alcázar biopsia renal - aehr.es · objetivos • conocer el procesamiento rutinario de muestras...

INTRODUCCIÓN A LA BIOPSIA RENAL

Lucía M. González LópezServicio Anatomía

PatológicaHospital General Universitario Ciudad Real

1

Objetivos• Conocer el procesamiento rutinario de

muestras renales en AP: MO, IFD, ME• Evaluación histológica de la biopsia renal:

-Identificar compartimentos del riñón-Reconocer patrones de lesión glomerular y términos histológicos-Reconocer patrones de IFD

2

Procesamiento rutinario de la biopsia renal

3

1. Envío de la muestra2. Manejo en AP3. Muestra en congelación4. Muestra en parafina

Envío a AP

• Manipular con mucho cuidado, evitando comprimirlo o fragmentarlo

• Enviar en fresco lo antes posible• Poner el cilindro sobre papel filtro, u otro papel que no se

deshaga (no papel higiénico ni toallas absorbentes), y luego envolver este papel con la muestra en gasa empapada abundantemente en solución salina: la muestra no se debe dejar secar.

• Si la muestra tardará más de 30 minutos en llegar al laboratorio : refrigerar poniendo el recipiente con la biopsia en otro con cubos de hielo/nieve carbónica

Nunca poner la muestra en el congelador.4

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

5

Papel de filtro/gasa/suero salino

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

Caja con hielo seco/nieve carbónica

6

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

Manejo en AP

• Microscopio de disección : Seleccionar tejido con glomérulos para I.F.D. , M.E. y M.O.

• La médula muestra estructuras paralelas que corresponden a los conductos colectores y a los vasos rectos.

• La corteza contiene glomérulos visibles como pequeños acúmulos de capilares o como puntos gruesos rojos.

• En casos de extensa destrucción glomerular o semilunas difusas y circunferenciales puede ser más difícil identificarlos.

7

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

8

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

Manejo en AP-congelación

• Para IFD :Fragmento con varios glomérulos(no uno sólo). Congelación rápida y cortes en criostato Antisueros: IgG, IgA, IgM, albúmina, C3, C4, C1q, Kappa, lambda y fibrinógeno.

• Para ME dos pequeños fragmentos, de 1 - 2 mm, con glomérulos. Glutaraldehído. En casos necesarios, el tejido incluido en parafina puede recuperarse para ME, pero la calidad de las imágenes disminuye marcadamente

• El tejido restante se procesa para inclusión en parafina y cortes para microscopio óptico.

9

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

10

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

Manejo en AP-Parafina

• Cortes (2 - 3 micras de espesor) teñidos con :-H-E. Núcleos azules(basófilos) .Citoplasma rosa(eosinófilo)-PAS: Colágeno IV-Plata-metenamina : Colágeno IV-Tricrómico de Masson: Colágeno I-Rojo congo .9 micras. Amiloide

11

Procesamiento rutinario de las biopsias renales

Evaluación histológica de la biopsia renal

12

1. Número glomérulos2. Compartimentos del riñón3. Glomérulos: Estructura histológica, composición,

evaluación, patrones histológicos y términos.4. Túbulos5. Intersticio6. Vasos7. Patrones de IFD

Evaluación histológica de la biopsia renal. Número glomérulos

• La correlación entre los hallazgos histológicos y clínicos es de gran importancia para llegar a un diagnóstico definitivo. No se debe nunca hacer un diagnóstico final sin la información clínica relevante en cada caso

• El diagnóstico en patología renal depende en gran parte de la cantidad de tejido adecuado para diagnóstico.

• Número glomérulos necesarios: según patología.-Lesiones difusas 1 puede ser diagnóstico.-Más de 10/12 glomérulos.

13

Compartimentos del riñón

1.Glomérulos2.Intersticio3.Vasos4.Túbulos

14

¿Cuál es el más afectado?EVALUACIÓN

SISTEMÁTICA DE LOS 4

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulos: estructura

15

Evaluación histológica de la biopsia renal

Estructura formada por el penacho, el espacio y la cápsula de Bowman.

• El penacho está formado por lóbulos de capilares.

• La arteriola aferente da origen a 4 - 8 capilares, cada uno de los cuales se subdivide para formar un lóbulo.

