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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
INFORME DE INVESTIGACIÓN SOBRE:
“DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON EL
POLIMORFISMO DE CÉLULAS ROJAS EN PACIENTES
ALCOHOLICOS”
Requisito previo para optar por el Título de Licencianda en Laboratorio Clínico
Autora: Quispe Ramírez, Magaly Esther
Tutor: Lcda. Msc. Escobar Suárez, Mónica Tatiana
Ambato – Ecuador
Octubre, 2016
ii
APROBACIÓN DEL TUTOR
En mi calidad de Tutor del Trabajo de Investigación sobre el tema:
“DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON EL
POLIMORFISMO DE CÉLULAS ROJAS EN PACIENTES
ALCOHOLICOS” de Quispe Ramírez Magaly Esther estudiante de la Carrera de
Laboratorio Clínico, considero que reúne los requisitos y méritos suficientes para
ser sometido a la evaluación del jurado examinador designado por el H. Consejo
Directivo de la Facultad de Ciencias de la Salud.
Ambato, Junio del 2016
LA TUTORA
_____________________________
Lcda. Msc. Escobar Suárez, Mónica Tatiana
iii
AUTORÍA DEL TRABAJO DE GRADO
Los criterios emitidos en el Trabajo de Investigación “DETERMINACIÓN DE
VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON EL POLIMORFISMO DE
CÉLULAS ROJAS EN PACIENTES ALCOHOLICOS”, como también
contenidos, ideas, análisis y conclusiones son de mi exclusiva responsabilidad,
como autora de este trabajo de grado.
Ambato, Junio del 2016
LA AUTORA
________________________
Quispe Ramírez, Magaly Esther
iv
DERECHOS DE AUTOR
Autorizo a la Universidad Técnica de Ambato, para que haga de este proyecto de
investigación o parte de ella un documento disponible para su lectura, consulta y
procesos de investigación.
Cedo los derechos en línea patrimoniales de mi proyecto de investigación, con
fines de difusión pública; además apruebo la reproducción de este proyecto de
investigación, dentro de las regulaciones de la Universidad, siempre y cuando esta
reproducción no suponga una ganancia económica y se realice respetando mis
derechos de autora.
Ambato, Junio del 2016
LA AUTORA
_______________________
Quispe Ramírez, Magaly Esther
v
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL EXAMINADOR
Los miembros del Tribunal Examinador aprueban el Informe de Investigación,
sobre el “DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON
EL POLIMORFISMO DE CÉLULAS ROJAS EN PACIENTES
ALCOHOLICOS” de Quispe Ramírez Magaly Esther, estudiante de la Carrera
de Laboratorio Clínico.
Ambato, Octubre del 2016.
Para constancia firman:
……………………… ……………………… ………………………
PRESIDENTE/A 1er VOCAL 2do VOCAL
vi
DEDICATORIA
Este proyecto se lo dedico a Dios que con su bendición de darme vida, salud y
sobre todo la fuerza he logrado culminar con éxito mi Carrera.
A mis hermosos padres TEREZA e ISIDRO por su apoyo incondicional tanto
moral, económico, por enseñarme a luchar día a día por mis sueños, a valorar el
esfuerzo de cada uno de ellos, por ser lo que son unos padres responsables,
cariñosos y sobre todo rectos y rígidos frente a mis debilidades, que me enseñaron
a luchar por sobre todas las cosas, a ser fuerte frente a tantos obstáculos que se
nos presentaron y que a pesar de todo estoy aquí ya siendo una profesional como
ellos lo deseaban y yo quería ofrecérselos, este éxito se los dedico con todo mi
corazón a ellos, ya que sin su ayuda yo no sería nada, a ustedes mis padres
hermosos por tanto amor y dedicación este éxito no es mío si no de ustedes y para
ustedes.
A mis hermanos EDISON, BETTY, DIEGO, DANILO, KATERINE, ISIDRO Y
ERIKA, que con sus voces de aliento me impulsaron a seguir luchando para que
pueda cumplir con mi meta mi sueño tan anhelado, gracias por darme su amor, su
apoyo por brindarme su amistad y porque a pesar de todo estamos unidos y claro
que no somos una familia perfecta pero si la ideal que mis padres formaron.
A mis cuñados MILTON, NARCISA, ADRIANA, MARCO, que de una u otra
forma me ayudaron y supieron llegar con sus palabras de aliento para que hoy sea
una profesional.
Magaly Quispe
vii
AGRADECIMIENTO
A dos seres supremos llenos de muchas virtudes sin ningún defecto DIOS y la
VIRGEN por darme la vida para cumplir mi meta.
A mí amada Universidad que me abrió las puertas desde el principio sin esperar
nada a cambio tan solo mi esfuerzo y dedicación, y así formarme académicamente
, como también a mis diferentes docentes por impartir sus conocimientos con
migo y así formarme ahora como una profesional.
A mis amados padres, hermanos, cuñados por ayudarme y confiar en mi a cada
memento. También a Roberto que con su amor, confianza y apoyo me ayudo a
cumplir con mi meta.
A mi tutora Dra. Mg. Tatiana Escobar, por guiarme con su sabiduría y tenerme
paciencia para así terminar mi proyecto con éxito.
A las licenciadas Norma Álvarez, y Silvana Mena por brindarme su confianza y
ayudarme en los momentos más difíciles de mi vida ellas fueron un pilar
fundamental para que yo siguiera adelante con mi proyecto.
A mis amigas en especial a mi amiga Gabriela López, que con su amistad
incondicional supo ser parte de este logro.
Magaly Quispe
viii
ÍNDICE DE CONTENIDO
PÁGINAS PRELIMINARES
APROBACIÓN DEL TUTOR………....…………………………….………...ii
AUTORÍA DEL TRABAJO DE GRADO................ …………………………iii
DERECHOS DE AUTOR……………………………………………………..iv
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL EXAMINADOR.…………………...…….v
DEDICATORIA………………………………………………………………..vi
AGRADECIMIENTO………………………………………………………….vii
ÍNDICE DE CONTENIDOS…………………………………………………...viii
ÍNDICES DE TABLAS………………………………………………………...xi
ÍNDICE DE GRÁFICOS……………………………………………………….xii
ÍNDICE DE FOTOGRAFÍAS………………………………………………….xiii
ÍNDICE DE ANEXOS………………………………………………………….xiv
RESUMEN……………………………………………………………………...xv
SUMMARY…………………………………………………………………….xvii
INTRODUCCIÓN………………………………………………………………..1
CAPÍTULO I
EL PROBLEMA
1.1 TEMA……………………………..……….……………………… 3
1.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA…………………..……… 3
1.2.1 CONTEXTO…..…………………..………………………………. 3
1.2.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA..……………………….….. 5
ix
1.3
1.4
JUSTIFICACIÓN...……………………………………………….
OBJETIVOS……..………………………….…………………….
5
6
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.1 ESTADO DEL ARTE……………………..………………………. 8
2.2 FUNDAMENTO TEÓRICO.….………..........…………………….. 11
2.2.1 QUÍMICA SANGUÍNEA………………………………………….. 11
2.2.2 VITAMINAS…..…………………………………………………… 12
2.2.3 CLASIFICACIÓN DE LAS VITAMINAS.……………………….. 13
2.2.4 MANIFESTACIONES HEMATOLÓGICAS……………………... 26
2.2.5 VITAMINAS B12 Y SU RELACIÓN CON EL ALCOHOLISMO. 27
2.2.6 PATOLOGÍAS ASOCIADAS AL ALCOHOLISMO…………….. 27
2.2.7 ESTUDIO DEL ERITROCITO……………………………………. 37
2.2.8 ALTERACIONES DEL ERITROCITO…………………………… 41
2.2.9 ESTUDIO DE PLACA O EXTENSIÓN SANGUÍNEA………….. 45
2.3 HIPÓTESIS…………..………………….…….……………………
47
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
3.1 NIVEL DE INVESTIGACIÓN…..………..…..……………..……. 49
3.2 SELECCIÓN DEL ÁREA O ÁMBITO DE ESTUDIO……..……. 50
3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA..………………………………..……. 51
3.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓN…………………... 52
3.5 DISEÑO MUESTRAL……………………………………………... 52
3.6 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES..……………..……. 54
x
3.7 DESCRIPCIÓN DE LA INTERVENCIÓN Y
PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIÓN DE LA
INFORMACIÓN……………………………………………………
56
3.8 ASPECTOS ÉTICOS……………………………..………………... 69
CAPÍTULO IV
ANÁLISIS Y DISCUCIÓN DE RESULTADOS
4.1 TABULACIÓN DE RESULTADOS………………………………. 73
4.2 RESULTADOS DE LABORATORIO…………………………….. 81
4.12 VERIFICACIÓN DE LA HIPÓTESIS…………………………….. 84
CONCLUSIONES...……………………………………………………………
BIBLIOGRAFÍA……………………………………………………………….
ANEXOS………………………………………………………………………..
86
87
95
xi
ÍNDICE DE TABLAS
TABLA No. 1 VALORES DE REFERENCIA DE LOS ERITROCITOS……….. 41
TABLA No. 2 VALORES DE REFERENCIA DE VITAMINA B12…………… 68
TABLA No. 3 RESULTADOS…………………………………………………….. 73
TABLA No. 4 EDADES…………………………………………………………... 74
TABLA No. 5 GÉNERO…………………………………………………………… 76
TABLA No. 6 TIEMPO QUE ACUDE MOVIMIENTO INTERNACIONAL 24
HORAS ALCOHOLICOS ANÓNIMOS “GRUPO LATACUNGA”.
77
TABLA No. 7 TIEMPO DE CONSUMO DE ALCOHOL…………………………. 79
TABLA No. 8 CARÁCTERISTICAS CELULARES………………………………. 81
TABLA No. 9 VITAMINA B12………………………………………………….. 83
TABLA No. 10 CARÁCTERISTICAS DE LAS VITAMINAS 105
xii
ÍNDICE DE GRÁFICOS
GRÁFICO No. 1 EDADES…………………………………………………… 75
GRÁFICO No. 2 GÉNERO…………………………………………………… 76
GRÁFICO No. 3 TIEMPO QUE ACUDE MOVIMIENTO INTERNACIONAL
24 HORAS ALCOHOLICOS ANÓNIMOS “GRUPO
LATACUNGA”………………………………………………
78
GRÁFICO No. 4 TIEMPO DE CONSUMO DE ALCOHOL…………………... 79
GRÁFICO No. 5 CARÁCTERISTICAS CELULARES……………………… 81
GRÁFICO No. 6 VITAMINA B12…………………………………………… 83
xiii
ÍNDICE DE FOTOGRAFIAS
FIGURA No. 1 LUGAR DONDE SE TOMO LAS MUESTRAS PARA
SU POSTERIOR INVESTIGACIÓN…………………… 98
FIGURA No. 2 ENTREGA DE INFORMACIÓN HACIA LOS
PACIENTES DEL MOVIMIENTO……………………… 98
FIGURA No. 3,4 TOMA DE MUESTRAS MEDIANTE PUNCIÓN
VENOSA A LOS PACIENTES PARTICIPANTES DEL
MOVIMIENTO…………………………………………...
99
FIGURA No. 5,6,7,8 PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LA
REALIZACIÓN DEL FROTIS SANGUÍNEO…………..
100
FIGURA No. 9 OBSERVACIÓN DE LOS FROTIS SANGUÍNEOS
CON LA SUPERVICIÓN DE LA DR. TATIANA
ESCOBAR EN EL LABORATORIO DE LA
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO……………..
101
FIGURA No. 10,11 DESECHAMOS EL CONTENIDO Y REALIZAMOS
EL LAVADO ADICIONAL……………………………...
101
FIGURA No. 12,13 MUESTRAS Y EQUIPOS UTILIZADOS PARA LA
DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12……………….
102
FIGURA No. 14,15,16 INGRESO DE LA PRUEBA VITAMINA B12 AL
EQUIPO STAT FAX……………………………………..
102
FIGURA No.
17,18,19,20
AGITAR SUAVEMENTE, CUBRIR LOS POCILLOS Y
ESPERAR 45 MINUTOS……………………………… 103
FIGURA No. 21,22 ADICIÓN DE REACTIVO ENZIMATICO DE
VITAMINA B……………………………………………. 104
FIGURA No. 23,24 ADICIÓN DE SOLUCIÓN DE PARADA Y MEZCLA
DE 15 SEGUNDOS SUAVEMENTE, LECTURA
DESPUES DE LOS 30 MINUTOS………………………. 104
xiv
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO No. 1 PROCESAMIENTO DE LA TOMA DE MUESTRA EN
EL MOVIMIENTO INTERNACIONAL 24 HORAS
“GRUPO LATACUNGA” Y PROCESAMIENTO DE
LAS MUESTRAS EN EL LABORATORIO CLÍNICO
“ALVAREZ”……………………………………………….
98
ANEXO No. 2 CARÁCTERISTICAS DE LAS VITAMINAS…………… 104
ANEXO No. 3 FORMATOS DE RESULTADOS DE LABORATORIO… 106
ANEXO No. 4 AUTORIZACIÓN DEL LABORATORIO CLÍNICO
ALVAREZ PARA LA REALIZACIÓN DE LOS
ANÁLISIS DE VITAMINA B12 Y FROTIS
SANGUÍNEO……………………………………………… 107
ANEXO No. 5 OFICIO PARA PEDIR AUTORIZACIÓN PARA
REALIZAR E PROYECTO DE INVESTIGACIÓN EN
EL CENTRO DE ALCOHOLICOS ANONIMOS 24
HORAS GRUPA LATACUNGA…………………………. 108
ANEXO No. 6 VOLANTE INFORMATIVO ENTREGADO EN EL
CENTRO DE ALCOHOLICOS ANONIMOS 24 HORAS
GRUPA LATACUNGA…………………………………... 109
ANEXO No. 7 INSERTO UTILIZADO PARA LA DETERMINACIÓN
DE VITAMINA B12………………………………………. 110
ANEXO No. 8 AUTORIZACIÓN DEL CENTRO DE ALCOHOLICOS
ANONIMOS 24 HORAS GRUPO LATACUNGA……….
112
xv
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON EL
POLIMORFISMO EN CELULAS ROJAS EN PACIENTES
ALCOHOLICOS.
Autora: Quispe Ramírez Magaly Esther
Tutora: Escobar Suárez Mónica Tatiana
Fecha: Mayo del 2016
RESUMEN
La siguiente investigación se la realizó con el fin de determinar la vitamina B12
y relacionarla con el polimorfismo en células rojas, en pacientes alcohólicos que
acuden al Movimiento Internacional 24 horas “GRUPO LATACUNGA”
En el presente estudio se contó con la participación de 40 pacientes con
antecedentes alcohólicos de aproximadamente 7 a 12 años de consumo, también
de tratamientos que en muchos de los casos a dado resultado, estos acuden al
Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO
LATACUNGA” en un rango de tiempo de más o menos de 4 a 6 años, se realizó
la extracción sanguínea para el análisis de la determinación de vitamina B12 y
para realizar el frotis sanguíneo el cual me permitió evaluar el polimorfismo en las
células rojas o hematíes, y así cumplir con los objetivos planteados en la
xvi
investigación , teniendo como resultados en la vitamina B12 un 80% se
encuentran con los valores disminuidos, mientras que en el polimorfismo tuvimos
un 82.5% en lo que es la Macrocitosis y un 67,5% de hipersegmentación de los
neutrófilos, dando anotar lo que es característico en la anemia megaloblástica
causada por deficiencia de vitamina B12 en pacientes alcohólicos .
