1 - introducción de hongos

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Dra. María Gabriela Latorre Rapela

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CLASE INAGURAL DE LA CLASE DE MICOLOGIA CLINICA

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Dra. María Gabriela Latorre Rapela

Árbol diagramático que representa la organización de la mayoría de los

eucariontes en 6 grupos (Simpson & Rogers 2004b, Current Biology)

Incertae

sedis Z

Y

G

O

M

Y

C

O

T

A

?

Flagelados

Flagelados

Flagelados

Adaptado de Hibbert

et al., 2007

Reino: Fungi

Denominación de especie: binomial (Género y epíteto

específico). En latín, Código de Nomenclatura Botánica

Nombres: derivados del latín o griego, descriptivos del

hongo, su fuente o de personas.

Se les debe agregar el nombre de quien lo describió.

Ej.: Penicillium citrinum Thom

Aspergillus fumigatus Fresenius

Nomenclatura dual:

teleomorfo: estado sexual

anamorfo: estado asexual

holomorfo: ambos estados simultáneamente

Son organismos eucariotas

Quimioheterótrofos:

•Utilizan sustancias químicas como fuente de energía

•Utilizan sustancias orgánicas como fuente de carbono

No son fotosintéticos ( sin clorofila)

Se nutren por absorción

Típicamente no móviles (Chytridiomycota tiene una fase móvil)

Cuerpo vegetativo (talo) unicelular o filamentoso

Presentan pared celular (quitina: polímero de N-acetilgucosamina con

uniones β-1,4 glucanos) Oomycota pared de celulosa.

Se reproducen por esporas de origen sexual y/o asexual.

•Tienen núcleo verdadero

• ADN con intrones

• ADN en cromosomas

• Organelas

•Esteroles en la membrana

• Ribosomas 80S

CÉLULA EUCARIOTA

Enzimas alfa (celulasas)

Enzimas beta (celulasas)

Polimero

de celulosa

Celobiosa B glucosidasa

Glucosa

Hifa

Digestión exógena de

sustratos

Quitina

Β-1,3-D-glucano

Β-1,6-D-glucano

Mananos

Proteínas

RIM, 2008

Filósfera

Rizósfera

Hongos acuáticos

Geohongos Queratinófilos

Coprófilos

Gran facilidad para adaptarse a diferentes

ambientes

Ampliamente distribuidos en la naturaleza, siendo

su hábitat muy diverso.

Algunos son acuáticos, principalmente de agua

dulce; la mayoría son terrestres, viviendo en el suelo o

sobre materia orgánica muerta.

Rol fundamental en el ciclo de la materia proceso de biodegradación

NUTRICION DE LOS HONGOS

Se reconocen tres modos de nutrición en hongos:

SAPROTROFÍA, NECROTROFÍA, BIOTROFÍA SAPROTROFOS: se alimentan de materia orgánica muerta. -Obligados: Géneros Aspergillus, Penicillium, Mucor

NECROTROFOS: se alimentan de células o tejidos previamente muertos por el hongo. - Obligados: invaden un tejido y hacen que muera. - Facultativo: pueden convivir con tejidos sanos. Ej. Hongos que obtienen nutrientes de tejidos muertos de plantas vivas (Género Rhizopus). BIOTROFOS: se alimentan de células vivas sin dañarlas

MUTUALISMO

(+ +)

COMENSALISMO

(+ 0?)

PARASITISMO

(+ -)

SIMBIOSIS

Asociación entre un hongo (aporta agua) y un alga (aporta compuestos orgánicos)

P >H2O Aportes en la

Asimilación de nitrógeno

Micorrizas

Micelios

Asociación de los hongos con las raíces de los vegetales

Micorrizas

Huevo de Heterodera schachtii infectado por Verticillium suchlasporium.

Huevos de Heterodera avenae infectados por el hongo Verticillium suchlasporium. Detalle de apresorios producidos por el hongo (flechas).

Huevos del nematodo Heterodera avenae.

Algunos hongos, comestibles, forman parte de la dieta. (hongos de sombrero comestibles Agaricus bisporus, Pleurotus ostreatus, etc.)

Durante su digestión secretan metabolitos primarios y secundarios:

-Metabolitos Primarios energía necesaria para crecer y multiplicarse

-Metabolitos secundarios en la biotecnología de los alimentos ý bebidas.

-Metabolitos secundarios potentes ATM y MTX

ASPECTOS ECOLÓGICOS

Biorremediación en suelos contaminados con materiales tóxicos o residuos de hidrocarburos.

Saccharomyces cereviciae: factoría genética para producir productos farmacéuticos (interferón y otros), mediante la introducción en su citoplasma de genes heterólogos.