• En cada lóbulo hay varias áreas mesangiales

• Área mesangial: Porción del mesangio que sostiene varias luces capilares en los cortes histológicos

• Normal: 2-3 núcleos /área mesangial

16

Glomérulos

17

Evaluación histológica de la biopsia renal

18

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulo. Composición

• Los principales componentes de la MB: colágeno tipo IV, heparán sulfato, laminina, proteoglicanos, entactina y fibronectina

• La matriz mesangial está formada por diferentes tipos de colágeno (III, IV, V y VI), proteínas microfibrilares, glucoproteínas, proteoglicanos y otros componentes

Técnicas. -H-E: Núcleos azules(basófilos) .Citoplasma rosa(eosinófilo)-PAS: Colágeno IV : Mesangio y MB-Plata-metenamina : Colágeno IV. Mesangio y MB-Tricrómico de Masson: Colágeno (I). Mesangio, MB e intersticio

+ Comportamiento de los depósitos 19

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulo -HE

20

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulo- Plata

21

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulo- PAS

22

Evaluación histológica de la biopsia renal

Glomérulo- T. Masson: Azul o verde

23

Evaluación histológica de la biopsia renal

Evaluación de glomérulos1. Grado de celularidad. No debe haber más de tres células por área mesangial•Falsa hipercelularidad en corte grueso: falsa hipercelularidad.•No evaluar la celularidad en las aréas mesangiales adyacentes al polo vascular porque en ellas hay, normalmente, más células.2. Tipo de hipercelularidad:•Mesangial : Diferenciar matriz o celularidad mesangial•Endocapilar: Hipercelularidad dentro del penacho. Las células que proliferan son mesangiales, endoteliales y células inflamatorias circulantes •Extracapilar(semiluna): Proliferación de células en el espacio de Bowman.

Al menos dos capas de células tapizando la cápsula de Bowman más del 25% de la circunferencia del glomérulo.

Las células que proliferan son podocitos parietales y células inflamatorias, principalmente monocitos

Puede ser circunscrita o circunferencial.

24

Evaluación histológica de la biopsia renal

Hipercelularidad mesangial. HE

25

Evaluación histológica de la biopsia renal

Expansión matriz mesangial. PAS

26

Evaluación histológica de la biopsia renal

Hipercelularidad mesangial-endocapilar

27

Evaluación histológica de la biopsia renal

Hipercelularidad endocapilar-inflamatorias

28

Evaluación histológica de la biopsia renal

Proliferación extracapilar(semiluna). Plata

29

Evaluación histológica de la biopsia renal

27

Patrones histológicosHipercelularidad•Mesangial•Mesangial y endotelial•Celularidad inflamatoria•Celularidad epitelial(semilunas)Engrosamiento de la membrana basal•Subepitelial•SubendotelialHialinización y esclerosis

Endocapilar

Extracapilar

Evaluación histológica de la biopsia renal

Términos

31

Evaluación histológica de la biopsia renal

•Global: Que compromete todo el glomérulo.•Segmentario: Compromete sólo una parte del glomérulo.•Difuso: Que compromete todos, o casi todos, los glomérulos.•Focal: Que compromete sólo algunos glomérulos. No está definido o porcentaje exacto y aceptado por todos. •Hialinosis: Depósitos glomerulares homogéneos, amorfos, compuestos principalmente de material proteináceo. Debe diferenciarse de la necrosis fibrinoide, que presenta similares características tintoriales, pero, es un material más granular, menos homogéneo y se acompaña de detritus celulares y/o células inflamatorias.• Esclerosis: Lesión glomerular cicatricial producida con proliferación de colágeno tipo IV (colágeno glomerular).•Fibrosis: Cicatrización producida, principalmente, con colágeno tipo I (colágeno de tipo intersticial).

Hialinosis-esclerosis

32

Evaluación histológica de la biopsia renal

Esclerosis

33

Evaluación histológica de la biopsia renal

Colágeno I. PAS -

Colágeno IV. PAS +

Colágeno I. Plata -

Colágeno IV. Plata +

Túbulos

• Los túbulos corresponden al 90% de la corteza renal• Estructura con la mayor demanda energética del

riñón.• El sistema tubular de la nefrona se divide en varios

segmentos: túbulos proximales, porción delgada del asa de Henle, porción gruesa del asa de Henle, túbulo contorneado distal y conductos colectores.

