anaerobs.clostridium
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-ClostridiumTRANSCRIPT
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Bacterias anaerobias
Lic. Natasha Soca
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Son bacterias que pueden crecer en presencia de oxígeno o no.
Esporuladas o no esporuladas
Se diferencian por:
Morfología
Ecología
Patología
Tratamiento
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No esporulados :
Cocos Gram +
Bacilos Gram +
Bacilos Gram –
Esporulados :
Bacilos Gram-
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• Forman parte de la Flora Normal
• Son agentes de infecciones endógenas, polimicrobianas y oportunistas
• Producen infecciones inespecíficas
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Bacterias anaerobias estrictas
• Son las bacterias incapaces de crecer en presencia de oxigeno.
• Realizan respiración anaerobia o fermentación. • Para algunas el oxígeno es letal. • Los mecanismos de acción tóxica del oxígeno son
diversos (H2O2, radical superoxido, etc.).
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Distintos aceptores de electrones, y sus productos
Aceptor Producto final
Nitrato Nitritos, óxidos de N y N2
Sulfato Sulfuros
Azufre Sulfuros
CO2
Ácido acético
CO2 Metano
Fumarato Succinato
Fe3+ Fe2+
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Bacilos Gram positivos esporulados
• Producen infecciones endógenas y exógenas
• En forma directa
• O por la acción de las toxinas
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BACILOS GRAM + ANAEROBIAS ESPORULADAS: Clostridium
• Anaerobios estrictos. • Endosporas en disposición terminal o subterminal. • Flagelos peritrico. • Sin cápsula, excepto C. perfringens • Ampliamente distribuidos en la naturaleza. • Algunos forman parte de la flora normal • Algunos son responsables de infecciones e intoxicaciones graves
por la formación de TOXINAS de naturaleza proteica, termolábiles.
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• Ampliamente distribuidos en la naturaleza.
• Algunos son saprofíticos y otros son patógenos.
• Producen infecciones en la piel, partes blandas, intoxicación alimentaria.
• Sobreviven en condiciones adversas (esporas).
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• Rápida tasa de crecimiento.
• Producción de numerosas toxinas histolíticas, neurotoxinas y enterotoxinas
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Factores de patogenicidad
• Colagenasas
• Hialuronidasas
• Proteasas
• Dnasas
• Heparinasas
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Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Clostridium botulinum
Clostridium difficile
C. septicum,
C. novyi.
C.bifermentans
C. ramosum
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Clasificación de Clostridium en función de su toxicidad
• Neurotóxicos: – C. tetani
– C. botulinum
• Citotoxicidad en lesiones previas: – C. perfringens (gangrena gaseosa)
– C. histolyticum, C. bifermentans, etc.
• Enterotóxicos: – C. perfringens
– C. difficile (colitis pseudomembranosa)
• Cuadros purulentos (piógenos) junto con otras bacterias anaerobias: No hay efecto tóxico. – C. ramosum, C. perfringens…
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Esporas caracterìsticas
• DEFORMAN EL SOMA BACTERIANO.
• UBICACIÓN SUBTERMINAL
– Ovales: C. histolyticum, C. difficile
• UBICACIÓN TERMINAL
– Redondos: C. tetani
– Ovales: C. tertium, C. ramosu
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Clostridium tetani
• Esporas esféricas, terminales con engrosamiento (en palillo de tambor)
• Hábitat: En la tierra y en el intestino del hombre y animales .
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Clostridium tetani
• Bacilo Gram +, móvil esporulado con espora terminal con aspecto de palillo de tambor
• Posee una potente neurotoxina termolábil la tetanoespamina que es del tipo A-B que bloquea los neurotransmisores para la sinapsis inhibidora lo que permite la sináptica excitadora descontrolada-parálisis espástica.
• Posee una hemolisina la tetanolisina
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Clostridium tetani
• Produce tres toxinas neurotóxicas (en el SNC)
• Produce el TETANOS: Caracterizado por parálisis espástica (rigidez tetánica).
