LAS BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO (BPL). HISTORIA Y APLICACION

Las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) son un sistema de calidad que recopilan los procesos

organizativos y las condiciones bajo las cuales los estudios no-clínicos de seguridad sanitaria y medioambiental son planificados, realizados, controlados, registrados, archivados e informados.

Su objetivo es asegurar la calidad e integridad de todos los datos obtenidos durante un estudio

determinado, y su cumplimiento es necesario para todos aquellos estudios no clínicos de seguridad

sobre productos farmacéuticos, productos pesticidas, productos cosméticos, medicamentos veterinarios, así como, aditivos alimentarios, aditivos de piensos y productos químicos industriales.

La calidad comparable de datos experimentales constituye la base del reconocimiento mutuo entre

los diferentes países. Si cada uno de éstos puede confiar en los datos experimentales obtenidos en

otros países, se evita la duplicidad o repetición de los ensayos. De este modo, se ahorran gastos, tiempo y reducción cuantitativa de animales destinados a experimentación. La aplicación de estos principios debe contribuir a eliminar barreras técnicas en el comercio y continuar mejorando la protección

de la salud humana y del medio ambiente.

Históricamente, los pasos seguidos hasta las normas y disposiciones que rigen actualmente son los

siguientes: Hasta mediados de los años 70, las autoridades de la Food and Drug Administration

(FDA) asumían que los estudios presentados para su aprobación, cumplían con uno de los requisitos

recomendados, que era el de la fiabilidad y exactitud de los datos obtenidos durante el experimento.

Las autoridades observaron que en algunos estudios presentados por las compañías farmacéuticas

había datos contradictorios y evidencias de prácticas de laboratorio inaceptables. Eso hizo que en los

años 1975 y 1976, los propios laboratorios farmacéuticos solicitaran a la FDA la redacción y el establecimiento de una normativa que regulase los ensayos toxicológicos, a fin de corregir y evitar las

anomalías observadas, anomalías que incluían fundamentalmente las siguientes deficiencias o errores:

• Insuficiente planificación de los ensayos.

• El personal técnico desconocía la importancia de atenerse exactamente a los protocolos

experimentales.

• Los datos del estudio no estaban sujetos a una supervisión periódica.

• Deficiencias en la forma de tomar, valorar y archivar los datos primarios.

• Los protocolos no permitían la evaluación de todos los datos disponibles.

• Imposibilidad de certificar la cualificación científica y experiencia del personal implicado en el ensayo

• Aplicación inadecuada de las técnicas de laboratorio y del manejo de los animales de

experimentación.

• Los estudios contratados por terceros no eran supervisados por los centros encargados.

• Algunos datos obtenidos durante el ensayo, no constaban en el informe final.

A la vista de la baja calidad encontrada en algunos informes, después de un programa de inspecciones llevado a cabo en todo el país y a fin de intentar solucionar estas incorrecciones, el 19 de noviembre de 1976 se propuso un proyecto de norma que la FDA publicó en el Federal Register (FR),

denominándolo “Good Laboratory Practice Regulations for Nonclinical Laboratory Studies”. A partir de este momento se sucedieron toda una serie de inspecciones, publicándose sus resultados. Después de unos ligeros cambios salió la versión definitiva de las BPL en el Code of Federal Regulations

(CFR) (21, Part. 58), para ser revisado con posterioridad (véase CFR, vol. nº 42, nº 172,1987).

La Organización para la Cooperación y Desarrollo Económico (OCDE) a la vista de la divulgación

de dichas normas por la FDA, tomó conciencia del problema y un grupo de expertos, elaboraron una

guía sobre los Principios de las BPL muy parecida a la de la FDA, editándose en 1981 con el título de

“OECD Principles of Good Laboratory Practice”. Esta guía, a pesar de que no es de obligado

cumplimiento, sí que es una recomendación a seguir para todos los países que forman dicha 3 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

organización. Durante los años 1995 y 1996 se realizó una revisión, redactando una nueva versión a

mediados de 1998. La Unión Europea (UE) asumió las BPL de la OCDE, publicando las siguientes

directivas:

• 9 junio 1988: Directiva 88/320/CEE relativa a la inspección y verificación de las BPL.

• 18 diciembre 1989: Directiva 90/18/CEE por la que se adapta al progreso técnico el

Anexo de la Directiva 88/320/CEE.

