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Prácticas de Toxicología Analítica 1
ANÁLISIS de TÓXICOS ORGÁNICOS
Antonio Juan García Fernández Isabel Navas Ruíz
Área de Toxicología. Dpto. Ciencias Sociosanitarias
Universidad de Murcia
Prácticas de Toxicología Analítica
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
ANÁLISISTOXICOLÓGICO
Conjuntodeprocesosanalíticosencaminadosaponerdemanifiestolapresenciadeunasustanciadelasconsideradastóxicasenunamuestra
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
Muestrasparaanálisis
- Muestraproblema
- Muestrasespeciales:- Enriquecidasofortificadas- Certificadasoestándaresdereferencia
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
Análisisquímicotoxicológico
- Muestrahomogénea- Separacióndelassustanciasdeinteréstoxicológico
ModalidadesotiposdeA.Q-T
- A)Nosospecha:SistemáticaAnalíticaToxicológicaGeneral
- B)Sospechaconcreta:Métodoespecífico
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
FasesdelA.Q-Tgeneral- Fraccionamientodelamuestradelaboratorio- Obtencióndelamuestraanalítica- Extraccióndeltóxicodelamuestraanalítica- Purificacióndelextracto:eliminacióndeinterferencias
- Deteccióndesustanciasxenobióticas- Identificacióndeltóxico- Determinaciónovaloracióncuantitativa
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
SISTEMÁTICASANALÍTICASTOXICOLÓGICAS
- Volátiles(gasesyvapores)- Sistemáticaparagasesyvapores
- Inorgánicos- Sistemáticaparatóxicosinorgánicos
- Orgánicos- Sistemáticaparatóxicosorgánicos
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
SEPARACIÓNOAISLAMIENTODETÓXICOS
- Compuestosvolátiles:- Destilación,calentamiento,acidificación,alcalinización,reducción
- Elementosinorgánicos:- Destrucciónpreviadelamateriaorgánica.Mineralización,formacióndequelatos.
- Compuestosorgánicos:- Extraccióncondisolventesorgánicos:ExtracciónL-LoS-S,extracciónporcromatografía,separaciónporelectroforesis
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA INTRODUCCIÓN
ANÁLISISDETÓXICOSINORGÁNICOS(METALES):
ESPECTROSCOPÍAATÓMICAVOLTAMPERIMETRÍA-POLAROGRAFÍA
ANÁLISISDETÓXICOSORGÁNICOSYVOLÁTILES:
MÉTODOSCROMATOGRÁFICOSMÉTODOSESPECTROFOTOMÉTRICOS
INMUNOQUÍMICOSESPECTROMETRÍADEMASAS
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA
Cromatografía. Concepto y definiciones
Es el método por excelencia para la separación de sustancias químicas (Ej. , , )
Fase estacionaria
Muestra compleja arados
Fase móvil
Anal itos sep
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA
Cromatografía. Tipos
CLASIFICACIÓN
q SEGÚNLADISPOSICIÓNDELAFASEESTACIONARIA:
v CROMATOGRAFÍAPLANAØ CromatografíaenpapelØ Cromatografíaencapafina
v CROMATOGRAFÍAENCOLUMNA.Segúnelfluidoempleadocomofasemóvilsedistinguen:
Ø CromatografíadelíquidosØ CromatografíadegasesØ Cromatografíadefluidossupercríticos
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA
Cromatografía. Aplicaciones analíticas
Fármacos,drogas(monitorizaciónterapéuticaodeadicción).
Vitaminas,hormonas,péptidosespecíficosyproteínas
Contaminantesambientales,residuosdepesticidas,etc
Venenosimplicadosenhomicidios,suicidiosyenvenenamientosdeanimales
Etc.
