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USO DE PROBIÓTICOS BACILLUS SPP. EFICACIA SOBRE CRECIMIENTO Y SALUD DE LECHONES AL DESTETE Detlef Kampf 1 , Toon Elsen 2 , Luc Martens 2 , 1 Orffa Additives, Werkendam, Paises Bajos 2 PVL Bocholt, Bocholt, Bélgica Joni De Sutter 3 , Noriko Nakamura 4 , Dirk Fremaut 5 3 Orffa Additives, Bornem, Bélgica 4 Calpis, Paris, Francia 5 University College, Ghent, Bélgica

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2nutriNews Junio-Julio 2015 | Bacillus spp. uso en lechones al destete

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USO DE PROBIÓTICOS BACILLUS SPP. EFICACIA SOBRE CRECIMIENTOY SALUDDE LECHONES AL DESTETEDetlef Kampf1, Toon Elsen2, Luc Martens2, 1 Orffa Additives, Werkendam, Paises Bajos2 PVL Bocholt, Bocholt, Bélgica

Joni De Sutter3, Noriko Nakamura4, Dirk Fremaut5

3 Orffa Additives, Bornem, Bélgica4 Calpis, Paris, Francia5 University College, Ghent, Bélgica

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3nutriNews Junio-Julio 2015 | Bacillus spp. uso en lechones al destete

Los tratamientos antimicrobianos se han utilizado de manera habitual en cerdos para la prevención y el tratamiento de enfermedades

y su uso, en consecuencia, ha permitido mejorar parámetros productivos como son la ganancia media diaria y el índice de conversión (Barton 2000).

Pero, a pesar de sus efectos beneficiosos , la reciente preocupación por los residuos de medicamentos en los alimentos y la posible transferencia de resistencia de los antibióticos usados a los patógenos humanos ha abierto diversas discusiones para encontrar soluciones alternativas; tales como los probióticos.

Los probióticos son cultivos vivos de bacterias inofensivas o especies de levadura que equilibran la microflora intestinal en beneficio del animal (Fuller 1989).

Desafortunadamente los probióticos más conocidos no son capaces de sobrevivir a las tecnologías aplicadas en la producción de piensos, como por ejemplo, la administración de calor.

De este modo, una forma de subsanar estos problemas es el uso de los probióticos formadores de esporas , en particular del género Bacillus.

La mejora de los parámetros de producción gracias al uso de Bacillus spp. en la alimentación de los lechones se da a través de dos vías :

Consumo de oxígeno en el tracto digestivo

Producción de ciertas enzimas como la catalasa y la subtilisina, lo que se traduce en un ambiente adecuado para las bacterias beneficiosas, tales como Lactobacilos.

Los lactobacilos colonizan las membranas de las mucosas intestinales y bloquean los espacios de adhesión de los agentes patógenos, es decir, que actúan bajo un mecanismo conocido como exclusión competitiva.

Además, los lactobacilos producen ácido láctico que actúa contra patógenos tales como Salmonella, E. coli, Campylobacter y Clostridium (Hosoi et al. 2000).

En numerosos ensayos, se han dado resultados positivos en la reducción de estos patógenos cuando se adiciona Bacillus spp. (por ejemplo, Maruta y col.. 1996, Fritts y col. 2000, Ragione y Woodward 2003), así como en la mejora de rendimiento de los animales (por ejemplo, Kritas y col. 2010, Marubashi y col. 2012, Medel y col. 2009).

Por otro lado, las determinaciones de los efectos del calor en la granulación o la expansión sobre la capacidad de supervivencia de Bacillus subtilis fueron también descritos recientemente (Nollet 2005, Kampf 2012).

Los probióticos son cultivos vivos de bacterias inofensivas o especies de levadura que equilibran la microflora intestinal

Bacillus subtilis: probióticos formadores de esporas

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Instalaciones:

El ensayo se realizó en PVL Bocholt, Bélgica.

Animales:

Los lechones fueron alojados en tres instalaciones idénticas.

Todos los lotes fueron separados con cortinas de plástico para evitar la contaminación cruzada de las cepas similares del probiótico utilizado en la prueba.

Se utilizaron un total de 320 lechones repartidos de la siguiente forma en 3 repeticiones:

- 1er y 2º grupo con 120 lechones cada uno (4 tratamientos x 10 lechones x 3 corrales)

- 3er grupo con 80 lechones (4 tratamientos x 10 lechones x 2 corrales) por no disponer de más individuos.

La raza que se utilizó fue Topigs20 x Pietrain con 50% de hembras y 50% de machos.

Los animales fueron destetados aproximadamente el día 28 de edad ( con 7-8 kgs de peso vivo).

Duración:

El estudio duró 6 semanas llevando los animales hasta 25 kgs de peso vivo.

Dietas :

Se les administró pienso ad libitum con un dispensador por lote, agua ( sin ningún tipo de aditivos) con 1 bebedero de tetilla.

Las dietas suministradas fueron:

(A) dieta control basal sin ningún probiótico

(B) dieta basal + Bacillus subtilis y licheniformis a 12,8x105 UFC/g.

