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  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 145Rev. Fac. Agron. (Maracay) 29:145-160. 2003.

    Aceptado: junio, 2003

    * Departamento de Botnica Agrcola. Laboratorio de Fisiologa Postcosecha, Facultad de Agrono-ma, Universidad Central de Venezuela. Apdo. 4579. Maracay 2101. Aragua, Venezuela. E-mail:[email protected]

    Actividad de las enzimas pectinmetilesterasa,poligalacturonasa y celulasa durante la maduracin de

    frutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f.flavicarpa Degener)

    Laura Aponte*

    Angel Guadarrama*

    ABSTRACT

    Passion fruits (Passiflora edulis f. flavicarpa Degener) were harvested at

    different ripening states. It was necessary to establish physical analysis (fresh

    weight and firmness) and chemical analysis (total soluble solids, pH, carotenoids

    content, and total chlorophyll) in order to determine with accuracy the grade of

    fruit ripeness and, in this way, to establish the activity of Pectin methylesterase

    (PME), Polygalacturonase (PG), and cellulase enzymes with their kinetic

    characteristics and stability to heat. Results suggested the use of physical and

    chemical parameters for the definition of the fruits ripeness state. It was confirmed

    the presence of pectolytic enzymes (PME and PG), which exercised a differential

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003146activity at each state. Maximum activities of the PME and PG were

    detected at physiological ripeness and overripe states, respectively. For cellulase,

    no activity was detected at any of the evaluated states.

    Key words: Cellulase, enzymes, ripening, passion fruit, pectin methylesterase,polygalacturonase

    COMPENDIO

    Los frutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa Degener)

    fueron cosechados en diferentes estados de maduracin. Para cada uno fue

    necesario establecer adicionalmente anlisis fsicos (peso fresco y firmeza) y

    qumicos (slidos solubles totales, pH, contenido de carotenoides y clorofila

    total) para as establecer con exactitud el grado de madurez del fruto y con esto

    enfocar la determinacin de la actividad de las diferentes enzimas,

    Pectinmetilesterasa (PME), Poligalacturonasa (PG) y celulasa con sus respec-

    tivas caractersticas cinticas y su estabilidad al calor. Los resultados nos permi-

    tieron sugerir el uso de parmetros fsicos y qumicos para la definicin del

    estado de madurez del fruto y se confirm la presencia de enzimas pectolticas

    (PME y PG) las cuales ejercieron una actividad diferencial en cada estado,

    definiendo sus respectivas caractersticas; se encontraron actividades mximas de

    la PME y PG en el estado de madurez fisiolgico y sobremaduro respectiva-

    mente. Para la celulasa no se detect actividad en ninguno de los estados evalua-

    dos.

    Palabras clave: celulasa, enzimas, maduracin, parchita, pectinmetilesterasa,poligalacturonasa

    INTRODUCCION

    La maracuy es una planta de origen tropical cuyos frutos (tipo bayas)

    presentan un sabor particular intenso y una alta acidez, muy apreciado en los

    pases americanos y europeos que lo demandan con gran inters (Serna y

    Chacn, 1995). La gran aceptacin en los mercados internacionales, hacen de

    este cultivo uno de los ms promisorios y rentables dentro del rengln de los

    frutales en Venezuela, lo cual resalta la importancia e inters de investigar y

    ahondar an ms sobre sus caractersticas, ya que en el presente no se cuenta

    con suficiente informacin.

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 147

    Los frutos, en la generalidad de los casos, presentan cambios visibles en

    sus caractersticas externas por efecto del proceso de maduracin y senescencia

    (Proctor y Peng, 1989); entre estos cambios los del tipo cromtico son muy

    frecuentes, as se tiene que la evaluacin del color de los frutos es un ndice de

    uso comn para determinar el estado de madurez de stos y en el caso particular

    de la parchita maracuy, los cambios de tonalidades que van desde el verde al

    amarillo como ndices de madurez han sido estudiados por Villanueva-Arce y

    Evangelista (2000), concluyendo que la medicin de color es til para determinar la

    madurez del fruto.

