informe#2

UNIVERSIDAD EL BOSQUE

Química Ambiental

PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 2 (Reconocimiento de biomoléculas)

Fecha de Realización:

Camilo Andrés Beltrán Garzón

Jaime Andrés Castañeda Gantiva

María Camila Herrera

Andrea Rodríguez Cañas

1. Objetivos

Conocer las pruebas que se deben realizar para el reconocimiento de diferentes compuestos. Identificar los distintos conceptos que se manejan en la práctica, como lo son las

biomoléculas y las funciones que tienen cada una. Reconocer las características iniciales y finales de los reactivos para la identificación de

biomoléculas. Reconocer análisis químicos que se pueden presentar en las pruebas cualitativas.

2. Resumen

Durante la práctica se hizo un reconocimiento de los diferentes instrumentos de laboratorio que se utilizarían, luego de esto se realizaron seis diferentes pruebas para el reconocimiento de polisacáridos, azucares reductores, proteínas, lípidos y sales inorgánicas; en los que se prepararon extractos de algunas muestras a partir de la centrifugación y se tomaron los datos a partir de la muestra que se tenía, el color inicial y el color final luego de generar las reacciones con los respectivos reactivos, también se tomaron registros fotográficos y se realizó la clasificación de los compuestos según la biomolécula que fue identificada en cada uno de ellos.

3. Palabras claves: Biomoléculas, proteínas, extractos, lípidos, aminoácidos, carbohidratos

4. Tabla de datos

Muestra Biomolécula Aceite Lípido

Gaseosa CarbohidratosLeche entera Grasas – Carbohidrato

Leche deslactosada Proteína – Carbohidrato Hígado Proteína – lípidos Papa Proteína – Carbohidrato

Glucosa Carbohidratos – azúcar reductor

5. Muestra de cálculos

a. RECONOCIMIENTO DE AZUCARES REDUCTORES

Prueba reactivo de Fehling CuSO4+C6H 1206 NaOH Cu(OH )2∆Cu2O(Rojo ladrillo)

b. RECONOCIMIENTO DE POLISACARIDOS

Reactivo Lugo

I 2+ IK +(amilosa+amilopectina ) reacción física :cambia su¿azul

I 2+ IK +glucogenoreacción física :cambiasu ¿ rojocaoba

c. RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS

Reacción con Xantoproteinas

HNO3+C6H 6∆C6H 5N 3O5(amarillo )

Reacción debido a la presencia de Benceno en aminoácidos (tirosina, fenilalanina y triptofano)

Ensayo de Millon

C6H 6O+Hg (N O2 )2∆Compuestos (rosado )+HNO3

Reacción de condensación de los compuestos mercúricos en medio nitrificado con el Fenol presente en el aminoácido Tirosina.

d. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

Reactivo Sudán III

Sudan III+acígliceridosmezcla(rojo−naranja)

Sudán III es un colorante lipófilo (soluble en grasas). Por esa afinidad a los ácidos grasos hace que la mezcla de éstos con el colorante se ponga de color rojo. (Universidad Nacional Autónoma de México , 2011)

e. RECONOCIMIENTO DE SALES INORGÁNICAS

CaCl2+NaOH+H2CO3CaO3( precipitadoblanco)

6. Resultados

Tabla N°1 Reconocimiento de polisacáridos

Muestra Coloración original Coloración finalAceite Amarrillo claro Amarillo transparente

Gaseosa Naranja Rojo Leche entera Blanco Blanco amarillento

Leche deslactosada Blanco BlancoAgua Incoloro Naranja translucido

Hígado Naranja Transparente con residuos Papa Amarillo Amarillo con dos fases

Glucosa Incoloro Rojo

Tabla N°2 Reconocimiento de azucares reductores

Muestra Coloración original Coloración finalAceite Amarillo claro Tres fases: Transparente,

verde oscuro, azul. Gaseosa Naranja Café claro

Leche entera Blanco MarrónLeche deslactosada Blanco Amarillo quemado y marrón

Agua Incoloro AzulHígado Naranja ladrillo Naranja ladrilloPapa Amarillo Verde

Glucosa incoloro Café oscuro

Tabla N°3 Reconocimiento de proteínas (Ensayo de xantoproteínas)

Muestra Coloración original Coloración finalAceite Amarillo claro Naranja

Gaseosa Naranja Amarillo transparenteLeche entera Blanco Amarillo en dos fases

Leche deslactosada Blanco Amarillo en dos fasesAgua Incoloro Transparente

Hígado Naranja ladrillo Amarillo en dos fasesPapa Amarillo Amarillos con residuos

Glucosa incoloro Transparente

Tabla N°4 Reconocimiento de proteínas con anillo aromático (Ensayo de Millon)

Muestra Coloración original Coloración finalAceite Amarillo claro Naranja

Gaseosa Naranja AmarilloLeche entera Blanco Dos fases: rosado y

transparenteLeche deslactosada Blanco Dos fases: rosado y

transparenteAgua Incoloro Incoloro

Hígado Naranja ladrillo Rosado en dos fases con residuos

Papa Amarillo Residuo amarilloGlucosa incoloro Incoloro

Tabla N°5 Reconocimiento de lípidos

Muestra Coloración original Coloración finalAceite Amarillo claro Naranja palidoAgua Incoloro Traslucido

