UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRONOMICAS

DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINARIA

MATERIA: VIROLOGIA E INMUNOLOGIA

TAREA EX AULA

CIRCOVIRIDAE, TOGAVIRIDAE, ASFAVIRIDAE

CATEDRATICA: MVZ. ROSY FRANCIS ALVARENGA

HERNANDEZ ZAVALETA, LUIS ARMANDO

LAZO JOVEL, ADRIANA MARIA

ORTEZ MEJIA, RUTH SARAI

QUEZADA FUENTES, CARLOS ERNESTO

VEGA MONGE, STEFFANY GUADALUPE

CIUDAD UNIVERSITARIA, SAN SALVADOR 5 DE DICIEMBRE DE 2013

INTRODUCCIÓN

La virología es el estudio de los virus: su estructura, clasificación y evolución. Su manera de infectar y aprovecharse de las células huésped para la reproducción del virus, su interacción con los organismos huéspedes, su inmunidad, la enfermedad que causan, las técnicas para su aislamiento y cultivo y su uso en investigación y terapia. La virología es considerada un sub-campo de la microbiología y la medicina. Su investigación incluye: la replicación viral, los patógenos virales, la inmunología viral, las vacunas virales, los métodos de diagnóstico, la quimioterapia antiviral, las medidas de control de una infección y los diferentes signos que manifiestan la presencia de virus.

Entre los virus que afectan a los animales domésticos se tienen a la familia circoviridae, togaviridae, asfaviridae que cada una de ellas varía de acuerdo a su grado de virulencia las especies a las que atacan y los distintos síntomas que cada una de las patologías que presentan, a su vez estas tienen sus tratamientos preventivos y curativos, en las distintas etapas que los virus presentan

Cada especie de virus presenta una especie tipo que es la principal y esta estará determinada por la cantidad de animales susceptibles a este virus, los daños económicos que puede traer consigo, y si el virus puede llegar a producir algún tipo de enfermedad zoonotica y los efectos perjudiciales que presentan en los humanos

El saber la forma de transmisión, la replicación viral que cada familia presenta es de mucha importancia ya que estos son factores que pueden ayudar a prevenir o disminuir la transmisión de estos virus en las especies animales de importancia veterinaria

OBJETIVOS

General:

Conocer las características principales de las familias asfaviridae, togaviridae, circoviridae

Específicos:

-Identificar las características físico-químicas de las diferentes familias virales

-Identificar las especies tipos de las familias virales en estudio

CIRCOVIRIDAE (VAIP)

GENERALIDADESLa Familia de los Circovirus son virus ADN que afectan a diferentes seres vivos, entre ellos a las aves. Muy relacionados con un grupo de virus de las plantas conocido como Nanovirus, ha sido designada así sobre la base de la configuración circular del genoma. Tiene dos géneros: Gyrovirus y Circovirus. Producen deferentes cuadros clínicos, según las especies por ejemplo en las gallinas ocasionan una enfermedad inmunodepresora llamada, Anemia Infecciosa de los Pollos(es el único miembro del genero Gyrovirus. Entre las aves, entre las mascotas más populares encontramos también afecciones particulares ocasionadas por Circovirus. En Psitácidos produce la Enfermedad del Pico y las Plumas (PBFDV), la Muda Francesa en la cotorra, Circovirsis de las palomas y Circovirsis de los canarios (CaCV).

La Enfermedad del Pico y de las Plumas afecta a una gran variedad de loros en la vida silvestre y en cautiverio. Las puertas de entrada de los Circovirus de la Enfermedad del Pico y las Plumas son la oral, intranasal e intracloacal. Esta afección se manifiesta con frecuencia entre los 6 meses y 3 años de edad, período en que los psitácidos parecen ser más susceptibles. El período de incubación de la enfermedad va de 25 a 40 días según se determinó experimentalmente. Pero en algunos individuos la enfermedad puede llevar meses de incubación.

Los Circovirus porcinos (PCV) son agentes infecciosos de origen vírico descubiertos hace 25 años, de muy fácil difusión que infectan de forma natural a la especie porcina. Hasta el momento se han caracterizado dos tipos distintos, el circovirus tipo I (PCV1), apatógeno para el cerdo, y circovirus tipo II (PCV2).

NOMENCLATURA O TAXONOMIAFAMILIA: CIRCOVIRIDAE

GENERO: CIRCOVIRUS, GYROVIRUS

ESPECIE: VIRUS DE LA ANEMIA DEL POLLO (VAIP), VIRUS DE LA ENFERMEDAD DEL PICO Y LA PLUMA (BFDV), CIRCOVIRUS PORCINO (PCV) TIPO 1 Y 2.

REPLICACIÓN VIRAL:

- El virus penetra en la célula blanco por adsorción y penetración convencional se replica en el nucleó (hemocitoblastos de la medula ósea y las células T precursoras en la corteza del timo)

- Ocho horas post-infección pueden demostrarse bajos niveles de ARN de transcripción, alcanzando niveles máximos a las 4 horas

- Las producción de proteínas se da en la fase S del ciclo celular

- Una cadena de la forma replicativa del VAIP se transcribe en ARNm y a partir de esta se forman las tres proteínas

- La proteína viral VP3 puede detectarse a las 6 horas post-infección, la VP2 a las 12 horas post-infección, la proteína de la capside la VP1 hasta las 30 horas después

- La replicación de ADN probablemente ocurre por el modelo ¨circulo rodante¨

- El ADNss desnudo se convierte en ADNsd con participación de los factores celulares llevándolo a ser mARN viral.