(C) dieta basal + Bacillus subtilis C-3102 (DSM 15544; nombre comercial Calsporin) a una dosis de 3x105 UFC/g.

y (D) dieta basal + Bacillus cereus var. toyoi a 10x105 UFC/g en pienso.

Las dosis de uso se corresponden a las indicadas por sus fabricantes.

Los animales recibieron dos tipos de piensos, uno durante el periodo de destete (del día 1 al 14) y otro pienso en el periodo de arranque (del día 14 al 42) con dietas basadas en cebada y trigo con un nivel de energía especificado por el pienso comercial utilizado.

Los detalles de la composición de la formula se detalla en la tabla 1.

La composición de los piensos fue la misma para todos los grupos de tratamiento, sin la inclusión de ningún tipo de aditivo con excepción del probiótico, objetivo del estudio.

Todos los piensos fueron fabricados en granulado (pellets de 4.8mm) con un mismo tratamiento térmico y se confirmó, posteriormente al tratamiento por calor, la estabilidad térmica de los probióticos adicionados.

Objetivo

Material & Métodos

El objetivo del presente estudio fue investigar el efecto de diferentes productos probióticos con Bacillus spp. sobre el crecimiento, el consumo diario de alimento, el índice de conversión, la consistencia fecal y la salud de los lechones al destete.

A su vez, también se investigó el efecto de la adición de probióticos en la composición microbiana de las heces.

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Todos los lechones fueron pesados:

El día después al destete (día de inicio de la prueba),

El día 14 día (final del periodo del destete e inicio del periodo de arranque)

El día 42 (último día de la prueba)

Además se realizó una evaluación diaria de los niveles de diarrea, durante el período de destete y semanalmente durante el período de arranque, utilizando la siguiente escala :

0 = diarrea en casi todos los animales con la medicación en general 1 = diarrea en algunos animales 2 = heces blandas 3 = heces normales 4 = heces sólidas

5 = heces muy duras

Los análisis fecales de la composición microbiana se hicieron al final de la prueba con un número mínimo de 2-3 muestras frescas de excrementos de lechones por corral para cuantificar la similitud de la morfología de las colonias de cepas probadas.

Todos los datos fueron analizados por varianza según procedimiento GLM de SAS.

Tabla 1: Composición de la dieta / Ingredientes de las dietas de destete y arranque

La catalasa y subtilisina que produce Bacillus

subtilis favorecen el crecimiento de lactobacilos

Composición (%) Dieta de destete Dieta de arranque

Cebada 35 35

Trigo 18,49 20,354

Maíz 5,5 6

Copos de maíz triturado 5 -

Salvado de trigo - 7,5

Soja tostada 17 20

Harina de soja, 49/3,5 5 2,3

Pulpa de remolacha, Su<10 1,5 -

Suero en polvo 5 2,5

Aceite de soja 1 -

Lisina-HCl 0,073 0,029

Metionina 0,094 0,061

Triptófano 0,090 0,074

Treonina 0,076 0,043

Valina 0,177 0,139

Premix Starter 6 6

Ingredientes (g/kg)

Proteína bruta 175 177

Lisina digestible 11,0 10,6

Met+Cys digestible 6,5 6,2

Treonina digestible 6,9 6,6

Triptófano digestible 2,4 2,3

Energía neta (MJ/kg) 10,05 9,71

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Durante la prueba no fue necesario ningún tratamiento medicamentoso y la mortalidad fue similar en todos los grupos (2-4 por tratamiento)

En la tabla 2 se muestran los resultados obtenidos para los parámetros zootécnicos.

1. Peso vivo (PV)

Después de 14 días de prueba, no se encontraron diferencias en peso vivo entre tratamientos, pero en el periodo total de la prueba:

Los lechones en el grupo alimentados con Bac.cereus mostraron una tendencia positiva en ganancia de peso respecto a los lechones en el grupo control (p<0,10)

Los lechones en el grupo con Bac.subtilis se dio un incremento numérico en contraste al grupo control (p>0,10)

Y en los lechones del grupo con Bac.subtilis+licheniformis no se observó ninguna mejora en peso vivo.

Tabla 2. Efecto de los diferentes probióticos Bacillus spp. sobre los siguientes parámetros : peso vivo, ganancia media diaria, consumo diario de pienso índice de conversión y consistencia fecal de heces de los lechones destetados (CF)

A,B: diferentes letras en la misma línea significan diferencias (P<0,10)

PV (peso vivo): 0 = al principio de la prueba, 14 = al día 14 de la prueba, 42 = al día 42 de la prueba

GMD (ganancia media diaria), CMP (consumo de pienso diario), IC (índice de conversión), CF (consistencia fecal): 0-14 = desde el inicio al día, resp.; 14-42 = del día 14 al final de la prueba, resp.; 0-42 = desde el inicio al final de la prueba, resp.