Hígado Naranja ladrillo Naranja guayabaGaseosa Naranja Naranja

Tabla N°6 Reconocimiento de sales inorgánicas

Muestra Coloración original Coloración finalAgua Incoloro Lila – precipitado

Gaseosa Naranja Morado claro – precipitado blanco

Carbonato de sodio Blanco Lila - precipitado

7. Análisis de resultados

En el reconocimiento de azucares reductores se obtuvo como positivas las muestras de gaseosa, leche entera, deslactosada y glucosa, la gaseosa posee azúcar de mesa añadida (sacarosa) compuesta por glucosa y fructosa que al estar en forma líquida mediante hidrolisis rompe sus enlaces en sus monómeros más simples, mientras que la leche se conforma de lactosa, que al romperse produce glucosa y galactosa. Al ser monómeros tienen un enlace OH libre lo que permite que sirvan como reductores para otras sustancias. Gracias a que poseen su grupo carbonilo interactúan con proteínas para formar otros compuestos como las bases de schiff.

En la prueba de lugol para identificar polisacáridos dio como resultado positivo la papa y la leche entera, la papa está compuesta de almidón es un polisacárido compuesto principalmente de amilosa y a milopectina, pero al no tener sus grupos carbonilo libres no actúa como azúcar reductor, la solución yodada sumada al calor permite que el yodo se ligue a la biomolecula tiñéndolo.

Se obtuvo como positivo, en la prueba de reconocimiento de proteínas la leche deslactosada y entera y el extracto de hígado debido a sus componentes proteicos, la leche contiene varios tipos de proteínas entre ellos caseínas alfas, betas y k, dichas proteínas se componen de 169 a 207 aminoácidos, entre ellos metionina, fenilalanina, cisteína, prolina, treonina y serina, para esta prueba el componente a reaccionar fue la fenilalanina, este compuesto tiene la habilidad de degradarse a otros aminoácidos no esenciales como la tirosina, que al poseer anillos aromáticos junto con el ácido nítrico y en presencia de calor forman compuesto aromático nitrado de color amarillo, dichas proteínas se presentan en una concentración de 28g/L aproximadamente. Mientras que en el hígado Las proteínas de este están formadas por aminoácidos como ácido aspártico, ácido glutámico, alanina, arginina, cistina, fenilalanina, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina, triptofano y valina. En una concentración de 20g por cada 100. así mismo dichos alimentos también reaccionaron al reactivo de millón produciéndose una coloración rosada.

En la prueba del sudan se reconocieron lípidos, dando positivo tanto en el hígado como el aceite con una coloración naranja, el sudan es un líquido apolar y su solubilidad por ende es mejor en sustancias de este tipo. Al realizar la prueba el aceite se mezcló con el colorante, los aceites vegetales están compuestos una mezcla de 95% de triglicéridos y 5% de ácidos grasos libres, de esteroles, ceras y otros componentes minoritarios. Los triglicéridos son triesteres formados por la reacción de ácidos grasos sobre las tres funciones como alcohol del glicerol. Mientras que el hígado a pesar de ser mayormente glucógeno y proteínas, posee grasas (6.40 g por cada 100g). a diferencia de la prueba anterior, no existe una reacción química entre las sustancias y el colorante, simplemente el sudan se disuelve generando la coloración.

Para la prueba de reconocimiento de sales inorgánicas se obtuvieron resultados positivos en la muestra de gaseosa comercial debido a la presencia de agua carbonatada (ácido carbónico) con la cual se fabrica la gaseosa comercial, esta reacciona con el cloruro de calcio formando carbonato de calcio sólido de color blanco que se precipita.

8. Conclusiones

Identificar la presencia de biomoléculas en una muestra por medio del uso de pruebas cualitativas ofrece resultados de los cuales se puede deducir el origen de las muestras analizadas.

El uso de reactivos para la identificación de biomoléculas es un método rápido y moderadamente complejo que puede ser usado en cualquier tipo de muestras.

Se puede inferir de la identificación de biomoléculas por medio de pruebas cualitativas la presencia de la biomolécula predominante en una muestra.

Los resultados de la identificación de biomoléculas por medio de pruebas cualitativas pueden ser desviados debido a la presencia de diversidad de biomoléculas (así sea en pequeñas concentraciones) en las diferentes muestras.

Los resultados de la identificación de biomoléculas por medio de pruebas cualitativas que no concuerdan con la literatura pudieron haber sido influenciados por errores de tipo humano (como el manejo e higiene de los materiales).

Para la identificación de biomoléculas por medio de pruebas cualitativas en muestras sólidas (como el hígado) es necesario realizar una centrifugación de la sustancia.

9. Bibliografía

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Calvo(s.f) “caseínas” descargado el 20 de febrero de 2015 disponible en

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http://www.livestrong.com/article/261677-list-of-foods-high-in-tyrosine/

Alimentosconproteina.org (2014) “proteínas de la leche” descargado el 20 de febrero de 2015

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Funiber.org(2014) hígado de res crudo” descargado el 20 de febrero de 2015 disponible en

http://composicionnutricional.com/alimentos/RES-HIGADO-CRUDO-5

Universidad Autónoma Metropolitana. (2013). Identificación de Compuestos Bioquímicos. México D.F .

Universidad Nacional Autónoma de México . (2011). PRÁCTICA 1. RECONOCIMIENTO DE BIOMOLÉCULAS. México D.F .

ANEXOS

Reconocimiento de Polisacáridos Reconocimiento de Azúcares Reductores

Reconocimiento de gases inorgánicas Reconocimiento de Proteinas