- El mARN mensajero es traducido a proteínas virales- La replicación es mediada por la proteínas ocurriendo una

replicación circular produciendo genomas ANDss- Estos ADNss recién sintetizados pueden:

a) ser convertidos a ADNsd y servir como una plantilla para la transcripción / replicaciónb) ser encapsulados por las proteínas de la cápside y los viriones liberados por la gemación de la célula causada por la VP3 u apoptina

Características físico-químicasLos viriones de VAIP consiste en partículas con capside icosaedricas que no poseen envoltura con un diámetro de 19.1-26.5 (VAID), 17-20.7 (PCV), 12-20.7 (BFDV) nm. El VAIP tiene una densidad de flotación de 1.33 a 1.34 g/ml CsCl y es muy estable: resiste tratamientos con solventes orgánicos como el éter y cloroformo y sobrevive a temperaturas de 70ºC durante 1 hora. El VAIP es susceptible a desinfectantes como el hipoclorito al 5% (2 horas a 37ºC), yodoforos, formalina y fenol al 50% durante 5 min. El genoma del VAIP consiste en una cadena de ADN simple, circular, unido covalentemente y con polaridad negativa, de un tamaño aproximado de 23 kb. Está constituido por 2298 bases (VAIP), 1759 bases (PCV), y El BFDV por 2000 bases. El genoma del PCV mantiene 6 o 7 ORF (marcos de lectura abierta)

Se observan dos tipos de partículas, de acuerdo a que la simetría rotativa de la capside viral: la tipo I, donde las subunidades (capsomeros) forman una superficie y aspecto de red, y la tipo II que se caracterizan por poseer protrusiones en la superficie. Las 3 proteínas virales VP1, VP2 y Vp3 pueden asociarse con cuerpos apoptoticos que se muestran como estructuras electrónicas densas. La proteína no estructurada de 30 a 40 VP2, probablemente esté actuando durante el ensamblaje del virion, así la VP1 se dobla de manera correcta. Esta proteína viral VP1 de 50k es la única proteína detectada en partículas virales altamente purificadas y resulta probable que sea la principal proteína de la capside. La tercera proteína viral VP3 se asocia con el núcleo en células afectadas pero no con partículas virales altamente purificadas.

PATOGENESIS DEL CIRCOVIRIDAE.El virus infecta específicamente las células del sistema inmune y aquellas células que producen la pluma y el pico.

Los eventos básicos durante la patogénesis de la infección con el VAIP fueron dilucidados por estudio secuenciales histopatológicos ultra estructurales y de inmune histoquímica. Los hemocitoblastos en la medula ósea y linfoblastos en la corteza del timo son los primeramente involucrados en la infección cito lítica temprana a los 6 u 8 dias post inoculación, llevando a una rápida depleción de estas células por apoptosis. Además, se han observado en la medula ósea proeritroblastos agrandados, células hematopoyéticas en degeneración y macrófagos con ingestas de células hematopoyéticas degeneradas. En contraste con el timo, antes de los 10 a 12 días de post inoculación no se detectan depleción de células linfoides y necrosis ocasional en la bolsa de Fabricio, bazo, y focos linfoides de otros tejidos. La repoblación del timo con linfocitos y de la medula ósea con proeritroblastos y promieloblastos y la actividad hematopoyética recuperada desde los 16 días a partir de la inoculación, parecen coincidir con el comienzo de la aparición de anticuerpos. Estudios inmune histoquímicas demostraron que el VAIP se replica en linfoblastos de la corteza del timo y un número elevado de linfocitos timicos corticales devienen positivos al virus a los 4 o 6 dias post infección. También se han detectado antígenos de VAIP en hemocitotoblastos y células reticulares de la medula ósea y linfocitos maduros del bazo en el timo y la medula ósea, las células infectadas son más abundantes a los 6-7 días post infección y pueden ser detectadas hasta 10-12 días. Estas células infectadas, aunque el virus puede persistir en los tejidos hasta 28 días y en el contenido rectal hasta 49 días.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIOPruebas de ELISA indirectas para detectar anticuerpos séricos

El virus puede ser aislado de la mayoría de los tejidos con un título viral máximo a los 7 días post infección. Se prefiere el órgano del hígado o los linfocitos del bazo como fuentes para el aislamiento de este. Para ello se inoculan pollitos SPF (libres de patógenos específicos) de 1 día de edad y de 14 a 21 días post inoculación para ello se debe realizar un hematocrito que debe ser inferior al 27% que proporcionara un diagnostico presuntivo. También puede inocularse células MSB-1 y observar un efecto cito-patico

La confirmación puede hacerse por medio de PCR para detectar el ácido nucleico viral

ENFERMEDADES

Enfermedad del pico y la pluma en los psitácidos.

- Distribución

La enfermedad del pico y la pluma de los psitácidos afectan muchas especies de aves psitácidas alrededor del mundo. Las cacatúas son particularmente susceptibles.

- Transmisión

La transmisión del virus es por contacto directo y por contacto indirecto. La infección ocurre principalmente por las rutas oral y respiratoria.

- Características clínicas y patológicas

La enfermedad puede observarse en ambas formas: crónica y aguda fatal. El virus infecta específicamente las células del sistema inmune y aquellas células que producen la pluma y el pico. El signo cardinal de la forma crónica de la enfermedad involucra el pico y la pluma. La deformación del pico se caracteriza por necrosis del palatino y picos alargados y de fácil fractura. El emplume anormal es progresivo, haciéndose más evidente con cada muda y generalmente ocurre en un patrón simétrico con reemplazo de las plumas normales por plumas que cesan de crecer poco después de emerger del Folículo. Hay supresión del sistema inmune y son comunes las infecciones bacterianas secundarias. Ocurre una forma aguda de la PBFD en la que las lesiones del pico y la pluma pueden no ser evidentes. Esta forma que es vista con más frecuencia en aves

jóvenes y se caracteriza clínicamente por letargo, anorexia y diarrea. Las aves afectadas mueren con frecuencia

- Diagnóstico de laboratorio

Especímenes clínicos: Aves completas y plumas infectadas.El diagnóstico frecuentemente se basa en los signos clínicos y la histopatología de los tejidos afectados, Comúnmente se encuentran cuerpos de inclusión intranucleares e intracitoplásmicos en plumas, pico y bolsa de Fabricio. Hay ensayos comerciales que usan PCR para detectar el ácido nucleico viral del PBFD en aves asintomáticas y aves enfermas. Cuando no hay lesiones aparentes en pico o pluma éste es el mejor método disponible para detectar la presencia de virus de PBFD en la sangre del ave.  El virus no se ha propagado con éxito en huevos embrionados o cultivos celulares.

Gyrovirus

Infección por el virus de la anemia aviar

 Agente causal Virus de la anemia infecciosa aviar (Gyrovirus).

