4.1instrumentacionespectrometriademasas_2462
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EspectrometríaEspectrometríade Masasde Masas
Q. Georgina Duarte LisciQ. Georgina Duarte LisciFacultad de QuímicaFacultad de Química
UNAMUNAM
Investigador (es) Año Contribución
J.J. Thompson 1912 Primer espectrómetro de masas
Dempster 1918 Electro-ionización y enfoque magnético
Stephens 1946 Analizador de Tiempo de Vuelo (TOF)
Nier-Johnson 1952 Instrumentos de doble enfoque
Paul, Steinwedel,Raether, Reinhard y von Zahn
1953-58
Analizador cuadrupolar
Wiley y McLaren1955 Diseño avanzado del analizador de tiempo
de vuelo (TOF)
Gohlke yMcLafferty
1956 Cromatografía de Gases/Espectrometría de Masas
Beynon 1956 Espectrometría de Masas de alta resolución
Munson y Field 1966 Ionización Química
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNCronología de la EMCronología de la EM
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNCronología de la EMCronología de la EM
Investigador (es)Investigador (es) AAññoo ContribuciContribucióónn
Dole, Mack, Hines, M. Ferguson y Alice 1968
Ionización por Electro-spray (ESI)
McLafferty1973
Cromatografía de Líquidos/Espectrometría de Masas
Barber, Bordoli, Sedgwick, Tyler, Surman yVickerman
1981Bombardeo de átomos rápidos (FAB)
Blakely y Vestal1983
Ionización porTermo-spray
Yamashita, Fenn, Aleksandrov, Gall, Krasnov, Nikolaev,Pavlenko, Shkurov, Dokl,Baram y Garacher
1984Aplicación de la ionización por Electro-spray (ESI) en macromoléculas
J. J. Thompson, 1912J. J. Thompson, 1912
JJosephoseph JJohnohnThompson, 1912Thompson, 1912
Ventajas de la Ventajas de la Espectrometría de MasasEspectrometría de Masas
Capacidad de IdentificaciónCapacidad de IdentificaciónIdentificación inequívoca de casi cualquier tipo de substancia, desde
átomos hasta moléculas complejas de peso molecular elevadoAnálisis cualitativo y cuantitativoAnálisis cualitativo y cuantitativo
Identificación de una substancia en presencia de otras similaresIdentificación de una substancia en presencia de otras similares
Alta sensibilidadAlta sensibilidad
Técnica universal y específicaTécnica universal y específica
Información isotópicaInformación isotópica
Información estructural, energías de enlaces, cinética,Información estructural, energías de enlaces, cinética,fisicoquímica, etc.fisicoquímica, etc.
Técnica rápida (análisis en línea en tiempos reales, control deTécnica rápida (análisis en línea en tiempos reales, control deprocesos enzimáticos, metabólicos, etc)procesos enzimáticos, metabólicos, etc)
¿Por qué es importante la ¿Por qué es importante la Espectrometría de Masas?Espectrometría de Masas?
Porque es una técnica analítica poderosa Porque es una técnica analítica poderosa utilizada para:utilizada para:
Identificar compuestos químicosIdentificar compuestos químicosCuantificar compuestos químicosCuantificar compuestos químicosProveer información válida en áreas como la Proveer información válida en áreas como la química, física, astronomía, geología, química, física, astronomía, geología, biología, criminalística, etc.biología, criminalística, etc.