• Requiere anaerobiosis: Heridas profundas.
• Periodo de incubación: 5 – 7 días
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Clostridium tetani
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Clostridium tetani
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Clostridium tetani
PATOLOGIA
TETANOS
NEONATAL
TETANOS
LOCALIZADO
TETANOS
GENERALIZADO
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Clostridium tetani
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Clostridium tetani – Mecanismos de patogenecidad
• TETANOSPASMINA: RESPONSABLE DE
CUADRO DE TÉTANOS (TIPO ANTIGÉNICO
ÚNICO)
• TOXINA TIPO A+B,CODIFICADA POR
PLÁSMIDO
• TETANOLISINA: HEMOLISINA
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Clostridium tetani
• TOXINA TETÁNICA
• PROTOXINA (150 KDa)
• TOXINA FORMADA POR DOS CADENAS
• CADENA PESADA - SE UNE A MEMBRANA
NEURONAL
• LOCALIZACIÓN EN VESÍCULAS DE
TERMINALES NERVIOSOS PRESI-NÁPTICOS
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Clostridium tetani
• TOXINA TETÁNICA
• HIDROLIZA PROTEÍNAS DE ANCLAJE
(SINAPTOBREVINAS) DE
NEUROTRANSMISORES INHIBI-TORIOS
(GLICINA, GABA)
• FALTA DE RELAJACIÓN MUSCULAR
• CAUSA ESPASMOS MUSCULARES
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Clostridium tetani Vacunación.
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Clostridium botulinum • Ampliamente distribuidas:
Aire, suelo, alimentos
• En conservas (abombamiento
por metano)
• Esporas subterminales con
engrosamiento.
• Potentes neurotoxinas
(proteicas y termolábiles):
Clasificadas de la A a la G.
Causan parálisis flácida por
bloqueo de la liberación de
acetil colina en las neuronas
• PATOGENIA Botulismo
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Clostridium botulinum
• Son bacilos Gram +.
• Esporulados.
• Anaerobios estrictos.
• No poseen cápsula.
• Se dividen en 4 grupos por el tipo de toxina que producen y su actividad proteolítica
• La enfermedad humana se asocia a los tipos I y II.
• Se conocen 8 toxinas botulínicas( A,B ,C , alfa , D ,E ,F G).
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Clostridium botulinum
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Clostridium botulinum
Mecanismo de acción de la toxina: Llega al tubo digestivo a través de alimentos
contaminados.
Inicialmente Toxinfección alimentaria.
Vía sanguínea y linfática
Bloquea la liberación de acetilcolina
Origina:
Visión borrosa; sequedad de boca, lengua y faringe; fotofobia; debilidad general de los músculos, incluso respiratorios.
Puede originar la muerte por fallo respiratorio y cardíaco.
Periodo de incubación: 18 – 36 horas.
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Clostridium botulinum
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Clostridium botulinum
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Clostridium botulinum Patogenia
• La toxina botulínica es específica para los nervios colinérgicos. Bloquea la neurotransmisión en la sinapsis colinérgica periférica al impedirla liberación del neurotransmisor acetilcolina.
• También produce una toxina que altera la permeabilidad vascular
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Clostridium botulinum
• Botulismo causado por alimentos-parálisis fláccida
• Botulismo infantil-producción in vivo de neurotoxinas.
• Botulismo de heridas
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Clostridium botulinum
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Clostridium perfringens Muy difundida en la naturaleza. Se le
puede encontrar en gran número en: Suelo
Flora intestinal
Del suelo pasa a heridas profundas produciendo la GANGRENA GASEOSA.
Produce varias toxinas: Citotoxicidad
Enterotoxina
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Clostridium perfringens
• Bacilos gram +
• Anaerobios- aero
tolerante.
• Posee cápsula.
• Inmóvil
• Produce esporas.