 Distribución

Es una infección común de las aves, distribuida mundialmente, particularmente en parvadas comerciales y pollos de engorde. El virus puede infectar aves de todas las edades. Las infecciones son más severas cuando hay infección concomitante con virus de la enfermedad de la bolsa de Fabricio, adenovirus aviares o virus de la reticuloendoteliosis.

Transmisión

 Directa e indirecta por las rutas oral-fecal y respiratoria; también se da la transmisión vertical a través del huevo y el semen de los machos reproductores infectados. Las aves en postura infectadas de esta manera presentan viremia por un periodo de 1-3 semanas. Los pollitos nacidos de huevos infectados son virémicos y por lo tanto una fuente de infección.

 Patogénesis

La viremia que se desarrolla en pollitos infectados de un día conduce a infección de varios órganos y específicamente de las células T (linfocitos T) de la corteza del timo y de la bolsa, y de los hemocitoblastos de la médula ósea.

Características clínicas y patológicas

La enfermedad se manifiesta únicamente en pollos jóvenes entre la 2ªy 3 ª semana de vida. El virus está presente en muchos órganos y heces. A continuación se desarrolla inmuno supresión y anemia aplástica con atrofia del tejido linfoide. Los signos clínicos comienzan aproximadamente a las dos semanas de edad e incluyen anemia, diarrea, anorexia, depresión y pérdida de peso. Comúnmente la mortalidad es de alrededor de 10% pero puede ser tal alta como 50% si hay otra infección simultánea. Los anticuerpos maternos previenen el desarrollo de signos clínicos en el pollito. Con frecuencia las lesiones que se observan en la necropsia son hemorragias subcutáneas y musculares, órganos viscerales pálidos, apariencia grasosa anormal de la médula ósea y atrofia de timo. Las lesiones microscópicas se encuentran de manera consistente en la médula ósea, donde los eritrocitos y otras células son reemplazados por células grasas, y en el timo, donde hay de presión linfoide.

 Diagnóstico

Especímenes clínicos: todo el pollo, suero, los signos clínicos, las lesiones y la anemia aplástica sugieren infección por virus de la anemia aviar, el virus puede ser cultivado en células pero el aislamiento no es comúnmente factible para los laboratorios de diagnóstico, el diagnóstico definitivo depende de la detección del ADN viral en el timo o en la bolsa por PCR, hibridización de mancha o hibridización in situ. La detección de anticuerpos séricos es posible mediante procedimientos convencionales como ELISA. Hay estuches comerciales de ELISA disponibles y se usan para identificar y eliminar gallinas reproductoras positivas antes de la postura.

 Prevención Es difícil mantener las parvadas en postura libres de infección. Un procedimiento usado es la exposición deliberada de las ponedoras a tejidos infectados o gallinaza de parvadas positivas. Las pérdidas son minimizadas si las parvadas se mantienen libres de otros virus inmunosupresores.

Pueden usarse antibióticos para controlar infecciones bacterianas secundarias.  A parvadas de reproductoras serológicamente negativas se les administrara vacunas vivas por inyección o en el agua de bebida antes del inicio de la producción de huevo

Circovirus Porcino tipo 1 y 2

Distribución

Los Circovirus porcinos (PCV) son agentes infecciosos de origen vírico descubiertos hace 25 años, de muy fácil difusión que infectan de forma natural a la especie porcina. Hasta el momento se han caracterizado dos tipos distintos, el circovirus tipo I (PCV1), apatógeno para el cerdo, y circovirus tipo II (PCV2)

Transmisión.

El movimiento de animales entre explotaciones es con toda probabilidad la causa más importante de entrada del virus. El virus es muy estable en el ambiente, y puede ser vehiculado de forma mecánica a través de camiones, ropa, calzado, material y equipamiento, e incluso también probablemente roedores y pájaros.

Una vez presente en una explotación, la transmisión más probable es por contacto directo entre cerdos enfermos y sanos.Debido a las características particulares de este virus, no se puede descartar que la aparición de los síntomas clínicos y lesiones esté relacionada con otros factores como el estrés, y las propias características y condiciones inmunológicas del animal.

Características clínicas y patológicas

En infecciones naturales, El PCV2 infecta principalmente células de la línea monocito/macrófago, células dendríticas de los órganos linfoides, y células de origen epitelial (hepatocitos, epitelio renal, epitelio bronquial). Actualmente no existen datos concluyentes acerca de que PCV2 pueda infectar linfocitos. La diseminación inicial de PCV2 está probablemente ligada a la movilidad de las células infectadas, generalizándose la infección al sistema linfoide y a numerosos órganos. La presencia subsiguiente de virus en sangre, que puede durar meses, contribuye a la diseminación de PCV2. El virus ha sido aislado o detectado en tonsilas, timo, bazo, hígado, riñón, nódulos linfáticos, mucosa nasal, pulmón, intestino delgado, médula ósea, encéfalo y testículo.

Signos clínicos:Retrasos en el crecimiento Ictericia (cerdos pálidos), alteraciones respiratorias (neumonía, disnea), ocasionalmente diarreas, incremento de los casos del Síndrome de dermatitis y nefropatía porcina, aumento de patologías secundarias. Crisis nerviosa, incoordinación, temperatura de 40 a 42 grados.

Toma de muestras

Para el diagnostico de la enfermedad vírica en términos generales podemos requerir de suero, o exudados y de tejidos, con el fin de llevar a cabo pruebas serológicas, aislamiento de virus y estudios estructurales.

Diagnóstico de laboratorio

El diagnóstico de laboratorio de los circovirus porcinos se lleva a cabo principalmente por aislamiento vírico en células susceptibles, la detección del virus empleando técnicas de detección de antígenos virales (principalmente Inmunohistoquímica) y por la detección de anticuerpos específicos (ELISA).

TOGAVIRIDAE.

GENERALIDADES

La familia togaviridae comprende dos géneros: los alphavirus trasmitidos por picaduras de vectores artrópodos o arbovirus que comprenden los virus de las encefalomielitis del este del osete y Venezuela y los productores de artralgias humanas chikungunya O´ nyong-nyong, mayaro, ross river, sindbis y selva de semliki entre otros, y los rubivirus cuya especie tipo es el virus de la rubeola humana.