Algunas aplicaciones específicasAlgunas aplicaciones específicasde la Espectrometría de Masas:de la Espectrometría de Masas:
Detectar e identificar el uso de fármacos de Detectar e identificar el uso de fármacos de abuso en atletas (antidoping)abuso en atletas (antidoping)Monitorear los gases de la respiración en Monitorear los gases de la respiración en pacientes durante cirugíapacientes durante cirugíaDeterminar la composición de materiales Determinar la composición de materiales provenientes del espacio exteriorprovenientes del espacio exteriorDeterminar adulteración en la miel de abejaDeterminar adulteración en la miel de abeja
Localizar depósitos petroleros (midiendo Localizar depósitos petroleros (midiendo precursores del petróleo en rocas)precursores del petróleo en rocas)Monitorear fermentaciones en línea (industria Monitorear fermentaciones en línea (industria biotecnológica)biotecnológica)Detectar contaminantes orgánicos en Detectar contaminantes orgánicos en aire, aire, agua, suelo y alimentosagua, suelo y alimentosDeterminar algunos tipos de envenenamientoDeterminar algunos tipos de envenenamiento(criminalística)(criminalística)
Algunas aplicaciones específicasAlgunas aplicaciones específicasde la Espectrometría de Masas:de la Espectrometría de Masas:
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNEM Diagrama GeneralEM Diagrama General
SistemaSistemade entradade entrada
CámaraCámaradede
IonizaciónIonización AnalizadorAnalizadorDetectorDetector
Sistemade Cómputo
S i s t e m a d e A l t o V a c í oS i s t e m a d e A l t o V a c í o
Componentes principales Componentes principales de de un un Espectrómetro Espectrómetro de de MasasMasas
SistemaSistema dede bombeobombeoSistema de entradaSistema de entradaFuenteFuente de de IonesIones (Cámara de Ionización)(Cámara de Ionización)Óptica IónicaÓptica IónicaAnalizador MásicoAnalizador MásicoDetectorDetectorLíneaLínea de de transferencia transferencia (CG(CG--EM)EM)
Sistema de BombeoSistema de BombeoTiposTipos de de Bombas Bombas de de VacíoVacío
Sistemas de EntradaSistemas de Entrada
•• Muestras PurasMuestras PurasEntrada directaEntrada directa
Sonda de Introducción Directa (DIP)Sonda de Introducción Directa (DIP)Sonda de Exposición Directa (DEP)Sonda de Exposición Directa (DEP)
•• MezclasMezclasCromatografía de GasesCromatografía de GasesCromatografía de LíquidosCromatografía de LíquidosElectrocromatografíaElectrocromatografíaElectroforesis CapilarElectroforesis CapilarExtracción de Fluídos SupercríticosExtracción de Fluídos Supercríticos
Sonda de Inserción Directa (DIP)Sonda de Inserción Directa (DIP)
Sonda de Esposición Directa (DEP)Sonda de Esposición Directa (DEP)
La muestra en disolución se coloca en un tubo capilar de vidrio
Temperatura máxima: 300oC
Diferentes velocidades de Calentamiento
Posibilidad de calentamiento directo de la muestra (sin solubilizar)
La muestra en disolución se coloca en un filamento
Calentamiento balístico
Rampas de temperatura programables
Alcanza hasta 1000oC
Entrada DirectaEntrada Directa
Tipos de IonizaciónTipos de IonizaciónIonización en Fase Gaseosa:Ionización en Fase Gaseosa:
Ionización y Desorción:Ionización y Desorción:
Bombardeo de Partículas:Bombardeo de Partículas:
Ionización a Presión Ionización a Presión Atmosférica:Atmosférica:
Desorción LasserDesorción Lasser
Electroionización (EI)Electroionización (EI)Ionización Química (CI)Ionización Química (CI)Desorción de Campo (FD)Desorción de Campo (FD)Ionización de Campo (FI)Ionización de Campo (FI)Bombardeo de Atomos Rápidos Bombardeo de Atomos Rápidos
(FAB)(FAB)Espectrometría de Ión Másico Espectrometría de Ión Másico
Secundario (SIMS)Secundario (SIMS)Electroespray (ESI)Electroespray (ESI)TermosprayTermosprayIonización Química a Presión Ionización Química a Presión
Atmosférica (APCI)Atmosférica (APCI)Ionización por desorción lasser en Ionización por desorción lasser en
matriz asistida (MALDI)matriz asistida (MALDI)
CÁMARA DE IONIZACIÓNCÁMARA DE IONIZACIÓNIonización ElectrónicaIonización Electrónica
+ - + Hacia el Analizador
Magneto
Magneto
+++ +++
++----
Target
Filamento
Repeledor
CÁMARA DE IONIZACIÓNCÁMARA DE IONIZACIÓNIonización ElectrónicaIonización Electrónica
Las moléculas de la muestra son ionizadas Las moléculas de la muestra son ionizadas por un haz de electrones (70 eV)por un haz de electrones (70 eV)Los iones son expulsados de la cámara y Los iones son expulsados de la cámara y dirigidos al analizadordirigidos al analizadorSe producen iones positivos y negativos:Se producen iones positivos y negativos:
90%90%10%10%
M + eM + e--
M + eM + e--
MM+. + 2+ 2 ee--
MM--.