Control Bac. subt. + lich. Bac. subt. Bac. cere. SEM P =

PV0 kg 6,67 6,67 6,67 6,67 0,00 0,987

PV14 kg 8,53 8,65 8,51 8,74 0,11 0,152

PV42 kg 20,51A 20,68AB 21,17AB 21,23B 0,29 0,077

GMD0-14 g/día 133 140 131 148 8 0,146

GMD14-42 g/día 425A 428A 451B 442AB 9 0,052

GMD0-42 g/día 329A 333AB 345B 347B 6 0,059

CMP-14 g/día 214B 204A 206AB 212AB 4 0,078

CMP14-42 g/día 568 565 572 583 8 0,119

CMP0-42 g/día 450 445 450 459 6 0,101

IC0-14 kg/kg 1,70 1,52 1,69 1,51 0,12 0,247

IC14-42 kg/kg 1,33 1,32 1,27 1,32 0,03 0,109

IC0-42 kg/kg 1,36B 1,33AB 1,30A 1,32AB 0,02 0,079

CF0-14 - 3,06B 2,95A 3,02AB 2,97AB 0,04 0,041

CF14-42 - 3,01 3,00 3,01 3,04 0,03 0,387

CF0-42 - 3,04B 2,96A 3,02AB 2,99AB 0,03 0,059

360350340330320310300

ResultadosEl grupo alimentados con Bac.cereus mostraron

una tendencia positiva en ganancia de peso

Imagen microscopica Bacillus cereus

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Para recibir una mejor respuesta de los probióticos, las condiciones ambientales juegan

un papel importante, por lo que también, en condiciones más difíciles, pueden esperarse

efectos más significativos.

360350340330320310300

1,391,371,351,331,311,291,271,25

Control Control B. subtilis+ lichen.

B.subtilis+ lichen.

B.subtilis B.subtilisB. cereus B. cereus

329

1,36

3331,33

P=0.079P=0.059

P=0.092

345

1,30

347

1,32

g/díag/día

Ganancia Media Diaria Índice de conversión

Gráfico 1: Efecto de los diferentes probióticos Bacillus spp. en la ganancia media diaria (GMD) y el índice de conversión (IC) durante todo el periodo de la prueba (42 días)

En cualquier caso, para los tres tratamientos con probióticos no se dieron diferencias significativas.

2. Ganancia media de peso diaria (GMD)

Se dieron exactamente los mismos resultados por lo que se refiere a la Ganancia Media Diaria. No llegando a observarse diferencias significativas entre tratamientos. Y, en este caso, no se pudieron concretar los motivos por los que los resultados obtenidos fueron por debajo de los expectativas, así como tampoco las condiciones sanitarias.

3. Consumo de pienso – Índice de conversión (IC)

Con respecto al consumo de pienso, fueron medidos en todos los tratamientos en los que se administró probióticos, así como también se calcularon los índices de conversión correspondientes.

Medidos los resultados , durante toda la prueba, se observó que todos los tratamientos con probióticos tendieron numéricamente a obtener una mejora en el índice de conversión.

Como ejemplo, durante los primeros 14 días, la mayor mejora en conversión se mostró en el grupo de Bac.cereus y también fue así para todo el periodo, para los lechones del grupo Bac.subtilis con diferencias significativas respecto al control (0,06 puntos)

4. Consistencia fecal

Se recogieron las diferentes puntuaciones sobre la consistencia de las heces , como indicadores de las buenas condiciones sanitarias durante la prueba. Sin embargo, se observaron diferencias significativas entre el grupo control y el grupo del tratamiento con Bac. subtilis+licheniniformis. Estas diferencias se observaron tanto durante los primeros 14 días como para el periodo total de la prueba (alrededor de 0,1).

En el análisis fecal se confirmaron las cantidades de las cepas testadas para confirmar la correcta incorporación de los probióticos y evitar así una posible contaminación cruzada entre tratamientos.

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Conclusiones

Bacillus cereus Bacillus subtilis Bacillus Licheniformis

El uso de Bacillus spp. ha demostrado tener efectos positivos en la reducción de la presión patógena en el intestino de los lechones en numerosos estudios.

Este grupo de probióticos es capaz de sobrevivir el estrés por calor durante los procesos de granulación y expansión y a su vez son compatibles con otros productos adicionados tales como los ácidos orgánicos y los antibióticos terapéuticos, ampliamente utilizados en las dietas de lechones.

En el presente ensayo, la eficacia de probióticos de diferentes cepas Bacillus spp se pusieron a prueba para investigar el impacto sobre el crecimiento de los lechones al destete.

1 Durante todo el período de prueba, la ganancia media diaria pareció ser mejor para los animales en tratamiento con los diversos probióticos, y lo mismo ocurrió para el índice de conversión.

2 El peso corporal y la ganancia diaria de los lechones se incrementaron en los tratamientos con Bacillus cereus y Bacillus subtilis.

3 El índice de conversión se vio mejorado por el uso de Bacillus subtilis.

4 La puntuación fecal no se vio afectada por el uso de probióticos y la cuantificación de la morfología de las cepas utilizadas confirmó que la inclusión se realizó correctamente.

De los resultados obtenidos se puede concluir que los probióticos de cepas Bacillus spp. son capaces de mejorar el rendimiento zootécnico de los lechones al destete.

Las diferencias parcialmente significativas con respecto a los animales control lo demuestran, aunque no se produjeron diferencias significativas entre las 3 cepas ensayadas.