• Rectos
• Sacarolítico activo.
• Produce gas,CO 2 y H
2
• Produce 4 toxinas
letales
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Clostridium perfringens
• Directo. Bacilos gram +
Con escasos LPMN debido a su destrucción por la Toxina Alfa.
- Crece en Agar sangre y Agar yema de huevo.
- Produce Lecitinasa
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Clostridium perfringens
• Produce:Gangrena gaseosa Mecanismo de acción citotoxicidad Puerta de entrada por heridas con condiciones anaerobias.
• Efecto sobre los tejidos Rompen células y tejidos (cél. sanguíneas, endoteliales y musculares) por la acción de varias toxinas:
– Hemolisinas
– Neuraminidasa (rompe el ácido neuraminico de las membranas)
– Hialuronidasa – Proteasas.
• Originando necrosis con produciendo gas, hemorragias y edema.
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Clostridium perfringens Factores de virulencia
• Toxina alfa- es una lecitinasa (fosfolipasa C ) provoca la lisis de los hematíes,plaquetas, leucocitos y células endoteliales.
• Aumenta la permeabilidad vascular con hemólisis masiva , hemorragia y destrucción tisular.
• Produce toxicidad hepática y disfunción miocárdica.
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Clostridium perfringens
• Toxina beta- es necrotizante
• Produce catecolamina (induce la hipertensión).es responsable de la enterocolitis necrotizante.
• Toxina epsilon-es una prototoxina que es activada por enzimas proteolíticas que aumenta la permeabilidad vascular de la pared gástrica.
• Toxina iota-tiene actividad necrótica y aumenta la permeabilidad vascular
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Clostridium perfringens • Enterotoxina-proteína termolábil producida en el
colon y liberada con la formación de esporas
• Toxina delta hemolítica
• Toxina teta –citolisina hemolítica
• Toxina kappa
• Colagenasa
• Gelatinasa
• Proteasa
• Dnasa
• Neuraminidasa
• Hialuronidasa
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Clostridium perfringens
Infecciones tóxica alimentaria:
• A partir de carne contaminada con Clostridium
perfringens tipo A .
– En el intestino germinan las esporas dando
cuadros diarreicos leves.
• La ingestión de carne contaminada con
C. perfringens tipo C ( rara)
Enteritis necrotizante (cuadros diarreicos graves,
muy acuosos y sanguinolentos con vómitos y puede
llegar al estado de Shock)
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Clostridium perfringens
• Mionecrosis –gangrena gaseosa – produce
necrosis muscular extensa con
shock,insuficiencia renal y muerte.
• Celulitis,fascitis e infecciones de partes
blandas- provoca supuración y formación de
gas .
• Intoxicación alimentaria.
• Enteritis necrotizante.
• Bacteriemia
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Clostridiun difficile
• Bacilo gram +.
• Esporulado
• Anaerobio
• Móvil
• Posee cápsula
• Productor de toxina A , B
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Clostridiun difficile • Productor de enterotoxina (toxina A) que induce la
producción de citocinas con hipersecreción de
líquidos y necrosis hemorrágica.
• Citotoxina (toxina B) induce la despolimerización
de la actina con pérdida del citoesqueleto celular.
• Factor de adherencia
• Se une a las células del
colon
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Clostridiun difficile
• Puede causar colitis pseudomembranosa.
• La diarrea asociada a C. difficile es la diarrea
nosocomial infecciosa
• Suelen adquirirse en el hospital
• Pueden causar:
• Colonización intestinal asintomática
• Diarrea aguda
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Clostridiun difficile
• Productor de enterotoxina que induce la
producción de citotoxinas con hipersecreción
de líquidos y necrosis hemorrágica.
• Citotoxina.
• Factor de adherencia – se une a las células del
cólon.
• Colitis pseudomembranosa puede ocasionar:
• perforación del colon
• sepsis
• muerte.