Hay que indicar que las directivas de la UE para ser efectivas deben ser publicadas en cada uno de

los países que forman dicha Unión. En España los dos Reales Decretos (RD) que establecen los principios de las BPL son:

• RD 822/1993, de 28 de mayo (BOE nº 128)

• RD 2034/1994, de 14 de octubre (BOE nº 281)

Considerando las modificaciones realizadas por la OCDE y siendo estas publicadas en 1998, la UE

ha revisado las dos directivas anteriormente señaladas, a fin de incorporar estas modificaciones, quedando reflejadas en las dos nuevas Directivas:

• 8 marzo 1999: Directiva 1999/11/CE

• 8 marzo 1999: Directiva 1999/12/CE

Como consecuencia de estas publicaciones, España también ha modificado sus dos RD, sustituyendo el anexo del RD 822/1993 por el RD 1369/2000 de 19 de julio (BOE núm. 173) y el RD

2043/1994 por la ORDEN del 14 de julio de 2000 (BOE núm. 103). La directiva 1999/11/CE, establece que las BPL “deben aplicarse a los ensayos no clínicos de seguridad sobre productos de ensayo

contenidos en productos farmacéuticos, plaguicidas, cosméticos, medicamentos veterinarios, aditivos

utilizados en la alimentación humana y animal, y sustancias químicas industriales. Estos productos de

ensayo suelen ser sustancias químicas sintéticas, pero también pueden ser de origen natural o biológico y, en algunas circunstancias, puede tratarse de organismos vivos. El propósito de los estudios con

estos productos es obtener datos sobre sus propiedades y su inocuidad para la salud humana y medioambiente”. En este contexto podríamos considerar como estudios de seguridad, y por lo tanto realizarse conforme a las BPL, los siguientes tipos de estudios:

• Estudios de toxicidad aguda.

• Estudios de toxicidad por dosis repetidas (subagudas y crónicas).

• Ensayos de mutagénesis, "in vivo" e "in vitro".

• Estudios de carcinogénesis.

• Estudios de fototoxicidad y estudios de ototoxicidad.

• Ensayos de tolerancia y ensayos de irritación (ocular y dérmica).

• Estudios de teratogénesis.

• Efectos de la administración perinatal y posnatal inmediata.

• Estudios de toxicocinética.

• Análisis químico de las nuevas sustancias.

• Ensayos de seguridad farmacológica.

PARTES DE QUE CONSTAN LOS PRINCIPIOS DE LA BPL

Siguiendo lo establecido en la directiva 1999/11/CE, los principios de las BPL están compuestos

por los siguientes apartados:

Sección I

• Introducción.

• Prefacio.

• Ámbito de aplicación.

• Definición de términos. 4

Sección II

• Organización y personal del Laboratorio.

• Programa de garantía de calidad (PGC).

• Instalaciones.

• Aparatos, materiales y reactivos.

• Sistemas experimentales.

• Productos de ensayo y de referencia.

• Procedimientos normalizados de trabajo (PNT).

• Realización del estudio.

• Informe final.

• Archivo y conservación de registros y materiales.

Como muchas otras normas, las BPL son de difícil interpretación ya que hay muchos aspectos

prácticos del laboratorio que no están claramente definidos en el texto. Pueden existir diferencias de

criterio con los mismos técnicos del laboratorio en el momento de su aplicación. Para subsanar precisamente estas diferencias, los distintos organismos han publicado una serie de guías complementarias

a las directivas que intentan aclarar aspectos confusos de dicha normativa. En este sentido la OCDE

ha publicado hasta el momento, 11 monografías. También en España se han publicado cuatro documentos por parte del Ministerio de Sanidad y Consumo, que intentan mejorar y unificar la aplicación

de las BPL. Son guías de trabajo y deben ayudar a mejorar la interpretación de los dos RD publicados

en nuestro país. Hay otras guías e incluso reglamentaciones que complementan también las BPL. Es el

caso por ejemplo de la guía para el uso y cuidado de los animales de experimentación y de las diferentes guías sobre higiene y seguridad en el laboratorio o manejo y tratamiento de residuos.

ORGANIZACIÓN Y PERSONAL DEL LABORATORIO

Las BPL recomiendan que las instalaciones dispongan de personal entrenado, cualificado y con

suficiente experiencia, que les permita realizar el ensayo correctamente. Cada una de las personas

involucradas en un estudio, tiene la responsabilidad de asegurar la calidad e integridad de los datos

asociados con dicho estudio.

Para la implantación de las BPL y un buen funcionamiento del centro, es clave que la dirección del

mismo asuma plenamente la decisión del cumplimiento y seguimiento de dichas normativas. Este

apoyo es básico ya que sin él es prácticamente imposible que dichas normas puedan llevarse a cabo en

el laboratorio. Un primer punto es definir claramente el organigrama del laboratorio, en donde queden

definidas las posiciones de todo el personal. Este organigrama debe ir acompañado de documentos en

los que se detallen las titulaciones, capacitaciones, experiencia y descripción del puesto de trabajo

(job description) individualizado para cada profesional o técnico. Estos registros deben estar descritos

en tres documentos distintos: curriculum vitae, descripción del puesto de trabajo y training o registros

de entrenamiento y formación.

Dirección del laboratorio

Se define así al grupo de persones o a la persona con la autoridad y responsabilidad formal de que

el laboratorio esté organizado y funcione de acuerdo con los principios de las BPL. La dirección es la

responsable de la calidad e integridad de los estudios llevados a cabo en su centro, ya que es la que

someterá la aprobación del informe final a las autoridades competentes.

