r esultados de transformaciÓn, r estricciÓn de plÁsmido e inducciÓn de proteÍna recombinante...

RESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, RESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE

Realizado por:Godínez Villanueva Diana Pamela

Rodríguez Espinosa Sofía Kesara

TRANSFORMACIÓNObjetivos Realizar la técnica de transformación bacteriana. Aprender a identificar células transformantes

mediante su fenotipo.

Desarrollo experimental

El equipo 6 repitió el experimento y después de 4 días de incubación se obtuvo:

Aprox. 130 colonias

RESTRICCIÓN

FACTORES CRÍTICOS AL TRABAJAR CON ENZIMAS:Pureza del DNATemperatura y pH DNAsasContaminantes con carga (-)DNA contaminado con otro DNA Grados de metilación Tipo de molécula de DNA Buffer adecuado

GEL MODELO1. Std de peso

molecular2. Sin restringir3. Sin muestra4. Restringido

con 2 enzimas5. Restringido

con 2 enzimas e incubado toda la noche

6. Restringido 1 enzima

1 2 3 4 5 6

TVR

Inserto

P

T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto

RNA

Std usado

NUESTRO GEL No se logró ver

mejorStd P E1 E2 P E1 E2 P

Std P E1 E2 E1 E2 E1 E2

RESULTADOS DEL SEMESTRE PASADO1 Std2 Plásmido sin restringir (todo el

vol)2 Plásmido sin restringir (5uL)3 Restricción 2 enzimas (todo el

vol)4 Restricción 2 enzimas (todo el

volumen toda la noche)5 Restricción 1 enzima (todo el

volumen, toda la noche)

INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Objetivos -Realizar la inducción de una

proteína recombinante (β- lactamasa).

Desarrollo experimental

¿QUÉ ESPERAMOS?

Tiempo de inducción 0 0.5 1.0 1.5 Std

Proteína recombinante

RESULTADOS INDUCCIÓNEquipo 1 Equipo 2 Equipo 3

Equipo 4 Equipo 5Equipo 6