Espectro ElectromagnéticoEspectro Electromagnético
70 eV70 eV
Ionización ElectrónicaIonización Electrónica
Excitación electrónica (similar a la teoría de UV) en orden decreciente se ionizan preferentemente los electrones:
n > π > σn
π
σ
R-O-R..
R-O-R+.
R-CH CH-R:: R-CH CH-R+.:R-CH 2 CH 2-R: R-CH 2 CH 2-R+.
70 70 eV eV de energíade energíaProduce el Ion Molecular y una gran cantidad de Produce el Ion Molecular y una gran cantidad de iones iones con diferentes estados de energíacon diferentes estados de energíaAquellos Aquellos iones iones con gran cantidad de energía interna con gran cantidad de energía interna ((vibracionalvibracional, rotacional y electrónica) liberan esta , rotacional y electrónica) liberan esta energía por medio de la fragmentaciónenergía por medio de la fragmentaciónLos Los iones iones con baja energía permanecen intactos (Ion con baja energía permanecen intactos (Ion Molecular)Molecular)Es la técnica de ionización más comúnEs la técnica de ionización más comúnEs la técnica de ionización de la que se obtiene más Es la técnica de ionización de la que se obtiene más informacióninformaciónTodas las bibliotecas comerciales disponibles están Todas las bibliotecas comerciales disponibles están basadas en los espectros obtenidos por esta ionizaciónbasadas en los espectros obtenidos por esta ionizaciónEs la ionización que más se utiliza con el sistema CGEs la ionización que más se utiliza con el sistema CG--EMEM
Ionización ElectrónicaIonización Electrónica
¿CÓMO SE GENERA UN ¿CÓMO SE GENERA UN ESPECTRO DE MASAS POR IE?ESPECTRO DE MASAS POR IE?
Analizador Detector
Cámara de Ionización
Espectro de Masas m/z
%
FilamentoFilamento
Ionización ElectrónicaIonización ElectrónicaMetanol (CHMetanol (CH33OH, P.M. 32)OH, P.M. 32)
33
32
31
30
29
17
15
12C16O1H
13C
Ionización QuímicaIonización QuímicaEs Es una técnica una técnica de de ionización significativamente más ionización significativamente más suave suave que que IE.IE.Se Se utiliza cuando utiliza cuando en el en el espectro por espectro por IE no IE no aparece aparece el ion el ion molecular,molecular, para confirmar para confirmar el ion molecular o el ion molecular o para para aumentar aumentar la la intensidad intensidad de de algunos iones fragmento algunos iones fragmento a a masas altasmasas altas..Se Se utiliza utiliza un gas un gas reactivoreactivo ((metanometano, , isobutanoisobutano, , amoníacoamoníaco, etc.) , etc.) queque eses ionizadoionizado porpor IE. Los IE. Los ionesionesresultantesresultantes reaccionanreaccionan con con laslas moléculasmoléculas del del analitoanalitoqueque se se encuentranencuentran en la en la fuentefuente, con , con transferenciatransferencia de de carga carga ((protónprotón) ) las moléculas neutras las moléculas neutras del del analito analito se se transforman transforman en en ionesiones. . AlgunosAlgunos ionesiones molecularesmoleculares son son demasiadodemasiado inestablesinestablesparapara permanecerpermanecer intactosintactos aúnaún utilizando esta técnicautilizando esta técnica. .
CH4 + e- 2CH4 -e+ +..