    Otra de las caractersticas de la maduracin del fruto est constituida por

    la prdida de la firmeza (liberacin del agua ligada y desintegracin del tejido),

    la cual est estrechamente relacionada con la alteracin enzimtica de la laminilla

    media y pared celular de los frutos las cuales estn constituidas principalmente

    por sustancias pcticas, celulosa y hemicelulosa (Proctor y Miesle, 1991;

    Salisbury y Ross, 1994). La celulosa se ha vinculado con la hidrlisis de la

    celulosa de la pared celular lo cual resulta en la prdida de cohesin de la

    estructura fibrilar de la matriz de polisacridos de la pared (Donoghue et al.,

    1994); la PME ha sido consecuentemente relacionada con la degradacin de

    las sustancias pcticas de la laminilla medianera de la clula, componente de la

    pared celular que acta como agente cementante o ligando entre las clulas y

    puede tambin controlar los movimientos de materiales solubles; esta enzima ha

    sido establecida en numerosas plantas superiores y est activa especialmente en

    frutos (King, 1990; Proctor y Miesle, 1991).

    El control de la actividad de la PME se encuentra referido a travs del

    conocimiento de su dependencia a ciertos parmetros, como la temperatura y el

    pH, y ocupa gran importancia en la industria alimenticia quienes procuran

    mantener las caractersticas texturales de los frutos y sus productos procesados

    (Castaldo et al., 1989). Las PME han sido purificadas y caracterizadas a

    partir de varias plantas y frutos, como tomates, naranjas, lechosas, manzanas y

    toronjas de pulpa blanca y se ha establecido que las PME de varias fuentes

    tienen caractersticas diferentes; en lo que se refiere a peso molecular, actividad

    especfica y otras. En realidad diferentes variedades de un mismo fruto tienen

    PME con caractersticas diferentes (Fayyaz et al., 1994).

    Como se ha mencionado, la PME est involucrada en la prdida de la

    estabilidad de los jugos vegetales a travs de la deesterificacin de las pectinas,

    seguida por la coprecipitacin de los pectatos con los materiales insolubles

    presentes en los jugos. La desestabilizacin es observada frecuentemente cuando

    los productos vegetales han sido sujetos a tratamientos trmicos obtenindose

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003148productos estriles y estables; puede ser causada por actividades

    enzimticas residuales que hallan pasado el tratamiento trmico. Sin embargo,

    no se han publicado evidencias que digan la existencia de actividad residual en el

    jugo de naranja pasteurizado, pero s en la industria de productos de tomate

    donde demuestran la clarificacin por la presencia de la actividad residual de

    esta enzima (Castaldo et al., 1996).

    La PG es otra enzima involucrada tambin con la degradacin de las

    sustancias pcticas y se ha sugerido que en los frutos en maduracin la PME

    prepara la pared para la hidrlisis a ser ocasionada por el efecto de la PG, la

    cual ataca los residuos pcticos desmetilados (Gray et al., 1994). Carrington et

    al. (1993), mencionan que la principal responsable de la solubilizacin total de

    las pectinas insolubles es la PG conllevando de esta manera al ablandamiento

    del fruto por cambios en la estructura de la pared. Se ha encontrado que la

    enzima PME incrementa su actividad en el estado preclimatrico observado en

    frutos de lechosa, la PG no es detectada en este estado pero s, y adems con

    aumento de su actividad, en el climaterio (maduro) disminuyendo despus de

    ste. La actividad de la celulasa se incrementa en forma gradual y al mismo

    tiempo que la PME (Paull y Chen, 1983).

    MATERIALES Y METODOS

    Se utilizaron frutos de Passiflora edulis f. flavicarpa Degener (maracuy)

    procedentes del Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP),

    stos se cosecharon en cuatro estados de madurez, directamente de las plantas,

    la seleccin se hizo sobre la base de una escala de coloracin en donde el estado

    verde presentaba 0% de coloracin amarilla, el estado de madurez fisiolgico

    con un 25% de coloracin amarilla, el estado maduro con un 75% de colora-

    cin amarilla y por ltimo el estado sobremaduro con un 100% de coloracin

    amarilla hacia marrn. Esta clasificacin fue respaldada a nivel de laboratorio a

    travs de anlisis fsicos con la medicin de la firmeza (por medio de un

    penetrmetro) y el peso fresco (a travs de una balanza), ambos en el fruto

    entero; y qumicos, por medio de la medicin de los slidos solubles totales (uso

    de un refractmetro manual ATAGO N1) y pH (uso de un pH metro 420A

    Orion), ambos en la pulpa del fruto. Tambin se determin el contenido de

    clorofila total (mtodo propuesto por Hiscox e Israelstam, 1979) en el epicarpio

    del fruto y contenido de carotenoides totales (mtodo propuesto por McCollum,

    1953) medido en la pulpa del fruto.