Las responsabilidades de la dirección expuestas en las BPL tienen un impacto sobre el cumplimiento de dichas normas. Como más importantes se podrían comentar las siguientes: debe asegurar la

disponibilidad de suficiente personal cualificado, locales apropiados, equipos y materiales para la

oportuna y adecuada realización del estudio. Antes del inicio de cada estudio, la dirección del laboratorio nombrará un director de estudio con la titulación, capacitación y experiencia apropiadas, debien-5

do también asignar un suplente para su posible sustitución. Si el estudio es multicéntrico debe nombrarse un Investigador Principal con capacitación y experiencia adecuadas. La dirección debe implementar y conducir un sistema efectivo de Garantía de Calidad realizado por personal asignado directamente por ella, a fin de asegurar que la responsabilidad de la garantía de calidad se ejerza en conformidad con los principios de las BPL.

La dirección debe asegurarse que se han establecido y los PNT apropiados y previamente aprobados por ella, tanto originales como sus revisiones. Estos PNT junto con el protocolo aprobado por el

director del estudio, deben ser los documentos básicos y adecuados para obtener la calidad e integridad de los datos. La dirección debe mantener un listado actualizado de los estudios programados que

se lleven en marcha en aquel momento (master schedule) y un archivo histórico de todos los PNT.

Finalmente, la dirección debe nombrar un responsable para la gestión del archivo, en el cual se

guarden todos los datos, especímenes y muestras procedentes de los estudios efectuados en el laboratorio en condiciones óptimas, y que según las correspondientes regulaciones hay que archivar durante

varios años. Algunas de estas responsabilidades pueden ser delegadas a otras personas dentro de la

organización, debiendo quedar claramente documentadas.

Director del estudio

Es la persona responsable de la realización del estudio no clínico sobre seguridad sanitaria o medioambiental. Tiene la responsabilidad principal de la realización del estudio, así como de la interpretación, análisis, documentación e informe de los resultados del ensayo. Para cada estudio se debe

nombrar un director, altamente cualificado, entrenado y con experiencia técnica para llevar a cabo la

investigación.

También tiene toda una serie de responsabilidades y funciones dentro del laboratorio que debe

asumir y cumplir. Antes del comienzo de un ensayo debe aprobar el protocolo, asegurándose también

que la Unidad de Garantía de Calidad (UGC) disponga de una copia del mismo. Este protocolo y los

correspondientes PNT estarán a disposición del personal asignado al estudio.

Debe asegurarse de que cualquier cambio del protocolo se haga mediante una modificación o una

enmienda, así como los datos primarios obtenidos se registren claramente e íntegramente. También es

responsable de que el estudio se realice de acuerdo con los principios de las BPL, por lo que debe

firmar el informe final incluyendo en el mismo un certificado de cumplimiento de las BPL. Por último, debe asegurarse que al término del estudio, el protocolo, informe final, datos primarios y todo

material perteneciente al mismo, sea archivado adecuadamente.

Investigador principal

Tiene responsabilidades sobre la fase o fases del estudio que le han sido delegadas y debe asegurar

que son seguidos los principios de las BPL.

Personal del estudio

Realizan in situ todo el procedimiento experimental del ensayo y son las responsables de asegurar

que el estudio sea de calidad. Deben conocer claramente las BPL, así como el protocolo y los correspondientes PNT aplicables al estudio que están realizando. El personal tomará las debidas precauciones sanitarias para minimizar los riesgos para su salud y asegurar la integridad de la investigación.

PROGRAMA DE GARANTÍA DE CALIDAD

Este programa ha de ser independiente de la realización de los estudios y concebido para asegurar

a la dirección que el laboratorio cumple con los principios de las BPL. La puesta en marcha y la formación de este programa es un requisito fundamental para el establecimiento de las BPL. Todo este 6

“sistema” debe efectuarse por una o más personas designadas por la dirección y directamente responsables ante ella siendo, por tanto, orgánicamente independiente de todos los jefes de departamento o

sección, debiendo actuar con absoluta independencia.

La dirección debe decidir y designar el personal que llevará a cabo el Programa de Garantía de

Calidad (PGC), estableciendo de forma clara y concisa sus funciones y responsabilidades. Este personal, dada las características de su trabajo, debe poseer un perfil humano muy específico con capacidad

para el diálogo, flexibilidad y tolerancia, pero sin menoscabo de la calidad de los estudios y del recto

cumplimiento de las normativas. Igualmente debe poseer capacidad de observación y meticulosidad

en su tarea de auditar y supervisar los ensayos, los datos producidos y los informes finales presentados.

Asimismo, es necesario emprender una importante tarea de información y de formación de todas

las personas relacionadas con el programa, a fin de que se entienda, perfectamente, no sólo su necesidad y beneficio, sino también hacer comprender que su implantación necesita una sincera y decidida

aceptación por parte de todo el personal, ya que si esto no es posible puede comportar graves problemas y poner en peligro el éxito esperado. Algunas de las dificultades de su aceptación se originan por

las inspecciones que el personal de la UGC realiza a los estudios que se están realizando en el laboratorio y por la mayor cantidad de documentación y por tanto de trabajo que ello origina en el personal.