Se realizó la comprobación de hipótesis por medio de la prueba estadística t de
student para muestras independientes la cual dio como resultado el tener un
margen de error= 0,000 que es menor a 0,005 que es el nivel de significancia
rechazando así la hipótesis la nula y aceptando la alterna la cual menciona que los
niveles disminuidos de vitamina B12 en conjunto con el polimorfismo de células
rojas es decir macrocitosis e hipersegmentación de los neutrófilos, que suele
presentarse en anemia megaloblástica en pacientes con antecedentes alcohólicos.
PALABRAS CLAVES: VITAMINA_B12, POLIMORFISMO_CÉLULAS
ROJAS, HIPERSEGMENTACIÓN_NEUTROFILOS Y MACROCITOSIS.
xvii
TECHNICAL UNIVERSITY OF AMBATO
FACULTY OF SCIENCES OF THE HEALTH
CARRIER OF CLINICAL LABORATORY
“DETERMINATION OF VITAMIN B12 AND ITS RELATIONSHIP WITH
RED OR POLYMORPHISM IN CELLS IN PATIENTS ALCOHOLICS”
Author: Quispe Ramírez, Carmen Mercedes
Tutor: Escobar Suárez Mónica Tatiana
Date: May 2015
SUMMARY
The following research was made in order to determine vitamin B12 and relate
polymorphism in red cells, in alcoholic patients attending the International
Movement 24 Hours "GROUP LATACUNGA"
In the present study it had the participation of 40 patients with alcoholic history of
approximately 7 to 12 years of consumption, also of treatments that in many cases
as a result, they come to the International Movement 24 hours Alcoholics
Anonymous "GROUP LATACUNGA" in a time range of about 4 to 6 years,
blood sampling for analysis of the determination of vitamin B12 was performed
and to perform the blood smear which allowed me to evaluate polymorphism in
red cells or red blood cells, and and meet the objectives in research, with the
results in vitamin B12 80% are the values decreased, while the polymorphism had
a 82.5% what is the Macrocytosis and 67.5% of hypersegmentation neutrophils,
giving record what is characteristic megaloblastic anemia caused by vitamin B12
deficiency in alcoholic patients.
xviii
Hypothesis testing was performed using the statistical Student t-test for
independent samples which resulted in having a margin of error = 0.000 which is
less than 0.005 which is the level of significance thus rejecting the hypothesis null
and accepting AC which mentions that decreased levels of vitamin B12 in
conjunction with red cell polymorphism that is macrocytosis and
hypersegmentation neutrophil, usually seen in megaloblastic anemia in patients
with alcoholic history.
KEYWORDS: VITAMIN_B12, POLYMORPHISM_RED_CELLS,
NEUTROPHILS _ HYPERSEGMENTATION AND MACROCYTOSIS.
1
INTRODUCCIÓN
El alcoholismo es problema de salud bastante grande que afecta mucho tanto a
mujeres como a hombres debido a la gran demanda que existe de este producto,
las malas influencias a las que están expuestos los adolescentes sobre todo y
pacientes que recurren al alcohol debido a problemas familiares.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) denomina en la actualidad al
alcoholismo "síndrome de dependencia del alcohol" y está incluido en el capítulo
V de la Clasificación Internacional de Enfermedades No. 10 (CIE-10).
El alcoholismo forma a su vez parte de una categoría denominada "Trastornos
mentales y del comportamiento debidos al consumo de sustancias psicótropas".
Como el sitio oficial está en inglés vamos a citar una definición del
documento Cuestionario de Identificación de los Trastornos debidos al Consumo
de Alcohol (AUDIT), Organización Mundial de la Salud. “La dependencia es un
conjunto de fenómenos conductuales, cognitivos y fisiológicos que pueden
aparecer después del consumo repetido de alcohol. (1)
La presente investigación tiene como objetivo determinar la Vitamina B12 en
pacientes alcohólicos y su influencia con el polimorfismo en células rojas.
También es muy importante realizar la determinación de vitamina B12 y el
estudio morfológico de células rojas o hematíes para llegar a conocer como se
alteran estos valores en pacientes alcohólicos.
Se realizó la determinación de vitamina B12 y el estudio morfológico de células
rojas o hematíes en 40 pacientes con antecedentes alcohólicos, para observar
cómo se encuentran los niveles de esta vitamina y si existe o no polimorfismo en
células rojas, teniendo como resultado que en personas con antecedentes
2
alcohólicos de más de 4 años la vitamina B12 tiende a disminuir y el
polimorfismo de células rojas está presente con alteraciones como macrocitosis e
hipersegmentación de los neutrófilos, que es característico de anemia
megaloblástica.
3
CAPÍTULO I
EL PROBLEMA
1.1 TEMA
Determinación de Vitamina B12 y su relación con el Polimorfismo de Células
Rojas en Pacientes Alcohólicos.
1.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.2.1 CONTEXTO
De acuerdo a el ámbito social en que estamos viviendo hoy en día con la sociedad
ha surgido cambios tanto sociales como económicos llevando consigo una serie de
enfermedades y adicciones entre estas el alcoholismo que es un mal social no solo
en el Ecuador si no a nivel mundial, impidiendo así mantener una buena relación
ya sea familiar y con la sociedad en sí, este ha sido el causante en el año 2014
según los datos que INEC expresa, que alrededor de 9125 personas consumen
alcohol del porcentaje y la prevalencia resulta ser mayor en hombres 89.7% y en
el caso de las mujeres resaltan un 10.3% todos estos datos fueron recogidos
mediante encuestas realizadas a personas mayores de 17años.
En el Ecuador en el período 2010 CONSEP y la OMS, indican que los casos de
morbilidad en pacientes alcohólicos se ha sumado en un porcentaje de 19,56% del
total de la población de trastornos mentales y de comportamiento, debido al uso
de alcohol, síndrome de dependencia y de acuerdo a enfermedad hepática no
especifica, las cifras para el mismo año en morbilidad es de 4.79%, de un total de
4
2.138 muertes relacionadas al consumo de alcohol y drogas el 97.43% están
relacionada al consumo de alcohol.
En vista que el alcoholismo es un problema social la Organización Mundial de la
Salud (OMS) dice que en el país se han registrado 700 mil personas con el mal, de
estas el 30% no puede acudir a centros de rehabilitación y a hospitales para
realizarse estudios debido a la mala relación social que en si lo caracteriza a este
tipo de pacientes. (2)
A nivel de la provincia de Cotopaxi, la alta incidencia de anemia megaloblastica
en pacientes con antecedentes alcohólicos se atribuye a múltiples factores de
acuerdo a la naturaleza de su estudio, procedencia de los individuos y
características geográficas de esta zona.
En el 2007 la prevalencia de consumo de alcohol y entre ellas el tabaco
alcanzaron una cifra de 76,09%. INEC al realizar una encuesta determinaron que
la edad promedio de inicio de consumo de bebidas alcohólicas es desde los 13
años en adelante.
A nivel de la ciudad de Latacunga por encuestas realizadas a la ciudadanía se
conoce que el alcoholismo es común, en adolescentes y adultos mayores debido al
alto grado de demanda alcohólica. Se estima que más del 30% de los habitantes de
la ciudad de Latacunga viven con dependencia en el alcohol. La prevalencia del
alcoholismo en los habitantes de esta ciudad llegaría a ser tan alta como del 50%
especialmente en adolescentes y adultos mayores, debido a la mala influencia en
los adolescentes o debido a problemas familiares, los adultos recurren al alcohol
debido a la soledad. (3)
En cuanto se refiere al Movimiento Internacional de Alcohólicos Anónimos 24
horas “GRUPO LATACUNGA”, su compromiso es ayudar a las personas que
5
tienen problemas con el alcohol y las drogas las 24 horas del día, en su totalidad
son 100 pacientes alcohólicos en busca de ayuda psicológica, sin tratamiento
farmacológico alguno.
1.2.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
¿Qué relación existe en la determinación de la Vitamina B12 en pacientes
alcohólicos con el polimorfismo en células rojas?
1.3 JUSTIFICACIÓN
El déficit de vitamina B12 es frecuente, especialmente en pacientes con
antecedentes alcohólicos, en nuestro ámbito existe una gran demanda de
enfermedades entre ellas la anemia megaloblástica, que es asociada a un
polimorfismo en los eritrocitos, e hipersegmentación en los neutrófilos, los cuales
son parámetros característicos de esta enfermedad, en los pacientes que acuden al
Movimiento Internacional de Alcohólicos Anónimos 24 horas “GRUPO
LATACUNGA” realicé exámenes tales como la determinación de Vitamina B12
y el estudio morfologico de las celulas rojas o hematies mediante estudio de placa,
para relacionarlo así obtenido ya los resultados de los análisis, y evidenciar así
esta realidad que aqueja esta población.
La importancia que tiene el presente estudio es crear un programa de tamizaje de
anemia megaloblástica el cual nos ayudará a la detención de la misma y así buscar
una solución.
El desarrollo de la presente investigación es factible debido a que el Movimiento
Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA” nos
6
dio la apertura para desarrollar este proyecto de investigación además de que se
cuenta con los recursos, materiales, económicos y humanos necesarios que
necesito para la realización de este proyecto.
Es factible señalar que con esta investigación se beneficiaría a la conservación de
la salud de los pacientes que acuden al centro ya antes mencionado.
1.4 OBJETIVOS
1.4.1 OBJETIVO GENERAL
- Determinar la Vitamina B12 sérica en pacientes alcohólicos y su relación
con el polimorfismo en células rojas.
1.4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
- Identificar las alteraciones más frecuentes en la fórmula hemática de
pacientes alcohólicos, evaluando la prevalencia de polimorfismo en los
eritrocitos, mediante la observación morfologica de las celulas rojas o
hematies con el estudio de placa.
- Relacionar el tiempo de alcoholismo con la aparición de alteraciones en la
fórmula hemática, determinando la prevalencia de un déficit de vitamina
B12 en pacientes alcohólicos que acuden al Movimiento Internacional 24
horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”.
7
- Analizar si el polimorfismo de células rojas se relaciona con los valores
de la Vitamina B12, desarrollando un programa de tamizaje de anemia
megaloblástica en el Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos
Anónimos “GRUPO LATACUNGA”.
8
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.1 ESTADO DEL ARTE
El trabajo realizado por Thomas Addison, titulada, HISTORIA DE ANEMIA
MEGALOBLASTICA, comienza en 1855 a principios del siglo XX, la anemia
megaloblástica atrajo la atención de algunos médicos de Boston. En 1908,
Richard Cabot informaba que la duración de la supervivencia entre 1.200
pacientes era de 1 a 3 años después de la aparición de la sintomatología. Francis
Weld Peabody y George Richards Minot compartieron una profunda apreciación
de la importancia de la morfología celular en el diagnóstico y seguimiento del
trastorno. Observaciones de Peabody en biopsias de médula ósea de pacientes con
la anemia llevaron a la conclusión que la producción de glóbulos rojos era
desordenada e ineficaz. George Whipple de la Universidad de Rochester había
explorado el efecto de la dieta sobre la regeneración de las células rojas en perros
después de la flebotomía periódica. Estos experimentos condujeron a Peabody y
Minot a iniciar de forma independiente ensayos dietéticos en tales enfermos.
Minot unió fuerzas con William Murphy en el Hospital Peter BentBrigham. Los
dos eran extraordinariamente detallistas, tanto en la clínica como en el laboratorio.
Los resultados de Whipple en perros sugirieron que el hígado debería ser el
componente clave del régimen alimenticio. En 1926, Minot y Murphy informaban
de sus conclusiones en 45 personas con anemia megaloblastica que habían sido
tratadas con una "dieta especial" consistente en hígado braseado (casi crudo),
junto con carne de res o de cordero y fruta fresca. Al final de la primera semana
9
de tratamiento, un aumento notable en el número de nuevos glóbulos rojos
(reticulocitos) estuvo acompañado con una mejora en el bienestar.
Luego, demostró que la administración intragástrica de jugo gástrico normal y
carne de músculo era efectiva sólo si se daba dentro de un período de 12 horas.
Posteriores análisis de Castle y otros investigadores mostraron que el factor
intrínseco en el jugo estomacal era una proteína necesaria para la absorción de
pequeñas cantidades de vitamina B12 en el intestino delgado distal. (4)
Según el estudio realizado en Santiago de Chile en Noviembre del 2012, por los
autores. Alex Brito, Eva Hertrampf, Manuel Olivares, Diego Gaitán, Hugo
Sánchez, Lindsay H. Allen, Ricardo Uauy, titulado FOLATOS Y VITAMINA
B12 EN SALUD HUMANA, la vitamina B12 la podemos encontrar de manera
natural en alimentos de origen animal, los cuales incorporan esta vitamina en sus
tejidos, huevos y leche se estima que el aporte de vitamina B12 al día es de 5-7 ug
teniendo una buena dieta el aporte de vitamina B12 es de 50%, por tanto los
análisis realizados por este grupo de investigadores señalan que la ingesta
dietética de vitamina B12 es de 2.9 – 1.2 ug/día alcanzándose la ingesta media
recomendada en tan solo 66 % de adultos mayores en Santiago de Chile.
La deficiencia de estas vitaminas los han definido de acuerdo a los signos y
síntomas, obteniendo los resultados séricos de cada una de estas vitaminas en
definitiva la deficiencia clínica de vitamina B12 es la presencia de anemia
megaloblástica, y la deficiencia de folatos es la ausencia anemia megaloblástica.
Chile después de la intervención de la deficiencia de folatos es demostró que
existen menor a 1% en grupos de edad distinta, la deficiencia de vitamina B12
oscila entre 8.5 y 51 %. La encuesta nacional de salud 2010 mostro que la
deficiencia de folatos < 12 nmolI/L y de vitamina B12 < 148 pmoI/L en sujetos
10
menores de 60 años era de 0.6 % y 8.5 % equitativamente. Ya que en el mundo
existen pocas encuestas nacionales de estas vitaminas. (5)
En otro estudio sobre MACROCITOSIS: CAUSAS, DIAGNÓSTICO
DIFERENCIAL, realizado por Elsa Mercedes Nucifora 1, Nora Basack enuncia
que las anemias macrocíticas tienen en común que los eritrocitos son más grandes
que de lo normal, producto de la deficiencia de la vitamina B12, como también
otras anemias macrocíticas de etiologías variadas como el alcoholismo, fármacos,
hipotiroidismo y enfermedades hepáticas, en este estudio se comprobó que
estadísticamente un 3% de la población general adulta presenta macrocitosis, en
una revisión etiológica de macrocitosis en pacientes de 6-12 años fue la ingesta de
medicamentos, cuando se observa en el frotis sanguíneo macro-ovalocitosis e
hipersegmentación neutrófila es directamente relacionada a la deficiencia de
vitamina B12.
