ANTIESTREPTOLISINAS

CBTIS 24°

4°B TLC /VESPERTINO

EQUIPO N°7

¿QUÉ SON?

Son pruebas para detectar el título antiestreptolisinas O (ANTICUERPOS ESPECIFICOS) en el suero de personas con infecciones causadas por estreptococos del grupo A. Las ANTIESTREPTOLISINAS son anticuerpos dirigidos contra la hemolisina "O" del estreptococo beta hemolítico y se "consideran normales" si son menores a 200 U TODD.Las ANTIESTREPTOLISINAS determinan el contacto del individuo con el estreptococo en un período de seis meses, los títulos MAYORES A 500 UT nos determina contacto reciente con la bacteria en un período de tres semanas APROXIMADAMENTE.

STREPTOCOCCUS PYOGENES

Streptococcus pyogenes es una bacteria Gram-positiva que crece en cadenas largas. Expresa el Antígeno grupo A de la clasificación de Lancefield en sus paredes celulares y hace hemólisis del tipo beta-hemólisis. Se cultiva en agar sangre.

---LA TÉCNICA---MATERIALES: 12 tubos de ensayo. Agua destilada Centrífuga Hidrosulfuro de de sodio Suero problema Sangre de conejo o humana del grupo O Estreptolisina O Regulador

PASO 1 Preparar todo para empezar:

Activar el suero problema(aplicando dos capilares de Na2SO3)

Obtener el suero problema (Centrifugando la muestra)

Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 5% (lavando los eritrocitos 3 veces con solucion salina fisiologica y preparar la solucion al 5% en regulador para estreptolisina O)

PASO 2

PREPARAR DILUCIONES DEL SUERO PROBLEMA DE LA SIGUIENTE MANERA

1. Dilución 1:10 (0.5ml de suero problema +4.5 ml de regulador)

2. Dilución 1:100 (1ml de la 1ra dilución + 9ml de regulador)

3. Dilución 1:500 (2ml de la 2da dilucion + 8ml de regulador

PASO 3

Montar la prueba de la sig. ManeraEn los tubos 1 y 2 colocar la dilución 1:10En los tubos del 3-7 colocar la dilución 1:100En los tubos del 8-12 colocar la dilución 1:500

Agregar lo siguiente:

Por ultimo agregar . 5 ml de estreptolisina O a cada uno

Mezclar bien e incubar a 37°c durante 5 min

Agregar a cada uno .5 ml de globulos rojos al 5%

Mezclar e incubar a 37°C Resuspender los GR e incubar

30 minutos mas Centrifugar 5 minutos

Tubo #

ml suero

ml regulador

1 .8 .2

2 .2 .8

3 1 0

4 .8 .2

5 .6 .4

6 .4 .6

7 .3 .7

8 1 0

9 .8 .2

10 .6 .4

11 .4 .6

12 .2 .8

PASO 4 LEER DE LA SIGUIENTE

MANERA: TOMAR EN CUENTA HASTA

EL TUBO QUE CAUSE HEMÓLISIS

los títulos MAYORES A 500 UT nos determina contacto reciente con la bacteria en un período de tres semanas APROXIMADAMENTE.

se "consideran normales" si son menores a 200 U TODD.

TUBO # UNIDADES TODD

1 12

2 50

3 100

4 125

5 166

6 250

7 333

8 500

9 625

10 833

11 1250

12 2500