práctica7 antiestreptolisinas
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Practica 7Reacción de hemolisis antiestreptolisinas
Dra. Patricia Gómez Ruelas.
Objetivo:
• Demostrar la presencia de anticuerpos mediante una técnica de hemolisis.
Producto extracelular estreptocócica que posee propiedades antigénicas producidas por
la mayoría de los estreptococos betahemolíticos A,C y G.
QUE ES LA ESTREPTOLISINA O?
Aparece a los 10 días de la infección estreptocócica.
Diagnostico de infecciones recientes por estreptococo betahemolíticos, en fiebre reumática y glomerulonefritis.
PARA QUE SE UTILIZA?
Se necesitan realizar 2 pruebas.
PCR, FR y aislamiento del estreptococo
betahemolítico del grupo A
Fundamento
• Los anticuerpos contenidos en el suero en presencia de antígeno especifico originan reacción de neutralización que se visualizan al añadir eritrocitos de carnero, los cuales forman un anillo en el fondo del tubo que tienen anticuerpos y en el tubo donde los eritrocitos son lisados por la estreptolisina no hay presencia de anticuerpos neutralizantes.
SUERO (SIN ANTICUERPOS) ESTREPTOLISINA O ERITROCITOS LISIS
SUERO (CON ACS) ESTREPTOLISINA O ERITROCITOS BOTON
Se reconstituye con agua destilada con el volumen indicado en la
etiqueta para cada 5 ml de estreptolisina reconstituida se
adiciona un tubo de hidrosulfito constituido e uno de los tubos
capilares que se adjuntan
Se agita por inversión hasta que se disuelva encontrándose en forma activa. Para emplearse de modo
inmediato ya que al reoxidarse este se inactiva.
Las diluciones del suero problema y la suspensión de glóbulos rojos se
preparan con la solución amortiguadora comercial para
estreptolisinas
SUSPENSIÓN DE GLOBULOS ROJOS
•Eritrocitos humanos o de carnero lavados 3 veces con solución isotónica y por ultimo se suspende en solución amortiguadora para estreptolisinas a una concentración del 5%.
DILUCION DEL SUERO.
Se usa una solución amortiguadora como diluyente.
1:10 0.5 ml de suero 4.5 ml de solución amortiguadora
1:100 0.5 ml de la dilucion1:10 4.5 ml de solución amortiguadora
1:500 1.0 ml de la dilucion1:100 4 ml de solución amortiguadora
Factores que interfieren en la prueba.
En portadores sanos se pueden encontrar títulos elevados de AEL.
Pacientes bajo tratamiento antimicrobiano suprimirá la respuesta del anticuerpo AEL.Aumentos considerables en la Beta-lipoproteína inhiben a estreptolisina O, dando por ende resultados falsos en el titulo de AEL.
INTERPRETACION.
Valores de referencia- menos de 166 unidades Todd.
Un titulo alto o aumento progresivo en los títulos es indicativo de una infección reciente o prevalencia por estreptococo
además de ser de apoyo para el diagnostico de escarlatina, erisipela, faringitis, tonsilitis estreptocócica, glomerulonefritis
y fiebre reumática.
PATOLOGIA TITULOS DE AEL UNIDADES TODD
Fiebre reumática activa 500-5000
Fiebre reumática inactiva 12-250
Artritis reumatoide. 12-250
Glomerulonefritis aguda 500-5000
Infecciones de vías respiratorias altas
100-333
Enfermedades de la colágena 12-250
Las unidades Todd son reciprocas de la dilución mas alta del suero que neutraliza completamente
la estreptolisina O. Así un suero que presenta hemolisis en el tubo 5 y hemolisis completa en los
demás tubos, es reportado como 125 unidades Todd
FIN