• Afectación túbulo-intersticial: Importante marcador pronóstico en glomerulonefritis primarias

34

Evaluación histológica de la biopsia renal

Túbulos HE

35

Evaluación histológica de la biopsia renal

TCP

TCD Y COLECTORES. HALO

Túbulos PAS. MB

36

Evaluación histológica de la biopsia renal

Túbulos. Plata. MB

37

Evaluación histológica de la biopsia renal

Túbulos –T. Masson

38

Evaluación histológica de la biopsia renal

Patología tubular

39

Evaluación histológica de la biopsia renal

NTA. Masson

Atrofia tubular. PAS

Intersticio

• Es el tejido de sostén. • Espacio entre glomérulos, túbulos, vasos y

nervios. • Composición: células (fibroblastos e

inflamatorias) y colágeno I, proteoglicanos, glucoproteínas y líquido.

• 7-9% de corteza renal.• Mayor en medular que cortical• Afectación túbulo-intersticial: Importante

marcador pronóstico en glomerulonefritis primarias

40

Evaluación histológica de la biopsia renal

Intersticio. HE

41

Evaluación histológica de la biopsia renal

Intersticio-PlataEvaluación histológica de la biopsia renal

Intersticio-PAS

43

Evaluación histológica de la biopsia renal

Vasos

• Las arterias y arteriolas renales tienen la misma estructura histológica que en otros sitios del organismo.

• Capas: Endotelio, íntima, lámina elástica interna (difícil de identificar, con tinciones rutinarias, en las arterias pequeñas), capa muscular y adventicia

• Las arteriolas aferentes son los principales vasos de resistencia en el riñón y regulan el flujo sanguíneo renal por contracción o relajación de sus una a tres capas de músculo liso.

44

Evaluación histológica de la biopsia renal

Vasos. HE

45

Evaluación histológica de la biopsia renal

Vasos. Masson

46

Evaluación histológica de la biopsia renal

Vasos-hialinosis

47

Evaluación histológica de la biopsia renal

IFD- Tipos de depósitos

• Lineales: Parietales(pared capilares glomerulares)

• Granulares: -Mesangiales-Parietales ( subendoteliales o

subepiteliales)-Mesangiales y parietales

Lupus: Combinación de patrones

48

Evaluación histológica de la biopsia renal

Evaluación de glomérulos. Términos

49

•Subendotelial: Región situada entre las células endoteliales y la MBG.•Subepitelial: Región ubicada entre los podocitos viscerales y la membrana basal glomerular (MBG).

Evaluación histológica de la biopsia renal

Lineal

50

Evaluación histológica de la biopsia renal

Mesangial

51

Evaluación histológica de la biopsia renal

Parietal Granular subepitelial

52

Evaluación histológica de la biopsia renal

Entre los podocitos viscerales y MBG. Contorno externo irregular

Spikes-membranosa

53

Evaluación histológica de la biopsia renal

Parietal granular subepitelial(humps)+ mesangio

54

Evaluación histológica de la biopsia renal

Parietal granular subendotelial

55

Entre las células endoteliales y la MBG(contorno externo liso).

Dobles contornos

56

57

La proliferación de células dentro del espacio urinario glomerular se denomina:

a)Proliferación mesangialb) Proliferación endocapilarc)Proliferación extracapilard)Proliferación vascular

58

59

La proliferación de células dentro del espacio urinario glomerular se denomina:a)Proliferación mesangialb) Proliferación endocapilarc)Proliferación extracapilard)Proliferación vascular

60

El incremento de la celularidad mesangial se define como:a)Presencia de más de 2 células por área mesangialb)Más de 1 célula por área mesangialc)Más de 3-4 células por área mesangiald)Incremento de la matriz y la celularidad

61

Las tinciones histológicas que mejor definen las membranas basales en patología renal son :

a)HE y Platab)PAS y Platac)Masson y PASd)Plata y Masson

62

Los depósitos subendoteliales se definen como :a)Situados entre los podocitos y la MBGb)Situados entre el mesangio y la MBGc)Situados entre las células endoteliales y la MBG.d)Entre el mesangio y los podocitos viscerales

MUCHAS GRACIAS

63