pruebas basicas coagulacion

Pruebas básicas de Pruebas básicas de CoagulaciónCoagulación

Departamento de Hemostasia y Departamento de Hemostasia y Trombosis. IIHEMA Trombosis. IIHEMA

Academia Nacional de MedicinaAcademia Nacional de Medicina

Vía Intrínseca de la Vía Intrínseca de la coagulacióncoagulación

BioqBioq. Luis Bastos. Luis BastosDpto. Hemostasia y TrombosisDpto. Hemostasia y Trombosis

IIHEMA IIHEMA Academia Nacional de MedicinaAcademia Nacional de Medicina

Fibrinógeno

M. Fibrina

Fibrina

IIa

FTVIIaCa2+

XIIIa

VIA INTRÍNSECA VIA INTRÍNSECA DE LA DE LA

COAGULACIONCOAGULACION

XII XIIa

XI XIa

IX IXaVIIIaFLCa2+

Ca2+

PK

X

XaVaFLCa2+

QAPM

IIHEMAIIHEMA

II

¿QUÉ PRUEBAS ¿QUÉ PRUEBAS EVALÚAN LA VIA EVALÚAN LA VIA

INTRÍNSECA DE LA INTRÍNSECA DE LA COAGULACION?COAGULACION?

IIHEMAIIHEMA

XIIXII XIIaXIIa

XIXI XIaXIa

IXIX IXaIXaVIIIaVIIIaFLFLCaCa2+2+

CaCa2+2+

FCFC

XX

XaXaVaVaFLFLCaCa2+2+

IIII

IIaIIaFibrinógenoFibrinógeno

FibrinaFibrina

ActivadorActivador+ FL+ FL

VIA INTRINSECAVIA INTRINSECA

APTT APTT KCT KCT SCTSCT

APTT o KPTTAPTT o KPTT•• Prueba de elección para la evaluación Prueba de elección para la evaluación

de la vía intrínsecade la vía intrínseca

IIHEMAIIHEMA

APTTAPTT

¿CUALES SON LOS ¿CUALES SON LOS COMPONENTES Y/O COMPONENTES Y/O

REACTIVOS NECESARIOS REACTIVOS NECESARIOS PARA REALIZAR LA PARA REALIZAR LA DETERMINACIÓN?DETERMINACIÓN?

IIHEMAIIHEMA

Tiempo de Tiempo de TromboplastinaTromboplastinaParcial ActivadaParcial Activada

•• Fosfolípidos de distinto Fosfolípidos de distinto

origen y concentraciónorigen y concentración

•• Activador (Kaolín, Activador (Kaolín, AcAc. . ElágicoElágico, ,

Sílice)Sílice)

•• Cloruro de calcio 0,025 MCloruro de calcio 0,025 M

IIHEMAIIHEMA

APTTAPTT

¿Qué sensibilidad ¿Qué sensibilidad debería poseer el debería poseer el

reactivo de elección ?reactivo de elección ?

IIHEMAIIHEMA

APTTAPTT

Déficit de factores de la víaDéficit de factores de la vía

Presencia de heparinaPresencia de heparina

Inhibidores de la víaInhibidores de la vía

IIHEMAIIHEMA

¿ DE QUÉ VARIABLES ¿ DE QUÉ VARIABLES VA A DEPENDER LA VA A DEPENDER LA

SENSIBILIDAD DE LA SENSIBILIDAD DE LA PRUEBA?PRUEBA?

IIHEMAIIHEMA

APTTSensibilidad

Activador Naturaleza y concentración de FL

IIHEMAIIHEMA

¿ CÓMO REALIZAMOS ¿ CÓMO REALIZAMOS LA PRUEBA ?LA PRUEBA ?

IIHEMAIIHEMA

APTT o KPTTAPTT o KPTT

•• 100 100 µµl plasma pacientel plasma paciente

•• 100 100 µµl l cefalinacefalina + activador+ activador

2 minutos 37 2 minutos 37 ººCC

••100 100 µµl l cloruro de calcio 0,025Mcloruro de calcio 0,025M

••V.NV.N.: 37.: 37--48 segundos48 segundosIIHEMAIIHEMA

¿ES IMPORTANTE ¿ES IMPORTANTE

RESPETAR EL TIEMPO RESPETAR EL TIEMPO DE INCUBACIÓN?DE INCUBACIÓN?