La primera epidemia de encefalitis equina que se tiene constancia documentada data de 1831, a lo en el que se produjo un brote en massachusets, en el que murieron 75 caballos. Desde entonces esta enfermedad causada por el virus de la encefalitis equina del este, ha sido descrita a lo largo de toda la costa atlántica de

Norteamérica. Una enfermedad similar, producida por el virus de la encefalitis equina del oeste, afecta frecuentemente a todo el oeste de Norteamérica.

Este virus fue aislado de cerebro de caballo, en el valle de san Joaquin de California por meyer et al. Estos investigadores apreciaron además el importante papel de los mosquitos en el ciclo de transmisión vírica, así como el riesgo de infección para el humano (en 1938 estos virus se aislaron en pacientes humanos que habitaban en la misma región que los caballos afectados). En 1936 se produjo una epidemia de encefalitis equina en Venezuela; el virus encontrado no era neutralizado y se llamó virus de la encefalitis equina venezolana.

Estos virus del este, del oeste y venezolana se agruparon dentro de la familia togaviridae, en el género alphavirus y el género rubivirus. Este último contiene un solo virus, el virus de la rubeola que infecta únicamente a los humanos.

Taxonomía y clasificación FAMILIA: TOGAVIRIDAE

GENERO:

i. ALFAVIRUSii. PESTIVIRUSiii. ARTERIVIRUSiv. RUBIVIRUSv. TOGAVIRUS ESPECIE:

i. VIRUS DE SINDBIS, VIRUS DE LA ENCEFALITIS EQUINA DEL ESTE, VIRUS DE LA ENCEFALITIS EQUINA DEL OESTE, VIRUS DE LA ENCEFALITIS EQUINA DEL ESTE, VIRUS DE LA ENCEFALITIS EQUINA VENEZOLANA, VIRUS GETAH, VIRUS J. HIGH-LANDS Y VIRUS DE SEMLIKI FOREST.

ii. VIRUS DE LA DIARREA VIRICA BOVINA, VIRUS DEL COLERA PORCINO Y EL VIRUS DE LA BORDER DISEASE PESTE PORCINA CLASICA.

iii. VIRUS DE LA ARTERITIS EQUINA.iv. VIRUS DE LA RUBEOLAv. VIRUS LACTICO DESHIDROGENADA Y EL VIRUS DE LA FIEBRE

HEMORRAGICA DE LOS SIMIOS.

Características físico-químicas

Son virones esféricos y envueltos de 60 a 80 nm. De diámetro. La capside de simetría icosaedrica contiene 240 copias de proteína C, posee espículas externas organizadas en 80 trimeros compuestos por dos glicoproteínas de tras membrana (E1 Y E2) y un poli péptido peri esférico (E3).

El genoma compuesto por ARN de cadena simple no segmentado y de polaridad positiva. Las proteínas E son responsables de la adsorción y penetración viral en el ciclo infectivo.

Debido a la composición lipoproteica de la envoltura los virones son estables a 4° C pero las partículas pierden infectividad tanto a los 56°C como a pH ácidos.

Estos virus no son muy estables en condiciones ambientales y son rápidamente inactivados por desinfectantes.

En habitads geográficos limitados en los que los mosquitos específicos y los hospedadores vertebrados desempeñan un papel importante para la sobrevivencia del virus, su extensión geográfica, distribución estacional y amplificación. Entre los hospedadores vertebrados que actúan como reservorio de los virus se incluyen pájaros y mamíferos; los animales domésticos y los hombres no participan normalmente en el ciclo primario de transmisión en la naturaleza, si bien pueden desempeñar un papel importante en los procesos de extensión y amplificación geográfica, causando epidemias.

Replicación viral

La replicación se realiza en el citosol de las células infectadas.

El ciclo de infección comienza con la adsorción de los virones mediante las glicoproteínas E a receptores celulares por el mecanismo de endocitosis y son transportados en vesículas recubiertas hasta los lisosomas, donde pierden sus cubiertas a pH bajo, liberando de ese modo su genoma en el citoplasma de la célula hospedadora. Los dos tercios del ARN genómico se traducen en un pequeño polipeptido y en una gran poli-proteína, la cual es fragmentada en cuatro proteínas no estructurales que forman en conjunto la ARN polimerasa dependiente de ARN. Esta enzima dirige la trascripción de todo el ARN negativo a partir del cual se producen dos tipos de ARN: el ARN genómico total de la progenie y un ARNm sub-genómico que corresponde al tercio del ARN genómico. Este último se traduce en otra poli-proteína que tiene actividad proteasa y que se fragmenta para dar lugar a las tres proteínas estructurales víricas: C, E1 y E2.

El ARN genómico y la nucleoproteína formaran nucleo-capsides icosaedricas en el citoplasma que, a su vez, migran a la membrana plasmática. Las proteínas estructurales de los peplomeros son glucosiladas paso a paso a medida que avanzan desde el RE; a la membrana plasmática pasando por el aparato de Golgi.

El ensamblaje del virion tiene lugar mediante la gemación de las nucleo-capsides a través de la membrana plasmática modificada por los peplomeros.

Inmunidad.

Existe respuesta de tipo humoral y celular. La igM específica se detecta por técnicas de ELISA o neutralización viral muy temprano los anticuerpos neutralizantes y hemaglutinantes de tipo igG aparecen entre los 10 y 14 días post-infección y duran meses. Los linfocitos T citotoxicos intervinientes secretan perforinas para aumentar la permeabilidad de las células infectadas lo que conlleva a la muerte de las mismas. También intervienen en las lisis de las células infectadas y las células NK.

PatogénesisEl modo primario de trasmisión a las aves y mamíferos es a través de la picadura de los mosquitos. Estos a su vez se infectan de un hospedador viremico y entre 4 y 10 días después el virus se localiza en las glándulas salivales y permanece persistentemente infectado. Posteriormente a la picadura el virus se introduce en los capilares y replica en el endotelio vascular y en lo monocitos para luego diseminarse por vía sanguínea y replicar en los músculos, articulaciones, piel o cerebro.