CH4+
+
.+CH4 CH5 ++ CH3
+CH5 ++M MH CH4
Ionización QuímicaIonización QuímicaReaccionesReacciones
analito Protonación
IE IQ
Malatión(Pesticida)P.M. 330
Ionización QuímicaIonización QuímicaEjemploEjemplo
Ionización Ionización por FABpor FAB
La energía para desorción es La energía para desorción es suministrada por un haz de átomos de suministrada por un haz de átomos de Xenón ó Argón de alta energía (6Xenón ó Argón de alta energía (6--10 10 KeV)KeV)Se utiliza para ionizar moléculas polares Se utiliza para ionizar moléculas polares y/o lábiles (Ej.organometálicos)y/o lábiles (Ej.organometálicos)
Ionización Ionización por FABpor FAB
Xe+Xe Xe+
Xe+Xe
Xe+
Xe+
Xe+Xe+
Xe XeXeXe
Ionización Intercambio de carga
Voltaje de aceleración
Xe+M
Xe+M
M+
M-
Xe
Xe
MM+ M+ M+H+
M-H-
Ionización por transferencia de cargaProcesos primarios Procesos secundarios
Ionización Ionización por FABpor FAB
ANALIZADORESANALIZADORES
El El objetivoobjetivo del del analizadoranalizador de de masas es resolver los masas es resolver los iones despuésiones después de de que fueron formadosque fueron formados en la en la fuentefuentede de ionizaciionizacióón.n.La La diferencia entrediferencia entre GC/MS y LC/MS son GC/MS y LC/MS son laslas ttéécnicascnicasde de ionizaciionizacióón n utilizadas utilizadas (no el (no el analizadoranalizador))AnalizadoresAnalizadores mmáás s utilizadosutilizados::
Sector Sector MagnMagnééticoticoCuadrupoloCuadrupolo
TrampaTrampa de de IonesIonesTiempoTiempo de de VueloVuelo
Sector MagnéticoSector Magnético
Magneto
Cámara de ionización
Detector
Cámara de Ionización
Sector magnéticoSector magnético: El campo magnético ejerce una : El campo magnético ejerce una fuerza perpendicular al movimiento del ion para fuerza perpendicular al movimiento del ion para deflectar los iones de acuerdo a su deflectar los iones de acuerdo a su momentomomento..
Sector eléctricoSector eléctrico: El campo eléctrico ejerce una fuerza : El campo eléctrico ejerce una fuerza perpendicular al movimiento del ion para deflectar los perpendicular al movimiento del ion para deflectar los iones de acuerdo a su iones de acuerdo a su energía cinéticaenergía cinética..
Al salir los iones de la cámara de ionización tienen Al salir los iones de la cámara de ionización tienen diferente velocidad, para obtener una mejor diferente velocidad, para obtener una mejor resolución es necesario adicionar un sector eléctrico resolución es necesario adicionar un sector eléctrico que colime o reúna los iones de acuerdo a su energía que colime o reúna los iones de acuerdo a su energía cinética.cinética.
Sector Magnético Sector Magnético y Sector Eléctricoy Sector Eléctrico
Doble SectorDoble Sector
m/z=Bm/z=B22rr22/2V/2V
Sector MagnéticoSector MagnéticoDoble sectorDoble sector
GeometríaGeometría
NierNier -- JohnsonJohnson
Geometría Inversa: Geometría Inversa:
1.1. Sector MagnéticoSector Magnético
2.2. Sector EléctricoSector Eléctrico
Sector Electrostático
••VentajasVentajas::––Excelente resoluciExcelente resolucióón de n de masamasa––Excelente exactitudExcelente exactitud de de masamasa––Excelente sensibilidadExcelente sensibilidad
••DesventajasDesventajas::––PrecioPrecio: : SistemasSistemas de alto de alto costocosto––AdquisiciAdquisicióón n espectral lentaespectral lenta((tiempostiempos de ande anáálisislisis largos)largos)
Sector MagnéticoSector Magnético
CuadrupoloCuadrupolo
CuadrupoloCuadrupolo
Todos losvalores de m/z
entran
Un valorde m/z
sale
+
-+
-
Separación basada en la estabilidad del valor de m/z dentro de los campos de RF y CD sobre las barras cuadrupolo
CuadrupoloCuadrupolo
••VentajaVentaja::––PrecioPrecio: el : el sistema menos carosistema menos caro del del mercadomercado
••DesventajasDesventajas::––Los lLos líímites de mites de deteccideteccióón no son n no son tan tan buenos comobuenos como en en otros sistemasotros sistemas––AdquisiciAdquisicióón n espectral lentaespectral lenta((tiempostiempos de ande anáálisislisis largos)largos)––RangoRango de de masas limitadomasas limitado
CuadrupoloCuadrupolo
FilamentoFilamento
Paso de los electronesPaso de los electrones
Salida de los ionesSalida de los iones
DetectorDetector
Centro de la trampaCentro de la trampa
Parte superior del electrodoParte superior del electrodo