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA
Cromatografía. Principios básicos
Unafaseestacionaria
Unafasemóvil
Moléculasdelamuestra(mezclaparaseparación)
Todosistemacromatográficocontiene:
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafo de GASES
Fasemóvil:N2,He,etc
PESTICIDASOrganoclorados,Organofosforados,
Carbamatos,etc
Injectorport
RecorderRecorder
Flowcontroler
Carriergas
Capillarycolumn
Detector
Oven
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. FASES MÓVILES
GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquid
Chromatography)
HidrógenoHelioNitrógeno
Solventespolares
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. FASES ESTACIONARIAS
GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquid
Chromatography)
Longitud:De2a60mDiámetrointerno:De0.2a0.53mmGrosordelapelícula:De0.1a1μm
COLUMNA
CAPILAR
Longitud:De3a30cmDiámetro:De2a5mmRelleno:
-Pelicular:30-40μm+F.E.2-5μmo-Partículasporosas:3-10μm
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. INYECCIÓN
HPLC
Volumendeinyección:10-30µl Volumende
inyección:1-2µl
CROMATOGRAFIADEGASES
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. CROMATOGRAMAS
GC(Cromatografíadegases)HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography)
Influyenenlaseparación:
- Longituddelacolumna- Diámetrointernodelacolumna- Grosordelapelícula(F.E.)- Tipodelgasportador- Velocidaddelgasportador- Temperaturadelacolumna
Influyenenlaseparación:
- Longituddelacolumna- Diámetrodelacolumna- Lafaseestacionaria- Lossolventesdelafasemóvil- Velocidaddelafasemóvil- Elgradientedelafasemóvil
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS
TIEMPODERETENCIÓN(tR)ÁREA(¿ALTURA?)TIEMPOMUERTO(tM)
TIEMPODERETENCIÓNAJUSTADOt’R=tR-tM
FACTORDECAPACIDADORETENCIÓNkk=CsVs/CmVm=KVs/Vm=Kb
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Cromatógrafos. DETECTORES
HPLC CROMATOGRAFIADEGASES
• Espectrofotométricos
• Defluorescencia
• Electroquímicos
• Refractométricos
• Espectrometríademasas
• DeIonizacióndellama
• Deconductividadtérmica
• Denitrógenoyfósforo
• Decapturadeelectrones
• Espectrometríademasas
Elespectrodemasassepresentahabitualmentecomoungráficodebarras,enlaquecadaunadeellascorrespondeaunión.Lainformaciónproporcionadaincluyelarelaciónm/zylaintensidadrelativadecadaseñal.Alamásintensa,denominadapicobase,seleasignaelvalor100.Comolamayorpartedelosionesformadostienecargaunidad,lasrelacionesm/zsecorrespondeconsusmasas.Eliónmoleculareseliónqueresultatraslapérdidadeunelectrónporpartedelamolécula.
Espectrodemasasdeln-decano(Pm=142)
Pentano(Pm=72)
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA ESPECTROMETRÍA DE MASAS
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TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Interpretación de resultados
Variablesqueinfluyenenlosresultadosanalíticos
• Momentodelatomademuestras• Estabilidaddelcompuestoenlamuestra• Homogeneidaddelamuestra
• Amplitudyreproducibilidaddelmétodoanalítico
• Interferenciasenelmétodoanalítico
- Defectosoperatorios- Escasarecuperacióndurantelaextracción- Inadecuadatécnicaextractiva- Insuficienteseparacióndeanalitos- Excesivaspérdidas(purificación,descomposición,etc)
- Desaparicióndeltóxico- Inadecuadatomademuestras(norepresentativa)- Inadecuadascondicionesdeconservacióndelamuestra- Facilidaddedegradacióndelanalito
TÉCNICASANALÍTICASENTOXICOLOGÍA Interpretación de resultados
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ANÁLISIS de TÓXICOS ORGÁNICOS
Diseño: A.J. García
Guión: A.J. García e I. Navas
Información: A.J. García e I. Navas
Edición: A.J. García
Prácticas de Toxicología Analítica
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