El alcohol es una de las causas relacionadas a la macrocitosis, asociada
fuertemente con la desnutrición y enfermedad hepática, en donde la anemia es un
factor pronóstico adverso en paciente con enfermedades hepáticas y alto consumo
de alcohol asociada a la mortalidad la anemia macrocítica causada por el consumo
excesivo de alcohol presenta en la medula ósea sideroblatos en anillo, los
investigadores han comprobado dos mecanismos por las que el alcohol produce
anemia macrocítica, la primera es la megaloblastocis y el efecto tóxico directo que
este ocasiona sobre los precursores eritroides, hay que tomar en cuenta que todos
estos son reversibles con la supresión del tóxico y la administración de folatos. (6)
En otro estudio realizado por el autor Conde, Dra. Alicia enuncian en su
investigación titulada como VITAMINA B12 que la vitamina b12 fue
descubierta hace 60 años, la cual no tiene bien definido sus características tanto
fisiológicas como neurológicas no han sido bien definidos. (7)
11
La definición dada por los autores Ortiz María en el año 2011 en el mes de
noviembre dicen que la vitamina es la más grande es llamada también
cobalamina ya que en su estructura química contiene un átomo de cobalto siendo
que es la única vitamina que presenta esta característica, presenta un peso
molecular de 1.335 Da, es muy importante ya que ayuda a múltiples funciones en
nuestro organismo. (8)
2.2 FUNDAMENTO TEÒRICO
2. 2.1 QUÍMICA SANGUINEA
El laboratorio clínico es un área muy amplia y además fundamental, ya que cada
uno de sus resultados en los exámenes ayudan al médico a diagnosticar
enfermedades para posteriormente proporcionar tratamientos oportunos, entre
estos, mide el azúcar en la sangre realizando una glucosa, electrolitos como sodio,
potasio, cloro, también enzimas como las del perfil hepático, los lípidos
conocidos como grasas, proteínas como la albumina, entre otras sustancias
metabólicas como el ácido úrico, la creatinina (9) (10)
Según X. Fuentes deduce que la química clínica es la rama que engloba por
completo al laboratorio clínico por qué se dedica al estudio in vitro in vivo de las
propiedades bioquímicas, con el fin de ayudar a prevenir, ayudar al diagnóstico y
un pronóstico en los tratamiento de las enfermedades, por lo tanto el analista es el
responsable de tomar las muestras correctamente, para su posterior análisis,
validación e interpretación de resultados. (11)
12
2.2.2 VITAMINAS
Son sustancias que el cuerpo necesita para cumplir con varias funciones como el
crecimiento y desarrollo normal de todo nuestro organismo.
La mejor manera de obtener vitaminas es consumiendo alimentos sanos y
diversos. Existen un sinnúmero de vitaminas que se las puede adquirir a través de
los alimentos como la A,B,C,D,E y las que son producidas por nuestro mismo
cuerpo como la D y K. cada una de las vitaminas cumplen una función específica
en nuestro cuerpo como por ejemplo la vitamina D ayuda a prevenir el raquitismo,
la vitamina A, previene la ceguera, es por eso que para evitar cualquier
enfermedad lo recomendable es consumir alimentos con una dieta balanceada para
el buen funcionamiento de nuestro organismo. (12)
Las vitaminas provienen del latín vita que significa “vida” y del griego
“ammoniakós” producto libio, amoniaco con el sufijo latino ina que significa
“sustancia” los cuales son compuestos heterogéneos muy importantes para la vida
que ingiriéndolos en porciones adecuadas y equilibradas originan el buen
funcionamiento fisiológico de nuestro cuerpo, existen vitaminas que no pueden
ser sintetizadas fácilmente por nuestro organismo. Las vitaminas con nutrientes
que junto con otros mecanismos nutricionales actúan como catalizadores de todos
los procesos fisiológicos directa o indirectamente. Las vitaminas son precursoras
de las coenzimas, lo cual la molécula de las vitaminas con un pequeño cambio en
su estructura pasa a ser la molécula activa sea esta una coenzima o no. Nuestro
cuerpo para su buen funcionamiento necesita tan solo dosis pequeñas de
vitaminas, ya que tanto el déficit como el exceso de vitaminas corporales pueden
producir enfermedades. El déficit de vitaminas se la conoce como “avitaminosis”
y el exceso se denomina “hipervitaminosis”
13
Está demostrado que las vitaminas del grupo B son imprescindibles para el
correcto funcionamiento del cerebro y el metabolismo corporal. Este grupo es
hidrosoluble (solubles en agua) debido a esto son eliminadas principalmente por
la orina, lo cual hace que sea necesaria la ingesta diaria y constante de todas las
vitaminas del complejo “B” (contenidas en los alimentos naturales). (13)
2.2.3 CLASIFICACIÓN DE LAS VITAMINAS
Las vitaminas se clasifican según su solubilidad, hidrosolubles e liposolubles.
Nuestro cuerpo cuenta con alrededor de 13 vitaminas que están clasificados
según su grupo tenemos 9 hidrosolubles entre estas 8 del complejo B y la
vitamina C y 4 liposolubles A, D, E, K.
VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Las vitaminas liposolubles son consumidas con los alimentos que contienen grasa,
ya que son las que se encargan de disolver las grasas y los aceites de nuestro
organismo, las cuales se encuentran almacenadas en el hígado y en los tejidos
grasos, por lo mismo ya que se encuentran almacenadas en la grasa pueden seguir
consumiéndose como nuestra reserva vitamínica cuando no se ha consumido un
aporte suficiente diario, ya que el consumo exagerado de las vitaminas puede
ocasionar una intoxicación.
Las vitaminas liposolubles son:
Vitamina A (retinolftalina)
Vitamina D (calciferol)
Vitamina E (tocoferol)
14
Vitamina K (antihemorrágica)
Su característica principal es la de no contener nitrógeno, otras característica
como transportarse a través de las grasas de los alimentos, son muy estables frente
al calor, se absorben en el intestino delgado con la grasa alimentaria, no es
excretada por la orina.
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Estas vitaminas son aquellas que se disuelven en el agua, son coenzimas que están
involucradas en muchas reacciones químicas del metabolismo.
Las vitaminas hidrosolubles son:
B1 (tiamina), B2 (riboflavina) , B3 (niacina o ácido nicotínico), B5 (ácido
pantoténico), B6 (piridoxina), B7/B8 (biotina), B9 (ácido fólico). B12
(cobalamina) y Vitamina C (ácido ascórbico).
Las características:
No contienen nitrógeno en su molécula (menos la vitamina C).
No se almacenan en el organismo ( a excepción de la vitamina B12 )
La vitamina B12 se almacena en el hígado.
Estas vitaminas consumidas en exceso si se excretan por la orina.
Las vitaminas, son muy importantes para cumplir con los procesos metabólicos
de nuestro cuerpo, las vitaminas sin embargo no aportan energía, no se utilizan
15
como combustible, pero sin las vitaminas nuestro cuerpo sería incapaz de
aprovechar los elementos constructivos y energéticos suministrados por la
alimentación.
Las vitaminas son utilizadas normalmente por nuestras células como antecesoras
de coenzimas, dando lugar a un sin número de enzimas que se encargan de regular
las reacciones químicas por las cuales viven las células. Ayudando a convertir los
alimentos en energía, las necesidades vitamínicas van cambiando de acuerdo a la
edad la actividad que tenga el ser humano. Las vitaminas se adquieren a través de
la alimentación, nuestro cuerpo solo no puede sintetizarlas como lo hace con la
vitamina D que se la puede adquirir con la exposición al sol o las vitaminas,
generalmente las vitaminas K, B1, B12 están presentes en pequeñas cantidades en
nuestra flora intestinal. (14)
VITAMINA A
Es también llamada Retinol o antixeoftálmica, esta vitamina se la encuentra en los
alimentos de origen animal , en el hígado en grandes cantidades y en el tejido
graso de la piel también se almacena en las palmas d las manos y pies es por eso
que podemos durar un tiempo prudente sin su consumo, ya que es una sustancia
antioxidante por que eliminan radicales libres para proteger al ADN de su acción
mutágena y prevenir el envejecimiento celular, por lo cual su función principal es
la formación y sostenimiento de la piel, membranas mucosas, dientes y huesos,
además participa en la producción de enzimas en el hígado y de hormonas
sexuales y suprarrenales, hay que tomar mucho en cuenta que la deficiencia de
esta vitamina ocasiona ceguera, y el exceso trastornos óseos por ende interfiere en
el crecimiento, detiene la menstruación y produce alteraciones en los glóbulos
rojos.
16
Las fuentes en donde se las puede encontrar esta vitamina. Yema delos huevos
pero sin exceso, aceite de soya, mantequilla, zanahoria, espinacas, hígado, leche,
queso, tomate, lechuga. (15)
VITAMINA C
También llamado.- Ácido ascórbico o vitamina antiescorbútica esta es necesaria
para la producción de colágeno ya que se trata de una proteína muy importante
que ayuda a la cicatrización de heridas , repara las encías, vasos, huesos y dientes,
y metabolizan las grasas la cual tiene mucha eficacia para reducir el colesterol, es
por eso que el consumo de esta vitamina es muy importante ya que une a las
células para formar tejidos el aporte de esta vitamina en las frutas y verduras
serán muchos más si se las consume frescas no muy maduras las frutas y las
verduras sin mucha cocción ya que esta vitamina se destruye al calor. Cuando la
vitamina es deficiente produce escorbuto.
Las principales fuentes en donde está presente esta vitamina son: la leche de vaca,
hortalizas, verduras, cereales, carne, frutas, cítricos. (16)
VITAMINA D
Llamada también calciferol o antirraquítica, es encargada de proporcionar energía
al intestino para permitir la absorción de nutrientes como son el calcio y las
proteínas, es importante porque protege los dientes y los huesos. Se la adquiere a
través de provitaminas de origen animal que se dan lugar al exponernos al sol, un
déficit de esta vitamina ocasiona en los niños malas formaciones óseas, caries
dental, y hasta raquitismo , pero en los adultos pueden ocasionar osteoporosis.
17
Las fuentes en donde se las puede encontrar a esta vitamina son en la leche, yema
de huevo, sardina, atún, queso, hígado y cereales.
VITAMINA E
Es también llamada tocoferol o restauradora de la fertilidad, esta vitamina es muy
importante porque se encarga de la formación de los glóbulos rojos, músculos y
otros tejidos, es importante y necesita para la formación de células sexuales
masculinas y en la anti esterilización. La función más importante que esta
desempeña es la de participar como un antioxidante evitando el envejecimiento de
las células, gracias a que la vitamina E actúa como antioxidante ayuda a que el
pulmón no se contamine aporta con oxígeno al organismo y retarda el
envejecimiento celular manteniendo joven al cuerpo, interviene en la
cicatrización de quemaduras, evita los abortos espontáneos y calambres en las
piernas. Si la vitamina es deficiente ocasiona distrofia muscular, infertilidad y
anemia.
Fuentes en donde se la puede encontrar. Chocolates,legumbres, verduras, leche
etc.
VITAMINA K
Llamada también antihemorrágica o Filoquinona, esta vitamina participa con el
metabolismo como coenzima formando así parte de una proteína llamada
protrombina ya que esta es la proteína que participa en la coagulación sanguínea.
El déficit de esta vitamina ocasiona, lesión cerebral en niños, anemia en adultos y
hemorragias incontrolables.
K1.- se la obtiene a partir de vegetales de hojas verdes.
K2 se obtiene a partir de derivados de pescados.
18
K3 la produce la flora intestinal las necesidades de esta vitamina en la dieta son
poco importantes.
Las fuentes en donde se las puede encontrar la vitamina K es en las legumbres,
hígado, aceite de soya, yema de huevo y en las verduras.
VITAMINAS DEL GRUPO B
Vitaminas hidrosolubles entre estas tenemos:
COMPLEJO B
Son sustancias frágiles solubles en el agua y son muy importantes para el
metabolismo de los hidratos de carbono. Esta contiene un factor hidrosoluble B
que tiene diferentes actividades vitamínicas.
VITAMINA B1
Llamada también Tiamina, aneurinao antiberibérica, metaboliza los glúcidos y
lípidos que dan lugar a la formación de energía, actúa en casos de depresión,
irritabilidad, pérdida de memoria, concentración y agotamiento, también aporta
como factor de crecimiento, digestión de los carbohidratos, funciones nerviosas y
cardiacas. Su deficiencia causa beriberi, ataque al corazón.
Las principales fuentes en donde se puede encontrar esta vitamina: legumbres,
cereales, carnes y frutas.
19
VITAMINA B2
Se la conoce también como riboflavina tiene la misma característica que la
Tiamina ya que actúa como una coenzima, se combina con una enzima para
ayudar con el metabolismo de los hidratos de carbono, grasas proteínas ya que
son las que participan en el transporte de oxígeno, ayudando a mantener bien las
membranas mucosas. El déficit de esta vitamina puede ser grave si existe una
carencia de otras vitaminas del grupo B en nuestro cuerpo, causa lesiones en los
labios y la nariz.
Las principales fuentes de vitamina B2 son: trigo, verduras, cereales, lentejas,
hígado, leche, carne, coco, pan y queso.
VITAMINA B3
Denominada nicotinamida, esta vitamina actúa en el metabolismo de hidratos de
carbono, grasas y proteínas, es un vasodilatador, actúa como sustento fisiológico
de la piel, lengua y el sistema digestivo. Es poco común encontrar en deficiencia a
esta vitamina porque nuestro organismo es capaz de producir una cantidad de
niacina a partir del triptófano, aminoácido que forma parte de muchas proteínas
que la adquirimos en la alimentación mixta, al consumir esta vitamina en grandes
cantidades ayuda a reducir los niveles de colesterol en la sangre, no es
recomendable consumir esta vitamina en grandes cantidades ya que pueden
ocasionar daños en el hígado, esta vitamina libera energía y ayuda a mantener la
integridad de las células de nuestro organismo y formar neurotransmisores, actúa
en la síntesis de hormonas sexuales , para la elaboración de cortisona, tiroxina , e
insulina en nuestro organismo.
Fuentes de esta vitamina: harina integral de trigo, pan de trigo integral, levadura
de cerveza, salvado de trigo, hígado de ternera, germen de trigo, arroz integral,
almendras.
20
VITAMINA B5
Llamada también ácido pantoténico, esta vitamina interviene en el metabolismo
celular como coenzima en la liberación de la energía a partir de las grasas,
proteínas y carbohidratos, forma parte de la coenzima que en actividad con las
moléculas intervienen en el metabolismo energético, en la síntesis de hormonas
anti estrés a partir del colesterol, en la síntesis y degradación de los ácidos grasos,
en la formación de anticuerpos.
Las principales fuentes en donde se las puede encontrar es la levadura de cerveza,
vegetales verdes, yema de huevo, cereales, viseras, maní, carnes y frutas.