La finalidad de la UGC es monitorizar cada estudio para asegurar a la dirección que los laboratorios, instrumentos, personal, métodos, prácticas, registros de datos y controles se realizan de acuerdo

con los protocolos de los estudios y los PNT aprobados. Esta monitorización se realiza mediante inspecciones periódicas y auditoría del informe final. Las inspecciones pueden ser de tres tipos: basadas

en estudios, en instalaciones y en procesos.

Una vez el personal de la UGC ha realizado la inspección debe realizar un informe de los resultados observados en la misma, informando de éstos a la dirección y al director del estudio. Este debe

indicar qué acciones correctoras tomará para solucionar las anomalías detectadas, si las hubiese habido. La auditoría del informe final consiste en confirmar que los métodos, procedimientos y observaciones se describen de manera exacta y completa, y que los resultados del informe reflejan los datos

primarios del estudio. Cuando exista esta confirmación, el responsable de la UGC debe elaborar y

firmar una declaración, que se incluirá en el informe final. En la misma se especificaran los tipos de

inspecciones realizadas y sus fechas, incluyendo la fase o fases del estudio inspeccionadas, y las fechas en que los resultados de las inspecciones se informaron a la dirección y al director del estudio.

Esta declaración también sirve para confirmar que el informe final refleja fielmente los datos primarios.

INSTALACIONES

Las instalaciones del laboratorio deben ser las adecuadas para satisfacer los requisitos del estudio,

tanto en tamaño, construcción como ubicación, minimizando las posibles alteraciones que puedan

interferir en la validez del estudio. Los materiales de la construcción deben ser de fácil limpieza. El

tamaño de las instalaciones, éstas deben tener una suficiente capacidad para producir y mantener las

condiciones ambientales requeridas. El diseño de las instalaciones debe proporcionar un adecuado

grado de separación entre las diferentes actividades para asegurar la realización correcta de cada estudio (véase Capítulo 5).

En el siguiente apartado, las BPL hacen referencia a los requisitos mínimos que deben cumplir

ciertos tipos de instalaciones, ya que el estudio que se lleva a cabo puede verse afectado. Diferencian

distintos tipos de instalaciones en función del uso al que están destinadas. 7 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Instalaciones del sistema experimental

El laboratorio debe tener un número suficiente de habitaciones o áreas con el fin de asegurar la separación de especies, aislamiento de proyectos individuales, salas de cuarentena o alojamiento especial de animales. También debe tener salas para garantizar el aislamiento de los estudios en los que se

utilicen sustancias u organismos de los que se conozca o sospeche que puedan comportar peligros

biológicos. Para más información respecto a las instalaciones de animales, véase el Capítulo 5.

Deben estar diseñadas, construidas y situadas de modo que se reduzcan al mínimo los trastornos

que puedan influir desfavorablemente en el estudio. Evitar ruidos externos e internos, iluminación

difusa o pobre, olores que puedan proceder de otras salas, etc.

La elección de buenos materiales es también importante. Estos han de proporcionar superficies lisas, no porosas, ser impermeables, resistentes a la corrosión y a los agentes químicos, utilizando en la

medida de lo posible aislantes térmicos y acústicos.

Un elemento básico e imprescindible en las instalaciones para animales, es el sistema de aire acondicionado. Las normas BPL no detallan las condiciones en que se deben mantener los animales y se

fundamentan en el anexo II el artículo 5 de la Directiva 86/609/CEE (véase Anexo I).

Instalaciones para la manipulación de los productos de ensayo y de referencia

Para prevenir contaminaciones o mezclas, debe haber salas o áreas separadas para la recepción y

almacenamiento de los productos de ensayo y de referencia, y las operaciones de mezclas de los productos de ensayo con un vehículo.

Estas salas o áreas de almacenamiento de los productos de ensayo deben estar separadas de las salas o áreas que contengan los sistemas experimentales, y deben de ser adecuadas para preservar la

identidad, concentración, pureza y estabilidad, así como garantizar un almacenamiento seguro de las

sustancias peligrosas.

Instalaciones de archivo

Su función es ofrecer almacenamiento y una recuperación segura de protocolos, datos primarios,

informes finales, muestras de productos a ensayar y especímenes. El diseño y las condiciones del archivo protegerán su contenido contra un deterioro prematuro. En el apartado de archivo, almacenamiento y conservación, se detallan las condiciones que debe reunir este tipo de instalación.

Eliminación de residuos

Dentro del laboratorio, otro tipo de instalación que actualmente tiene mucha importancia y que está

sujeta a normativas específicas a seguir, son las salas o recintos para la recogida, almacenamiento y

eliminación de todos los residuos y animales sobrantes, de forma segura e inocua. La manipulación y

eliminación de residuos debe ser efectuada de forma que no ponga en peligro la integridad del personal en los estudios que se estén realizando.

APARATOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Los equipos destinados a la obtención, almacenamiento, medida o recuperación de datos, tienen

que pasar por un proceso de validación con el fin de asegurar que su diseño y capacidad sean adecuadas para las funciones que deben realizar en el estudio. Como ejemplos podríamos incluir, balanzas,

equipos analíticos (HPLC, cromatografía, absorción atómica, etc.), analizadores de sangre y orina,

equipos informáticos utilizados para la obtención directa de datos, ordenadores para el cálculo estadístico, etc. El buen funcionamiento de todos estos instrumentos es esencial para la obtención de datos

válidos y de calidad. 8

Periódicamente, han de ser examinados y sometidos a una serie de operaciones de limpieza, mantenimiento y calibración de acuerdo con los PNT. Se establecen en el laboratorio planes de acción

para llevar a cabo todos estos procedimientos, muchas veces teniendo en cuenta las recomendaciones

de los propios suministradores y otras con la experiencia del propio laboratorio.

Debe prestarse especial atención a la calibración, señalando su periodicidad en el PNT del aparato

siguiendo los criterios del suministrador o la experiencia del personal. Estará documentada, exigiendo

un certificado o informe de calibración si ésta lo realiza un centro externo. Cualquier cambio de ubicación u operación distinta a la calibración previa obligará a realizar una nueva. Cada aparato debe

llevar una etiqueta con indicación de: fecha de la calibración, firma de la persona que haya realizado

la calibración y fecha de la próxima calibración.

Los patrones para realizar las calibraciones, deben estar certificados por organismos oficiales. Los

equipos de ventilación, aire acondicionado, iluminación, filtros, etc., de las salas de los animales también son inspeccionados y mantenidos periódicamente. Otro punto que señala la normativa, es el mantenimiento de registros de todos estos controles y actividades lo que implica que cada instrumento

deba poseer una documentación propia en la que se indiquen todas y cada una de las operaciones realizadas en él.

Todos los programas referentes a la inspección rutinaria, limpieza, mantenimiento y calibración, de

los equipos deben estar detallados en PNT específicos. En éstos se escriben con todo detalle las operaciones que hay que realizar (puesta en marcha y apagado, , períodos de limpieza, calibraciones,

conservación, condiciones de los contratos de mantenimiento, etc.), nombrando previamente para

cada aparato o conjunto de ellos a una persona responsable del control de las operaciones.

En un laboratorio es importante que los productos químicos, reactivos y soluciones estén etiquetados claramente, indicando la identidad (con su concentración, si procede), fecha de caducidad y las

instrucciones específicas de almacenamiento. La información referente a la procedencia, fecha de

preparación y estabilidad no es necesario que estén señaladas en la etiqueta, pero sí debe estar disponible. La fecha de caducidad puede ser ampliada en base a nuevos ensayos, que demuestren que la

estabilidad es correcta durante este nuevo período.

SISTEMAS EXPERIMENTALES

Son el sujeto de estudio con independencia de su origen biológico, químico o físico o una combinación de todos ellos. Normalmente el sistema biológico más utilizado en un laboratorio es el animal

de experimentación, sujeto a una amplia reglamentación.

Otras normas que también regulan el uso, cuidado y las instalaciones del animal de laboratorio son

las BPL. Un punto importante que debe incluirse dentro del PGC, es el de establecer y mantener las

condiciones adecuadas para el alojamiento, manejo y cuidado de los reactivos biológicos, asegurando

la calidad de los datos. Actualmente el animal de laboratorio es objeto de una auténtica prioridad y

vigilancia en el campo de la experimentación, ya que si queremos garantizar el nivel científico de los

ensayos, debemos asegurar la calidad de los animales utilizados.

Todos los animales procedentes del exterior del centro, deben ser aislados inmediatamente después

de su recepción hasta que su estado sanitario haya sido evaluado, manteniendo registros de su procedencia, fecha y condiciones de llegada. Estos períodos de cuarentena vienen regulados para cada especie en al anexo II de la directiva 86/609/CEE y deben fijarse en los correspondientes PNT del laboratorio. Si durante este período se produjera alguna mortalidad, estos lotes no serán utilizados en estudios y cuando sea apropiado, serán sacrificados. El tratamiento de cualquier enfermedad que se produzca antes o durante un estudio debe ser registrado. 9

Una vez terminado el período de cuarentena y siempre que las condiciones de trabajo o hábitat sean distintas a las del experimento, se aclimatarán durante un período adecuado, a las nuevas condiciones ambientales.

Cuando se somete a los animales a un tratamiento u observación, y especialmente cuando son retirados de su alojamiento o contenedores durante la realización del estudio, deben estar claramente

identificados. Esta identificación es doble, una sobre el mismo animal

y la otra mediante una etiqueta en la jaula. No se utilizará, en ningún caso, el mismo número o código

de identificación para dos animales distintos en un mismo establecimiento. Antes del comienzo de un

estudio se asigna a cada animal, grupo, dosis, sexo, etc. un único código que se indicará en el protocolo correspondiente.

