determinación de pka_s de fármacos por uv-vis viernes 25
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DETERMINACIÓN DE PKA DE FÁRMACOS MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRÍA UV
Un método indirecto para poder identificar la constante de acidez mediante las absorbancias de un compuesto en forma disociada y no disociada, a una concentración conocida para así poder integrar la Ley de Beer Lambert a la ecuación de Henderson Hasselblach
FUNDAMENTO
Los métodos espectroscópicos de absorción emplean la absorción de radiación electromagnética que presenta una molécula a una frecuencia característica correspondiente a la energía de transición existente entre diferentes niveles de energía electrónica.
La espectroscopia de ultravioleta consiste en la observación de la absorción de radiación electromagnética en las regiones del visible y el ultravioleta del espectro.
La absorbancia A está descrita por la ley de Lambert-Beer.
¿CÓMO SE LLEVA A CABO ESTE MÉTODO?
En este método se miden las absobancias de varias soluciones en donde el analito este en su forma ionizada y no ionizada y una donde exista un equilibrio entre ambas. Deben ser cercanos al pKa o dos unidades por encima y por debajo de este.
O
OH
Br
O
O
Br
O
OHBr
O
OBr
273nm 326nm
299nm
¿QUÉ HERRAMIENTAS SON NECESARIAS?
LEY DE ADITIVIDAD PARA ABSORBANCIAS.
Cuando existen más de un componente que absorbe radiación, se asume que las especies actúan independientes unas de otras y que sus absorbancias son aditivas.
O
OH
Br
O
O
Br
O
OHBr
O
OBr
273nm 326nm
299nm
CONSTANTE DE EQUILIBRIO
Esta ionización genera una constante de equilibrio:
¿CÓMO SE CONJUNTAN?
Otro método para la determinación de las constantes de acidez en solución acuosa, mediante la técnica de espectrofotometría UV/Vis utilizando el programa computacional SQUAD.
EQUIPO
Espectrofotómetro
Potenciómetro
Buffer
¿QUÉ CARACTERÍSTICAS DEBE TENER EL FÁRMACO A ANALIZAR?
Debe ser soluble en agua.
Debe ser ionizable (ácidos y base débiles)
Deben ser estables a pH’s ácidos y básicos (pruebas de estabilidad
La ionización debe de ser en el grupo cromóforo o en grupo auxocrónomos para poder ser detectado en el UV
Su debe cambiar por lo menos 20 nm aproximadamente en la longitud de onda para cada especie ionizada para el tratamiento de los datos (algebraico o por SQUAD)
ALGUNAS APLICACIONES QUE SE HAN REPORTADO
EJEMPLO:
Determinar el pka de la mercaptopurina, en disolución acuosa, la absorbancia de esta disolución de concentracion 5µg/mL a 323 nm. Medio acido 0.1M con una absorbancia de 0.550, medio 0.1m NaOH es de 0.020 y en disolucion tampon pH=8 de 0.196.
CALCITROL
Fácilmente soluble en etanolSoluble en éter dietílico y ácidos grasosCasi insoluble en agua= 265 nm
METIL PARABENO
GRACIAS POR SU ATENCIÓN
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