VITAMINA B6
Llamada también Piridoxina esta vitamina ayuda en la formación de glóbulos
rojos ya la utilización de las grasas de nuestro cuerpo, mejora la regeneración del
tejido nervioso para debilitar los efectos negativos de la radioterapia, evita
mareos. El déficit de esta vitamina produce depresiones, convulsiones, fatiga,
alteraciones de la piel, aberturas en los labios, mareos, anemia y cálculos en los
riñones. Esta vitamina es muy importante porque asimila adecuadamente las
proteínas, los hidratos de carbono y las grasas, el cuerpo elabora anticuerpos y
glóbulos rojos, produce la vitamina B3, ayuda a que se absorba la vitamina b12 y
a producir el ácido clorhídrico del estómago e interviene en el metabolismo del
magnesio.
Las principales fuentes en donde se puede encontrar esta vitamina son en casi
todos los alimentos origen animal y origen vegetal.
21
VITAMINA B8
Biotina, esta es una coenzima que participa en la transferencia de grupos carboxilo
(- COOH) interviene en la reacciones que producen energía y en el metabolismo
de los ácidos grasos, formación de glucosa, es fundamental para el buen
crecimiento de la piel y sus órganos, para el desarrollo de las glándulas sexuales,
la carencia de esta vitamina produce depresión, dolores musculares, anemia,
fatiga, nauseas, dermatitis, alopecia y alteraciones en el crecimiento. Fuentes
principales en donde se puede encontrar esta vitamina: levadura de cerveza, yema
de huevo, riñones, coliflor, hígado, leche, frutas.
VITAMINA B9
Llamada también ácido fólico, folina o ácido pteroil-L-glutámico vitamina
importante para la formación de proteínas estructurales y hemoglobina, esencial
para el crecimiento y desarrollo del ser humano, es también importante para el
buen funcionamiento de los nervios y del cerebro, ayuda a reducir los niveles
sanguíneos del aminoácido homosisteína, protege al pulmón, colon y cuello
uterino para evitar un cáncer, a ayuda a evitar la pérdida de memoria en el
envejecimiento. Las mujeres embarazadas deben consumir esta vitamina ya que
ayuda al crecimiento normal del feto evitando anomalías en el cerebro y columna
del recién nacido. La diferencia de esta vitamina se relaciona en si con los
defectos en el nacimiento, él bebe nace con bajo peso, las mujeres alcohólicas y
las embarazadas tienen mayor predisposición a la pérdida de la vitamina B9.
Los alimentos en donde se puede encontrar esta vitamina es en las espinacas,
plátanos, melones verduras, legumbres el consumo de cítricos, productos
horneados y cereales. (17)
22
VITAMINA B12
La vitamina B12 o cianocobalamina es esencial en la síntesis del DNA. Esta es
una coenzima que interviene en la síntesis de la metionina (síntesis de purina) y en
la conversión del ácido metilmalónico en ácido succínico (ácidos grasos y
metabolismo alifático de aminoácidos). El organismo utiliza los depósitos de
vitamina B12 muy económicamente, reabsorbiendo la vitamina B12 del íleon y
regresando al hígado donde es excretado muy poco. En la deficiencia de vitamina
B12 los hallazgos clínicos y de laboratorio incluyen anormalidades neurológicas,
disminución de los niveles de vitamina B12 , aumento en la excreción del ácido
metilmalónico y anemia macrocítica caracterizada por maduración megaloblástica
anormal de los precursores eritrocitarios de la medula ósea. Las anormalidades
neurológicas de la deficiencia de vit.B12 resultan probablemente de un defecto en
la síntesis de la mielina como también de la acumulación anormal de lípidos. La
anemia perniciosa es una anemia macrocítica causada por la deficiencia de
vitamina B12 debida a la falta de factor intrínseco. La baja ingesta de vitamina
B12, enfermedades del intestino delgado, gastrectomía, mala absorción y
deficiencia de transcobalaminas, pueden causar deficiencia de VitaminaB12.
La deficiencia de vitamina B12 afecta la apariencia de las células que se forman
en la superficie externa del cuerpo y recubren conductos internos (células
epiteliales). (18)
ESTRUCTURA QUÍMICA DE LA VITAMINA B12
Esta vitamina es muy similar a la porfirinas, la vitamina b12 pertenece al grupo de
los compuestos corinoides, une resulta de la unión de 4 anillos pirrólicos,
alrededor de un átomo central de cobalto este presenta seis valencias en donde 4
establecen enlaces covalentes con sus anillos pirrólicos correspondientes, la
quinta valencia se une a un nucleótido, la 5-6 dimetilbencimidazol y la sexta se
une a radicales diferentes originando los diferentes derivados de la cobalamina.
23
Cianocobalamina hidoxicobalamina, metilcobalamina y
desoxiadenosilcobalamina.
Las formas que actúan como coenzimas en los seres humanos son la metil y
desoxiadenosilcobalamina esta es conocida también como coenzima B12.
DERIVADOS DE LA COBALAMINA.
Radical CN (ciano) - su nombre Cianocobalamina.
OH (Hidroxilo) – Hidroxicobalamina.
CH3 (metilo) – Metilcobalamina.
5’ desoxiadenosil – desoxiadeosilcobalamina.
FISIOLOGÍA DE LA ABSORCIÓN DE LA VITAMINA B12
La vitamina B12 en nuestro organismo la adquiere atreves de los alimentos por
medio de dos vías de absorción para la cobalamina entre ellas tenemos la que se
asocia al factor intrínseco esta conlleva un proceso activo que se da en el
estómago en buen estado, como el de enzimas pancreáticas y un íleon terminal
normal, la vitamina B12 es adquirida de las proteínas animales , en nuestro
estomago por acción de la pepsina y el ácido clorhídrico la vitamina queda libre
para unirse a la proteína (R) la cual se encuentra secretada por las células
parietales del estómago y en pocas cantidades por las glándulas salivales,
segregando el factor extrínseco por el estómago que es fundamental para la
absorción de la vitamina B12, en el duodeno hay enzimas que favorecen la ruptura
del complejo Vitamina B12 – proteína (R) y la unión la vitamina B12 al factor
intrínseco.
La vitamina B12 se absorbe atreves de endocitosis en las células del íleon
terminal donde los enterocitos con unos receptores específicos como (cubilin)
para el complejo constituido por el factor intrínseco de la vitamina B12.
24
Una vez que se absorbe la vitamina se encuentra ya dentro de los vasos
sanguíneos, entonces la cobalamina junto con las transcobalaminas que son
proteínas plasmática hacen su recorrido. La haptocorrina tipo I o también llamada
halotranscobalamina o vitamina B12 activa, por su capacidad para entrar a las
células, es la más importante porque se encargada transportar el 80% de la
vitamina B12 que se encuentra circulante en nuestro organismo y la tipo II se une
a la vitamina restante del 20% que llegaran a las células medula ósea y a las
células hepáticas donde quedan almacenadas.
METABOLISMO DE LA VITAMINA B12
En el cuerpo humano tenemos dos reacciones metabólicas importantes en donde
necesitamos de la vitamina B12 como coofactor.
Tenemos la primera que sucede en las mitocondrias de las células durante el
catabolismo de los ácidos grasos con un número impar de átomos de carbono y
de los aminoácidos valina, isoleucina y treonina, el propionil-CoA resultante se
convierte a succinil-CoA para la oxidación el ciclo de los ácidos tricarboxilos o
también llamado ciclo de Krebs.
La segunda sucede el citosol de la célula, en este transcurso la vitamina B12
cataliza la conversión de homosisteína convirtiéndola en metionina mediante la
acción de la enzima metionina sintasa. Dando lugar a la transferencia del grupo
metilo de N- metiltetrahidrofolato o hidroxi- cobalamina generando el
tetrahidrofolato y la metil cobalamina mediante el proceso de conversión.
25
FUNCIONES DE LA VITAMINA B12
Intervienen en las síntesis de la DNA, ARN y proteínas
Interviene en la formación de los glóbulos rojos
Es muy importante en la proliferación, maduración y regeneración de las células
nerviosas.
Participa en las síntesis de los neurotransmisores y en el mantenimiento de la
vaina de las neuronas
Actúa en la transformación de los ácidos grasos en energía ayudando a mantener
la reserva energética de los músculos.
Interviene en el buen funcionamiento del sistema inmune
Es muy esencial para el metabolismo del ácido fólico.
CAUSAS DEL DÉFICIT DE LA VITAMINA B12
Por deficiencia nutricional
Síndromes metabólicos
Causas gastrointestinales
Según la fase de absorción y factores del metabolismo de la vitamina B12.
CONSECUENCIAS DEL DÉFICIT DE VITAMINA B12
Las alteraciones que ocasionan el déficit de vitamina b12 son:
Alteraciones hematológicas, y neuropsiquiátricas, según Lechner aunque la
prevalencia del déficit de vitamina B12 es frecuente, tan solo del 5-10% de los
pacientes son sintomáticos. (19)
26
ENTRE LAS PRINCIPALES MANIFESTACIONES CLÍNICAS
TENEMOS:
LEVES
Neuropatías sensoriales
Macrocitosis
Hipersegmentaciòn de los neutrófilos
GRAVES
Esclerosis combinada de la medula espinal.
Anemia hemolítica.
Pancitopenia.
2.2.4 MANIFESTACIONES HEMATOLÓGICAS
Entre las principales manifestaciones hematológicas tenemos:
COMUNES COMO:
Macrocitosis
Hipersegmentación de los neutrófilos.
Anemia megaloblastica
RARAS COMO:
Trombocitopenia y neutropenia aislada.
Pancitopenia
27
INFRECUENTES COMO:
Anemia hemolítica
Microangiopatía pseudotrombótica. (20)
2.2.5 VITAMINA B12 Y SU RELACIÓN CON EL ALCOHOLISMO
El alcoholismo es una de las causas principales que se asocia a la macrocitosis,
también se encuentra asociado con otras alteraciones como la desnutrición y la
enfermedad hepática concomitante, en donde la anemia es un pronóstico adverso
en pacientes con enfermedad hepática con alto consumo de alcohol conllevando
así a la mayor mortalidad, la anemia megaloblástica está fuertemente ligada al
alcoholismo y a la deficiencia de vitamina B12 ya que esta se considera como una
de las vitaminas más importantes en su grupo ya que es muy esencial para nuestro
metabolismo esta ayuda a quemar calorías y a la producción de energía, es
importante para el crecimiento y desarrollo de los tejidos, por lo que con el
consumo de alcohol, esta vitamina pierde la capacidad de producir glóbulos rojos,
y es causante de alteraciones hematológicas, neurológicas, neurocognitivas y
neuropsiquiátricas.
2.2.6 PATOLOGÍAS ASOCIADAS AL ALCOHOLISMO
OSTEOPOROSIS.- Es una de las enfermedades más llamativas por consumo
exagerado de alcohol, enfermedad que se caracteriza por adelgazamiento de los
huesos estos se vuelven más frágiles pero es más común en mujeres que en
hombres, el uso excesivo de alcohol provoca disminución de las vitaminas que
son esenciales para tener unos huesos sanos.
28
ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES.- El consumo de alcohol
provoca el surgimiento de coágulos de sangre causando así que los pacientes
sufran ataques cardíacos o derrames cerebrales.
MIOCARDIOPATÍA.- Esta enfermedad se caracteriza por que el musculo
cardiaco se ve afectado de manera que este pierde la capacidad de bombear la
sangre al corazón es por eso que es recomendable dejar de consumir alcohol ya
que este es un factor importante en esta enfermedad ya que el consumo de alcohol.
PANCREATITIS.- inflamación del páncreas que es similar a la cirrosis el
páncreas es cubierto de fibrosis lo que dificulta la producción de insulina y la
forma en que el azúcar se libera al torrente sanguíneo, los son, dolor abdominal
severo acompañado de vómito o nauseas, sudoración y fiebre.
HIPERTENSIÓN.- Se la determina más como una condición que una
enfermedad se caracteriza por que la sangre al pasar a través de las arterias causa
un daño en las arterias ocasionando derrame cerebral, enfermedades del corazón,
ataque cardíaco, edema pulmonar y aneurisma por hipertensión. Los valores que
se caracterizan en factor de riesgo de la presión sanguínea son una presión
sistólica sostenida por encima de 139 mmHg con una presión diastólica entre o
mayor a 89 mmHg, se puede deducir que el paciente tiene un alto riesgo de sufrir
de arterosclerosis, debido que el alcohol impide el normal flujo sanguíneo , la
hipertensión no es una enfermedad no se cura pero si se la puede controlar
entonces el paciente deberá seguir las recomendaciones del médico ya que entre
tantas recomendaciones esta dejar de consumir sustancias como el alcohol, tabaco,
café, evitar el sedentarismo, bajar de peso y seguir una dieta balanceada para
evitar recaídas.
29
HÍGADO GRASO.- Esta enfermedad se la conoce como esteatosis hepática, se
caracteriza por el aumento de grasa en el hígado porque este pierde la capacidad
de quemar grasas ya que el consumo de alcohol como es un carbohidrato es
primero en metabolizarse en el hígado, causando así la disminución del apetito,
nauseas, vómitos, dolor abdominal, la piel tiende a tomar un color amarillento lo
mismo sucede con la esclerótica de los ojos. Así que lo recomendable es no
consumir alcohol, hacer ejercicio y alimentarse balanceadamente es importante
para controlar el hígado graso mas no curarlo.
CIRROSIS HEPÁTICA.- La cirrosis hepática es la consecuencia de diferentes
enfermedades crónicas, el alcohol actúa dañando las células del hígado,
debilitándolo, ya que tejido sano es reemplazado por fibrosis debido a que este
tejido se acumula e impide que el hígado funcione correctamente lo que puede
reducir la acumulación de bilis en la sangre, la coagulación disminuye y por ende
la presión arterial, algunos síntomas de esta enfermedad son falta de apetito,
náuseas, fatiga, ictericia, trastornos cognitivos, temblores hemorragia interna hasta
desencadenar un coma y posteriormente la muerte.
CÁNCER.- El consumo exagerado de alcohol aumenta las probabilidades de que
las personas tengan cáncer, ya que el organismo empieza a formar el alcohol en
acetaldehído siendo este un potente cancerígeno, los tipos de cáncer que ocasiona
el consumo de alcohol es cáncer de boca, faringe, laringe, esófago y hígado. (21)
PATOLOGÍAS HEMATOLÓGICAS ASOCIADAS AL ALCOHOLISMO
ANEMIA.- Es la disminución de la masa eritrocitarios, o también se lo puede
definir como la disminución de volumen de los hematíes medido en le
hemograma mediante el número de hematíes, el hematocrito y la concentración de
hemoglobina.
30
ANEMIA MICROCÌTICA.- Son aquellas en las que el tamaño del hematíe se
encuentra reducido con una disminución en la cantidad de hemoglobina debido a
que esta se encuentra constituida de hierro, cadenas de globina y pigmento hem, la
causa , más frecuente de microcitosis es la ferropenia , pero en anemias ya
crónicas.
ANEMIA MACROCITICA.- La mayoría de las anemias macrocítica son
megaloblástica, ya que se caracteriza por presentar un gran tamaño en los
eritrocitos
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE FOLATO
Es la causa más común de anemia megaloblástica.