La viremia primaria resultante permite que el virus invada tejidos y órganos extracelulares específicos, dando lugar a una viremia secundaria con un título elevado, lo que permite la infección de los artrópodos vectores. La infección de los tejidos y órganos extraneurales puede producir directamente un proceso clínico. Por ejemplo la replicación del virus de la encefalitis equina venezolana en los tejidos reticuloendoteliales y tal vez en el musculo estriado y en el tejido conjuntico es probablemente la causa del proceso sistémico febril de los caballos y la replicación de virus de la fiebre amarilla en los hepatocitos es la causa de la enfermedad en el hombre. El musculo cardiaco, el epitelio pancreático, el tejido adiposo marrón y los tejidos linfoides son entre otros órganos y tejidos extraneurales importantes en la patogenia de esta familia viral.

Diagnóstico de laboratorio

El diagnostico presuntivo puede realizarse en base a los signos clínicos neurológicos coincidiendo con épocas calurosas.

Las técnicas recomendadas son la neutralización viral, la hemaglutinación, la inmunofluorecencia y la neutralización en placa.

Para el aislamiento viral se recomienda utilizar tejidos de sistema nervioso central o plasma de animales con pico febril, los cuales deben ser obtenidos en forma estéril y ser enviados y refrigerados si van a recibirse dentro de las 48 horas de extraídas

Las líneas celulares de mosquito también pueden utilizarse pero en ellas no se produce ECP marcado. Además, puede usarse hemo-adsorcion para determinar células infectadas. Para el relevamiento de mosquitos se puede emplear ELISA de captura o PCR, al igual que para confirmar sospecha o aislamiento positivo.

ENCEFALOMIELITIS EQUINA

La enfermedad está producida por tres virus antigénicamente distintos: los virus oeste, este y Venezuela. Los virus de la encefalomielitis del este oeste y Venezuela formaron parte del grupo A de clasificación original de los arbovirus. Los tres virus pueden diferenciarse y subtipificarse a su vez por la reactividad en distintas pruebas de la inhibición de la hemaglutinación, virus neutralización y anticuerpos monoclonales, así como también mediante secuenciación.

Estas son enfermedades de presentación estacional de climas templados o tropicales, que es principalmente cuando se brindan estas condiciones para la replicación viral y la población de mosquitos es elevado. El ciclo endémico de las encefalomielitis involucra la replicación en vectores como: mosquitos y reservorios como aves (este y oeste) y mamíferos roedores (Venezuela).

En periodos epidémicos epizoóticos pueden infectarse los hospedadores naturales equino y humano.

La infección de los caballos por los virus de la encefalitis equina del este, oeste y venezolana, producen unas manifestaciones clínicas diversas; la infección puede ser subclínica o puede tan solo dar lugar a fiebre, anorexia y depresión. El proceso

sistémico progresivo, que normalmente conduce a la muerte con signos neurológicos poco importantes, es más común en la encefalitis equina venezolana. En la encefalitis del este es más grave el proceso neurológico, caracterizado por una profunda depresión. En los caballos, la tasa de letalidad del virus de la encefalitis del oeste es del 20 al 40% y la del virus de la encefalitis venezolana es del 50 al 80%.

Epidemiologia

En Norteamérica este virus se mantienen en hábitats pantanosos de agua dulce mediante un mosquito vector enzonotico, Culiseta melanura. Este mosquito es responsable de la amplificación del virus mediante la transmisión entre aves silvestres, pero en algunas de ellas se produce una elevada viremia de varios días de duración, a partir de la cual se infectan los mosquitos. Sin embargo no está claro que especies de mosquitos transmiten el virus (virus de la encefalitis equina del este) a los hospedadores importantes clínicamente (caballo y hombre), porque Culiseta melanura se alimenta excesivamente de aves. En las costas de new jersey el mosquito Aedes sollicitans ha sido implicado porque se alimenta tanto de caballos como de aves, pero esta relación virus-vector no funciona en otras zonas.

En el oeste de lo estados unidos el virus de la encefalitis equina del oeste se transmite entre las aves así como a los caballos y el hombre a través de los mosquitos Culex pipiens, que pueden alcanzar altas densidades de población cuando las condiciones climáticas o los sistemas de irrigación son adecuados.

Virus de getah.Un brote de infección con el virus Getah ocurrió en caballos de carreras en Japón en 1978. La infección fue leve y caracterizada por fiebre, edema de los miembros posteriores y urticaria. La recuperación se dio sin contratiempos en siete días. El virus Getah ha sido aislado de mosquitos en Japón, el sur de Asia y Australia. Estudios serológicos indican que las infecciones ocurren en varias especies animales, incluyendo bovinos y especialmente cerdos. El virus ha sido incriminado como una causa de muerte fetal en cerdas infectadas. La transmisión se ha considerado que se da a través de mosquitos principalmente. El virus puede ser propagado en cultivos de células y en ratones inoculados intracerebralmente.

DIARREA VIRICA BOVINA

El virus de la BVD (BVD-V) es un Pestivirus que originalmente fue clasificado en la familia de los

Togaviridae, pero que debido a sus características moleculares se reclasificó dentro de la familia Flaviviridae. Es un virus de genoma ARN, pequeño con una envoltura lipoproteica que está estrechamente emparentado con el virus de la Enfermedad de Border de los ovinos y en un menor grado con el virus de la Peste Porcina Clásica.

El BVD-V puede infectar también de manera subclínica ovinos, caprinos, cerdos y otros rumiantes. Este virus también es un contaminante común de materiales biológicos, en especial líneas de cultivos celulares y sueros que se utilizan como promotores de crecimiento celular.

Hasta el presente se han caracterizado dos Genotipos de virus: genotipo 1 y genotipo 2. El primero está asociado a la enfermedad clásica BVD con sus diferentes presentaciones clínicas; en la naturaleza se aíslan dos Biotipos que se diferencian por su capacidad de producir efecto citopático en cultivos celulares: cepas citopáticas y cepas no citopáticas. Asimismo dentro de estos biotipos existen cepas antigénicamente homólogas y otras parcialmente heterólogas. El Genotipo 2 fue aislado por primera vez en 1992 y está asociado a cuadros agudos severos y hemorrágicos digestivos agudos en adultos. A este genotipo también se lo aísla de animales infectados persistentemente y de suero fetal.