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Clostridiun difficile
• La mayor parte de las infecciones por C.
difficile se adquieren nosocomialmente
Muchos pacientes permanecen asintomáticos
tras la colonización.
• El factor de riesgo más frecuente es el
tratamiento antibiótico previo,
• Los mayores responsables son clindamicina,
cefalosporinas, penicilinas y fluoroquinolonas.
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C. difficile
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Clostridiun difficile
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• Toma de muestra :en condiciones de anaerobiosis utilizando medios especiales reductores del oxígeno
• Examen directo microscópico
• Examen microscópico para visualizar las esporas y ver su ubicación
• Cultivo en anaerobiosis en Agar sangre O.
Agar específico ,etc
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• Identificación
• Pruebas bioquímicas:
Indol
Fermentación de azúcares
(glucosa ,lactosa, rapnosa , manitol, etc)
Digestión en medios con carne
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Lecitina en - Agar yema de huevo TEST DE NAGLER
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DIAGNÓSTICO.
• PRESENCIA DEL GERMEN
• PRESENCIA DE ANTÍGENOS
• Análisis de citotoxicidad
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• TUBOS HERMÉTICOS PARA MUESTRAS DE
– OÍDO INTERNO
– LÍQUIDOS CORPORALES (AMNIÓTICO, ASCÍTICO, PLEURAL, SINOVIAL, ETC)
– ORINA (PUNCIÓN SUPRAPÚBICA)
– TEJIDOS
– TRACTO GENITAL FEMENINO (QUISTES DE BARTHOLIN, FONDO DE SACO, ENDOMETRIO
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• Muestras inadecuadas
• LAVADO BRONQUIOALVEOLAR DESPROTEGIDO. • HISOPADO CERVICAL. • ASPIRADO ENDOTRAQUEAL. • LOQUIOS. • HISOPADO NASOFARÍNGEO / SECRECIÓN FARÍNGEA. • LÍQUIDO SEMINAL O PROSTÁTICO. • ESPUTO POR EXPECTORACIÓN O INDUCIDO. • HECES / MUESTRA RECTAL. • SECRECIÓN URETRAL / HISOPADO VAGINAL O
VULVAR. • ORINA (POR VACIADO DIRECTO O CATETERISMO
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Medios de cultivo empleados
• Caldo con tioglicolato (con o sin rezasurina)
• Caldo Tarozzi
– Caldo con trozos de hígado o carne y glucosa
• Agar blando.
• Medio de Hibler (papilla de cerebro)
• Medio BHI (caldo infusión cerebro- corazón)
• Medio RCM (Reinforced Clostridial Medium)
• Agar SPS (sulfito-polimixina-sulfadiacina)
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Métodos para obtener anaerobiosis
• Vacío.
• Reemplazo por gases.
- N - Gases inertes
- CO2 - Mezclas reductoras
• Sustancias reductoras atóxicas.
–Tioglicolato, glucosa
–Sulfito de Na
–Sulfoindigonato de Na
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Manómetro.
Picos para realizar
reemplazo gaseoso.
Esponja catalítica.
Soporte interno para sobre
con sustancia reductora.
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BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS Propionibacterium
• Ampliamente distribuidos en la naturaleza
• Algunos forman parte de la flora saprofita gastrointestinal, vaginal o bucal.
• Solo unas pocas son capaces de producir cuadros patógenos.
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BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS Fusobacterium
• Bacilos Gram + no esporulados (ver siguiente DP):
– Lactobacillus
– Propionibacterium
– Bifidobacterium
• Bacilos gram – no esporulados: – Bacteroides: Flora normal intestinal vaginal y bucal.
B. fragilis es patógeno oprtunista.
– Fusobacterium: F. nucleatum es patógeno oportunista del aparato respiratorio y tracto genital femenino.
• Cocos Gram + no esporulados: – Peptococcus: No patógeno
– Algunos Streptococcus anaerobios de la flora gastrointestinal normal.