IIHEMAIIHEMA

VIA EXTRINSECAVIA INTRINSECA

XIIIaXIIIa

VIIaFTPL Ca 2+

fibrinógeno fibrinafibrina

Fibrina insolubleFibrina insoluble

IX IXa

VIIIaPL Ca 2+X

Xa XVaPL Ca 2+

II IIa

XIIa QAPM PK

XI XIa

IIHEMAIIHEMA

FASE DE CONTACTO

¿ EN QUÉ ¿ EN QUÉ SITUACIONES SITUACIONES

PENSARIAMOS AL PENSARIAMOS AL OBTENER UN APTT OBTENER UN APTT

PROLONGADO ?PROLONGADO ?IIHEMAIIHEMA

APTT prolongadoAPTT prolongado

•• Pacientes bajo tratamiento Pacientes bajo tratamiento anticoagulante oral

•• DDééficit de factores : VIII, IX, XI, ficit de factores : VIII, IX, XI, XII, QAPM, PKXII, QAPM, PK

anticoagulante oral

•• Fibrinógeno < 100 Fibrinógeno < 100 mgmg//dldl

IIHEMAIIHEMA

APTT prolongadoAPTT prolongado

•• Heparina no fraccionadaHeparina no fraccionada

•• InhibidoresInhibidores

•• P. P. PolitransfundidoPolitransfundido ↓↓ VIII, VVIII, V

IIHEMAIIHEMA

APTT prolongadoAPTT prolongado

•• DDééficitficit de de vitaminavitamina KK

•• HepatopatHepatopatííasas

•• CIDCID

IIHEMAIIHEMA

ANTE UN APTT ANTE UN APTT PROLONGADO, PROLONGADO,

¿ QUÉ PRUEBA ¿ QUÉ PRUEBA DEBEMOS REALIZAR ?DEBEMOS REALIZAR ?

IIHEMAIIHEMA

Corrección con

plasma normal

( relación 1:1)

IIHEMAIIHEMA

APTT prolongadoAPTT prolongadoAPTT mezcla plasma del

paciente con plasma normal (1:1)

No corrige o prolonga

Corrige

Déficit de factores Inhibidor

IIHEMAIIHEMA

APTTAPTT

Corregir con plasma normal (1:1)

Indice de Rosner

APTT (P+N) – APTT N

APTT P

> Valor de corte (0,1)⇒ No Corrige

≤ Valor de corte ⇒ Corrige

IIHEMAIIHEMA

APTTAPTT

APTT (P+N) – APTT NAPTT P

= 0,10Valor de corte

P = 80 P = 80 segseg N = 40 N = 40 segsegP+NP+N

46 46 segseg 55 55 segseg

Corrige Corrige No CorrigeNo Corrige

¿ QUÉ HACER SI ¿ QUÉ HACER SI TENEMOS UN APTT TENEMOS UN APTT PROLONGADO, QUE PROLONGADO, QUE

CORRIGE Y FACTORES CORRIGE Y FACTORES VIII, IX, XI, XII VIII, IX, XI, XII NORMALES ?NORMALES ?

IIHEMAIIHEMA

APTT c/incubación prolongada (10 min. a 37°C)

Corrige

Posible déficit Precalicreínas

IIHEMAIIHEMA

¿ CÓMO REALIZAMOS ¿ CÓMO REALIZAMOS LA DETERMINACIÓN LA DETERMINACIÓN DE LOS FACTORES DE DE LOS FACTORES DE

LA VÍA ?LA VÍA ?

IIHEMAIIHEMA

Determinación de factoresDeterminación de factores

•• Modificación del APTTModificación del APTT

•• Reactivos:Reactivos:-- fosfolípidos de distinto origen fosfolípidos de distinto origen

y concentración y concentración

-- activadoractivador

-- cloruro de calcio 0,025 M cloruro de calcio 0,025 M

-- plasma deficiente en factor plasma deficiente en factor

a estudiar, (diluido ?)a estudiar, (diluido ?)IIHEMAIIHEMA

Determinación de factoresDeterminación de factores

•• Muestra: plasma diluido 1/5, 1/10, 1/20Muestra: plasma diluido 1/5, 1/10, 1/20

•• Curva del factor :Curva del factor :

--diluciones del estándar:diluciones del estándar:

1/5, 1/10, 1/20, 1/401/5, 1/10, 1/20, 1/40

•• Diluyente Fluido II Diluyente Fluido II (buffer (buffer OwrenOwren

modificado, pH 7,35)modificado, pH 7,35)