METABOLISMO DEL FOLATO Y SU DEFICIENCIA
El ácido fólico también denominado pteroil monoglutámica, es una forma inactiva
que precisa activar sor la acción de las folatos reductasas, organismos para
transformarse en la forma activa, también denominado ácido tetrahidrofólico o
ácido folinico.
El ácido fólico no solo aparece en los productos cárnicos sino también en
verduras, legumbres, levaduras y frutos secos.
Se absorbe fundamentalmente en el yeyuno y se deposita en el hígado, las
reservas de folato hepáticas son útiles solamente para tres o cuatro meses, a
diferencia de la vitamina B12 que pueden tardarse desde tres a seis años en
agotarse.
31
CLÍNICA DE LA DEFICIENCIA FOLATO
La misma que la deficiencia de cobalamina sin trastornos neurológicos ya que el
ácido fólico no es necesario para la síntesis de la mielina.
ESTUDIO DE ANEMIA MACROCÍTICA
La anemia megaloblástica se puede ver asociada con otros factores ocasiona una
macrocitosis, entre estos tenemos, síndromes mielodisplasicos, la aplasia,
hipotiroidismo.
Es por eso que es necesario realizar el estudio de la extensión de sangre periférica,
en donde podemos encontrar datos subjetivos como la hipersegmentación de los
neutrófilos y macrocitosis característicos en anemia megaloblástica.
También determinaremos niveles séricos de vitamina B12 y ácido fólico, y para
más especificidad de resultados se recomienda un aspirado de la medula ósea.
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE VITAMINA B12
La vitamina B12 o también llamada cobalamina o cianocobalamina por tener
cobalto en su molécula aparece en alimentos de origen animal.
La vitamina B12 se almacena principalmente en el hígado y su nivel es tan
elevado que la deficiencia tarda años en producirse.
32
Mediante la acción de los jugos gástricos se produce una liberación de la
cobalamina de las proteínas del alimento.
La vitamina B12 se une a un factor intrínseco (elaborado por las células parietales
gástricas) que va a transportar la vitamina B12 a lo largo del intestino delgado
hasta el íleon terminal, donde, a partir de receptores específicos se produce la
absorción de la vitamina B12 hacia el plasma.
En la sangre, la vitamina B12 está unida a transcobalamina la transcobalamina II
es la principal proteína de trasporte de la vitamina absorbida “de nuevo”, pero
presenta una corta vida media, dicha transcobalamina es sintetizada en el hígado,
la transcobalamina I esta sintetizada en los neutrófilos transporta la mayor parte
de la vitamina B12 circulante como consecuencia de su mayor vida media. (22)
ETIOLOGIA
1.- Disminución de la ingesta: dietas vegetarianas estrictas
2.- Disminución de la absorción
_ Deficiencia de factor extrínseco: gastrectomía, anemia perniciosa, o enfermedad
de biermer.
_ Alteración intestinal sobre todo en el íleon terminal.
_ Infestación por bacterias o paracitos
_ Deficiencia de receptores ileales para factores extrínseco.
_ Alteraciones pancreáticas
_ Fármacos (anticonceptivos, alcohol colestiramina)
33
3.- Alteración en la utilización: inactivación de la vitamina B12, de almacén
mediante el óxido nitroso de la anestesia.
La causa habitual de deficiencia de cobalamina es la anemia megaloblástica.
Cuando hay deficiencia de cobalamina la medula ósea y el sistema nervioso
compiten entre sí para aprovechar la escasa vitamina.
Por ello característicamente las alteraciones neurológicas no siempre se presentan
con alteraciones hematológicas e incluso los trastornos neurológicos más graves
se suelen ver en enfermos con anemias poco importantes.
TRATAMIENTO
Administración de vitamina B12 parenteral.
Se produce una respuesta reticulocitaria rápida del cuanto al quinto día. Es
aconsejable la administración de ácido fólico, ya que la deficiencia de cobalamina
ocasiona a su vez un déficit intracelular de folato. (23)
ANEMIA MEGALOBLASTICAS. La anemia megaloblástica es la que se
presenta por una deficiencia de la vitamina B12, o de ácido fólico.
Son aquellas causadas por deficiencia de folatos o vitamina B12, alteran las
síntesis del ADN ya que tanto el folato como la vitamina B12, participan en una
reacción necesaria para la síntesis de ADN que consiste en la formación del
timidilato a partir del urdilato.
A causa de la disminución de la velocidad de la síntesis del ADN se produce un
retardo en la división celular y esta alteración provoca cambios morfológicos
característicos de la anemias megaloblásticas, consistentes en un gran tamaño de
34
los precursores de las células sanguíneas en la medula ósea y en la sangre
periférica, como el trastorno afecta también a otras series hematológicas es
también frecuente la pancitopenia.
En la medula ósea de las anemias megaloblásticas además del crecimiento en el
tamaño de los precursores hematopoyéticos, se produce un aumento de la
población hematopoyética a consecuencia del retardo en la división celular.
También puede ocasionarse la destrucción intramedular de las células
hematopoyéticas (situación del eritropoyesis ineficaz), la sangre periférica se
caracteriza por hematíes de gran tamaño (macroovalocitos con un aumento del
VCM y también HCM) neutrófilos hipersegmentados y reticulocitos no
aumentados.
Entre las alteraciones bioquímicas es muy característico de las anemias
megaloblasticas la elevación de LDH sérica al igual que en las hemólisis, como
consecuencia de la destrucción de las células hematopoyéticas en la medula ósea
(eritropoyesis ineficaz).
Una de las características más útiles en el diagnóstico de las anemias
megaloblásticas es la presencia de los neutrófilos hipersegmentados. Pero estas
alteraciones desaparecen cuando los pacientes han recibido un tratamiento.
ANEMIA MEGALOBLÁSTICA
El estado megaloblástico se da mediante la síntesis defectuosa de ADN, mientras
que el ARN continúa con su síntesis dando como resultado un aumento de la masa
y la maduración citoplasmática, en esta circulación se recibe hematíes
macroovalocíticos, en donde todas las células presentan dispoyesis, esta se
35
caracteriza por que la maduración citoplasmática es mayor que la nuclear
produciendo así el megaloblasto en la médula, la dispoyesis aumenta la deterioro
intramedular de las células, eritropoyesis ineficaz causando hiperbilirrubinemia
indirecta e hiperuricemia, debido a que afectan las líneas celulares produciendo la
anemia megaloblástica, produce también reticulocitopenia debida a la producción
defectuosa de hematíes, la hipersegmentación de los neutrófilos
polimorfonucleares, la utilización deficitaria o defectuosa de vitamina B12 o ácido
fólico. (24)
Es la enfermedad causada por deficiencia de vitamina B12, relacionada con la
incapacidad del individuo de absorber cobalamina debido a la deficiencia de
factor intrínseco por parte de las células parietales. El factor intrínseco se une
ávidamente a la vitamina B12 proveniente de la dieta, formando un complejo que
es transportado hasta el íleon terminal, donde es absorbido después de la unión a
receptores de factor intrínseco de la membrana luminal de las células ileales. Hay
dos mecanismos que alteran la producción de factor intrínseco, el primero se debe
a una pérdida de células parietales de la mucosa gástrica que lleva a la falla en la
producción de factor intrínseco y el segundo debido a la presencia de
autoanticuerpos bloqueantes en el jugo gástrico, que se pueden unir al sitio de
unión de la vitamina B12 con el factor intrínseco, evitando así la formación de
este complejo. La enfermedad comprende un amplio espectro de síntomas, entre
los cuales se incluyen: síntomas constitucionales, alteraciones ginecológicas,
neurológicas y gastrointestinales. (25)
La vitamina B12 se excreta en la bilis ligada a la haptocorrina (factor ligante R).
Normalmente la mayoría de esta vitamina B12 se reabsorbe, las personas con un
contenido total de 500ug tendrían una perdida adicional de 0.05ug. En pacientes
con anemia perniciosa u otros defectos de absorción de la vitamina B12 es
probable que la circulación entero hepática está deteriorada, dando lugar a una
mayor excreción fecal de la vitamina. (26).
36
ANEMIA PERNICIOSA
La anemia perniciosa se desarrolla cuando el cuerpo no es capaz de absorber la
vitamina B12 que necesita de los alimentos debido a la falta de una proteína,
llamada factor intrínseco, producida por el estómago. Se requiere el factor
intrínseco para la absorción de la vitamina B12. A menudo, la anemia perniciosa
se relaciona con un ataque de origen autoinmunitario de las células parietales del
estómago y/o el factor intrínseco. La anemia es la liberación insuficiente de
oxígeno por parte de los glóbulos rojos de los pulmones a las células del cuerpo.
Entre más pronto se trate la anemia perniciosa, mejor es el resultado.
DIAGNÓSTICO
En el estudio de esta enfermedad se encuentra un hemograma con disminución
del hematocrito y de la hemoglobina. Los hematíes se encuentran aumentados de
tamaño (macrocitosis) y con aumento de la cantidad de hierro en ellos, siendo
así hipercrómicos. También puede haber leucopenia, neutrófilos
hipersegmentados, el volumen corpuscular medio suele ser alto en estadios
avanzados de la anemia, plaquetas bajas (plaquetopenia), y los reticulocitos suelen
tender a la baja, aun cuando suelen ser normales. Cambios en la LDH
aumentándola, hiperbilirrubinemia, vitamina B12 en sangre menor a los 100
pg/dl, y examen de Schilling para determinación de holotranscobalamina II, y
medición del ácido metilmalónico. (27)
37
2.2.7 ESTUDIO DEL ERITROCITO
Los eritrocitos provienen del griego “puopóc” que significa rojo y del latín
“kútoc” que significa bolsa, o también eritro (rojo) + citos (células) son los
elementos formes que se encuentran en mayor cantidad en nuestra sangre. Los
eritrocitos tienen forma oval o bicóncavo aplanada y presenta una depresión en
el centro que mide de 5-7.5 μm de diámetro, 1 μm de grosor y de 80 a 100 fL de
volumen, su citoplasma está compuesto por un pigmento llamado hemoglobina
que es la sustancia que le da el color rojo al eritrocito y ayuda al trasporte de
oxígeno a las células y tejidos de todo nuestro cuerpo, gracias a su forma
bicóncava se adapta a una mayor superficie de intercambio de oxígeno por
dióxido de carbono en los tejidos y su membrana es tan flexible que permite a los
glóbulos rojos atravesar por los capilares.
HEMOGLOBINA.- La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, la cual
le da el color característico a los glóbulos rojos, se encarga del transporte de
oxígeno a través de la sangre desde los pulmones hacia todos los tejidos de todo el
cuerpo.
PRODUCCIÓN DE LOS GLÓBULOS ROJOS
Los glóbulos rojos se producen en la medula ósea, a partir de las células madre
que se van reproduciendo rápidamente, la producción de los eritrocitos está
regulada por la eritropoyetina esta es una hormona producida por el riñón, por eso
cuando existe una disminución de la oxigenación de los tejidos la eritropoyetina
aumenta su producción actuando en la medula ósea para estimular la producción
de glóbulos rojos.
38
ETAPAS DEL DESARROLLO MORFOLÓGICO DE LA CÉLULA
ERITROIDE
Célula madre pluripotencial
Célula madre multipotencial
Célula progenitora o CFU-S (unidad formadora de colonias del bazo)
BFU-E (unidad formadora de brotes de eritrocitos)
CFU-E (unidad formadora de colonias de eritrocitos), que luego formará
los proeritroblastos.
Proeritroblastos: Célula grande de citoplasma abundante, núcleo grande con
cromatina gruesa, nucléolos no muy bien definidos (20-25 micras).
Eritroblasto basófilo: Más pequeño que el anterior (16-18 micras), citoplasma
basófilo, cromatina gruesa y grumosa, aquí se inicia la formación de la
hemoglobina.
Eritroblasto policromatófilo: Mide 10-12 micras, el citoplasma empieza a
adquirir un color rosa por la presencia de hemoglobina, aquí se presenta la
última fase mitótica para la formación de hematíes, no posee nucléolos y la
relación núcleo/citoplasma es de 4:1.
Eritroblasto ortocromático: Mide 8-10 micras, tiene cromatina compacta y el
núcleo empieza a desaparecer.
Reticulocito: Casi diferenciado en eritrocitos maduros. La presencia en SP
(sangre periférica) representa el buen funcionamiento de la MO.
Eritrocito, finalmente, cuando ya carece de núcleo y mitocondrias. Tiene
capacidad de transporte de oxígeno.
A medida que la célula madura, la producción de hemoglobina aumenta, lo que
genera un cambio en el color del citoplasma en las muestras de sangre teñidas con
la tinción de Wright, de azul oscuro a gris rojo y rosáceo. El núcleo
paulatinamente se vuelve picnótico, y es expulsado fuera de la célula en la etapa
ortocromática.
39
La membrana del eritrocito en un complejo bilipídico–proteínico, el cual es
importante para mantener la deformabilidad celular y la permeabilidad selectiva.
Al envejecer la célula, la membrana se hace rígida, permeable y el eritrocito es
destruido en el bazo. La vida media promedio del eritrocito normal es de 100 a
120 días.
La concentración eritrocitaria varía según el sexo, la edad y la ubicación
geográfica. Se encuentran concentraciones más altas de eritrocitos en zonas de
gran altitud, en varones y en recién nacidos. Las disminuciones por debajo del
rango de referencia generan un estado patológico denominado anemia. Esta
alteración provoca hipoxia tisular. El aumento de la concentración de eritrocitos
(eritrocitosis) es menos común.
La hemólisis es la destrucción de los eritrocitos envejecidos y sucede en
los macrófagos del bazo e hígado. Los elementos esenciales, globina y hierro, se
conservan y vuelven a usarse. La fracción hemo de la molécula
se cataboliza a bilirrubina y a biliverdina, y finalmente se excreta a través
del tracto intestinal. La rotura del eritrocito a nivel intravascular libera
hemoglobina directamente a la sangre, donde la molécula se disocia en dímeros α
y β, los cuales se unen a la proteína de transporte, haptoglobina. Esta transporta
los dímeros al hígado, donde posteriormente son catabolizados a bilirrubina y se
excretan.
FUNCIÓN DE LOS GLOBULOS ROJOS
Como los eritrocitos se encargan del transporte de oxígeno que es necesario para
producir energía en los diferentes tejidos entra al cuerpo humano a través de los
pulmones atraviesa las membranas de los alveolos pulmonares y es captado por
los glóbulos rojos unidos a la hemoglobina, para luego ser transportado por el
40
sistema circulatorio a los diferentes tejidos, el oxígeno es transportado a través de
los capilares para llegar a las células, con lo que al mismo tiempo el CO2 que
producen las células es encerrado por la hemoglobina de los glóbulos rojos y
trasportado a los pulmones en donde es eliminado.
FACTORES PARA SU PRODUCCIÓN
VITAMINA B12.- Es muy importante para la síntesis y multiplicación de los
eritrocitos, ya que las células madre de la médula ósea deben multiplicase muy
rápidamente para la producción de los glóbulos rojos, la falta de vitamina B12
origina anemia megaloblástica.