Existe toda una serie de factores de riesgo que pueden contaminar al colectivo animal y por tanto

producir problemas durante la realización de un estudio. Destacan el alimento, debiéndose usar dietas

completas, equilibradas y constante. El agua de bebida es también otro factor de

riesgo. Para ello se deben establecer una serie de controles rutinarios tanto biológicos como químicos.

Las jaulas y demás materiales que forman parte del ambiente de los animales, como por ejemplo,

la cama, deben ser desinfectados o esterilizados y ser renovados en intervalos apropiados. Hay que

tener en cuenta que este material está en contacto directo con el animal, por lo que puede ser un factor

importante de contaminación.

PRODUCTOS DE ENSAYO Y DE REFERENCIA

Las BPL requieren que antes de comenzar el estudio, se recopile toda la información del producto.

Procedencia, identificación química, forma y propiedades físicas más relevantes, su pureza y la identificación de cualquier impureza significativa.

Los productos han de ser almacenados en lugares adecuados, evitando el riesgo de cualquier posible contaminación química o física. Los recipientes de contención del producto tienen que identificarse de forma clara, y en ellos ha de figurar al menos la siguiente información:

• Nombre del producto.

• Número de lote.

• Suministrador.

• Fecha de recepción.

• Condiciones de almacenamiento.

• Fecha de caducidad.

Igualmente, hay que mantener registros de la caracterización de los productos, fechas de entrada y

caducidad, cantidades recibidas y utilizadas durante estudio.

Las características más importantes del producto (identidad, lote, pureza, composición, etc.), deben

conocerse desde su inicio, aunque durante el transcurso del mismo podrán ampliarse sus parámetros,

debiendo en todos los casos estar debidamente documentados. Es importante conocer la estabilidad

tanto del producto a ensayar como el de referencia en las condiciones de almacenamiento y del estudio. En muchos ensayos el producto se mezcla en un vehículo, sea para administrar en forma de solución o mezclado con la dieta. En estos casos las BPL indican que debe determinarse la homogeneidad,

concentración y estabilidad del producto a ensayar en ese vehículo.

Todos estos procedimientos son indicados en los correspondientes PNT, en los que se describe la

política del centro respecto a los parámetros mínimos que es necesario conocer antes de empezar un

estudio. El laboratorio debe disponer de PNT sobre manejo, manipulación, muestreo y almacenamien-10

to de los productos. En todos los estudios, excepto en los de corta duración, hay que conservar una

muestra de cada lote del producto de ensayo con fines analíticos.

PROCEDIMIENTOS NORMALIZADOS DE TRABAJO (PNT)

En los PNT o procedimientos normalizados de trabajo, se describe de forma documentada el modo

de realizar ensayos o actividades normalmente no detalladas en los protocolos o guías. Todo laboratorio debe contar con PNT escritos y aprobados por la dirección del laboratorio. Sus posibles revisiones

han de ser aprobadas por la dirección del laboratorio y siempre se dispondrá de los PNT correspondientes antes de aplicar una técnica determinada, ya que este documento junto con el protocolo, constituyen la base para la realización del ensayo. Los objetivos principales de los PNT son:

• Estandarizar los métodos, ya que permiten una continuidad en la realización del estudio,

y de esta manera conseguir que los resultados obtenidos en el mismo laboratorio sean

prácticamente siempre realizados en las mismas condiciones de trabajo.

• Reducir los riesgos de equivocación por parte del personal que realiza el estudio, ya que

en este sentido los PNT son un medio de formación de las nuevas personas que se integran en el laboratorio. Los PNT disminuyen los errores sistemáticos que puedan producirse normalmente y minimizan la influencia que pudiera existir por el cambio de personal en un momento dado, reduciendo por tanto la variación de los resultados si estos

han sido obtenidos por diferentes personas.

• Mejorar la calidad e integridad de los datos obtenidos en un estudio.

Es importante planificar y estructurar con todo detalle los PNT antes de escribirlos definitivamente, ya que son la pauta a cumplir en las diferentes áreas del laboratorio. Los PNT son documentos

técnicos planificados y escritos con instrucciones para el personal, por tanto, son las referencias manuales de los procedimientos a seguir para asegurar que todas las operaciones se realizan correctamente. Deben ser válidos para todo el personal científico y definir el conjunto de métodos operatorios

a emplear en un estudio. A pesar de que los procedimientos deben estar detallados al máximo, deben

permitir una cierta flexibilidad cuando haya que realizar cualquier tipo de modificación de la técnica.

Hay que tener en cuenta que los textos, separatas y métodos analíticos provenientes de la bibliografía no pueden ser en sí mismos los PNT del estudio, sino que sólo se pueden utilizar como complemento.

Otro punto a considerar en los PNT es su distribución, en el entorno del laboratorio. Es necesario

que el personal que esté realizando un determinado estudio, pueda consultar los mismos en cualquier

momento y por tanto tenga acceso a ellos fácilmente, ya que precisamente su trabajo vendrá regulado

y estructurado por los PNT previamente escritos. Estos también serán usados para la confección del

correspondiente protocolo experimental.