IIHEMAIIHEMA

Determinación de factoresDeterminación de factores

•• 50 50 µµl dilucil dilucióón pacienten paciente

•• 50 50 µµl dilucil dilucióón plasma deficienten plasma deficiente

•• 50 50 µµl l cefalinacefalina + activador+ activador

2 minutos 37 2 minutos 37 ººCC

•• 50 50 µµl l cloruro de calcio 0,025Mcloruro de calcio 0,025M

IIHEMAIIHEMA

Determinación de factoresDeterminación de factores

•• V.NV.N.: 50%.: 50%--150%150%

•• Valores : Valores :

déficit del factor déficit del factor

inhibidorinhibidor

IIHEMAIIHEMA

Determinación de factoresDeterminación de factores

IIHEMAIIHEMAFactor (U/dl)

Tiem

po (s

eg)

normal

inhibidor específico

o déficit

DEFICIENCIA DE FACTORESDEFICIENCIA DE FACTORES

DEFICIENCIADEFICIENCIA INCIDENCIAINCIDENCIA HERENCIAHERENCIA

FibrinógenoFibrinógeno 1:1 millón1:1 millón ARAR

Factor IIFactor II 1:2 millones1:2 millones ARAR

Factor VFactor V 1:1 millón1:1 millón ARAR

Factor VIIFactor VII 1:500.0001:500.000 ARAR

Factor VIIIFactor VIII 1:10.0001:10.000 XLRXLR

Factor IXFactor IX 1:60.0001:60.000 XLRXLR

Factor XIFactor XI 1:100.0001:100.000 ARAR

Factor XIIIFactor XIII 1:2 millones1:2 millones ARAR

IIHEMAIIHEMA

Vía final Vía final o comúno común

BioqBioq. Luis Bastos. Luis BastosDpto. Hemostasia y TrombosisDpto. Hemostasia y Trombosis

IIHEMA IIHEMA Academia Nacional de MedicinaAcademia Nacional de Medicina

VIA EXTRINSECAVIA INTRINSECA

XIIa HMK PK

II IIa

fibrinógeno fibrinafibrina

Fibrina insolubleFibrina insolubleXIIIaXIIIa

XI XIa

IX IXaVIIIaPL Ca 2+

X Xa

VIIaFTPL Ca 2+

XVaPL Ca 2+

IIHEMAIIHEMA

¿ QUÉ PRUEBAS ¿ QUÉ PRUEBAS PODEMOS UTILIZAR PODEMOS UTILIZAR

PARA EVALUAR PARA EVALUAR

ESTA VÍA ?ESTA VÍA ?

IIHEMAIIHEMA

Tiempo de Tiempo de

Trombina (TT)Trombina (TT)

Fibrinógeno (I)Fibrinógeno (I)

IIHEMAIIHEMA

Tiempo de Tiempo de

Trombina (TT)Trombina (TT)

Tiempo de TrombinaTiempo de Trombina

•• Mide el tiempo de coagulación del Mide el tiempo de coagulación del plasma en presencia de trombinaplasma en presencia de trombina. .

•• Evalúa la transformación de Evalúa la transformación de fibrinógeno a fibrina, pero excluye la fibrinógeno a fibrina, pero excluye la participación del factor XIII.participación del factor XIII.

IIHEMAIIHEMA

Tiempo de TrombinaTiempo de Trombina

•• Reactivo: Reactivo:

-- solución de trombina de solución de trombina de

10 unidades/ml10 unidades/ml

•• Muestra: Muestra:

-- plasma citratadoplasma citratado

IIHEMAIIHEMA

¿ CÓMO REALIZAMOS ¿ CÓMO REALIZAMOS LA PRUEBA ?LA PRUEBA ?

IIHEMAIIHEMA

Tiempo de TrombinaTiempo de Trombina

•• 100 100 µµl de plasmal de plasma 30 segundos 3730 segundos 37ººCC 100 100 µµl de l de

trombinatrombina

•• Se debe informar su valor en Se debe informar su valor en relacirelacióónn

con el normal del dcon el normal del díía.a.

-- valores normales entre 16valores normales entre 16--22 segundos.22 segundos.

IIHEMAIIHEMA

¿ EN QUÉ ¿ EN QUÉ SITUACIONES SITUACIONES

TENDRÍAMOS UN TT TENDRÍAMOS UN TT PROLONGADO ?PROLONGADO ?

IIHEMAIIHEMA

T T prolongadoT T prolongado

•Fibrinógeno disminuido (<100mg%)•Fibrinógeno anómalo

•Heparina

•PDF-DD

•Paraproteínas

•HeparinoidesIIHEMAIIHEMA

T. TROMBINAT. TROMBINACorregir con plasma normal (1:1)

P= 25seg N= 16segN/2= 20seg P+N= ¿?