EPIDEMIOLOGIA

El BVD-V posee dos estrategias de sobrevivencia en la naturaleza. La más frecuente, pero menos perfeccionada, es la infección permanente de animales susceptibles a través de una transmisión horizontal principalmente respiratoria. Los animales luego de ser infectados producen una viremia transitoria que dura entre 10 y 14 días. El virus se recupera en cantidades mucho menor que las excretadas por los IP, de las descargas nasales y otras excreciones y secreciones desde el 3 al 14 día post infección. Si bien concentraciones muy bajas de virus pueden seguir eliminándose luego de este período, la enfermedad es más difícil que se transmita.

Después de una infección natural los animales inmunorreactivos o inmunocompetentes son considerados refractarios a nuevas infecciones con una cepa homologa (antigénicamente similar). Sin

embargo, si estos contactan con una cepa heteróloga (antigénicamente distante) pueden volver a infectarse.

La segunda estrategia de sobrevivencia del virus en la naturaleza es induciendo la formación de animales infectados persistentemente (IP), para lo cual deben ser inmunotolerantes. Estos eliminan grandes concentraciones de virus por todas las excreciones y secreciones durante toda la vida. El número de animales IP que existe en los rodeos es determinado por la incidencia de la infección aguda entre los seronegativos en la preñez temprana y por la transmisión vertical de los animales IP entre ellos mismos. Los métodos de transmisión son vertical y horizontal. La vertical es de una generación a otra por lo tanto los animales IP pueden producir una transmisión vertical al igual que cuando se produce una infección aguda y se infecta el feto. La transmisión horizontal puede ser directa o indirecta. La directa es por contacto de animales susceptibles y virémicos transitorios o IP. También puede ser a través de semen contaminado. La transmisión indirecta puede producirse por insectos hematófagos o inadecuados manejos. La transmisión aerógena a cierta distancia es improbable, aunque en ambientes cerrados fue comprobada.

Border disease

La enfermedad de la frontera (EF) es una enfermedad vírica de las ovejas descrita por primera vez en 1959 en la región fronteriza entre Inglaterra y Gales. El virus se distribuye por todo el mundo. Las tasas de prevalencia varían en las ovejas del 5 al 50% entre países y de región en región dentro de cada uno de ellos. Entre los signos destacan la esterilidad de las ovejas, la aparición de abortos y nacidos muertos y el nacimiento de corderos débiles de menor tamaño. Los corderos afectados pueden mostrar temblores musculares, deficiente desarrollo corporal y vellones anormalmente peludos (a los corderos se les llama “temblorosos peludos” o “de lana rizada”) y a la enfermedad se le ha denominado “enfermedad de los corderos temblorosos peludos”. La transmisión vertical juega un papel importante en la epidemiología de la enfermedad. La infección de los fetos puede provocar el nacimiento de corderos con infección persistente (IP). Estos corderos IP son virémicos, anticuerpo-negativos y excretan los virus de manera constante. El virus se propaga de oveja a oveja, y los animales PI son la fuente más potente de infección. Las ovejas también se pueden infectar después de un contacto próximo con vacas que excreten el virus estrechamente relacionado de la diarrea vírica bovina (BVDV).

Peste porcina clásica PPC.

La peste porcina clásica (PPC) es una enfermedad viral de los cerdos, altamente contagiosa y de gran impacto económico. La gravedad de esta enfermedad varía con la cepa del virus, la edad del cerdo y el estado inmunitario de la manda de cerdos. Las infecciones agudas, causadas por cepas de alta virulencia y que presentan un alto índice de mortalidad, pueden diagnosticarse rápidamente. Sin embargo, es posible que las infecciones con cepas de menor virulencia sean más difíciles de reconocer, en particular en cerdos adultos. Estas infecciones pueden ser leves, y asemejarse a septicemias provocadas por otros agentes, al igual que a otras enfermedades. En algunas manadas, el único síntoma puede ser el bajo rendimiento reproductivo o la falla en el crecimiento, de algunos cerdos. El amplio rango de signos clínicos y la similitud con otras enfermedades pueden hacer que la peste porcina clásica sea difícil de diagnosticar. Aunque la PPC en una oportunidad se diseminó, muchos países han erradicado esta enfermedad de los cerdos domesticados. La reintroducción del virus puede ser devastadora. En 1997-1998, un brote en los Países Bajos se propagó a más de 400 piaras, y erradicarlo costó $2.3 mil millones. Se sacrificaron aproximadamente 12 millones de cerdos, algunos en el intento de erradicar la enfermedad, pero la mayoría por razones de salud pública asociada con la epidemia. En el 2000, el Reino Unido atravesó por un brote, y en el 2001, brotes menores se informaron en Rumania, Eslovaquia, España y Alemania.

Arteritis equina.

La arteritis viral equina (AVE) es una enfermedad viral de los équidos de gran importancia económica. Los sementales pueden convertirse en portadores a largo plazo del virus y transmitirlo durante el apareamiento. Aunque pueden reproducirse si se toman precauciones, la necesidad de aparearlos con yeguas seropositivas o vacunadas disminuye su conveniencia como reproductores. En algunos caballos se puede presentar una enfermedad aguda. Aunque las muertes son muy poco frecuentes en los adultos sanos, las

yeguas preñadas que se infectan pueden abortar y los potrillos muy jóvenes pueden morir de neumonía fulminante y enteritis. La prevalencia de arteritis viral equina ha aumentado recientemente, debido posiblemente al aumento en el transporte de caballos y semen.

Las cepas varían en su virulencia y potencial para inducir abortos. Se ha reconocido un solo serotipo. Los análisis genéticos limitados sugieren que las cepas del virus de la AVE que se encuentran en los burros de Sudáfrica pueden diferir significativamente de las cepas de Norteamérica y Europa. Especies afectadas El virus de la arteritis equina se encuentra en los équidos. Se ha informado acerca de la existencia de anticuerpos en caballos, ponis, burros y cebras. La enfermedad se presenta principalmente en caballos y ponis, aunque también se han informado signos clínicos en burros infectados en forma experimental. Es posible que el virus de la AVE también cause enfermedad en los camélidos de Sudamérica. Un PCR detectó ácidos nucleicos virales en una alpaca que había abortado.

ASFARVIRUS

1. Generalidades

El nombre de la familia asfaviridae deriva de las iniciales africanswinefever and releatedviruses y ha sido creada recientemente para incluir el agente de la peste porcina africana.