• Cocos Gram – no esporulados: – Veillonella: Flora intestinal y bucal
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Bacilos gram negativos anaerobios
• GÉNERO BACTEROIDES
• Los Bacteroides son bacilos gram negativos anaerobios obligados que están presentes en gran cantidad en el intestino grueso del ser humano
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Especies
• B. fragilis
• B. thetaiotamicron
• B. vulgatus,
• B. ovatus
• B. distasonis
• B. ureolyticus
• B. gracilis
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Bacteroides
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• Los Bacteroides se asocian a infecciones anaerobias subdiafragmáticas y genitales
• Sepsis a punto de partida de estas infecciones.
• Son resistentes a penicilinas (por producción de betalactamasas)
y cefalosporinas, con alguna excepción.
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• Cocobacilos pequeños gram negativos, pleomórficos con vacuolas evidentes.
• Colonias pequeñas, bajas, convexas, de color blanco a gris, semi opacas y brillantes
• algunas pueden ser hemolíticas.
• B. fragilis aislado de muestras clínicas posee una cápsula polisacárida que puede perderse o disminuir con los cultivos sucesivos
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• Abscesos peritoneales
• B. fragilis, es predominante y a menudo está acompañado por microorganismos anaerobios facultativos y por otros microorganismos
anaerobios estrictos, como Clostridium o los Estreptococos anaerobios (Peptococcus, Peptostreptococcus).
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GÉNEROS PREVOTELLA Y PORPHYROMONAS
• Los bacilos productores de pigmento negro en las colonias en agar sangre ,que previamente
• Se clasificaban como subespecies de Bacteroides melaninogenicus se han reclasificado en dos nuevos géneros:
Porphyromonas
Prevotella ,este último también incluye algunas
especies no pigmentadas.
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• Forman parte de la flora normal de boca, tracto genital e intestinal
• Son patógenos importantes en boca, cabeza, cuello e infecciones pleuropulmonares.
• Prevotella melaninogenica, Prevotella denticola, Prevotella loescheii, Prevotella intermedia y
• Prevotella corporis son miembros de la flora normal de la boca, vías respiratorias superiores y partes blandas subyacentes.
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• . Prevotella bivia prevalece en la flora vaginal y produce vaginosis e infecciones de origen obstétrico.
• Porphyromonas endodontalis y Porphyromonas gingivalis forman parte de la flora normal de la boca
y las encías
• Porphyromonas asaccharol en la flora intestinal
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GÉNERO FUSOBACTERIUM
• Fusobacterium nucleatum
• Flora normal de la boca, tracto respiratorio superior, tracto genitaly gastrointestinal.
• Es un agente causal de infecciones orales, abscesos de pulmón
• Infecciones pleuropulmonares
• Infecciones del líquido amniótico
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Fusobacterium necrophorum
• Es un anaerobio muy virulento que puede causar infección ampliamente diseminadas.
• Es el agente etiológico principal de la Angina de Vincent (asociado a Borrelia),
• Angina de Vincent -Infección necrótica de amígdalas y faringe, que presenta un exudado purulento
membranoso, acompañada de mal olor.
Se halla en una variedad de infecciones subdiafragmáticas.
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Hábitat - tracto gastrointestinal.
• Son bacilos largos con extremos acintados o filamentos delgados.
• Producen alfa y beta hemólisis en Agar sngre
ovina
Las colonias son translúcidas
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VEILLONELLA
• Pequeños cocos gram negativos
• En diplococos o cadenas cortas y racimos Miembros de flora bucal, intestinal y genital, Se aísla de materiales clínicos, pero es dudoso su poder patógeno.
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Peptoestreptococcus
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• Cocos Gram + no esporulados:
– Peptococcus: No patógeno
– Algunos Streptococcus anaerobios de la flora gastrointestinal normal.