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 149Se realizaron los anlisis bioqumicos con la determinacin y caracteriza-

    cin de cada una de las enzimas citadas para los estados de madurez ya estable-

    cidos. Las enzimas hidrolticas fueron extradas por homogeneizacin de 25 g

    de pulpa (semillas + arilo) en 25 ml de NaCl al 10% (pH 6.2) por un

    minuto. El extracto crudo fue centrifugado a 15000 rpm por 30 minutos; el

    sobrenadante fue removido (extracto enzimtico) para cada una de las enzimas

    y realizada la evaluacin de las actividades en forma inmediata o almacenado

    bajo congelacin a -15C para su posterior anlisis. La determinacin de la

    actividad de la PME fue por el mtodo de Hagerman y Austin (1986), en

    donde la mezcla de reaccin consisti de 2.5 ml de solucin de pectina ctrica al

    1% (p/v) en cloruro de sodio 0.2 N, ms dos gotas de azul de bromofenol y

    0.75 ml del extracto enzimtico; la reaccin se llev a cabo por una hora a 30C,

    se midi su absorbancia a 620 nm expresando la actividad en variacin de la

    absorbancia / h a 30C.

    La evaluacin de la actividad de la poligalacturonasa se realiz por el

    mtodo de MacDonnell et al. (1945); la mezcla de reaccin consisti de 2.5 ml

    de solucin de cido poligacturnico al 0.2% (p/v) y 0.75 ml del extracto

    enzimtico incubndola a 30C por una hora, transcurrido el tiempo se filtr

    con papel Whatman 1, se determin la prdida de viscosidad en comparacin al

    testigo. La actividad se expres como el porcentaje de la disminucin de la

    viscosidad durante una hora a 30C.

    La actividad de la celulosa se evalu igual que la poligalacturonasa, sustitu-

    yendo solamente el sustrato que fue una solucin de 2.5 ml de carboximetilcelulosa

    al 0.2% (p/v) expresando su actividad como el porcentaje de la disminucin de

    la viscosidad por una hora a 30C.

    A nivel de la caracterizacin cintica de cada enzima con sus mtodos

    respectivos, se utiliz una concentracin de sustrato diferente al mtodo original

    propuesto varindolas entre 0.06 y 10 mg/ml de solucin. El clculo de la

    constante de Michaelis-Menten (Km) y de la velocidad mxima (Vmx) se

    realiz por representacin grfica de la ecuacin de Lineaweaver-Burk

    (Lehninger, 1982). Para la obtencin del pH ptimo, se realizaron las medi-

    ciones de las actividades de las enzimas con sus mtodos respectivos, aunque se

    ajustaron las mezclas de reaccin a varios pH iniciales entre 2 a 8 para la

    PME, 3 a 9 para la PG y 4 a 8 para la celulasa (Cameron et al., 1995;

    Snchez et al., 1998).

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003150En la obtencin de la temperatura ptima, la excepcin la constituy la

    temperatura de reaccin para cada enzima las cuales fueron entre 5 a 50C

    para las enzimas. En la determinacin de la estabilidad enzimtica al calor los

    diferentes extractos enzimticos se sometieron a temperaturas de 90 y 100C

    con intervalos de tiempos de 1, 3, 6 y 9 minutos segn el mtodo descrito por

    Guadarrama (1989). Los extractos se descongelaron antes de tomar alcuotas

    de 1 ml y colocarlas en los tubos de ensayos, se calentaron en los tiempos y

    temperaturas indicadas, luego los tubos fueron sumergidos en un bao de agua

    con hielo y as determinar la actividad enzimtica residual a la temperatura y

    pH ptimo de la enzima respectiva.

    La investigacin se efectu bajo un diseo completamente aleatorizado,

    con tres repeticiones. El anlisis estadstico se hizo con el establecimiento del

    ANAVAR con estudio de significancia a travs de la prueba de Tukey o

    Mnima Diferencia Significativa, utilizando para ello los programas estads-

    ticos Statistix 4.0 y SAS.

    RESULTADOS Y DISCUSION

    Los frutos de parchita maracuy tienden a perder peso hacia el estado

    sobremaduro; mientras que en los estados del verde al maduro se concentran los

    mayores valores de peso fresco. Estos frutos en el estado verde son muy firmes,

    perdiendola a medida que el fruto pasa al estado de madurez, y sta se reduce

    progresivamente hasta el estado sobremaduro cuando los mismos se arrugan y

    resecan como consecuencia de la prdida de humedad; el contenido de slidos

    solubles totales se va incrementando gradualmente, obteniendo su pico en el

    estado maduro, para luego disminuir en el estado sobre maduro.

