunologa. 12a edicin. Medelln: Corporacin para Investigaciones Biolgicas; 2001. p.155-6.3. Gavilondo JV. Anticuerpos monoclonales. Teora y prctica. La Haba- na: Elfos Scienticiae; 1995. p.47-51.4. Bona CA, Bonilla FA. Textbook of immunology. Second edition.Amsterdam: Harwood Academic Publisher; 1990.5. Bruggemann M, Caskey HM, Teale C, Waldmann H, Williams GT, Surani MA, Neuberger MS. A repertoire of monoclonal antibodies with human heavy chains from transgenic mice. Proc Natl Acad Sci USA. 1989;86:6709-13.

Anexos