• Cocos bacilos Gram – no esporulados:
– Veillonella: Flora intestinal y bucal
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BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS
• Bacilos Gram + no esporulados:
– Lactobacillus:
• Microaerofílicos (algunos anaerobios), no patógenos
• Flora bucal, vaginal e intestinal
• Utilidad industrial.
– Propionibacterium:
• Anaerobios y microaerofílicos.
• Pleomorficos
• Flora normal del tubo digestivo, tracto urinario y piel.
• P. acnes produce infecciones en piel
• Algunas spp se usan en fabricación de queso.
– Bifidobacterium:
• Flora intestinal. No patógeno.
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BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS
• ACCIÓN PATÓGENA E INTERÉS CLÍNICO:
– La mayoría son no patógenos
– Unos pocos patógenos oportunistas:
• En Inmunodeprimidos, SIDA, en estados carenciales, desnutrición.
• En enfermedades nosocomiales: Infecciones quirurgicas, complicaciones de escaras, úlceras por decúbito, etc.
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BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS
• Aislamiento, caracteres bioquímicos y diagnóstico bacteriológico: – Toma de muestras: Dependiendo del cuadro clínico:
De esputo, heces, exudado…
– Transporte en medios específicos con bajo potencial redox y atmósfera de CO2.
– Tinción de Gram: Morfología, etc.
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– Aislamiento en medios de cultivo en condiciones aeróbicas, anaeróbicas y microaerofílicas.
– Si crece en el medio anaerobio, se somete a PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ANAEROBIOS (baterías de identificación rápida): Gelatinasa, fermentaciónes, Indol, etc.
– Estudios de CROMATOGRAFÍA DE GASES y HPLC para detectar la producción de ácidos grasos volátiles, propios de las bacterias anaerobias.
– Técnicas serólógicas con sueros específicos.
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Actynomices
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Género Actinomyces
• Bacilos gram (+)
• Anaerobios o microaerofílicos
• No esporulados, del género Actinomyces.
• Se caracteriza por la formación de abscesos, fibrosis tisular y presencia de tractos fistulosos en distintas localizaciones anatómicas,
• Afecta con mayor frecuencia las regiones cervicofacial (55%), torácica (20%) y abdomino pélvica (15%).
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14 especies de Actinomyces conocidas,
6 pueden ser patógenas para el hombre.
Son comensales y habitantes normales de:
orofaringe,
tracto gastro intestinal
tracto genital femenino.
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• La infección tiene como puerta de entrada:
• Lesiòn de la mucosa del tracto gastrointestinal ,
• Aspiración de secreciones de la orofaringe o tracto gastrointestinal hacia el tracto respiratorio
• La presencia de dispositivo intrauterino, es también factores de riesgo importantes.
![Page 102: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/102.jpg)
• Cara y cuello -sitios más frecuentes de infección
• La enfermedad puede manifestarse como un absceso piógeno doloroso o como un cuadro que evoluciona en forma crónica, formando masas induradas indoloras a menudo acompañadas de tractos fistulosos que descargan gránulos actinomicóticos
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Diagnóstico de actinomicosis
• Aislando especies de actinomyces en medios de cultivo para anaerobios,
• Demostración de gránulos actinomicóticos (“gránulos de azufre”) en exudados y cortes histológicos sugieren fuertemente el diagnóstico.
• Es infrecuente su visualización con tinciones de uso habitual, pero esta se facilita al usar tinciones especiales como la de Grocott-Gomori
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![Page 109: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/109.jpg)
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Toma de muestra para anaerobios
• En condiciones de anaerobiosis utilizando
medios especiales reductores del oxígeno.
• Debe proceder de lugares cerrados.
• Adecuada asepsia
• Elegir la forma de recolección
(Aspirado,Biopsia de Tejido)
![Page 112: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/112.jpg)
![Page 113: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/113.jpg)
Mobiluncus
![Page 114: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/114.jpg)
![Page 115: ANAEROBS.clostridium](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022051002/5695d34d1a28ab9b029d736e/html5/thumbnails/115.jpg)
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