    Se observ un pH ms cido en el estado verde, que aumentaba ligera-

    mente hacia el sobremaduro. El contenido de carotenoides totales se increment

    desde el estado verde hasta el maduro luego disminuy hacia el sobremaduro, en

    cambio el contenido de clorofila total disminuy notoriamente a medida que se

    avanz en el estado de madurez. Todos estos anlisis permitieron evidenciar la

    separacin entre cada uno de los estados tratados y proceder a determinar la

    actividad enzimtica para cada uno, caracterizndolas en aquellos en donde se

    encontr la mayor actividad (Cuadro 1).

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 151Cuadro 1. Tendencias promedio de los anlisis fsicos y qumicos en los diferentes

    estados de madurez del fruto de parchita maracuy (Passiflora edulis f.

    flavicarpa)

    Enzima Pectinmetilesterasa

    Se pudo constatar que la actividad de la PME tiende a aumentar hacia el

    estado de madurez fisiolgica, para luego disminuir de forma gradual en los

    estados maduro y sobremaduro. Se dedujo que el estado de madurez fisiolgica

    es donde se concentra la mayor actividad de esta enzima para estos frutos

    (Figura 1); los resultados coinciden con los obtenidos por Ketsa y Daengkanit

    (1998), quienes encontraron actividad en frutos de Durio zibethinus Murray

    en el estado de madurez fisiolgica incrementando as el ablandamiento.

    La cintica fue evaluada en el extracto crudo a diferentes concentraciones

    de sustrato (0.06; 0.12; 0.25; 0.5; 1.0; 2.0; 4.0; 6.0; 8.0 y 10) mg/ml de

    pectina ctrica. La concentracin ptima de sustrato se ubic a los valores de 2.0

    y 4.0 mg/ml de pectina ctrica. Se estim la velocidad mxima (Vmx) y la

    constante de Michaelis-Menten (Km) aparente de esta enzima con la repre-

    sentacin grfica de Lineaweaver-Burk, las cuales fueron de 0.233 DAb/h y

    4.0 mg/ml, respectivamente. Comparando la Km obtenida con las determi-

    nadas por otros investigadores, sta result ser elevada; Giovane et al. (1990),

    consiguieron Km diferentes para dos PME de frutos de Actinidia chinensis,

    Estados de madurez

    -

    76.93

    15.30

    3.74

    0.48

    0.99

    1.75

    134.22

    18.23

    3.32

    0.65

    2.92

    1.38

    115.51

    17.70

    3.22

    0.64

    3.73

    0

    121.50

    13.38

    3.14

    0.27

    7.36

    Anlisis fsico

    Firmeza (mm)Peso fresco (g)

    Anlisis qumico

    Slidos solubles (Brix)pH

    Carotenoides totales (mg/100 ml de jugo)Clorofila total(mg/l de solucin)

    SobremaduroMaduroMadurezFisiolgica

    Verde

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003152en donde la PME1 fue de 1.82 mg/ml y para la PME2 fue de 0.76 mg/

    ml. En todos los casos observados se evidencian Km, que aunque son de dife-

    rentes fuentes, sus valores estn muy por debajo del obtenido para el fruto de

    parchita; este hecho sugiere que la PME de este fruto presenta poca afinidad

    hacia el sustrato utilizado.

    Figura 1. Actividad de la Pectinmetilesterasa (D absorbancia / hora) en los estados demadurez de frutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa).

    En el ensayo para la temperatura ptima, se observ que la mayor actividad,

    segn tendencia se obtuvo a los 10 C; considerndose sta como la temperatura

    ptima (Figura 2) claro est, segn las medias hay un amplio rango de temperatura

    en las cuales la enzima ejerce su efecto, sin tener una disminucin total de la

    actividad, ejemplo de esto son los resultados de Castaldo et al. (1989), en la cual

    la PME extrada de frutos de manzanas present actividad constante a tempera-

    turas de 40-50C y segn King (1990) a 60C como temperatura ptima en

    manzanas Bramley. En cambio, en toronja se ha encontrado actividad a tempera-

    turas de 4C y en jugos de naranjas a 5C (Cameron y Grohman, 1995).

    0

    0.01

    0.02

    0.03

    0.04

    0.05

    0.06

    0.07

    0.08

    0.09

    Verde Madurez Fisiolgica Maduro Sobremaduro

    Estado de Madurez

    Ab

    sorb

    anci

    a/ho

    ra

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 153

    Figura 2. Variacin de la actividad de la pectinmetilesterasa (D absorbancia / hora) enfrutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa) a diferentes tem-

    peraturas.

