hbv t%c3%a9cnicos

BANCO DE SANGRECaracterísticas de los agentes patógenos

• PRESENCIA EN SANGRE

• ESTADO DE PORTADOR CRÓNICO ASINTÓMATICO

• ALTA PREVALENCIA EN LA POBLACIÓN

• VIABILIDAD DEL AGENTE EN LAS CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO DE LA SANGRE

BANCO DE SANGREElección de nuevos agentes patógenos

• Prevalencia del agente en la población• Infectividad del agente• Estado de portador crónico asintomático• Prueba de tamizaje confiable• Pruebas confirmatorias• Relación costo/beneficio

AGENTES PATÓGENOS DE IMPORTANCIA TRANSFUSIONAL

• PARASITOS: Tripanosoma cruzi

• BACTERIAS: Brucellas, Treponema pallidum

• VIRUS: HBV,HCV,HIV,HTLVI/II

NORMAS DE LA AAHI

DE REALIZACIÓN OBLIGATORIA EN TODOS LOS DADORES

anti-Tripanosoma cruzi (2 determinaciones)

anti-Treponema pallidumanti-Brucellas

NORMAS DE LA AAHI

DE REALIZACIÓN OBLIGATORIA EN TODOS LOS DADORES

anti-HIVHIV AgHBsAg

anti-HBcAnti-HCV

anti-HTLV I/II

Hacia la seguridad transfusional

• Selección y tamizaje del donante de sangre– Interrogatorio más

exahustivo– Tamizaje de ATT

• Nuevas generaciones de reactivos

• Incorporación de antigenemia

• Detección de nuevos Agentes (WNV, CJD)

– ¿Diagnóstico?

• Inactivación de hemocomponentes:– Plasma: Solvente

Detergente, etc.– Universal: Psoralenos

+ UV.

Nuevos conceptos en la detección de donantes portadores

• Detección de Portadores Crónicos Asintomáticos– Serología florida

– Anticuerpos de clase IgG de alto título

– Concepto de sensibilidad poblacional: Detección de infectados verdaderos (confirmados)

• Detección de Infectados Recientes– Asintomáticos o con clínica indefinida

– Serología incompletamente desarrollada.

– Agente infeccioso en sangre, anticuerpos de clase IgM que pasarán a IgG

– Concepto de sensibilidad en función del período de ventana

Detección de infectados recientes: Concepto de período de ventana

Período de Ventana: Es el tiempo transcurrido desde la inoculación de un agente infeccioso hasta su detección por los métodos disponibles:

• Detección de anticuerpos– Métodos menos sensibles (Ej. ELISA 1.0)– Métodos más sensibles (Ej. ELISA 3.0)

• Detección directa del agente infeccioso– Metología menos sensible (Ej. ELISA)

• Métodos menos sensibles (Ej. ELISAs antiguos para HBsAg)• Métodos más sensibles (Ej. ELISAs modernos para HBsAg)

– Metodología más sensible (Ej NAT)• Estrategias menos sensibles (Ej NAT en pools)• Estrategias más sensibles (Ej. ID-NAT)

Hepatitis B – Rasgos

Clínicos Hepatitis B – Rasgos

Clínicos • Período de incubación: Promedio 60-90 días

Rango 45-180 días• Enfermedad clínica (ictericia): <5 años: <10%

5 años: 30%-50%

• Relación de fatalidad/caso: 0.5%-1%• Infección crónica: <5 años, 30%-90%

5 años, 2%-10% • Mortalidad prematura a partir de la enfermedad

crónica hepática: 15%-25%

Clinical Features of HBV InfectionClinical Features of HBV Infection

Incubation periodIncubation period Average 8-12 Average 8-12 weeksweeks

Range 6-26 Range 6-26 weeksweeks

Acute illness (jaundice)Acute illness (jaundice) 10% <5 yrs old10% <5 yrs old30%-50% 30%-50% >>5 yrs 5 yrs

oldold

Case fatality rateCase fatality rate 0.5%-1%0.5%-1%

Chronic infectionChronic infection 30%-90% <5 yrs 30%-90% <5 yrs oldold

2%-6% 2%-6% >>5 yrs 5 yrs oldold

Chronic hepatitisChronic hepatitis 66%66%

Premature mortality from CLDPremature mortality from CLD 15%-25%15%-25%

Hepatitis B Virus Infections, U.S.Hepatitis B Virus Infections, U.S.