ÁCIDO FÓLICO.- Es muy importante también por que ayuda a la síntesis de los
glóbulos rojos y su deficiencia en la dieta ocasiona anemia.
HIERRO.- Al ser necesario para la producción de hemoglobina nuestro
organismo contiene alrededor de 4-5 gramos de hierro, encontrando su mayor
porcentaje en la hemoglobina que es contenida por los eritrocitos, en los hombres
la cantidad de hierro es de 0.6 mg la misma que se elimina por las heces, en las
mujeres las necesidades de hierro son el doble que las del hombre ya que las
mujeres pierden la regla o menstruación. (28)
41
Tabla Nª 1: Valores de Referencia de los Eritrocitos
VALORES DE REFERENCIA NORMALES
Recién nacido: 4-5 millones/ Ml
A los tres meses 2 a 4.8 millones/ mL
Entre los 3 y 5 años 4 a 5.3 millones/ mL
De los 5 a 15 años 4.2 a 5.2 millones/ mL
Hombre adulto 4.5 a 5 millones/ mL
Mujer adulta 4.2 a 5.2 millones/ mL
2.2.8 ALTERACIONES DEL ERITROCITO
ALTERACIONES DEL TAMAÑO
ANISOCITOSIS.- Se caracterizan por que los eritrocitos presentan diferentes
tamaños.
MICROCITOSIS.- Cuando los hematíes presentan un diámetro menor a 7 µm
y un volumen mayor a 100 µm³ se producen en enfermedades como las
talasemias, en anemias sideroblasticas, pero más característico es anemia
ferropenia.
Fuente: Hematología Médica
42
MACROCITOSIS.- El tamaño de los eritrocitos es mayor a 8 µm y un volumen
mayor a 100µm³, se produce sobre todo en personas alcohólicas y en hepatopatías
crónica.
MEGALOCITOSIS.- Los hematíes tienden a estar aumentados de tamaño es
superior a 11 µm, y es muy característico de anemias megaloblásticas.
ALTERACIONES DE LA FORMA
POIQUILOCITOSIS.- Se caracterizan por presentar una desigualdad en la
forma de los eritrocitos.
ACANTOCITOS.- Se caracteriza por que los hematíes presentan espículas de
longitud y posición irregular, estas alteraciones se producen en cirrosis hepáticas,
mielofibrosis aguda y crónica.
DIANOCITOS.- Los hematíes se presentan planos y con una forma muy similar
a un sombrero mexicano. Con un reborde coloreado y una zona anular pálida, se
producen en talasemias y hepatopatías.
DREPANOCITOS.- se presentan en forma de hoz, característicos en anemias de
células falciformes.
ELIPTOCITOSIS.- Los hematíes presentan una forma elíptica u oval, es
característico en anemias ferropénica, anemia megaloblástica y en mielofibrosis
pero es típica de la eliptocitosis hereditaria.
43
EQUINOCITOSIS.- También se los conoce con el nombre de estereocitos o
astrocitos se presentan en forma de espículas cortas y distribuidas regularmente a
lo largo de toda la superficie, se produce en la uremia y hepatopatías neonatales.
ESFEROCITOSIS.- Cuando los hematíes tienen la forma esférica pueden
aparecer microesferocitos, se producen en la hidrocitosis, en la anemia inmuno
hemolítica y sobre todo en las esferocitosis hereditarias.
ESQUISTOCITOSIS.- Los hematíes presentan fragmentaciones, presentes en
anemia microangiopática, en la hemólisis mecánica por la presencia de una
prótesis de una válvula en el corazón, y en quemaduras graves.
ESTOMATOCITOSIS.- Los hematíes presentan una invaginación central en
forma de una boca, se producen en el alcoholismo y en las hepatopatías cónicas.
EXCENTROCITOSIS.- Consiste en encontrar hematíes cuya hemoglobina está
concentrada en unos de sus polos, se producen en déficit de glucosa- 6- fosfato
deshidrogenasa.
KERATOCITOSIS.- Consiste en encontrar hematíes con formas espiculadas en
su superficie, se producen en anemias hemolíticas, microangiopatías, hemólisis
por prótesis cardíacas.
ALTERACIONES DEL COLOR
ANISOCROMÍA.- se puede observar la falta de uniformidad en la coloración de
unos y otros hematíes, se presentan en el inicio de tratamientos de anemia
carencial y en enfermos con anemia hipócroma.
44
HIPOCROMÍA.- Los hematíes se presentan pálidos y con un aumento de la
claridad central, se producen en anemia ferropénica.
HIPERCROMÍA.- Los hematíes se pueden encontrar intensamente coloreados
la hipercromía que se puede presentar en esferocitosis hereditaria.
POLICROMASIA.- Los hematíes suelen presentarse con una coloración
ligeramente basofílica.
INCLUSIONES INTRAERITROCITARIAS
SUSTANCIAS GRANULOFILAMENTOSA.- Llamada también como
reticulocito filamentosa se origina de restos ribosómicos agregados, común en
reticulocitos.
CUERPO DE HOWELL-JOLLY.- Se lo conoce como un pequeño residuo
nuclear, se lo observa como un grumo visible en el interior de los hematíes y que
se tiñe de un color que está entre rojo oscuro y el negro, aparecen en pacientes
esplenectomizados.
CUERPOS DE HEINZ.- Son precipitados de la hemoglobina, presentan una
serie de granulaciones pequeñas que se sitúan en la periferia de los hematíes, se
producen en enfermedades congénitas que comportan una inestabilidad de la
hemoglobina que hace que esta se desnaturalice y precipite en presencia de
algunos medicamentos.
45
CUERPO DE PAPPENHEIMER.-gránulos sideróticos, estos son
acumulaciones de hemosiderina unida a proteínas, consiste en gránulos basófilos,
se producen en pacientes esplenectomizados y en anemias sideroblasticas.
PUNTEADO BASÓFILO.- Son agregados ribosómicos originados por una
degeneración vacuolar del citoplasma o precipitados de cadenas globinas libres,
presentan puntos basófilos, con tamaño variable y dispersos por toda la superficie
del hematíe, se producen en intoxicaciones por plomo y también en talasemia y
leucemia.
ANILLOS DE CABOT.- Estos están formados por restos de la membrana
nuclear o de microtúbulos se presentan a manera de hilos basófilo adoptan una
forma de un anillo o de un ocho y pueden ocupar toda la periferia célula, se
pueden presentar en anemia megaloblástica y anemias hemolíticas.
INCLUSIONES PARASITARIAS.- se encuentran parásitos en los hematíes por
distintas formas evolutivas como por ejemplo el plasmodium. (29) (30) (31)
2.2.9 ESTUDIO DE PLACA O EXTENSIÓN SANGUINEA
FASES DEL EXTENDIDO SANGUÍNEO
La información obtenida de un frotis de sangre periférica dependerá mucho de la
calidad del extendido, tiene mucha importancia ya que el diagnóstico de muchas
enfermedades hematológicas se pueden observar de acuerdo a las características
morfológicas de las células sanguíneas.
Cada vez que realizamos un frotis sanguíneo debemos hacerlo de una manera
suave tratando que no nos quede ni muy grueso ni muy delgado para que así la
46
distribución de las células serán más fáciles de observar en diferentes áreas,
mirando claramente su tamaño forma y color en los eritrocitos.
El material que se va a utilizar debe estar completamente limpio y libre de grasa, y
realizarlo en lo posible dentro de las dos primeras horas de práctica.
Una extensión sanguínea correcta debe contener cabeza, cuerpo y cola. La zona
ideal para realizar la observación está entre la cola y el cuerpo. (32)
Cabeza: en esta fase se coloca la sangre para proceder al extendido es por eso que
se tiene gran concentración de eritrocitos, en la cual no es aconsejable realizar la
observación.
Cuerpo: Es la parte media del el frotis sanguíneo esta es la parte ideal para
proceder la observación, ya que los glóbulos rojos y las plaquetas no se
encuentran aglutinados ni esparcidos.
Cola: Esta es la zona final del frotis la cual se encuentra diluida, y la morfología
de las células se encuentran alteradas encontrándolas esparcidas, también
encontraremos una gran concentración de plaquetas. (33) (34)
Frotis sanguíneo
Frotis de sangre o frotis de sangre periférica es un análisis de sangre en donde se
puede medir el número y forma de las células sanguíneas, el fotis sanguíneo es un
elemento muy importante para la ayuda diagnostica el cual debe ser realizado con
mucha responsabilidad y profesionalismo, ya que si el médico lo solicita es
porque sospecha de alguna anormalidad, en el conteo celular detectados en
analizadores hematológicos, y por qué el paciente presenta esplenomegalia o
adenopatías. El médico solicita el estudio de la placa para que le puedan ayudar a
diagnósticos tales como síndrome mielodisplasicos, leucemia, linfoma o anemia
hemolítica, es por eso que el frotis sanguíneo sigue siendo una herramienta
importante para ayudar al diagnóstico médico.
47
Análisis de placa hematológica
El médico solicita el estudio de la placa cuando existen hallazgos sugestivos de
anemia, ictericia inexplicada, dolor abdominal, dolor torácico o dolores en los
miembros, infecciones severas inexplicadas, sospecha de coagulación
intravascular diseminada, insuficiencia renal aguda, o agradecimiento de los
riñones sobre todo en los niños, en hemorragias, exudados o signos de
hiperviscosidad o atrofia óptica en el fondo del ojo, cuando sospecha de
enfermedades bacterianas o parasitarias, en hallazgos sugestivos de cáncer no
hematopoyético entre estas pérdida de peso, malestar y dolor óseo, fiebres
inexplicables, enfermedades virales, inflamatorias o malignas. A veces el estudio
del frotis logra un diagnóstico definitivo, por eso debemos realizarlo con mucho
profesionalismo, el mayor reto del estudio de la placa es para proveer al médico
de buena información y así llegar a un buen diagnóstico en lo que sea pertinente la
opinión médica como eanemias y trombocitopenias así como en la caracterización
de los Linfomas y Leucemias. (35) (36)
48
2.3 HIPÓTESIS
Hi: Los valores bajos de Vitamina B12 se relacionan con las alteraciones
morfológicas en células rojas en pacientes alcohólicos.
Ho: Los valores bajos de Vitamina B12 no se relacionan con las alteraciones
morfológicas en células rojas en pacientes alcohólicos.
49
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
3.1 NIVELES DE INVESTIGACIÓN
El enfoque que tome en cuenta en mi investigación es cuantitativo y cualitativo.
Cualitativo: Porque al visitar a los pacientes que acuden al Movimiento
Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, se
interactuó con ellos y se pudo cono ser de más cerca la realidad.
Cuantitativo: Porque se realizó la determinación de vitamina B12, y sus
resultados me ayudaron a comprobar hipótesis, lo cual nos indicó que el consumo
excesivo de alcohol ocasiona deficiencia de vitamina B12 y por ende
polimorfismo en las células rojas.
Descriptivo: Porque la investigación permitirá detallar las características más
importantes del objeto de estudio, es decir las causas y efectos que pueden
producir dentro del problema planteado y confrontando que los pacientes pueden
contraer anemia megaloblástica por déficit de Vitamina B12, encaminado al
polimorfismo en células rojas.
Asociación de variables: Este nivel me permitirá evaluar cada una de las
relaciones que existen entre la variable independiente como lo es “Determinación
de Vitamina B12” y la variable dependiente siendo esta “Polimorfismo en
Células Rojas”.
50
Nivel de Laboratorio.- Se utilizó la modalidad de laboratorio ya que se realizó
los diferentes exámenes competentes a este ámbito para así cumplir con los
objetivos propuestos en mi proyecto de investigación.
Nivel Exploratorio.- Porque permitirá tener un contacto directo con la realidad y
conocer más de cerca los factores que generan el problema reconociendo las
variables de interés investigativo, además se buscará una situación que no ha sido
investigada en el Movimiento Internacional de Alcohólicos Anónimos “GRUPO
LATACUNGA”.
Investigación de campo.-porque se pudo compartir las problemáticas y las
realidades que viven los pacientes que acuden al Movimiento Internacional de
Alcohólicos Anónimos 24 horas “Grupo Latacunga”, lo cual ayudo a recolectar
información requerida para la realización del presente proyecto.
3.2 SELECCIÓN DEL ÁREA O AMBITO DE ESTUDIO
La investigación de este proyecto se realizó en el Movimiento Internacional 24
horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, ubicado en la ciudad de
Latacunga ciudadela el chofer, luego de haber tenido una reunión con el
encargado del Movimiento el Sr. Wilson Romero designado como padrino del
mismo, donde me supo detallar que al centro acuden 100 personas entre ellas
hombres y mujeres jóvenes adolescentes, adultos mayores entre estos
profesionales, me supo manifestar que en el centro no existe ningún tratamiento
farmacológico para nadie los pacientes acuden al centro voluntariamente y su
única terapia consiste en dar charlas de motivación haciendo que los pacientes
se concienticen y se hagan de ellos un auto diagnóstico y así se den cuenta por si
solos del daño que están causando a su salud con el consumo excesivo de alcohol.
51
Manifestó que existe una red llamada Movimiento Internacional con las cuales
ellos trabajan solo con el fin de ayudar a las personas con problemas de
alcoholismo sin obligarlos a nada.
El centro está conformado por 100 pacientes entre estas 30 mujeres y 70 hombres.
Tomando en cuenta a pacientes que acuden diariamente al centro e incluso viven
en el movimiento, a los cuales se les dio la información oportuna antes de realizar
ningún procedimiento, también se les explico sobre el conocimiento informado ya
que tienen todo el derecho de desistir en la participación de mi estudio, trabaje
con los pacientes que acuden diariamente y los que viven en el Movimiento los
cuales acudieron a mi llamado y aceptaron someterse a mi estudio, también a
responder algunas presuntas que hice con el fin de reunir datos para el
cumplimiento de mi cuarto capítulo preguntas como cuantos años tienen y el
tiempo en que acuden al Movimiento, a todos los que voluntariamente decidieron
ayudarme, procedí a tomar las muestras sanguíneas con las respectivas normas de
bioseguridad y a transportarlos inmediatamente a procesarlos en el Laboratorio
Clínico “ALVAREZ” ubicado en la calle García Moreno y 24 de Mayo junto al
Banco del Pichincha en ciudad de Salcedo.
3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA
Población.- La población considerada para el presente proyecto está conformado
por todos los pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, el cual cuenta con un numero
de 100 pacientes que por el costo del examen y la disponibilidad de los pacientes
me veo en la necesidad de tomar una muestra.
52
Muestra.- Debido a que cuento con una población muy numerosa en su totalidad
son 100 pacientes, he tomado una muestra de 40 pacientes son completamente
fijos ya que debido a la libertad que tienen no se les pudo obligar a que se
sometan todos a mi estudio para la realización de mi proyecto.
3.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÒN
CRITERIOS DE INCLUSIÓN
1. Pacientes que aceptaron realizar la encuesta.
2. Pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos
Anónimos “GRUPO LATACUNGA”.