P+N< N/2 ≥ N/2

Corrige No Corrige

Fibrinógeno (I)Fibrinógeno (I)

IIHEMAIIHEMA

Determinación de FibrinógenoDeterminación de Fibrinógeno

•• Modificación Tiempo de TrombinaModificación Tiempo de Trombina

(método de (método de ClaussClauss))

•• Reactivos: solución de trombina Reactivos: solución de trombina

(concentración de 100 ó 75 U/ml)(concentración de 100 ó 75 U/ml)

IIHEMAIIHEMA

Determinación de FibrinógenoDeterminación de Fibrinógeno•• Muestras :Muestras :

-- diluidas 1/10 en buffer veronal diluidas 1/10 en buffer veronal

OwrenOwren pH=7,35pH=7,35

•• Curva de calibración: Curva de calibración:

-- diluciones 1/5, 1/10, 1/20 y diluciones 1/5, 1/10, 1/20 y

1/40 del 1/40 del estándardestándard..

IIHEMAIIHEMA

¿ CÓMO REALIZAMOS ¿ CÓMO REALIZAMOS LA PRUEBA ?LA PRUEBA ?

IIHEMAIIHEMA

100 100 µµl Trombina +l Trombina +100 100 µµl de dilucil de diluciónn de plasmade plasma

Tiempo de Tiempo de coagulacicoagulacióónn

Tiempo de coagulación es Tiempo de coagulación es inversamente proporcional a la inversamente proporcional a la concentración de Fibrinógenoconcentración de Fibrinógeno

IIHEMAIIHEMA

Determinación de FibrinógenoDeterminación de Fibrinógeno

•• Los resultados se expresan en Los resultados se expresan en mgmg/dl./dl.

•• V.NV.N.: 200.: 200--400 400 mgmg//dldl

IIHEMAIIHEMA

Resultados : TT alterado,TP normal,APTT normalResultados : TT alterado,TP normal,APTT normal

mezcla del plasma del paciente

c/normal (1:1)

Dosaje de Fibrinógeno

Hipo o afibrinogenemia

Corrige No corrige

Disminuido

T de Reptilasa

Alterado Normal

Disfibrinogenemiacongénita o adquirida

Inhibición tipo

heparina

IIHEMAIIHEMA

¿ Qué hacer ante un paciente ¿ Qué hacer ante un paciente con antecedentes de con antecedentes de

sangrado tardío, que presentasangrado tardío, que presentaAPTT, PT y TT normalesAPTT, PT y TT normales ??

IIHEMAIIHEMA

Determinar

Factor XIII

IIHEMAIIHEMA

Factor XIII

Alterado Normal

Determinación de α-2 antiplasmina

Disminuído: déficit congénito o adquirido

Déficit congénito o adquirido del FXIII o inhibidor del FXIII

IIHEMAIIHEMA

ESTRUCTURA DEL FACTOR XIIIESTRUCTURA DEL FACTOR XIIISubunidad A (XIIIA):Cromosoma 6globularSitio activoMonocitos, megacariocitos,placenta, hígadoA

A

B

B

Tetrámero (A2B2)Subunidad B (XIIIB)

Cromosoma 1FilamentosaTransportador XIIIAHígado

IIHEMAIIHEMA

¿ CUALES SON LAS ¿ CUALES SON LAS FUNCIONES DEL FUNCIONES DEL

FXIII?FXIII?

IIHEMAIIHEMA

•• Estabilizar el coágulo Estabilizar el coágulo ((transamidasatransamidasa))

•• Produce la unión entre la fibrina y Produce la unión entre la fibrina y la la αα2 antiplasmina.2 antiplasmina.

IIHEMAIIHEMA

Funciones del F XIIIFunciones del F XIII

•• Entrecruzamiento (uniones covalentes) Entrecruzamiento (uniones covalentes) entre: entre:

IIHEMAIIHEMA

monmonóómeros de fibrina meros de fibrina

malla de fibrina malla de fibrina

fibronectinafibronectina

colcoláágeno (matriz para proliferacigeno (matriz para proliferacióón n

de fibroblastos) de fibroblastos)

