biobalística y electroporación

Biotecnología Vegetal Biobalística y Electroporac ión Edar Onam Pech- Santiago Noviembre, Puerto Escondido, Oaxaca Biobalísti ca y Electropor ación

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Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Edar Onam Pech-Santiago

Noviembre, Puerto Escondido, Oaxaca

Biobalística y Electroporación

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Biobalística

MicropartículasconAN

• Aceleran <1500km/h

Penetran a células y

tejido

• Atravesando Pared y mem.

Se libera y se integra al

genoma• Transformación

Biotecnología Vegetal

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Biobalística

• Primer acelerador de micropartículas impulsadas por explosión de pólvora.

• Sandford et al. (1984) describen la técnica de bombardeo de micropartículas para la transferencia directa de ADN.

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TIPOS -funcionamiento

• Explosión pólvora

• Descarga de He a alta presión

• Descarga CO2 o N2 comprimido

• Descarga eléctrica

• Flujo de partículas o flujo de helio a baja presión por aspersión

• Flujo de helio con cañón de precisión

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Factores que influyen

• Parámetros físicos– tamaño de las

micropartículas y su preparación–presión de bombardeo–distancia recorrida por el

DNA–nivele de vacío generado–cantidad y calidad del DNA

• Parámetros biológicos–el estado fisiológico del

explante y el tipo

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Utilizada para

• Transformación de células, tejidos y órganos, organelos y polen.

• En cereales (monocotiledóneas), leguminosas y arboles recalcitrantes.

• Aumente la eficiencia de transformación de A. tumefaciens.

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Electroporación

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

• Tratamiento de naturaleza física

• Consiste en someter a la célula a altos voltajes, lo cual causa la formación de poros en la membrana.

• Se usa en protoplastos, células intactas (arroz, maíz, trigo y cebada) y meristemos.

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Limitaciones

• Transformación con alto rendimiento pero poco utilizada por su aplicación en su mayoría a protoplastos

Biotecnología Vegetal

Biobalística y Electroporación

Factores que influyen

• Intensidad del campo eléctrico, duracion, numero e intervalo entre pulsos.

• Tipo y concentración de DNA.

• Tipo de explante utilizado.

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