uso de pipetas

UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATOFACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOSINGENIERA BIOQUMICA LABORATORIO DE INGENIERA DE ENZIMAS

Docente: Ing. Cecilia Carpio Ayudante: Egdo. Juan Pablo PeafielNombre : Cristian Carvajal Semestre: 8vo U BioqumicaPrctica : 1

TEMA:

USO DE LA PIPETA. DETERMINACIN DE LA EXACTITUD Y PRECISIN

I.- INTRODUCCIN

La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas analticas.Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20, 200 y 1000 l, respectivamente.Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l), y las azules para pipetear volmenes grandes (por ejemplo, 800 l). (Equipos y laboratorios de Colombia, 2014)Precisin se refiere a la dispersin del conjunto de valores obtenidos de mediciones repetidas de una magnitud. Cuanto menor es la dispersin mayor la precisin. Una medida comn de la variabilidad es la desviacin estndar de las mediciones y la precisin se puede estimar como una funcin de ella. Es importante resaltar que la automatizacin de diferentes pruebas o tcnicas puede producir un aumento de la precisin. Esto se debe a que con dicha automatizacin, lo que logramos es una disminucin de los errores manuales o su correccin inmediata. No hay que confundir resolucin con precisin. (SKOOG, 2009)Exactitud se refiere a cun cerca del valor real se encuentra el valor medido. En trminos estadsticos, la exactitud est relacionada con el sesgo de una estimacin. Cuanto menor es el sesgo ms exacto es una estimacin. Cuando se expresa la exactitud de un resultado, se expresa mediante el error absoluto que es la diferencia entre el valor experimental y el valor verdadero. (PALLAS R, 2004)

III.- OBJETIVOS

General Determinar la precisin y la exactitud de cuatro micropipetas automtica.Especficos Establecer la importancia del uso correcto de la micropipeta. Verificar el funcionamiento correcto de la micropipeta.

IV.- MATERIALES

Pipeta automtica Puntas para pipeta Agua Balanza analtica con 0.0001 g de precisin Tubos de tapa rosca (bacteriolgicos) secos Vasos de precipitacin

V.- PROCEDIMIENTO

VI.- RESULTADOS

Tabla #1 Resultados ObtenidosVolumen (ml)G1 (g)G2 (g)Volumen (ml)G3 (g)G4 (g)

0,150,2840,1520,10,0970,274

0,290,1510,0980,274

0,2740,1490,0970,273

0,250,4220,2510,250,2340,4273

0,4230,250,2340,4201

0,4220,2530,2450,4215

0,50,6660,50,50,4880,6678

0,6650,4970,4920,6692

0,6680,4970,490,6632

10,9190,9840,750,7420,9351

0,9180,990,7470,9203

0,9180,9960,7290,9147

Elaborado por: Cristian Carvajal.Fuente: Laboratorio de Ing. de las Enzimas

1. Elaborar un grfico de barras para demostrar la variacin de los resultados que incluya barras de errorGRAFICO #1 Barras con error al 5% G1 y G2


GRAFICO #2 Barras con error al 5% G3 y G4


2. Determinar la exactitud y precisin del instrumento a lo largo de todo el rango de medidasClculo demostrativo para la exactitud

TABLA #2 Exactitud de las pipetasVolumenG1%G2%VolumenG3%G4%

0,150 mL11,0199,160,100 mL102,830

0,250 mL30,9199,430,250 mL104,6430,51

0,500 mL66,57100,230,500 mL101,8366,57

1,000 mL108,04100,831,000 mL125,97107,54

Elaborado por: Cristian Carvajal.Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones

Calculo demostrativo para la precisin

%TABLA #3 Precisin de las pipetasVolumenG1%G2%VolumenG3%G4%

0,150 mL0,8080,1530,100 mL0,0580,058

0,250 mL0,0580,1530,250 mL0,6350,379

0,500 mL0,1530,1730,500 mL0,2000,306

1 mL0,0580,6001 mL0,9291,082


3.- Elaborar los clculos estadsticos correspondiente para obtener la media, desviacin estndar, desviacin estndar relativa en relacin al promedio y expresarla en porcentajeMedia

TABLA #4 Media de los pesos

VolumenG1(g)G2(g)VolumenG3(g)G4(g)

0,150 mL0,2830,1510,100 mL0,0970,274

0,250 mL0,4220,2510,250 mL0,2380,423

0,500 mL0,6660,4980,500 mL0,4900,666

1,000 mL0,9180,9901,000 mL0,7390,923


Desviacin estndar

TABLA #5 Desviacin estndar de los pesos

VolumenG1G2VolumenG3G4

0,150 mL8,083E-031,528E-030,100 mL5,774E-045,774E-04

0,250 mL5,774E-041,528E-030,250 mL6,351E-033,786E-03

0,500 mL1,528E-031,732E-030,500 mL2,000E-033,055E-03

1,000 mL5,774E-046,000E-031,000 mL9,292E-031,082E-02


Desviacin estndar relativa en relacin al promedio (%)