    El comportamiento presentado por la PME es de mayor actividad hacia pH

    cidos, ya que a pH de 3 fue donde se localiz la mxima actividad (Figura 3) y

    disminuy la actividad por encima y por debajo de ste. Este resultado fue

    contrario al obtenido por Owusu-Yaw et al. (1988), debido a que se utilizaron

    pH cidos entre 2 y 3 para inhibir el efecto de la PME en la estabilizacin de

    jugos de naranjas, tambin ha sido utilizado en toronjas (la enzima en estos

    frutos ha presentado pH ptimos de 8 y 7.6, respectivamente).

    En la estabilidad al calor se verific, que si bien a los 90 y 100C se mantuvo

    la actividad (Figura 4), ya que no se presentaron diferencias entre los tiempos a una

    misma temperatura, tambin se tiene que, la enzima PME se present aparentemen-

    te estable a la temperatura de 90C y a los 100C se observ una disminucin en su

    accin en comparacin con la temperatura anterior. Varios ensayos tecnolgicos

    han sido utilizados para resolver el problema de la clarificacin de los jugos y stos se

    resumen en tratamiento trmico (105-115C) para inactivar la PME. Esta tecno-

    loga puede ser usada para la estabilizacin de los jugos; sin embargo, debe tenerse

    mucho cuidado para evitar cambios en el sabor y aroma de los mismos como conse-

    cuencia de este tratamiento (Castaldo et al., 1991).

    0,1 65

    0 ,17

    0 ,1 75

    0 ,18

    0 ,1 85

    0 ,19

    0 ,1 95

    0 ,2

    0 ,2 05

    0 1 0 2 0 30 4 0 5 0 60

    T e m p e ra tu ra ( C )

    Abs

    orb

    anci

    a/ho

    ra

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003154

    Figura 3. Variacin de la actividad de la Pectinmetilesterasa ( absorbancia / hora) enfrutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa) a diferentes

    pH.

    Enzima PoligalacturonasaSe comprob que la actividad de la Poligalacturonasa (PG), mostr

    tendencia a incrementarse durante el proceso de maduracin (Figura 4),

    ocurriendo mayor porcentaje de prdida de viscosidad en el estado sobremaduro,

    por tanto es la fase de maduracin del fruto que ms sufre la accin de la PG.

    Buescher y Furmanski (1978), en frutos de duraznos han asociado a la PG

    con la prdida de la firmeza y adems, su actividad no se registra durante la

    inmadurez sino a medida que stos entran a la sobremadurez; de igual manera

    en tomates verdes tampoco se obtiene actividad detectable de esta enzima (Tucker y

    Grierson, 1982).

    La cintica fue evaluada en el extracto crudo a diferentes concentraciones

    de sustrato (0.06; 0.2; 0.25; 0.5; 1.0; 2.0 y 4.0) mg/ml de cido

    poligalacturnico. La concentracin ptima se ubic a los 2.0 mg/ml de cido;

    con la representacin grfica de Lineawever-Burk se estim la Velocidad mxima

    (Vmx) y la Constante de Michaelis-Menten (Km) aparente de esta enzima,

    las cuales fueron de 15.22% de prdida de viscosidad/h y de 0.03 mg/ml,

    0

    0,05

    0,1

    0,15

    0,2

    0,25

    0 1 2 3 4 5 6 7 8

    pH

    A

    bso

    rba

    nci

    a/ho

    ra

    81 2 3 4 5 6 7pH

    A

    bsor

    banc

    ia /

    hora

    0.25

    0.2

    0.15

    0.1

    0.05

    00

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 155respectivamente. Comparando la Km obtenida para parchita con las determinadas

    por otros investigadores, esta result ser menor; indicando posiblemente ms

    afinidad hacia este sustrato; as se tiene que la calculada por Snchez et al.

    (1998) para frutos de chirimoya es una Km aparente de 3.7 mg/ml para el cido

    poligalacturnico, como tambin la Km para lechosa (Chan y Tam, 1982) fue

    establecida entre 4.4 mg/ml para la endopoligacturonasa y de 0.8 mg/ml para la

    exopoligalacturonasa; como se puede observar la obtenida en frutos de parchita

    se encuentra muy por debajo de estos valores.

    Figura 4. Estabilidad calrica de la pectinmetilesterasa (D absorbancia / hora) en frutosde parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa).