αα22-- antiplasminaantiplasmina

fibrinógeno fibrinafibrina

Fibrina insolubleFibrina insolubleXIIIaXIIIa

VIA INTRINSECAXIIaHMKPK

XI XIa

VIA EXTRINSECA

IX IXaVIIIaPL Ca 2+

X

Xa

VIIaFTPL Ca 2+

XVaPL Ca 2+

II IIa

IIHEMAIIHEMA

E

D

E E E

D D D D D DE

D D

E

D DD D

trombina

2FpA + 2FpBD

A AB B

E

D D

FIBRINOGENO

E

D DE

D D

MONOMERO DE FIBRINA

DIMERO DE FIBRINA

F XIIIa

POLIMERO DE FIBRINA IIHEMAIIHEMA

Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas

•• Diátesis hemorrágicas tardías:Diátesis hemorrágicas tardías:

-- caída del cordón umbilicalcaída del cordón umbilical

-- traumas o cirugíastraumas o cirugías

-- hemorragias intracraneales hemorragias intracraneales

(SNC, ¼ pacientes deficitarios)(SNC, ¼ pacientes deficitarios)

•• Cicatrización tardía y anómala de heridasCicatrización tardía y anómala de heridas

•• Abortos espontáneos y recurrentes Abortos espontáneos y recurrentes

IIHEMAIIHEMA

PruebaPrueba de de solubilidadsolubilidad

¿¿CCóómomo evaluarevaluar la la deficienciadeficiencia de FXIIIde FXIII??

Urea oUrea oAc.AcAc.Acééticotico

CaCa2+2+ o o IIaIIa

plasmaplasma

¿¿SensibilidadSensibilidad??

IIHEMAIIHEMA

SOLUBILIDADPlasmas deficientes (artificiales)Plasmas deficientes (artificiales)

0

50100

150

200250

300

1% NP 5% NP 10% NP

IIa/Aa

Ca/Aa

Ca/Urea

3000

2000

1000

500

Tiempo (min)

Concentración de plasma (%)

IIHEMAIIHEMA

PRUEBA DE PRUEBA DE SOLUBILIDAD DEL SOLUBILIDAD DEL

COAGULOCOAGULO

Trombina/Ac.AcTrombina/Ac.Acééticotico

mayor mayor sensibilidadsensibilidadtiempostiempos mmáás s cortoscortos

EQAS, 2003EQAS, 2003

IIHEMAIIHEMA

Prueba de solubilidad en urea 5MPrueba de solubilidad en urea 5M

• 200 µl de PPP• 100 µl buffer Owren• 200 µl Cl2Ca

30 minutos a 37º C

3 ml de urea 5 M

Valor normal: insoluble > 24 horas IIHEMAIIHEMA

Solubilidad en TrombinaSolubilidad en Trombina--AcéticoAcético

•• 200200µµl fisiológica l fisiológica •• 200 200 µµl plasma l plasma •• 100 100 µµl trombina (30UI/ml)l trombina (30UI/ml)

30min 3730min 37

3ml 3ml AcAc. Acético al 2%. Acético al 2%

IIHEMAIIHEMA

Laboratorio (Cuantificación)Laboratorio (Cuantificación)

•• Inmunoelectroforesis específica Inmunoelectroforesis específica ((LaurellLaurell) para subunidades A y B.) para subunidades A y B.

•• Elisa para subunidades A y B.Elisa para subunidades A y B.

IIHEMAIIHEMA

Sistema Sistema FibrinolíticoFibrinolítico

BioqBioq. Luis Bastos. Luis BastosDpto. Hemostasia y TrombosisDpto. Hemostasia y Trombosis

IIHEMA IIHEMA Academia Nacional de MedicinaAcademia Nacional de Medicina

Sistema FibrinolíticoSistema Fibrinolítico

Plasminógeno PAIPAI

Plasmina

α2 - Antiplasmina

u-PA/u-PARt-PA

FibrinaFibrina PDFIIHEMAIIHEMA

Sistema FibrinolíticoSistema Fibrinolítico

TestGlobales

PAI

α2 -PI

•Lisis de Euglobulinas

•Lisis en Sangre Entera

Inhibidores

•PDF/f.

