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Prácticas de Toxicología Analítica 1

ANÁLISIS de TÓXICOS ORGÁNICOS

Antonio Juan García Fernández Isabel Navas Ruíz

Área de Toxicología. Dpto. Ciencias Sociosanitarias

Universidad de Murcia

Prácticas de Toxicología Analítica

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

ANÁLISISTOXICOLÓGICO

Conjuntodeprocesosanalíticosencaminadosaponerdemanifiestolapresenciadeunasustanciadelasconsideradastóxicasenunamuestra

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

Muestrasparaanálisis

-  Muestraproblema

-  Muestrasespeciales:-  Enriquecidasofortificadas-  Certificadasoestándaresdereferencia

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

Análisisquímicotoxicológico

-  Muestrahomogénea-  Separacióndelassustanciasdeinteréstoxicológico

ModalidadesotiposdeA.Q-T

-  A)Nosospecha:SistemáticaAnalíticaToxicológicaGeneral

-  B)Sospechaconcreta:Métodoespecífico

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

FasesdelA.Q-Tgeneral-  Fraccionamientodelamuestradelaboratorio-  Obtencióndelamuestraanalítica-  Extraccióndeltóxicodelamuestraanalítica-  Purificacióndelextracto:eliminacióndeinterferencias

-  Deteccióndesustanciasxenobióticas-  Identificacióndeltóxico-  Determinaciónovaloracióncuantitativa

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

SISTEMÁTICASANALÍTICASTOXICOLÓGICAS

-  Volátiles(gasesyvapores)-  Sistemáticaparagasesyvapores

-  Inorgánicos-  Sistemáticaparatóxicosinorgánicos

-  Orgánicos-  Sistemáticaparatóxicosorgánicos

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

SEPARACIÓNOAISLAMIENTODETÓXICOS

-  Compuestosvolátiles:-  Destilación,calentamiento,acidificación,alcalinización,reducción

-  Elementosinorgánicos:-  Destrucciónpreviadelamateriaorgánica.Mineralización,formacióndequelatos.

-  Compuestosorgánicos:-  Extraccióncondisolventesorgánicos:ExtracciónL-LoS-S,extracciónporcromatografía,separaciónporelectroforesis

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN

ANÁLISISDETÓXICOSINORGÁNICOS(METALES):

ESPECTROSCOPÍAATÓMICAVOLTAMPERIMETRÍA-POLAROGRAFÍA

ANÁLISISDETÓXICOSORGÁNICOSYVOLÁTILES:

MÉTODOSCROMATOGRÁFICOSMÉTODOSESPECTROFOTOMÉTRICOS

INMUNOQUÍMICOSESPECTROMETRÍADEMASAS

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA

Cromatografía. Concepto y definiciones

Es el método por excelencia para la separación de sustancias químicas (Ej. , , )

Fase estacionaria

Muestra compleja arados

Fase móvil

Anal itos sep

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA

Cromatografía. Tipos

CLASIFICACIÓN

q SEGÚNLADISPOSICIÓNDELAFASEESTACIONARIA:

v CROMATOGRAFÍAPLANAØ CromatografíaenpapelØ Cromatografíaencapafina

v CROMATOGRAFÍAENCOLUMNA.Segúnelfluidoempleadocomofasemóvilsedistinguen:

Ø CromatografíadelíquidosØ CromatografíadegasesØ Cromatografíadefluidossupercríticos

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA

Cromatografía. Aplicaciones analíticas

Fármacos,drogas(monitorizaciónterapéuticaodeadicción).

Vitaminas,hormonas,péptidosespecíficosyproteínas

Contaminantesambientales,residuosdepesticidas,etc

Venenosimplicadosenhomicidios,suicidiosyenvenenamientosdeanimales

Etc.

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA

Cromatografía. Principios básicos

Unafaseestacionaria

Unafasemóvil

Moléculasdelamuestra(mezclaparaseparación)

Todosistemacromatográficocontiene:

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafo de GASES

Fasemóvil:N2,He,etc

PESTICIDASOrganoclorados,Organofosforados,

Carbamatos,etc

Injectorport

RecorderRecorder

Flowcontroler

Carriergas

Capillarycolumn

Detector

Oven

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. FASES MÓVILES

GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquid

Chromatography)

HidrógenoHelioNitrógeno

Solventespolares

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. FASES ESTACIONARIAS

GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquid

Chromatography)

Longitud:De2a60mDiámetrointerno:De0.2a0.53mmGrosordelapelícula:De0.1a1μm

COLUMNA

CAPILAR

Longitud:De3a30cmDiámetro:De2a5mmRelleno:

-Pelicular:30-40μm+F.E.2-5μmo-Partículasporosas:3-10μm

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. INYECCIÓN

HPLC

Volumendeinyección:10-30µl Volumende

inyección:1-2µl

CROMATOGRAFIADEGASES

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. CROMATOGRAMAS

GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography)

Influyenenlaseparación:

-  Longituddelacolumna-  Diámetrointernodelacolumna-  Grosordelapelícula(F.E.)-  Tipodelgasportador-  Velocidaddelgasportador-  Temperaturadelacolumna

Influyenenlaseparación:

-  Longituddelacolumna-  Diámetrodelacolumna-  Lafaseestacionaria-  Lossolventesdelafasemóvil-  Velocidaddelafasemóvil-  Elgradientedelafasemóvil

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS

TIEMPODERETENCIÓN(tR)ÁREA(¿ALTURA?)TIEMPOMUERTO(tM)

TIEMPODERETENCIÓNAJUSTADOt’R=tR-tM

FACTORDECAPACIDADORETENCIÓNkk=CsVs/CmVm=KVs/Vm=Kb

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. DETECTORES

HPLC CROMATOGRAFIADEGASES

•  Espectrofotométricos

•  Defluorescencia

•  Electroquímicos

•  Refractométricos

•  Espectrometríademasas

•  DeIonizacióndellama

•  Deconductividadtérmica

•  Denitrógenoyfósforo

•  Decapturadeelectrones

•  Espectrometríademasas

Elespectrodemasassepresentahabitualmentecomoungráficodebarras,enlaquecadaunadeellascorrespondeaunión.Lainformaciónproporcionadaincluyelarelaciónm/zylaintensidadrelativadecadaseñal.Alamásintensa,denominadapicobase,seleasignaelvalor100.Comolamayorpartedelosionesformadostienecargaunidad,lasrelacionesm/zsecorrespondeconsusmasas.Eliónmoleculareseliónqueresultatraslapérdidadeunelectrónporpartedelamolécula.

Espectrodemasasdeln-decano(Pm=142)

Pentano(Pm=72)

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA ESPECTROMETRÍA DE MASAS

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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Interpretación de resultados

Variablesqueinfluyenenlosresultadosanalíticos

•  Momentodelatomademuestras•  Estabilidaddelcompuestoenlamuestra•  Homogeneidaddelamuestra

•  Amplitudyreproducibilidaddelmétodoanalítico

•  Interferenciasenelmétodoanalítico

-  Defectosoperatorios-  Escasarecuperacióndurantelaextracción-  Inadecuadatécnicaextractiva-  Insuficienteseparacióndeanalitos-  Excesivaspérdidas(purificación,descomposición,etc)

-  Desaparicióndeltóxico-  Inadecuadatomademuestras(norepresentativa)-  Inadecuadascondicionesdeconservacióndelamuestra-  Facilidaddedegradacióndelanalito

TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Interpretación de resultados

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ANÁLISIS de TÓXICOS ORGÁNICOS

Diseño: A.J. García

Guión: A.J. García e I. Navas

Información: A.J. García e I. Navas

Edición: A.J. García

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