3. Pacientes que viven en el Movimiento.
4. Pacientes que voluntariamente decidieron someterse a mi estudio.
CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
1. Pacientes que no realizaron la encuesta.
2. Pacientes que no acudan frecuentemente al Movimiento.
3. Pacientes que raramente acuden al centro.
4. Pacientes que no quisieron realizarse ningún tipo de procedimiento.
3.5 DISEÑO MUESTRAL
Para cumplir con el desarrollo de mi investigación utilice el muestreo
probabilístico regulado, el alcoholismo de hoy en día es unos de los problemas
sociales bastante grande me he permitido tomar en cuenta a los pacientes con
antecedentes alcohólicos en donde se mostrara presente el problema de mi
53
investigación, una vez ya contando con la colaboración de los pacientes que
decidieron ayudarme voluntariamente, respondieron a mis preguntas sin exaltarse,
pero sin otorgar ninguna firma los cuales en su totalidad suman 40 pacientes
dispuestos a realizarse las pruebas.
54
3.6 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
3.6.1 VARIABLE INDEPENDIENTE: Determinación de Vitamina B12
CONCEPTUALIZACIÓN CATEGORIAS INDICADORES ÍTEMS BÁSICOS TÉCNICAS E
INSTRUMENTOS
Vitamina B12 es una coenzima que
contribuye en la elaboración de ADN y la
formación de los eritrocitos. En la
deficiencia de vitamina B12 los hallazgos
clínicos y de laboratorio incluyen
anormalidades neurológicas, aumento en la
excreción del ácido metilmalónico y anemia
macrocítica caracterizada por la maduración
megaloblastica anormal de los precursores
eritrocitarios de la medula ósea.
El organismo utiliza los depósitos de
vitamina B12 muy económicamente,
reabsorbiendo la vitamina B12 del íleon y
regresando al hígado donde es excretado
muy poco.
Importancia de la
vitamina B12
Deficiencia de la
vitamina B12
Métodos
Quimioluminiscencia.
Es importante para la
síntesis de AD N
Ayuda a la formación
de glóbulos rojos.
Valores de vitamina
B12 < 110 pg/dL
Determinación de
Vitamina B12:
Sus valores normales
110 - 835 pg/dL
¿Porque es importante la
vitamina B12 en el cuerpo
humano?
¿Cuáles son los valores de
vitamina B12 que presentan
los pacientes con
antecedentes alcohólicos?
Entrevista
Análisis, observación
y resultados del
laboratorio.
Elaborado por: Investigadora
55
3.6.2 VARIABLE DEPENDIENTE: Polimorfismo en células rojas
CONCEPTUALIZACIÓN CATEGORIAS INDICADORES ÍTEMS BÁSICOS TÉCNICAS E
INSTRUMENTOS
Polimorfismo en células rojas,
la palabra polimorfismo viene
del prefijo “poli” significa
muchos, del sustantivo “morfo”
que significa formas y del
sufijo “ismo” que significa
actividad. Entonces se lo puede
definir cuando los glóbulos
son capaces de adoptar
distintas formas sin que se
modifique su estructura natural,
característica en pacientes
alcohólicos con anemia
megaloblástica ocasionado por
un déficit de vitamina B12.
Pacientes
alcohólicos
Alimentación
Anemia
megaloblástica
Consumo excesivo
de alcohol
Déficit Vitamínico
Estudio morfologico
de las celulas rojas o
hematies mediante
estudio de placa e
hipersegmentación
de los neutrofilos.
¿Los problemas familiares,
económicos y sociales son un
vínculo para el alcoholismo?
¿La mala alimentación es
causante de anemia
megaloblástica?
¿Cuáles son las patologías
celulares que encontramos en
anemia megaloblástica causada
por un déficit de Vitamina B12?
Entrevista
Análisis, observación y
resultados de laboratorio
Elaborado por: Investigadora
56
3.7 DESCRIPCIÓN DELAINTERVENCIÓN Y PROCEDIMIENTOS PARA
LA RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN.
DESCRIPCIÓN DE PROCEDIMIENOS, MÉTODOS Y TÉCNICAS
Se procedió de la siguiente manera:
Tomar las muestras sanguíneas entre las 8: 00 – 9:00 de la mañana explicando
anteriormente que los pacientes deben acudir en ayunas.
Todos los pacientes se reunieron a la hora establecida se procedió a la toma de
las muestras, y fueron transportadas de inmediato al laboratorio Clínico
“ALVAREZ” que es donde realice los análisis este se encuentra ubicado en la
ciudad de salcedo.
Una vez ya procesadas las muestras, se obtuvo cada uno de los resultados, la
Vitamina B12 la cual se determinó con el método de Imunoensayo Enzimático
Competitivo utilizando el equipo ESTAT FAX 7.400, y el reactivo de la casa
comercial MONOBINDInc.
Se realizó el extendido de la sangre total o también llamado frotis sanguíneo
para evaluar la forma de las diferentes células rojas o hematíes y la
hipersegmentación de los neutrófilos los cuales fueron evaluados y observados
también por mi tutora Dr. Mg. Tatiana Escobar en el laboratorio de la
Universidad Técnica de Ambato.
Al finalizar se anotaron cada uno de los resultados para posteriormente sean
interpretados correctamente y así poder realizar la estadística correspondiente
Se analizaron y tabularon los resultados utilizando el programa Excel y el
paquete estadístico para ciencias sociales SPSS (Statistical Pacage for Social
Sciences).
Se establecieron las conclusiones de la investigación.
57
ANALISIS DE MUESTRAS SANGUINEAS
Se obtuvo la muestra sanguinea con la tecnica de punción venosa, y las
adecuadas normas de bioseguridad , las muestras fueron colocadas en tubos uno
de color lila con anticuagulante EDTA para la realización del frotis sanguíneo y
su posterior estudio y en tubos rojos estos sin anticuagulante, que me servira para
realizar la determinación de vitamina B12.
MATERIALES Y EQUIPOS
Normas de bioseguridad
Mandil
Guantes
Gorro
Mascarilla
Zapatos
Materiales utilizados en la obtención de la muestra
Tubos de ensayo al vacío, tapa roja y tapa lila
Gradillas
Torundas de algodón
Alcohol antiséptico
Torniquete
Curitas
Jeringas de 10mL
Recipiente para desechar objetos corto punzantes
Recipiente para desechar desechos infecto contagiosos
58
Fundas rojas
Dermos y marcadores
Transportador para muestras
Equipos de laboratorio
Centrífuga
Baño maría
Microscopio
Homogenizador
Materiales de laboratorio
Placas porta y cubre objetos
Tubos de ensayo estériles
Gradillas
Pipetas
Reactivos
Para la determinación de vitamina B12
Reactivo de Wright para el frotis sanguíneo
Aceite de inmersión
MÉTODOS
Procedimientos para la venopunción
Preparar todos los materiales que se van a utilizar
Verificar los datos del paciente
Coificar cada uno de los tubos
Colocar al paciente lo mas comodo posible
59
Preguntar si el paciente se encuentra en ayunas
Explicar al paciente lo que se le va a realizar mediante la aceptación de un
concentimiento informado
Ubicar la vena de punción
Colocar el torniquete y desinfectar el lugar de la puncion y mientras ya fluya
sangre a la geringa quitar el torniquete y extraer la cantidad suficiente.
Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y se cubre el
sitio de punción para detener cualquier sangrado.
Colocar el los tubos cuidadosamente por las paredes evitando que estos se
hemolicen.
Preguntar al paciente si se encuentra bien y posteriormente colocarle una curita
en la zona depunción .
Desechar los materiales utilizados en los respectivos recipientes
Una vez obtenida la muestra sanguínea se procedió al transporte inmediato para
realizar centrifugación y así obtener la muestra el suero para su posterior análisis,
mientras se realiza la separación de los sueros, los tubos de tapa lila deben estar
en constante agitación para realizar los respectivos extendidos de sangre o frotis
sanguíneo .
PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO
Técnica para realizar el frotis sanguíneo
Una vez que la muestra este bien homogenizada procedemos a realizar el frotis
sanguíneo.
Codificar correctamente la placa para evitar confusiones.
Depositar una gota o 50ml de sangre total en la parte superior de la placa
porta objetos.
60
Inmediatamente impidiendo que esta se seque coger un cubreobjetos y
proceder hacer el extendido verificando que este tenga cabeza, cuerpo y cola.
Dejar que este se seque completamente.
Luego colocarlo en una superficie plana y colocar el reactivo de Wright hasta
que la placa quede completamente tapada con el reactivo.
Dejar actuar el reactivo de Wright durante 7 minutos.
Luego colocar agua destilada y soplar suavemente evitando que esta se
derrame y dejar actuar 2 minutos
Lavar la placa con un chorro de agua pequeño para evitar que este se dañe.
Limpiar la parte en donde no se encuentra el extendido para así tener una mejor
observación.
Dejar secar bien el frotis y agregar una gota de aceite de inmersión en la parte
inferior del frotis es decir en la cola y dejar que este se expanda hacia toda la
placa.
Observar al microscopio con el lente de 100 x y anotar los resultados
correspondientes.
Cabe recalcar que el reactivo utilizado para este procedimiento es de la casa
comercial TECNOLAB WRIGHT.
Con el reactivo de Wright y Microscopio
Procedí a colorear la extensión sanguínea (frotis) la placa completamente seca
y posteriormente al estudio morfologico de las celulas rojas o hematies,
observados con el microscopio de marca BOECO GERMANY.
61
Técnica para realizar la determinación de vitamina B12 de la casa comercial
MONOBINDInc.
Determinación cuantitativa de la concentración de vitamina B12 e suero humano
mediante un inmunoensayo enzimático e microplaca.
Principio
Inmunoensayo Enzimático Competitivo Retardado (tipo 9)
Los reactivos esenciales requeridos para un inmunoensayo enzimático incluyen
anticuerpo, conjugado enzima- antígeno y antígeno nativo.
Después de marcar el anticuerpo marcado con biotina con un suero que contiene
el antígeno, da como resultado una reacción del antígeno y el anticuerpo.
Ag + Ag – Ac(biotina)
Ac.- Anticuerpo marcado con biotina
Ag = Antígeno (cantidad variable)
Ag Ac = complejo inmune
Después de una incubación corta la enzima combinada es adicionada (esta adición
retrasada permite un incremento en sensibilidad para las muestras con una baja
concentración). Aunque la adicción del conjugado de la enzima resulta e una
reacción de competición entre la enzima análoga y el antígeno en la muestra por
un número limitado de sitios de unión de anticuerpos (no consumidos en la
primera incubación).
62
Ka
Enz Ag + Ag + rAc Btn Ag Ac Btn + Enz AgA Btn
K-a
Enz Ag = conjugado enzima – antígeno (cantidad constante)
Enz AgAcBtn= complejo anticuerpo – conjugado enzima antígeno
rACbtn= anticuerpo marcado con biotina que no reacciono en la primera
incubación.
K a= tasa constante de asociación
K – a = tasa constante de disociación
K = K a/K-a = constante de equilibrio
Ocurre una reacción simultanea entre la biotina adherida al anticuerpo y la
estreptavidina inmoviliza sobre el micropozo.
Esto efectúa de la fracción unida al anticuerpo después de decantación o
aspiración.
AgAcbtn + Enz AgAcbtn + estreptavidina complejo inmovilizado
Estreptavidina = estreptavidina inmovilizada en el pozo.
Complejo inmovilizado = complejo de sándwich unido a la superficie sólida.
La actividad de la enzima es la fracción unida al anticuerpo es inversamente
proporcional a la concentración del antígeno nativo.
Mediante el uso de varios sueros de referencia con concentración de antígeno
conocida, se puede generar una curva de respuesta de dosis de la cual se puede
hallar la concentración del antígeno desconocida.
63
REACTIVOS
MATERIALES SUMINISTRADOS
A.- calibradores de vitamina B12 1 ml/vial – iconos A.F
Encontramos en la presentación 6 Viales de albumina humana de referencia para
vitamina B12 en concentraciones de 0 (A), 100 (B), 200 (C), 400 (D), 1000 (E) Y
2000 (F) en pg/mL Almacenar de 2-8°C.un preservante ha sido adicionado. Los
calibradores pueden ser expresados en concentraciones molar p M/L
multiplicados por 0,738 por ejemplo: 100 pg/mL * 0,738 = 73,8 p M/L.
B.- Reactivo de enzima vitamina B12 – 6,0 ml/vial
Un vial de vitamina B12 (análoga) – peroxidasa de rábano (HRP) en una matriz
proteica estabilizada. Almacenar de 2 – 8°C.
C.- Reactivo vitamina B12 Biotina - 6,0 ml – Icono
Una botella de reactivo que contiene conjugado IgG de conejo purificado
biotinilado anti- vitamina B12 en Búfer colorante azul y conservante. Almacenar
de 2- 8°C.
D.- Placa revestida con estreptavidina 96 pozos - icono
Una microplaca de 96 pozos recubiertos con 1,0 ug/ml estreptavidina y empacada
en una bolsa de aluminio con un agente desecante. Almacenar de 2-8°C.
64
E.- Solución de lavado concentrado – 20 ml – icono
Un vial que contiene un surfactante en búfer de solución salina, un preservante ha
sido adicionado. Almacenar de 2-8°C.
F.- Reactivo –sustrato 12ml/vial – icono.
Un vial con contenido de tetrametilbencidina (TMB9) y peróxido de hidrogeno
(H2O2) en Búfer. Almacenar de 2-8 °C.
G.- Solución de parada de la reacción 8 ml/vial – icono
Un vial que contiene un ácido fuerte (H2SO4). Almacenar de 2 – 30°C
H.- Agente de liberación – 12ml/vial Icono
Un vial que contiene una base fuerte (hidróxido de sodio) y cianuro de potasio.
I.- Agente estabilizante - icono
Un vial que contiene solución ditiotreitol (DTT)
J.- Búfer de neutralización - 7 ml /vial
Un vial que contiene Búfer que reduce el pH de la extracción de la muestra.
65
Nota:
No usar reactivos más allá de la fecha de expiración
Evite la exposición prolongada al calor y a la luz
Los reactivos abiertos son estables por sesenta días cuando son almacenados
de 2-8°C la estabilidad del kit y sus componentes están identificados en la
etiqueta.
Todos los reactivos vienen para microplaca de 96 pozos.
Materiales adicionales
1.- Pipeta de 50 y 100 Ul con una precisión de 1,5 %
2.- Dispensadores de 0,100 ml y 0,350 ml con una precisión mayor a 1,5 %
3.- Dispensador de volumen ajustable (200 y 100 uL) para el conjugado.
4.- Lector de micro placas con capacidad de absorbancia de longitud de onda de
450 y 620 nm.
5.- Papel absorbente para el secado de las microplacas.
6.- Envoltura de plástico o cubierta de micro placa para la incubación.
Muestras
Muestra de suero o plasma heparinizado
Muestra debe ser tomada en ayunas
Las muestras pueden ser refrigeradas a una temperatura de 2-8°C máximo
hasta 5 días
En caso de que no puedan ser analizadas dentro de los 5 días pueden ser
almacenadas a una temperatura de 20°C hasta 30 días
Evitar en lo posible la congelación y descongelación repetitiva.