Neurospora crassa modelo para la comprensión de los mecanismos genéticos de recombinación.

Dimorfismo: Bajo determinadas circunstancias, muchos hongos filamentosos crecen

y se reproducen como levaduras (unicelulares).

Histoplasma capsulatum

Colonias de levaduras en medio sólido

Brotación Ejemplo: Saccharomyces cerevisiae, Candida spp.

No todas las levaduras se reproducen sexualmente. Algunas forman ascos con esporos de origen sexual en su interior división

(Phylum) Ascomycota y otras basidiosporos división (Phylum) Basidiomycota.

Basidiosporo

Asco con ascosporos

HIFAS: filamentos multinucleados, masas citoplasmáticas polinucleadas contenidas en tubos rígidos y ramificados.

MICELIO: Entrecruzamiento de hifas.

Desde el punto de vista estructural :

MICELIO NO TABICADO (no septado):

Ausencia de tabiques, flujo libre de

citoplasma y núcleos . Micelio cenocítico.

MICELIO TABICADO (septado):

tabiques o septos a intervalos regulares. La

existencia de un fino poro en cada septo y

de corriente citoplasmática permite la

circulación de citoplasma y, en algunos

casos, de los núcleos a lo largo de la hifa.

Poro simple

Poro múltiples

Doliporo

Desde el punto de vista del aspecto macroscópico :

LAXO O FLOJO, ej. género Fusarium

COMPACTO, ej. género Penicillium

M. Vegetativo: funciones de absorción,

asimilación, fijación y excreción. En

contacto directo con el sustrato.

M. Reproductivo: está destinado a producir

los elementos necesarios para perpetuar la

especie y difundirla.

Desde el punto de vista de la función que cumple:

Hifas espiraladas: hifas que

semejan el espiral de un

“sacacorchos”.

Órganos nodulares: hifas retorcidas en

forma apretada, como si se tratara de nudos.

Hifas en raquetas: presentan

regularmente ensanchamientos en forma

de clavas, semejando raquetas de tenis

dispuesta una a continuación de la otra.

Cuerpos pectinados: hifas con

proyecciones unilaterales cortas

irregulares, apariencia de peine con

dientes rotos.

Hifas peridiales: hifas anchas

multiseptadas, semejante a la columna

vertebral y que pueden terminar en un

espiral.

Rizoides: hifas especializadas que se sumergen

en el sustrato. Semejan raicillas y cumplen

funciones de absorción.

Estolones: hifas vegetativas aéreas

ligeramente curvadas que se extienden

horizontalmente sobre el sustrato,

facilitando la rápida invasión de éste.

Esclerocio: cuerpo nodular de 1mm de diámetro, entrelazamiento de

las hifas del micelio vegetativo, que se recubren con una corteza,

sumamente resistente. Generalmente son pigmentados. Se los

considera elemento de resistencia, capaz de conservar la especie en

el tiempo.

Esporos (endógenos)

Artroconidios

Elementos Taloconidios

Asexuales

Conidios Clamidoconidios

(exógenos)

Blastoconidios

Zigosporos Elementos o Basidiosporos esporos sexuales Ascosporos

ESPOROS: son de origen endógeno. Se forman dentro de esporangios y se

denominan esporangiosporos. Ejemplos: géneros Mucor, Rhizopus.

CONIDOS: origen exógeno. TALOCONIDIOS: Su formación implica la transformación de una hifa preformada. Dentro de los taloconidios se diferencian: •ARTROCONIDIOS: Ejemplo: género Geotrichum. •CLAMIDOCONIDIOS: Ej géneros Fusarium, Mucor, Candida.

Fotos: G. Perelstein

BLASTOCONIDIOS: Ejemplo: Aspergillus,

Penillium, Fusarium, Scopulariopsis, etc.

Los conidios presentan morfologías y colores

muy variados y, según su tamaño, pueden

clasificarse en:

MACROCONIDIOS: son bi o pluricelulares.

Los septos que separan las células pueden ser

transversales o transversales y longitudinales.

MICROCONIDIOS: son unicelulares.

Algunos hongos, deuteromicetes,

producen picnidios o acervulis, que

contienen conidios.

PICNIDIOS son formaciones globosas

o con forma de pera, conformados por

hifas especializadas y en su interior se

encuentran conidios.

ACERVULIS son formaciones

producidas por un masa de hifas

agrupadas en forma de plato o

almohadilla que en, su mayoría, dan

origen a los conidios.

-ZIGOSPOROS: exosporos de origen

sexual, Zygomycota.