Parte inferior del electrodoParte inferior del electrodo
Trampa de IonesTrampa de Iones
Trampa de IonesTrampa de Iones
••VentajasVentajas::––Capacidad paraCapacidad para MS/MS MS/MS ––PrecioPrecio: no tan : no tan bajo como los bajo como los cuadrupolarescuadrupolares––LLíímites de mites de deteccideteccióón n mejores que mejores que los cuadrupolareslos cuadrupolares ••DesventajasDesventajas::
––ReaccionesReacciones ionion--molmolééculacula––AdquisiciAdquisicióón n espectral lentaespectral lenta((tiempostiempos de ande anáálisislisis largos)largos)––RangoRango de de masas limitadomasas limitado
Trampa de IonesTrampa de Iones
El detector es colocado en el punto focalEl detector es colocado en el punto focalpara asegurar una óptima resolución másicapara asegurar una óptima resolución másica
DetectorDetector
Tiempo de Vuelo (TOF)Tiempo de Vuelo (TOF)Con ReflectrónCon Reflectrón
ReflectrónReflectrón
••VentajasVentajas::––Potencial para rangosPotencial para rangos de de masasmasas mmáás s grandes grandes ––Buena Buena resoluciresolucióón y n y exactitudexactitud de de masasmasas––Excelente sensibilidadExcelente sensibilidad––La La masmas rráápida adquisicipida adquisicióón n espectralespectral ((los tiemposlos tiempos mmáás s cortoscortos de ande anáálisislisis))
••DesventajaDesventaja::––PrecioPrecio: : tiendetiende a ser ma ser máás s caro que los caro que los sistemas cuadrupolaressistemas cuadrupolares y y algunas algunas trampastrampas de de iones pero menos costoso iones pero menos costoso que losque los de de sectoressectores
Tiempo de Vuelo (TOF)Tiempo de Vuelo (TOF)
Sistema CG/EMTOFSistema CG/EMTOF
En elEn el sistemasistema MS/TOFMS/TOF las abundanciaslas abundancias dede los iones permanecen los iones permanecen constantesconstantes aa travéstravés dede todotodo elel pico cromatográficopico cromatográfico.. Esto esEsto es la clave la clave dede los algoritmos automatizados que permitenlos algoritmos automatizados que permiten ““descubrirdescubrir””señalesseñales dede compuestos que coeluyencompuestos que coeluyen. .
El softwareEl software identifica automáticamente las posicionesidentifica automáticamente las posiciones dede los picoslos picosen elen el cromatograma acromatograma aúún aqun aquééllos que esten bajollos que esten bajo la lla lííneanea base.base.
AlgoritmoAlgoritmo dede Detección Detección AutomáticaAutomática dede PicosPicos
EnmascaramientoEnmascaramiento yy CoeluciónCoelución
Propylene Glycol
139 Analitos16 minutos
139 Analitos16 minutos
95 Analitos1 hora 15 minutos
95 Analitos1 hora 15 minutos
Análisis TradicionalAnálisis Tradicional dede PetróleoPetróleo((NaftaNafta))
Análisis Análisis Elemental Elemental ((CombustiónCombustión--ReducciónReducción))
La La informacióninformaciónobtenidaobtenida se se reportareportacomocomo porcentajesporcentajes de de elementoselementos (C, H, N, S, (C, H, N, S, y O). y O). Hay Hay rompimiento rompimiento de de todostodos los los enlacesenlaces
Análisis por Análisis por Espectrometría Espectrometría de de MasasMasas
En En Espectrometría Espectrometría de de Masas Masas la la energía energía impartida porimpartida por el el hazhazde de electroneselectrones a la a la molécula rompe molécula rompe algunosalgunos de de los los enlaces. enlaces. Porciones Porciones grandes grandes de la de la estructura estructura de la de la molécula molécula permanecen intactas permanecen intactas permitiendo permitiendo la la identificación identificación del del analitoanalito..
ResoluciónResoluciónCálculo de MasaCálculo de Masa
3 diferentes formas de calcular el Peso Molecular:3 diferentes formas de calcular el Peso Molecular:•• Masa Promedio:Masa Promedio: Se utiliza el peso atómico (es el
promedio de todos los isótopos) para cada elemento. C=12.01115, H=1.00797, O=15.9994, N=14.00674
•• Masa Monoisotópica:Masa Monoisotópica: Se utiliza la masa exacta del isótopo más abundante de cada elemento. C=12.000000, H=1.007825, O=15.994915, N=14.003074
•• Masa Nominal:Masa Nominal: Se utiliza la masa íntegra del isótopo más abundante de cada elemento. C=12, H=1, O=16, N=14
ResoluciónResolución
Es la capacidad de un espectrómetro Es la capacidad de un espectrómetro para distinguir entre dos iones con para distinguir entre dos iones con masas cercanas.masas cercanas.