La peste porcina africana es una enfermedad exclusiva del ganado porcino muy contagiosa, de curo febril, evolución muy variable y lesiones cutáneas, ganglionares y viscerales de tipo congestivo y necrótico/hemorrágico.

La PPA ya fue descrita como enfermedad vírica distinta de la peste porcina clásica, aunque se conocía como contagiosa y mortal al menos desde la introducción de los cerdos europeos en 1910. Se estableció la transmisión por garrapatas del género ornithodoros desde los suidos salvajes africanos y la ineficacia de la inmunización pasiva en los cerdos afectados.

Aunque la PPA solo afecta a los suidos de la familia suidae, su virulencia y contagiosidad por cualquier vía en cerdos domésticos la hacen una de las plagas más peligrosas y temidas del ganado porcino.

2. Taxonomía y clasificación:

FAMILIA: ASFAVIRIDAE

GENERO: ASFAVIRUS

ESPECIE: VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA.

3. Características fisicoquímicas.

TAMAÑO: 200 NM

TIPO DE CAPSIDE: ICOSAEDRICA

ENVOLTURA: 200-215nm de diámetro

NATURALEZA DEL AC. NUCLEICO: ADNss.

TIPO DE AC NUCLEICO: ADN.

Ph:4 a 11,

Temperatura:56°c durante 60-70mn, 60°c durante 20mn, 4 a 20°c en años.

4. Replicación viral:

Este virus afecta naturalmente a células del sistema inmune, los monocitos-macrofagos, produciendo un fenómeno característico de hemoadsorcion antes de la destrucción de la célula infectada. También se ha observado replicación viral en las células endoteliales, hepatocitos, células epiteliales tubulares renales y neutrófilo. El VPPA se ha podido adaptar líneas celulares estables sobre las que produce efecto citopatico. Se fija a receptores de la célula hospedadora para la proteína de superficie p12, la entrada del virus en la célula tiene lugar por un mecanismo de endocitosis, regulada por la proteína p30 de capside, que se pierde al terminar el proceso. La síntesis de ARNm preexistente en la capside, y la cubierta del nucleoide, pero la replicación del ADN requiere su migración hasta la inmediaciones del núcleo celular y la expresión de los genes tempranos, que se trascribe desde ambas cadenas por un mecanismo de autocebado. Parte de los genes tempranos codifican las enzimas ADN polimerasa, timidina cinasa, ribonucleotido reductasa y ADN lipasa, siendo reprimidos una vez iniciada la replicación, probablemente codificando las proteínas funcionales no enzimática. La replicación inicia en un solo punto en el interior del núcleo, con el ADN genómico y continúan en el citoplasma sobre el ADN, dando lugar a complejos de hasta 100 moléculas de ADN.

Ensamblajes de los virones tiene lugar en zonas concretas de retículo endoplasmatico próximas al núcleo. La capside se forma

sobre la superficie externa de estas de estas membranas, que quedan incorporadas a la estructura como envoltura lipídicas internas. Que quedan incorporadas a la estructura como envoltura lipídicas internas. En su interior se forma consecutivamente en propio nucloide. Los viriones completos forman agregados pera cristalinos en los que se completa su maduración, y finalmente la membrana citoplasmática de la célula infectada forma microvellocidades, a través de los cuales los viriones adquieren la envoltura exterior mientras se van liberando por gemación.

5. inmunidad.

Se han descrito distintos mecanismos efectores celulares y humorales durante la infección de VPPA, pero todavía no se conoce cuál es su implicación en la protección frente a la infección.

Las respuestas humorales como celulares no parecen estar afectada, aunque los mecanismos de protección frente a cepas homologas virulentas siguen sin estar suficientemente aclarados. Se han identificado linfocitos CD8 procedentes de animales infectados, capaces de destruir macrofagos infectados de PPA, lo que sugiere que la inmunidad celular tampoco está afectada. Una de las razones por las que el virus escapa a la respuesta inmune puede ser que el genoma viral codifica varias proteínas que interfieren con las respuestas inmunes. La infección VPPA origina una respuesta de anticuerpos específicos de gran magnitud, que es fácilmente detectable por las técnicas de diagnóstico de laboratorio a partir del día 7 post-infección y los anticuerpos específicos duran mucho tiempo, estos anticuerpos no poseen capacidad de neutralización total del virus de la PPA.

6. patogénesis de la familia.

En cerdo es la única especie domestica que se infecta naturalmente por VPPA. Los jabalíes pero europeos y americanos son susceptibles a la infección, con síntomas clínicos y mortalidad similar a la observada en cerdos domésticos.

La administración de la enfermedad se realiza fundamentalmente por contacto directo con un animal enfermo o portador a un animal sano o también a través de restos de alimentos elaborados con carne fresca contaminada procedente de países endémicos afectados, que se utilizan para la alimentación del ganado. Los productos comerciales curados (jamón, lomo, etc.) o los tratados por calor no presentan virus activos.

La entrada del VPPA en el cerdo normalmente ocurre por vía oro nasal, aunque son también posibles otras rutas como la cutánea (por escarificación o picaduras de garrapatas), intramuscular, subcutánea, intravenosa. El periodo de incubación varia en un rango de 3 a 21 días, dependiendo del aislado, dosis de inoculación y ruta de exposición. La replicación primaria tiene lugar en los monocitos y macrófagos de los ganglios linfáticos más próximos al lugar de la entrada del virus. Los monocitos y los macrófagos de las tonsilas y de los ganglios linfáticos mandibulares son los primeros en afectarse si la infección es oral. Desde estos lugares los virus se diseminan por vías sanguíneas asociados a las membranas de los hematíes, y o por vías linfáticas.

La viremia comienza generalmente entre los 2-3 a 8 días pos infección y debido a la ausencia de anticuerpos neutralizantes, persisten durante mucho tiempo incluso durante meses.

Las principales células dianas del virus de la PPA son las células las pertenecientes al sistema mononuclear fagocítico que sufre un efecto cito patico.

7. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO.

En la actualidad se dispone de numerosos métodos para llevar a cabo tanto el diagnostico virológico como serológico.

Diagnostico virológico. Las técnicas más utilizadas para la detección del virus son la hemoadsorcion, la inmunofluorecencia directa y la PCR.