2,856%TABLA #6 Desviacin estndar relativa

VolumenG1G2VolumenG3G4

0,150 mL2,8561,0120,100 mL0,5950,211

0,250 mL0,1370,6090,250 mL2,6680,895

0,500 mL0,2290,3480,500 mL0,4080,459

1 mL0,0630,6061 mL1,2571,172


4.- Realizar un anlisis R&RCon la ayuda del programa minitab, se tiene la siguiente informacin para un anlisis R&R

Fuente %Var. de estudio (%SV)R&R del sistema de medicin total 33,93Repetibilidad 17,36Reproducibilidad 29,15 grupo 23,00 grupo*volumen ml 17,91Parte a parte 94,07Variacin total

VII.- DISCUSIN En la presente prctica de laboratorio se pudo analizar y determinar la precisin y exactitud de diferentes micropipetas a volmenes determinados, puesto a la necesidad de que los mismos se encuentren totalmente calibrados y los datos que proporcionen sean con exactitud y precisin, en la Tabla #1 se encuentran detallados los pesos de cada una de las mediciones que posteriormente se utilizaron para determinar la exactitud y precisin del intrumento, en la Tabla #2 se observa la exactitud de cada instrumento expresado en porcentaje en donde el Grupo 2 y Grupo 3 se hallan en un rango aceptable, al contrario del Grupo 1 y Grupo 4, en la Tabla #3 se encuentra igualmente expresado en porcentaje la precisin en donde los datos se encuentran en un rango de 0 a 1 que indicara una precisin aceptable para todos los datos, en la Tabla #4 se encuentra expresada la media aritmtica para cada grupo de volmenes y en la Tabla #5 la desviacin estndar del mismo grupo de datos lo que indic que para la mayora de datos no existe una variacin significativa entre ellos, en la Tabla #6 se analiz la desviacin relativa y los mejores resultados se encontr en la micropipeta del Grupo 2.

VIII.- CONCLUSIONES

Se determin la precisin y la exactitud de las 4 micropipetas de cada grupo en donde despus de un anlisis exhaustivo en donde por medio de la desviacin estndar y la desviacin estndar relativa se concluy que la micropipeta del grupo nmero 2 es la que presentaba menor error al momento de utilizar. Se estableci la importancia del uso correcto de la micropipeta debido a que los volmenes pueden variar en cada medicin y esto en un futuro podra afectar al experimento que se est realizando debido que se utilizan medidas muy pequeas en donde los errores por experimentacin afectaran completamente la investigacin. Se verific el funcionamiento correcto de la micropipeta mediante el anlisis de la variacin que presentan los volmenes en cada medicin, para esto se utiliz la media, desviacin estndar y desviacin estndar relativa como medidas de tendencia central que permiten analizar la dispersin de los datosIX.- CUESTIONARIO

a) cul es la diferencia entre exactitud y precisin?Exactitud se refiere a que nuestros datos se encuentren ms cerca del valor que se requiere y la precisin es la que tan cerca se encuentran nuestros datos entre si independientemente que estos estn cerca o no del valor requerido.

b) Enumerar las principales fuentes de error en esta prueba Calibracin de la micropipeta. Factores ambientales. Manipulacin incorrecta del instrumento. Danos interno o externos de la micropipetas. Que fuera de la micropipeta se encuentren gotas del lquido.c) Qu significan las siglas R&R, Explicar de forma concisa en que consiste un anlisis R&R, y la razn o razones para realizarlo El Anlisis del sistema de medicin (MSA) es un componente clave para establecer, mejorar y mantener sistemas de calidad. El tipo ms comn de MSA es el estudio de repetibilidad y reproducibilidad (R&R) del sistema de medicin. La mayora de los estudios R&R del sistema de medicin evala los efectos de dos factores en la variacin de su sistema de medicin: por lo general, Operador y Parte. Sin embargo, los efectos de Operador y Parte suelen no ser suficientes para comprender plenamente el sistema de medicin. A menudo es necesario agregar una tercera variable (generalmente, Sistema de medicin) al estudio estndar (Minitab Inc, 2014).

X. - BIBLIOGRAFA

Equipos y laboratorios de Colombia, 2014 vease tambin en:http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/Skoog, Douglas A. (2009). Principios de Anlisis Instrumental (6 edicin). PARANINFO, S.A. p.965Ramon Palls Areny, (2004). Sensores y acondicionadores de seal 4Ed. Marcombo ISBN (978-84-267-1344-5)

Minitab Inc. 2014. Estudio R&R ampliado del sistema de medicin. Vase tambin en: http://www.minitab.com/es-mx/Published-Articles/C%C3%B3mo-dise%C3%B1ar,-analizar-e-interpretar-los-resultados-de-un-estudio-R-R-ampliado-del-sistema-de-medici%C3%B3n/. Fecha de consulta 13/10/2014

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