Se expresa como Se expresa como R=m/R=m/∆∆mm, donde , donde ∆∆mm es es la diferencia de masas entre los dos la diferencia de masas entre los dos iones y iones y mm la masa nominal del ión de la masa nominal del ión de menor masa.menor masa.
ResoluciónResolución
CO+.
N2+.
+C2H4
.
CO+.
N2+. +
C2H4.
27 28 29 27.9949 28.0061 28.0313
Baja ResoluciónBaja Resolución Alta ResoluciónAlta Resolución
ResoluciónResoluciónEjemploEjemplo
Masa Nominal
Masa Monoisotópica
Masa Promedio
C17H32 236 236.2504 236.44459
C16H28O 236 236.2140 236.40096
C15H28N2 236 236.2252 236.40389
ResoluciónResoluciónEjemploEjemplo
Diferencia entre Masas Monoisotópicas
C17H32 y C16H28O 236.2504-236.2140=0.0364C17H32 y C15H28N2 236.2504-236.2252=0.0252C15H28N2 y C16H28O 236.2252-236.2140=0.0112
Resolución = R = m / Resolución = R = m / ∆∆mm Resolución necesaria C17H32 y C16H28O 236.2140 / 0.0364= 6,489 C17H32 y C15H28N2 236.2252 / 0.0252= 9,374 C15H28N2 y C16H28O 236.2140 / 0.0112= 21,090
Exactitud de MasaExactitud de Masa
Exactitud de MasaExactitud de Masa = = m/z Calculada m/z Calculada –– m/z Observadam/z Observadam/z Calculadam/z Calculada
x 10x 1066
Ejemplo:Ejemplo:400.0020 400.0020 –– 400.0000 =400.0000 =
400.0020400.00200.002 0.002 x10x1066 = 4.99 ppm= 4.99 ppm
400.0020400.0020
Exactitud: 2 mmu (miliunidades) o 5 ppmExactitud: 2 mmu (miliunidades) o 5 ppm
SensibilidadSensibilidad•• Es una medida de la respuesta del Es una medida de la respuesta del
instrumento para iones de un compuesto en instrumento para iones de un compuesto en particularparticular
•• Indica el valor de la corriente iónica Indica el valor de la corriente iónica detectada en el colectordetectada en el colector
•• Siempre debe estar referida a un compuesto Siempre debe estar referida a un compuesto determinado (relación señaldeterminado (relación señal--ruido)ruido)
•• Disminuye al aumentar la resolución y la Disminuye al aumentar la resolución y la velocidad de barridovelocidad de barrido
•• Está determinada por la eficiencia de la Está determinada por la eficiencia de la ionización, eficiencia de la transmisión y ionización, eficiencia de la transmisión y respuesta del detectorrespuesta del detector
3
0 20 40 60 80 100 500 1000 2500 5000 50000
FID
NPD
ECD-CC
TCD
FPD-S
MS-Scan
MS-SIM
1
0.1
0.1
DETECTORDETECTOR
pg
SensibilidadSensibilidad y y Detectores para CGDetectores para CG
Diagrama Muestra PuraDiagrama Muestra Pura
Muestrapura
IEIE¿¿VolátilVolátil??
NoNo
Se obtuvo M
No se obtuvo M
IQIQ
SíSíDIPDIP
PM < 3000PM < 3000
PM > 3000PM > 3000
DEPDEP
FABFAB Otras técnicasOtras técnicas(ESI, MALDI)(ESI, MALDI)
++..
++..
Diagrama MezclaDiagrama Mezcla
MezclaMezcla SeSe obtuvoobtuvo MM
No se obtuvo MSíSí
NoNo
Otras técnicasOtras técnicasElectroesprayElectroespray,, , , FritFrit FABFAB
¿¿VolátilVolátil??
CG
HPLC
ECZ
IEIE IQIQ++..
++..