cromatografía de partición

Cromatografía de partición

• María del Rocío Bautista Paredes• Dante Estrada Castro• Sabine Schauer Cué • Cecilia Silva Magaña

1941

Iniciaron el uso de la cromatografía de reparto o

partición.

1952

Recibieron el premio nobel de química por el desarrollo

de la cromatografía de partición.

¡Un poco de historia!

¿Que es?

Se caracteriza por una FASE ESTACIONARIA líquida anclada en un SOPORTE SOLIDO y una FASE LÍQUIDA MOVIL.

Ambas fases son inmiscibles.

Columnas de tipo liquido-liquido

Los líquidos se mantenían en su lugar mediante

adsorción liquida.

Columnas de Fase Liquida Unida

Los líquidos están ligados n enlace por un enlace tipo

iónico.

Provocando rellenos muy estables e insolubles en la

fase móvil.

El soporte solido por lo general es gel de sílice.

• Solidos formados por partículas mecánicamente resistentes, porosas y uniformes con diámetros de 3 a 5 µm.

• La fase de sílice totalmente hidrolizada (por calentamiento con HCl 0.1 M durante 1 o 2 días) esta constituida por grupos silanol químicamente reactivos.

• Los grupos silanol se transforman con organoclorosilanos en grupo siloxanos , lo que proporciona una fase liquida estacionaria técnicamente estable y difícil de hidrolizar en condiciones normales.

Un componente de la mezcla se va desplazando por la columna

depende de su

FASE ESTACIONARIA (F.E.)

Soluble

Lento

FASE ESTACIONARIA (F.E.)

Puede modificarse en función de lo que esté unido a la

superficie de sílice (éteres, nitrilos, aminas alifáticas).

En función

Fase normal

Fase inversa

Permite disponer de F.E. selectivas.

• Cromatografía en fase normal.

La F.E. está constituida por un líquido de carácter POLAR (trietilenglicol, agua).

Como FASE MÓVIL (F.M.) se emplean disolventes relativamente no polares (hexano, éter isoproílico).

Mezcla polar/no polar

El componente menos polar es el primero que se detecta.

Soluble F.E.

Tiempo de eluciónSe utiliza para la separación

de compuestos muy polares .

• Cromatografía en fase inversa. La F.E. está constituida por un líquido de carácter NO

POLAR (usualmente hidrocarburo).

Como F.M. se emplean mezclas de agua con disolventes polares miscibles, como metanol o acetonitrilo .

El componente más polar es el primero que se detecta.

Soluble F.E.

Tiempo de elución

Se emplea para la separación de mezclas de compuestos de polaridad baja.

• La mayor parte de las separaciones por cromatogarfía de líquidos se realizan en esta fase.

• Empaquetado: Octil u octodecilsiloxano

• Fase Móvil: Disolución acuosa con contenido variable de un disolvente (metanol, acetonitrilo o tetrahidrofurano)

C8 H17- / C18 H37-

FASE NORMAL FASE INVERSA

F. E. POLAR F. E. NO POLAR

F.M. NO POLAR F. M. POLAR

Elución: Menos polar 1° Elución: Más polar 1°

Separación de comp. POLARES Separación de comp. NO POLARES

Stock, R. Chromatographic Methods, Chapman and Hall and Science Paperbacks, 1974 p.p. 42

Establecimiento del Método

• Acetonitrilo• Hexano• Dioxano

Cuando la fase móvil es líquida, los componentes de la muestra interaccionan

con la fase móvil y la estacionaria; por ejemplo:

Polaridad ascendente grupos funcionales

Hidrocarburos

La polaridad de la fase estacionaria apenas se debe parecer a la de los analitos y para la elución se utiliza entonces una fase móvil

considerablemente distinta

La fuerza del solvente depende de la naturaleza del analito y de la fase estacionaria (por lo

regular polares

Índice de Polaridad de Snyder

Índice de polaridades es una mezcla de solventes de A y B

Donde y son los indices de polaridad de los dos solventes y y son las fracciones en volumen de cada uno de los solventes A y B

APLICACIONES DE LA

CROMATOGRAFÍA DE REPARTO

Fármacos

Bioquímica

Productos alimenticios

Productos de industria química

Propulsores

Contaminantes

Ciencias forenses

Química clínica