REALIZACIÓN DEL ESTUDIO

Protocolo

Todo estudio ha de tener un protocolo escrito en el que se definan los objetivos y el diseño experimental. El protocolo debe ser aprobado y fechado por el Director del Estudio y verificado su cumplimiento de BPL por el personal de la UGC. En algunos países las legislaciones indican que éste

también debe ser aprobado por la dirección del laboratorio y el promotor, entendiéndose por promotor

la entidad que encarga, financia y/o presenta un estudio no clínico de seguridad sanitaria o medioambiental.

Es el documento básico a seguir para la realización de un estudio y debe ser complementado por

los PNT, los cuales expondrán con detalle todas las pautas a seguir y que de forma resumida están 11 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

indicadas en el protocolo. Estos dos documentos son la base para llevar a cabo el estudio por todo el

personal implicado en el mismo y a su vez son los documentos que el personal de la UGC seguirá

para la realización de sus inspecciones o auditorias.

Si durante el ensayo el director del estudio observa que no puede seguir exactamente el protocolo

aprobado, las normas BPL establecen que cualquier cambio, modificación o revisión del mismo estará

documentada, aprobada, fechada y mantenida con el protocolo. Actualmente la normativa establece la

posibilidad de poder realizar estos cambios mediante:

a) “Modificación” del protocolo después de la fecha de inicio de un estudio. Es un cambio intencionado, que será justificado, aprobado, fechado y firmado por el director del estudio,

manteniéndose siempre con el protocolo inicial.

b) “Desviación” del protocolo es un cambio no intencionado del protocolo después de la fecha

de iniciación del mismo. Debe ser descrita, explicada, reconocida y fechada de manera oportuna por el director del estudio y/o investigador principal y manteniéndose junto a los datos

primarios del estudio.

El contenido mínimo de un protocolo, debe reunir la siguiente información, sin limitarse a ella:

• Título descriptivo.

• Descripción, indicando la naturaleza y objetivo del estudio.

• Identificación del producto del ensayo.

• Producto de referencia que se va a utilizar.

• Nombre y dirección del promotor.

• Nombre y dirección de cada uno de los laboratorios y centros de ensayo que intervienen.

• Nombre y dirección del director del estudio.

• Nombre y dirección del investigador o investigadores principales, y la fase o fases del estudio delegadas por el director del estudio y sometidas a la responsabilidad del investigador principal.

• Fecha de aprobación del protocolo con la firma del director del estudio.

• Fechas propuestas de inicio y finalización del experimento.

• Referencia a las guías de la OCDE, otras guías o métodos usados.

• Justificación de la elección del sistema experimental.

• Características del sistema experimental, como especie, cepa, subcepa, suministrador,

número, rango de peso, sexo, edad y cualquier otra información relevante.

• Método de administración y la razón de su elección.

• Niveles de dosis o concentraciones, frecuencia y duración de la administración o aplicación.

• Información detallada del diseño experimental, incluyendo una descripción del desarrollo

cronológico del estudio, todos los métodos, materiales y condiciones, tipo y frecuencia

de los análisis, medidas, observaciones y exámenes que se van a realizar y, si los hubiese,

los métodos estadísticos utilizados.

• Una lista de los registros que se van a conservar.

Recopilación de datos

Otro punto al que hace referencia las BPL, es el de recopilación de datos durante el estudio. Todos

los registros y documentación original del laboratorio, o sus copias compulsadas, que son el resultado

de las observaciones y actividades originales de un estudio, se denominan “datos primarios” Estos

también pueden incluir fotos, copias de microfilm o microfichas, datos obtenidos de instrumentos

automatizados, o cualquier otro medio que sea reconocido como capaz de proporcionar seguridad en

el almacenamiento de la información por un período determinado. 12

Las BPL recomiendan que todos los datos generados durante la realización del estudio sean registrados inmediatamente de forma directa, exacta y legible por la persona encargada de realizarlo. Estas

anotaciones deben firmarse con rúbrica o iniciales y fecharse.

Cualquier modificación de los datos primarios debe efectuarse de manera que no oculte la lectura

de la entrada previa, debiéndose indicar la razón del cambio y ser fechado y firmado (con rúbrica o

iniciales) por la persona que haya realizado la modificación.

Actualmente, y en la última revisión de las BPL, se ha incluido un apartado que hace referencia a

la obtención de datos primarios a través de sistemas informatizados, por lo que el vacío reglamentario

existente hasta ahora ya está regulado. A este respecto la normativa indica: “los datos obtenidos como

entradas directas de ordenador deben ser identificados en tiempo y fecha de su introducción por la

persona responsable de su entrada. Los sistemas informatizados deberán diseñarse para poder posibilitar en todo momento la conservación de datos que permitan realizar auditorías retrospectivas que

muestren todos los cambios de los datos sin ocultar los datos originales. Debe ser posible asociar todos los cambios de datos con las personas que los han realizado, por ejemplo por medio de firmas

electrónicas con hora y fechas. Las modificaciones deberán justificarse en todos los casos”.