    La temperatura ptima para la PG fue de 30C, ya que hubo mayor dismi-

    nucin de viscosidad en comparacin con las dems temperaturas (Figura 5), indi-

    cando una mayor actividad de esta enzima. Esta temperatura ptima fue menor en

    comparacin a la de 45C, ubicada en la lechosa por Chan y Tam (1982).

    0 ,2

    0 ,2 2

    0 ,2 4

    0 ,2 6

    0 ,2 8

    0 ,3

    0 ,3 2

    0 ,3 4

    0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

    T ie m p o (m in u to s )

    A

    bs

    orb

    an

    cia

    /ho

    9 0 C

    1 0 0 C

    81 2 3 4 5 6 7Tiempo (minutos)0 109

    100

    90 C

    0.2

    0.22

    0.24

    0.26

    0.28

    0.30

    0.32

    0.34

    A

    bsor

    banc

    ia /

    hora

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003156

    Figura 5. Actividad de la poligalacturonasa (% prdida de viscosidad / hora) en losestados de madurez de frutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f.

    flavicarpa).

    La tendencia mostrada de la PG para el pH, fue con el aumento de la

    prdida de viscosidad desde pH cidos hasta acercarse a la neutralidad, es decir,

    desde 3 hasta 6. A pH 6 se encontr la mayor accin de esta enzima y por

    encima de ste, se observ una disminucin marcada de la actividad (Figura

    6). Chan y Tam (1982) hallaron en frutos de lechosa que la PG tiene un pH

    ptimo de 4.6; adems sealaron que en duraznos se present un pH de 4, en

    dtiles un pH de 5 y en peras de 4.5.

    En la estabilidad al calor, la PG present una leve disminucin en un

    tiempo de tres minutos a 90C, para luego estabilizarse; a esta temperatura no

    hubo inactivacin, pero se pudo notar que la accin de esta enzima es realmente

    baja (Figura 7). A los 100C, en nueve minutos, prcticamente se disminuy el

    efecto y se hizo menos estable en comparacin a los 90C. Los resultados con-

    trastan con los obtenidos por Chan et al. (1981) en el tratamiento calrico para

    la inactivacin de la PG, quienes evaluando esta enzima en lechosa emplearon

    temperaturas de 46 48C por 65 y 20 minutos, respectivamente, para dismi-

    nuir o inactivar la accin de la PG. En este caso, la presencia de actividad, si

    bien disminuida, incluso en tratamiento calrico a 100C por nueve

    minutos puede deberse a la presencia de isoenzimas y/o al tipo del fruto.

    0

    2

    4

    6

    8

    1 0

    1 2

    1 4

    V e r d e M a d u r e z F i s i o l g i c a M a d u r o S o b r e M a d u r o

    E s t a d o d e M a d u r e z

    Prd

    ida

    de Vi

    sco

    sida

    d (%

    /h)

  • Aponte y Guadarrama / Actividad enzimtica en parchita maracuy 157

    Figura 6. Variacin de la actividad de la Poligalacturonasa en frutos de parchitamaracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa) a diferentes temperaturas.

    Figura 7. Variacin de la actividad de la Poligalacturonasa (% prdida de viscosidad / hora)en frutos de parchita maracuy (Passiflora edulis f. flavicarpa) a diferentes pH.

    0

    5

    1 0

    1 5

    2 0

    2 5

    0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0

    T e m p e r a t u r a ( C )

    Prd

    ida

    de Vi

    sco

    sida

    d (%

    /h).

    0

    2

    4

    6

    8

    1 0

    1 2

    1 4

    1 6

    1 8

    0 1 2 3 4 5 6 7 8

    p H

    Prd

    ida

    de vis

    co

    sid

    ad (%

    /h)

    86420 1097531pH

    Prd

    ida

    de v

    iscos

    idad

    (%/h)

    8

    6

    4

    2

    10

    1816

    14

    12

    0

  • REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (2) 2003158Enzima celulasa

    Se realiz el procedimiento indicado en la metodologa para medir activi-

    dad de celulasa y en los tres experimentos que se realizaron no se encontr

    actividad detectable en ningn estado, por lo que se sugiere que si el fruto de

    parchita maracuy presenta actividad de esta enzima, entonces esta expresin ha

    de ser nfima. Hasta el momento, aparentemente no se tiene informacin sobre

    la celulasa en parchita maracuy, por esta razn no se procedi en su anlisis y

    caracterizacin.

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