Autoinmunidad

Determinación de anticuerpos antinucleares

1065. Inmunología Aplicada.Enseñanza Experimental Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas

Técnicas para la determinación de los anticuerpos antinucleares

Los anticuerpos antinucleares (ANA) son anticuerpos dirigidos contra el material nuclear y se pueden detectar mediante técnicas inmunológicas.

•Inmunofluorescencia

•Ensayos inmunoenzimáticos

Títulos de ANA

•El título de una prueba positiva de ANA es importante para el diagnóstico de los trastornos del tejido conectivo.

•Los individuos sanos tienen títulos negativos o bajos.

•Los pacientes con trastornos del tejido conectivo generalmente tienen títulos elevados.

•Pueden observarse títulos intermedios o altos en familiares no afectados, en personas mayores, en mujeres gestantes, en pacientes con infecciones crónicas, en pacientes con neoplasias y en algunos individuos sanos.

Valor predictivo de las pruebas de ANA

•El valor predictivo positivo es una medida del número de individuos con una prueba positiva que tienen la enfermedad, comparado con todos los individuos que tienen un resultado positivo.

Tipos de ANA

En inmunofluorescencia, se observan cinco patrones básicos de ANA:

•Moteado

•Homogéneo

•Periférico

•Centromérico

•Nucleolar

El modelo moteado se correlaciona con anticuerpos frente constituyentes nucleares que no son DNA (pe RNP) y se observa en TMTC, LES y esclerosis sistémica progresiva.

Los patrones homogéneo y periférico se correlacionan con anticuerpos frente a histonas y al DNA nativo respectivamente y se asocian a LES. Estos dos patrones pueden coexistir.

El modelo centromérico es característico del síndrome de CREST

Los anticuerpos dirigidos contra nucleolos producen un patrón nucleolar y se asocia con esclerodermia

Células HEp-2 con patrón moteado

Enfermedades asociadas

Otros autoanticuerpos (cANCA/pANCA)

Anti-proteínasa 3: cANCA

Anti-MPO: pANCA

Enfermedades asociadas

InmunofluorescenciaProcedimiento

Portaobjetos con células Hep-2 como sustrato

•DNAdoble cadena

•DNAcadena sencilla

•Ribonucleoproteínas•Histonas

+Suero del paciente con anticuerpos

Incubar y lavar

Anti IgG humana marcada con isotiocianato de fluoresceína

Incubarlavar

Solución de montaje

Observar en microscopio estimulando al fluorocromo con luz UV