INFORME FINAL

Es un documento en el que se describe el desarrollo del estudio, sus resultados y conclusiones. El

responsable de elaborar este informe al finalizar el estudio es el director del estudio. Además de la

información mínima que debe contener un informe, las BPL también dan toda una serie de recomendaciones a seguir para la cumplimentación y presentación del mismo.

• Para cada estudio se preparará un informe final.

• Se utilizará el sistema internacional de unidades.

• Habrá de estar firmado y fechado por el director del estudio, aceptando la validez de los

datos.

• El director del estudio certificará el cumplimiento de las BPL.

• Asimismo, estará firmado y fechado por el investigador principal u otros científicos, si

los hubiese.

• Las correcciones o adiciones del informe final se incorporarán mediante modificación.

El contenido mínimo del informe final, sin limitarse a ellos, incluye los siguientes datos:

• Título descriptivo (el mismo que el del protocolo).

• Identificación del producto a ensayar.

• Identificación del producto de referencia.

• Características del producto (pureza, estabilidad y homogeneidad).

• Información sobre el promotor y laboratorio, indicando: nombre y dirección del promotor, laboratorio, director del estudio, investigador principal (si lo hubiese), y de las personas que han contribuido a la realización del informe.

• Fechas de comienzo y finalización de la fase experimental.

• Declaración de la UGC.

• Descripción de métodos y materiales usados.

• Referencias bibliográficas.

• Resumen de resultados.

• Informaciones y datos requeridos en el protocolo.

• Exposición de resultados (cálculos y métodos estadísticos).

• Discusión y conclusiones.

• Archivo. 13

ARCHIVO. ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIÓN

El archivo es el lugar donde se guarda de forma segura todo el material (datos primarios, especí-

menes, muestras, etc.) procedente de un estudio y que dispone de acceso controlado.

Los archivos deben ser concebidos y equipados para acoger y almacenar de forma segura durante

el período reglamentado, el siguiente material.

• Protocolo y enmiendas.

• Datos primarios.

• Productos a ensayar y de referencia.

• Documentación relativa a los sistemas experimentales.

• Especímenes.

• Informes finales.

• Informes de las inspecciones de la UGC.

• Lista de estudios programados (master schedules).

• Documentación de personal.

• Revisiones del Programa de garantía de calidad.

• Registros e informes del mantenimiento y calibración de los aparatos.

• Documentación de la validación de los sistemas informáticos.

• Fichero cronológico de los PNT.

• Registros de los controles ambientales.

• Soportes magnéticos.

Debido a que el tiempo de conservación del material es muy largo, el archivo debe cumplir un nú-

mero básico de condiciones a fin de mantener en el mejor estado posible todo este material archivado.

Ello hace que en el diseño del archivo se deban tener en cuenta los siguientes factores: medidas de

protección contra robo y actos vandálicos, protección contra incendios (detectores de humo), extintores de dióxido de carbono o no acuosos, circuitos eléctricos de seguridad, evitar entrada de luz solar

directa, evitar el paso de conducciones de agua, barreras contra animales e insectos, sistemas ambientales controlados y sala adyacente para consultas. Todos estos factores podrán variar según la cantidad

y material a archivar.

El funcionamiento de los archivos debe estar documentado mediante los correspondientes PNT. El

acceso a los mismos debe estar limitado sólo a las personas autorizadas por dirección. Estos son los

que llevarán el control de entrada y salida del material y sólo ellos tendrán acceso al archivo. Todas

estas operaciones deben registrarse. El archivero debe tener indexado todo el material existente en el

mismo, a fin de conocer en cualquier momento su estado y poder buscarlo o recuperarlo.

RESUMEN

Las normas BPL son, en esencia una filosofía de trabajo. No regulan propiamente la parte científica de los ensayos, sino que son las exigencias generales a seguir respecto a la calidad de los mismos.

No son más que un sistema de garantía de calidad cuyo objetivo principal es mejorar el funcionamiento de los laboratorios y la idoneidad de los datos obtenidos en los estudios.

La finalidad de la aplicación de las BPL es la aceptación mutua de resultados entre diferentes paí-

ses, por lo que es obvio que todos intenten unificar el contenido de las mismas a fin de que no haya

diferencias significativas entre ellas. Es importante poder demostrar a las autoridades de los otros

países a los que se presenta la posible aprobación del nuevo producto, que los resultados obtenidos en

los correspondientes ensayos preclínicos, han sido generados cumpliendo con normas de trabajo que

merecen la garantía y aceptación mutua de los mismos. Con ello se obtienen toda una serie de beneficios importantes en el comercio internacional de sustancias químicas, como son la reducción del nú-14

mero de animales, facilitar técnicas alternativas y evitar en lo posible la repetición innecesaria de estudios, todo ello con el consiguiente ahorro de tiempo y recurso