CULTIVO

El ASFV cultivado in vitro presenta un espectro restringido de sustratos celulares, incluso en histocultivos de origen porcino, el virus inyecta solo monocitos macrófagos, células endoteliales y parte de los Polimorfonucleares. La adaptación a sistemas celulares de otros orígenes no es fácil y puede requerir varios pases ciegos pero se ha logrado en líneas estables de origen porcino común PK15, y de primates, como vero, CV y MS (de riñón de mono).

En los cultivos celulares produce un claro efecto citopático, mostrando las células infectadas condensación cromatinica y

cariorrexis, con aparición de cuerpos de inclusión intracitoplasmaticos y, finalmente lisis.

HEMOADSORCIÓN:

La técnica de hemoadsorcion se basa en la capacidad de glóbulos rojos de determinada especie animal de unirse a proteínas virales que están siendo incorporadas en la membrana plasmática en las células infectadas, agregando glóbulos rojos a una mono capa infectada con virus es posible observar microscópicamente la adherencia de los mismos a células que contienen virus y que están expresando antígenos virales en su superficie.

Por medio de esta técnica, es posible demostrar la infección por aquellos virus que presentan proteínas hemaglutinantes.

INMUNOFLUORECENCIA DIRECTA:

Está basada en la detección de antígenos virales sobre cortes o improntas de tejidos mediante reacción con un conjugado fluorescente de PPA. Es un método sencillo, rápido y sensible, pudiendo también aplicarse sobre cultivos celulares infectados con macerados de órganos o tejidos de cerdos sospechosos. Cuando la infección es avanzada, la fluorescencia especifica puede presentar un aspecto granular.

PCR: (polymerase chain reaction)

La PCR consiste en una reacción enzimática mediante la cual se amplifica selectivamente una secuencia específica de ADN del VPPA presente en la muestra en relación a la de otras secuencias presentes en la misma mezcla de reacción.

Mediante el empleo de ésta técnica es posible en pocas horas ob-tener millones de copias de la secuencia en estudio a partir de unas pocas de copias dicha secuencia contenida en una muestra. Es-tas muestras pueden provenir de aislamientos en cultivos celulares infectados, así como también de muestras clínicas en donde no se conoce el titulo viral del cual se parte.

Diagnostico Serológico

Dado que no existe ninguna vacuna disponible contra el VPPA, la presencia de anticuerpos específicos frente al virus es indicativa de la enfermedad. En la actualidad la técnica más utilizada para la detención de anticuerpos de PPA son: La inmunofluorecencia indirecta, el ELISA indirecto y el inmunobloting.

Inmunofluorecencia indirecta una técnica rápida, que presenta una buena sensibilidad y especificidad, donde los anticuerpos específicos presentes en un suero o exudados se hacen reaccionar sobre un tapiz celular infectado con el virus. La reacción es visualizada gracias a la adición de proteína A marcada o de un segundo anticuerpo anti IgG de cerdos marcados con fluorescencia. En el caso de las muestras positivas sobre el tapiz celular se localizan fluorescencia en determinados puntos cercanos al núcleo que serán los centros replicativos del virus.

ELISA

Esta técnica se emplea actualmente utiliza un antígeno soluble que contiene la mayoría de la proteínas del virus. Este método posee una gran sensibilidad y especificidad, es sencillo, rápido y económico.

Inmunobloting

Es una técnica inmune-enzimática que utiliza como soporte antigénico filtros de nitrocelulosa, con proteínas virales previamente transferidas, sobre las cuales se hacen reaccionar el suero sospechoso, realizando la detención de anticuerpos específicos con proteína A-peroxidasa. La técnica permite determinar la reactividad de los anticuerpos presentes en el suero frente a distintas proteínas inducidas específicamente por el virus del PPA.

Remisión de muestras para el diagnostico

Para el diagnostico de VPPA deben remitirse muestras de tejido de vasos, riñón y ganglios enfáticos, así como sangre tomadas en las fases febriles, con anticoagulante (EDTA). Para las pruebas serológicas enviar suero de los animales sospechosos.

Así mismo es importante adjuntar una ficha de la historia clínica que debe colocarse en el exterior de la caja de envió de muestras de un sobre cerrado.

8. Enfermedades que produce.

La peste porcino africano, se considera como una enfermedad de gran poder de difusión y especial gravedad con consecuencia socioeconómico y sanitarias graves para los países afectados. La cepa africana del VPPA generalmente induce enfermedad híper aguda o aguda, mientras que los aislados europeos pueden inducir cuadros agudos-subagudos, crónicos o inaparentes. Los cerdos salvajes africanos son muy resistentes a la infección y generalmente no presentan lesiones.

9. Epidemiologia

La peste porcina africana

Es una enfermedad hemorrágica altamente contagiosa que afecta a los cerdos domésticos, jabalís verrugosos, jabalís europeos y jabalís americanos. Todos los grupos de edad son igualmente sensibles.

Con formas del virus de alta virulencia, la peste porcina africana se caracteriza por fiebre alta, pérdida de apetito, hemorragias de la piel y órganos internos, y muerte entre 2 y 10 días después en promedio. Las tasas de mortalidad pueden alcanzar el 100%.

El organismo causante es un virus ADN de la familia Asfarviridae.

La enfermedad es generalmente prevalente y endémica en los países del África Subsahariana. En el continente europeo, es endémica únicamente en Cerdeña (Italia). Fuera de África, han aparecido focos en Georgia en 2007 (la primera vez que se registra la enfermedad en esa parte de Europa) y en algunos países del Caribe

CONCLUSIONES

Se concluye en el siguiente trabajo la importancia de la virología y conocer todos aquellos virus que afecten a todos los animales de interés veterinario, siendo también zoonoticos y provocar enfermedades en los humanos. Un animal infectado por un virus puede enfermarse fácilmente y de no tratarse bien la enfermedad puede provocar la muerte, lo que representa una pérdida económica

si de animales de producción se refiere. También se concluye la importancia que tiene como estudiantes familiarizarnos con los virus y conocer todos los mecanismos de acción que poseen entrada, replicación viral y su salida y los efectos negativos que este provoca.

BIBLIOGRAFIAS