Newly acquired infections 73,000

Acute cases 21,000Deaths from acute liver failure 290Chronic infections 4,400

Persons ever infected (1990) 4.9%

Persons with chronic infection 1.25 million

HBV-related chronic liver disease 4% - 14%

Deaths from chronic disease/year 3,000-5000

Modes of HBV Transmission

• Percutaneous– Injecting drug use– Occupational, household (needle stick, non-intact

skin)– Therapeutic (contaminated equip, unsafe injections)– Transfusions and transplants from infectious donors

• Permucosal– Sex with infected partner– Birth to infected mother (perinatal)– Household (exposure to infected contact)

Exposure to Blood or Body Fluids Containing Blood

Source: Sentinel Counties

Reported Risk Factors for Acute Hepatitis BUnited States 2000-2003

Heterosexual 39%

MSM 26% Injecting drug use 17%

None identified 14%

Other 4%*

* Other - Household contact, occupational exposure, hemodialysis, institutionalization, transfusion

Source: Adapted from Sentinel Counties and NNDSS, CDC

Hepatitis B Aguda: Perfil Serológico Hepatitis B Aguda: Perfil Serológico In

cub

ació

n Síntomas

HBeAg

HBsAg

TiempoCon

cent

raci

ón R

elat

iva

Fase Aguda2-12 semanas

4-12

sem

anas

Infección Aguda Reciente(2-6) semanas

Anti-HBc IgM

Anti-HBc total

Anti-HBe

Ventana

RecuperaciónAños

Anti-HBs

Acute HBV Infection with Recovery

Weeks after Exposure

Rel

ativ

e C

once

ntr

atio

n

Symptoms

HBeAg anti-HBe

Total anti-HBc

IgM anti-HBc anti-HBsHBsAg

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100

Limit of Detection

HBV DNA

HBsAg

Progression to Chronic HBV InfectionProgression to Chronic HBV Infection

Weeks after Exposure

Rel

ativ

e C

once

ntra

tion

of R

eact

ants

IgM Anti-HBc

Total Anti-HBc

HBsAg

Acute(6 months)

HBeAgHBeAg

Chronic(Years)

Anti-HBeAnti-HBe

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Years

HBV DNAHBV DNA

Limit of Detection

Interpretation of HBV Serologic Tests

HBV DNA HBsAg Anti-HBc Anti-HBs Interpretation

- - - - Susceptible

+ - - - Early acute, pre-SC

+ + - - Early acute infection

+ + + - Acute or chronic

- - + + Recovered/immune

+ + + - Chronic infection

Interpretation of HBV Serologic Tests

HBV DNA HBsAg Anti-HBc Anti-HBs Interpretation

+/- - + - Resolving infection, past infection,

"low- level" chronic infection

- - - + Immune (>10 mIU/mL)

- + - - Transient (<21 days) during vaccination

Marcadores de infección por HBV

•Período de ventana de antígenos cercana al NAT

•Baja viremia durante el período de ventana (2000 Cp/ml)

•Baja velocidad de duplicación exponencial (2-4 días)

Pruebas de tamizaje y suplementarias

Las pruebas de tamizaje son utilizadas

• En : Población con serología desconocida

• Para :– Orientación diagnóstica

(sospecha clínica)

– Estudios de prevalencia poblacional (alto y bajo riesgo)

– Descarte de unidades infectadas

Las pruebas suplementarias son utilizadas

• En: Población con pruebas de tamizaje positivas

• Para:– Distinguir entre positivos

falsos y verdaderos

– Diagnóstico del donante seropositivo

– Decisión sobre donaciones futuras

Características de las pruebas

• TAMIZAJE:• Son simples, rápidas, baratas,adaptables a

volúmenes grandes y ampliamente automatizables

• Alta sensibilidad (baja proporción de resultados falso negativos)

• Menor especificidad (mayor proporción de resultados falso positivos)

Características de las pruebas

• SUPLEMENTARIAS:

• Pruebas complejas y caras

• Algunas ya están automatizadas

• Alta especificidad

• Menor sensibilidad

Pruebas suplementarias

• Neutralización de antígeno por anticuerpo especifico: ( HBsAg, p24Ag, HCV CoreAg)

• Western blot (HIV, HTLV)

• RIBA/LIA (HCV, HIV,HTLV)

• Inmunofluorescencia (Sífilis, HIV, Chagas)

• Biología molecular (PCR, NASBA)

Detección de HBsAgDetección de HBsAg

TÉCNICA SENSIBILIDAD

Inmunodifusión (ID) >5000 ng/ml

Contrainmunoelectroforesis (CIE) >1000 ng/ml

Aglutinación (AG ) 100-500 ng/ml

Hemaglutinación rev. pasiva (HARP)

20-50 ng/ml

Enzimoinmunoensayo (ELISA)1-3 ng/ml (0.10-

0.50)

Radioinmunoensayo (RIA) 0.1-1 ng/ml