-BASIDIOSPOROS: exosporos de

origen sexual, Basidiomycota.

-ASCOSPOROS: endosporos de origen

sexual. Se encuentran dentro de bolsas

llamadas ascos. Ascomycota.

Los ascos pueden encontrarse libres o contenidos dentro de cuerpos fructíferos

llamados ascomas . Según la forma que adoptan reciben distintos nombres:

• Ascoma Cleistotecial: completamente cerrado y esférico.

• Ascoma Peritecial: con forma de pera o botella.

• Ascoma Apotecioal con forma de plato.

• Ascoma Gimnotecial: es un cleistotecio de trama laxa, rodeado por hifas

peridiales. Es característico de algunos hongos Dermatofitos

Gimnotecio

Apotecio

Peritecio

Cleistotecio

Peritecio

Cleistotecio

Apotecio

Apotecio

Apotecio

asco

ascosporo

Syncephalastrum racemosum

Mucor hiemalis

Fusarium solani

Paecilomyces variotii

Acemonium strictum

conidios exógenas (ontogenia blástica fialídica)

Penicillium oxalicum

Alternaria alternata

Ascomycota (Lewia)

Conidios

en cadenas

acropétalas

Curvularia eragrostidis (amorfo de Cochliobolus eragrostidis)

Conidios exógenos, blásticos

(poroconidios o conidios tréticos)

)

Conidióforos

Vesículas

Mètulas

Fiálides

Conidios

Pilobulus

Keratinomyces ajelloi

Coccidioides immitis Geotrichum candidum

Botrioso Simpodial

Trético

Blástico

Chrysonilia intermedia

Botrytis cinerea

Ramichloridium schulzeri

Stemphylium vesicarium

Poro

Fialídicos

Anelídicos

Penicillium roqueforti

anélide

Primer Trabajo Práctico

TOMA DE MUESTRA DE MICOSIS

SUPERFICIALES

TOMA DE MUESTRA DE MICOSIS SUPERFICIALES

OBJETIVOS

•Conocer las indicaciones que deberá decirle al paciente

para realizar una buena toma de muestra.

•Conocer las distintas formas de tomar una muestra de

micosis superficial dependiendo de la lesión y la clínica del

paciente.

•Conocer los distintos métodos para el procesamiento de

la muestra.

•Conocer las diferentes condiciones de cultivo a utilizar

según la sospecha diagnóstica y lo observado al

microscopio.

EXAMEN MICOLÓGICO

o Indicaciones previas al paciente

o Toma de muestra

-Antisepsia previa del paciente

-Recolección del material biológico

-Conservación del material

o Procesamiento de la muestra

La calidad del diagnóstico de micosis depende de la calidad y cantidad del material

Recolección de los especímenes

Recipientes: -Estériles -Irrompibles -Tamaño adecuado

Conservación a temperatura ambiente

•No deberán tomar medicamentos antifúngicos de 10 (diez) a 15 (quince) días antes de la toma de muestra. •No aplicar lociones tópicas, cremas, pomadas o cosméticos en el caso de lesiones superficiales. •Si la lesión está en cuero cabelludo, se recomienda higiene previa con solución fisiológica o jabón de PH neutro para impedir las contaminaciones bacterianas. •Si la lesión ocurre en uñas, se recomiendan cepillarlas luego de baños de inmersión prolongados (20 a 30 minutos) con solución salina hipertónica tibia (salmuera). Realizar este procedimiento durante 3 (tres) días previos al turno. •Si las uñas son de pies, concurrir con zapatos cerrados a fin de no contaminar con hongos saprófitos. •Advertir al paciente que evite cortar las uñas al ras, ya sea de manos y / o pies.

Preparación de portaobjetos para recoger el material

ANTISEPSIA PREVIA DEL PACIENTE

Higiene de la zona •Alcohol 70% •Solución fisiológica 8,5% (si se sospecha infección por levaduras

Toma de muestra: Lesiones de piel secas

Toma de muestra

Raspado con bisturí del borde activo

Toma de muestra

Cinta adhesiva transparente

Raspado con bisturí estéril de toda la superficie de la lesión

Toma de muestra: lesiones de mucosas húmedas

SF

Toma de muestra: uña

Toma de muestra: pelos

Toma de muestra: pelos

Examen directo

OHK

Azul de metileno

Gram

Kinyoun

Examen directo

•Medios de cultivo: Sb, lactrimel, DTM, Dixon

•Temp.:28ºC

•Tpo.:20 días

Cultivo

*Se puede adicionar cloranfenicol (50 - 100 ug/ml) para evitar la contaminación bacteriana.

Condiciones de cultivo