•D-Dímero

Marcadores de Fibrinolisis

• Plasminógeno

• t-PA

Sustrato y activador

IIHEMAIIHEMA

Evaluación Fibrinolítica

Método funcional Dosaje de plasminógeno cromogénico

Electroinmunoensayo

Método funcional Dosaje de α2-antiplasmina cromogénico

Electroinmunoensayo

Lisis de Euglobulinas

Método funcional Dosaje de plasminógeno cromogénico

Electroinmunoensayo

Método funcional Dosaje de α2-antiplasmina cromogénico

Electroinmunoensayo

Lisis de EuglobulinasIIHEMAIIHEMA

Pre y post Lisis de Euglobulinas isquemia por

oclusión venosa

TPA Método funcional PAI cromogénico

Dímero D Aglutinación PDF en látex

IIHEMAIIHEMA

Evaluación Fibrinolítica

Puntos a tener en cuenta:Puntos a tener en cuenta:•• Reposo previoReposo previo : :

-- 20 minutos (el estrés y ejercicio 20 minutos (el estrés y ejercicio

la liberación endotelial de la liberación endotelial de tPAtPA))

•• Ayuno previo:Ayuno previo:

-- Cafeína: la actividad Cafeína: la actividad

fibrinolítica.fibrinolítica.

-- Carbohidratos ricos en calorías: Carbohidratos ricos en calorías:

la actividad del PAIla actividad del PAI--11IIHEMAIIHEMA

Puntos a tener en cuenta:Puntos a tener en cuenta:

•• EvitarEvitar ::

-- AlcoholAlcohol: : la actividad fibrinolíticala actividad fibrinolítica

por la liberación delpor la liberación del

PAIPAI--11

-- Tabaco: el antígeno del Tabaco: el antígeno del tPAtPA

IIHEMAIIHEMA

0

5

10

15

9 12 15 18 21 24 3 6 9

Hora

PAI B

ioló

gico

(UI/m

l)

RITMORITMOCIRCADIANOCIRCADIANO

NormalesNormales

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

9 12 15 18 21 24 3 6 9

Hora

tPA

Bio

lógi

co (U

I/ml)

0

2

4

6

8

9 12 15 18 21 24 3 6 9

Hora

tPA

inm

unol

ógic

o (n

g/m

l)

AE AE WallnöferWallnöfer etet al, 1993al, 1993IIHEMAIIHEMA

Lisis del coáguloLisis del coágulo

•• Evalúa globalmente la actividad Evalúa globalmente la actividad fibrinolíticafibrinolítica

•• Afectada por los niveles de Afectada por los niveles de PlgPlg//PlmPlm, , fibrinógeno, activadores e inhibidores de fibrinógeno, activadores e inhibidores de la fibrinolisis (la fibrinolisis (αα22--PI)PI)

IIHEMAIIHEMA

Lisis del coáguloLisis del coágulo

•• Sangre recién extraída en tubo de vidrio Sangre recién extraída en tubo de vidrio limpio y seco.limpio y seco.

•• Baño a 37Baño a 37ºCºC, tomar la hora cuando , tomar la hora cuando coagula.coagula.

•• Tomar el tiempo de lisis completa del Tomar el tiempo de lisis completa del coágulocoágulo

IIHEMAIIHEMA

Lisis de Lisis de EuglobulinasEuglobulinas

•• Precipitación de fracción proteica Precipitación de fracción proteica (“Euglobulinas”) en medio ácido(“Euglobulinas”) en medio ácido

Activadores del Activadores del

Plasminógeno Plasminógeno

PAI

FibrinógenoFibrinógeno

PlgPlg

Plasmina PAIPlasmina

SobrenadanteSobrenadante::-- Inhibidores de la Plasmina (Inhibidores de la Plasmina (αα22--PI)PI)

IIHEMAIIHEMA

Lisis de Lisis de euglobulinaseuglobulinas

• 250 µl PPP* • 4 ml agua destilada • 70µl ácido acético (1%)

30 min. en heladera 4-8ºC

• Centrifugar a 1000 rpm, 5 min

(*) PPP obtenido de sangre anticoagulada (9:1) con citrato ácido de sodio. IIHEMAIIHEMA

Lisis de Lisis de euglobulinaseuglobulinas

• Descartar el sobrenadante

• 250µl de borato de sodio

• 250µl de CaCl2 0,025M

IIHEMAIIHEMA

FIBRINOLIFIBRINOLISISSIS

Respuesta a la isquemiaRespuesta a la isquemia

• Muestra basal (pre)

• Muestra luego de 10 min. de compresión(post)

• Esfingomanómetro: presión media entre la mínima y la máxima (del paciente)

IIHEMAIIHEMA

Respuesta a la isquemia• Tanto la muestra basal como la post oclusión

se deben recoger en tubos con citrato ácido y mantener refrigeradas

• Índice post/pre:

< 0,70 buena respuesta

0,70-0,75 pobre respuesta

> 0,75 mala respuesta

IIHEMAIIHEMA