66
PROCEDIMIENTO
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
1. BÚFER PARA LAVADO
Diluir los contenidos del concentrado del lavado a 100 ml con agua destilada o
desionizada en un frasco adecuado el búfer diluido puede ser almacenado a
temperatura ambiente hasta por 60 días.
2. AGENTE DE LIBERACIÓN
Adicionar la alícuota de agente estabilizante con el fin de preparar una solución
1/40 (agente estabilizante / agente liberador), por ejemplo para preparar 400 uL
(4ml), adicionar 100 uL de agente de estabilización para 3900 uL de agente de
liberación.
3. EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA
Con los tubos suficientes para la preparación de todas las muestras de pacientes,
controles y sueros de referencia.
Dispensar 0,1 ml (100uL) de cada muestra dentro de los tubos de pruebas
individuales.
Pipetear 0,050ml (50uL) de búfer de liberación a cada tubo de prueba, agitar
después de cada adición. Permitir que la reacción se efectúe durante 15 minutos
al final de los 15 minutos, dispensar 0,050 ml (uL) de búfer de neutralización,
agitar después de cada adición y finalizar la extracción.
67
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Antes de proceder con el análisis llevar todos los reactivos las referencias séricas
y los controles a temperatura ambiente.
1. Marcar los pozos de microplaca para cada muestra de referencia control y
muestra a analizar por duplicado.
2. Pipetear 0,050 ml (50uL) de calibrador de vitamina B12 extraído
apropiadamente control o muestra dentro del pozo asignado.
3. Adicionar 0,050 ml (50uL) de reactivo de vitamina B12 biotina a todos los
pozos.
4. Agitar suavemente la microplaca durante 20 a 30 segundos para mezclar.
5. Cubrir e incubar durante 45 minutos a temperatura ambiente.
6. Adicionar 0,050 ml (50uL) de reactivo enzimático de vitamina B12 a todos los
pozos.
Directamente en la parte superior añadir los reactivos dispensados en los pozos
7. Agitar suavemente la microplaca durante 20 a 30 segundos para mezclar.
8. Cubrir e incubar durante 30 minutos a temperatura ambiente.
9. Desechar el contenido de la microplaca mediante decantación o aspiración. Si
se realiza decantación secar la placa con papel absorbente.
10. Adicionar 350 uL de Búfer de lavado, decantar golpear y secar o aspirar
repetir dos veces más para un total de tres lavados
11. Adicionar 0,100 ml (100uL) de reactivo de sustrato a todos los pozos.
Siempre añadir los reactivos en el mismo orden con el fin de minimizar las
diferencias del tiempo de reacción entre los pozos.
Nota: (No se debe agitar después de la adicción del sustrato)
12. Incubar a temperatura ambiente durante 20 minutos.
13. Añadir 0,050 ml (50 uL) de solución de parada a cada pozo y mezcle
suavemente de 15 a 20 segundos.
68
Siempre añadir los reactivos en el mismo orden con el fin de minimizar las
diferencias del tiempo de reacción entre los pozos.
14. Leer la absorbancia de cada pozo en 450 nm.
Los resultados deben de leerse dentro de los 30 minutos siguientes a la adicción
de la solución de parada.
Cálculo de Resultados
Se utiliza una curva de dosis respuesta para determinar la concentración de
vitamina B12 en muestras desconocidas.
1. Registrar la absorbancia obtenida a partir de la impresión del lector de
microplaca.
2. Graficar la absorbancia para cada suero referencia duplicado frente a la
correspondiente concentración de vitamina B12 en pg/mL en papel grafico lineal.
3. Trazar la mejor curva a través de los puntos.
4. Para determinar la concentración de vitamina B12 de una muestra desconocida,
ubicar la absorbancia promedio de los duplicados para cada muestra desconocida
en el eje vertical del gráfico, encontrar el punto de intersección de la curva y leer
la concentración en pg/ml desde el eje horizontal del gráfico.
Tabla N° 2: Valores de referencia de la Vitamina B12
POBLACIÓN Pg/Ml pmol/L
Recién nacidos 160-1300 118-959
Adultos 200-835 148- 616
Adulto > 60 años 110- 800 81-590
FUENTE: Inserto de la casa comercial MONOBINT
69
Con el espectrofotómetro ESTAT FAX 4.700.
Deteminación de vitamina B12, utilizando el método de Imunoensayo
Enzimático Competitivo Retardado.
La técnica que se utilizará en el presente estudio será la observación en forma
directa en la cual el instrumento será un registro específico que ayudará a tener un
respaldo de los resultados de laboratorio (muestra de sangre) con los cuales se
procederá a realizar un análisis profundo para establecer el número de pacientes
que presentan anemia megaloblástica debido al consumo excesivo de alcohol.
PLAN DE RECOLECCIÓN DE INFORMACIÓN.
La recolección de la información se lo realizo en Movimiento Internacional 24
horas de Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”. La recolección de
información complemento las estrategias metodológicas requeridas por los
objetivos e hipótesis de investigación, de acuerdo en el enfoque escogido.
3.8 ASPECTOS ÉTICOS
Siguiendo un régimen legal primero se les explico sobre que se trata la
investigación seguida al acceder a realizarse el examen se quedó claro que
ninguno de los pacientes está dispuesto a firmar el consentimiento informado,
pero si contestar a mis preguntas que me sirvieron para la recolección
información.
Ya que acuden voluntariamente debido a sus condiciones, se procedió a realizar
la determinación de vitamina B12 y el frotis sanguíneo de cada uno de los
pacientes participantes, los resultados obtenidos en los análisis serán entregados al
Sr. Wilson Romero su Padrino ya que a ellos no les interesa los resultados más se
enfatizan en querer ayudarme en la investigación y no recibir ninguna medicación
70
ya que ellos están en el centro voluntariamente y su recuperación se da con terapia
auto diagnostica.
Considerando: Que, la Constitución de la República del Ecuador, ordena:
REGLAMENTO CONTROL A CENTROS DE RECUPERACION A
PERSONAS CON ADICCION
Norma: Acuerdo Ministerial # 339
Status: Vigente Publicado: Registro Oficial # 272
Fecha: 6-9-2010
Art. 4.- Los Centros de Recuperación (CR) pueden ser: - Públicos o privados. - De
consulta externa e internamiento. Art. 5.- Los CR tienen por finalidad ofrecer
programas de promoción, prevención, diagnóstico, tratamiento, rehabilitación,
reinserción social a personas con cualquier adicción por el consumo de alcohol,
psicotrópicos, estupefacientes y otras sustancias que generen dependencia.
Art. 6.- Los Centros de Recuperación (CR), constituyen establecimientos de salud,
que pueden ser organizaciones de la sociedad civil, o cualquier institución o
persona natural, legalmente calificada y autorizada para brindar el servicio de
promoción, prevención, tratamiento, rehabilitación y reintegración social, las
mismas que estarán bajo la responsabilidad de un profesional de la salud con
formación de cuarto nivel.
f.) Dra. Ximena Abarca Durán, Ministra de Salud Pública (E). Es fiel copia del
documento que consta en el archivo del Proceso de Asesoría Jurídica al que me
remito en caso necesario.- Lo certifico.- Quito, a 9 de agosto del 2010. f.) Dra.
Nelly Mendoza Orquera, Secretaria General, Ministerio de Salud Pública. (37)
71
EL MINISTRO DE SALUD PÚBLICA
Considerando:
Que, la Constitución de la República del Ecuador manda:
“Art. 32.- La salud es un derecho que garantiza el Estado, cuya realización se
vincula al ejercicio de otros derechos, entre ellos el derecho al agua, la
alimentación, la educación, la cultura física, el trabajo, la seguridad social, los
ambientes sanos y otros que sustentan el buen vivir. El Estado garantizará este
derecho mediante políticas económicas, sociales, culturales, educativas y
ambientales; y el acceso permanente, oportuno y sin exclusión a programas,
acciones y servicios de promoción y atención integral en salud, salud sexual y
salud reproductiva. La prestación de los servicios de salud se regirá por los
principios de equidad, universalidad, solidaridad, interculturalidad, calidad,
eficiencia, eficacia, precaución y bioética, con enfoque de género y
generacional.”. (38)
Ley orgánica de salud ley 67 registro oficial suplemento 423 de 22- diciembre
2006.
Última modificación 24 de enero del 2012. Estado vigente
Art. 1.- La presente Ley tiene como finalidad regular las acciones que permitan
efectivizar el derecho universal a la salud consagrado en la Constitución Política
de la República y la ley. Se rige por los principios de equidad, integralidad,
solidaridad, universalidad, irrenunciabilidad, indivisibilidad, participación,
pluralidad, calidad y eficiencia; con enfoque de derechos, intercultural, de género,
generacional y bioético.
72
Art. 2.- Todos los integrantes del Sistema Nacional de Salud para la ejecución de
las actividades relacionadas con la salud, se sujetarán a las disposiciones de esta
Ley, sus reglamentos y las normas establecidas por la autoridad sanitaria nacional.
Art. 3.- La salud es el completo estado de bienestar físico, mental y social y no
solamente la ausencia de afecciones o enfermedades. Es un derecho humano
inalienable, indivisible, irrenunciable e intransmisible, cuya protección y garantía
es responsabilidad primordial del Estado; y, el resultado de un proceso colectivo
de interacción donde Estado, sociedad, familia e individuos convergen para la
construcción de ambientes, entornos y estilos de vida saludables.
Art. 4.- La autoridad sanitaria nacional es el Ministerio de Salud Pública, entidad
a la que corresponde el ejercicio de las funciones de rectoría en salud; así como la
responsabilidad de la aplicación, control y vigilancia del cumplimiento de esta
Ley; y, las normas que dicte para su plena vigencia serán obligatorias.
Art. 5.- La autoridad sanitaria nacional creará los mecanismos regulatorios
necesarios para que los recursos destinados a salud provenientes del sector
público, organismos no gubernamentales y de organismos internacionales, cuyo
beneficiario sea el Estado o las instituciones del sector público, se orienten a la
implementación, seguimiento y evaluación de políticas, planes, programas y
proyectos, de conformidad con los requerimientos y las condiciones de salud de la
población.
Art. 6.- Es responsabilidad del Ministerio de Salud Pública: 1. Definir y
promulgar la política nacional de salud con base en los principios y enfoques
establecidos en el artículo 1 de esta Ley, así como aplicar, controlar y vigilar su
cumplimiento; 2. Ejercer la rectoría del Sistema Nacional de Salud.
73
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUCIÓN
4.1 TABULACIÓN DE DATOS
TABLA N° 3.- Resultados
CÓDIGO
EDAD
FROTIS VITAMINA B12 (pg/mL)
Macrocitosis Hipersegmentación de los Neutrófilos
1 27 SI SI 160
2 64 SI SI 84,6
3 53 SI SI 108,6
4 28 SI SI 149,2
5 52 SI NO 98,2
6 38 SI SI 137,8
7 29 SI SI 125,5
8 18 SI SI 120,2
9 30 SI SI 115,6
10 28 SI SI 138,7
11 24 NO NO 262
12 23 SI SI 116,7
13 35 SI SI 98,5
14 29 SI SI 96,6
15 55 SI SI 112,2
16 46 NO NO 246,7
17 33 NO NO 373
18 48 NO NO 282,6
19 62 SI SI 108,8
20 36 SI NO 103,1
21 54 SI SI 131
22 58 SI SI 147,5
23 39 SI SI 107,2
24 37 SI SI 99,8
25 27 SI SI 106,7
26 48 SI NO 119,2
27 45 SI SI 108,5
28 52 SI NO 98,2
29 62 SI SI 75,2
30 53 SI SI 120,5
31 32 NO NO 289
32 30 NO NO 248,8
33 59 SI SI 114,3
74
Se analizó los datos recogidos mediante una entrevista con los pacientes y los
resultados obtenidos en el procesamiento de las muestras sanguíneas. Se
analizaron 40 muestras sanguíneas de los pacientes que acuden al Movimiento
Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, con
los cuales se cumplió con los objetivos planteados en la investigación.
Tabla N° 4.- Edades
Elaborado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”.
34 48 SI SI 112,5
35 65 SI NO 106,4
36 64 SI SI 93,5
37 47 SI NO 113,3
38 48 SI SI 128,3
39 62 NO NO 380
40 27 SI SI 142
RANGO DE EDADES DE LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL
MOVIMIENTO INTERNACIONAL 24 HORAS ALCOHOLICOS
ANONIMOS “GRUPO LATACUNGA”
EDADES FRECUENCIA PORCENTAJE
18-28 años 8 20%
29-38 años 10 25%
39-48 años 8 20%
49-58 años 7 17,5%
59-68 años 7 17,5%
Total 40 100%
75
Gráfico N° 1.- Edades
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”.
Análisis
De los 40 pacientes que acuden AL Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, se destaca que el 20% está
en un rango de edad de 18 a 28 años, el 25% su rango de edad es de 29 a 38 años,
seguido del 20% de 38 a 48 años y con un 17,5% el rango de edad es de 49 a 58
años al igual que el rango de edades de 59 a 68 años.
Interpretación
De acuerdo a los datos obtenidos, pudimos observar que la mayor parte de
pacientes que acuden Movimiento internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”, se encuentra en un rango de edad de 29 a 38 años.
20%25%
20%17,5% 17,5%
18-28 años 29-38 años 39-48 años 49-58 años 59-68 años
RANGO DE EDADES DE LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL MOVIMIENTO INTERNACIONAL 24
HORAS ALCOHOLICOS ANONIMOS “GRUPO LATACUNGA”
76
Tabla N°5.- Género
GENERO DE LOS PACIENTES PARTICIPANTES
GÉNERO FRECUENCIA PORCENTAJE
FEMENINO 3 7,5%
MASCULINO 37 92,5%
TOTAL 40 100%
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
Gráfico N° 2.- Género
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
7,50%
92,50%
GENERO DE LOS PACIENTES PARTICIPANTES
FEMENINO MASCULINO
77
Análisis
De los 40 pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, el 92,5% son de género
masculino, mientras que el 7,5% son de género femenino.
Interpretación
De acuerdo a los datos obtenidos, se observó que la mayor parte de pacientes que
acuden al Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos “GRUPO
LATACUNGA” son de género masculino con un 92,5%, sumando un total de 37
y el resto son de género femenino.
Tabla N°6.- Tiempo que acuden Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”
TIEMPO EN QUE LOS PACIENTES ACUDEN AL MOVIMIENTO PARA
REHABILITARSE
TIEMPO QUE ACUDEN AL MOVIMIENTO FRECUENCIA PORCENTAJE
1-3 años 8 20%
4 a 6 años 22 55%
7 a 10 años 10 25%
TOTAL 40 100%
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
78
Gráfico N° 3.- Tiempo que acuden Movimiento Internacional de 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
Análisis
De los 40 pacientes del Movimiento Internacional de Alcohólicos anónimos
“GRUPO LATACUNGA”, 22 pacientes acuden de 4 a 6 años, 10 pacientes de 7 a
10 años y 8 pacientes acuden al centro de 1 a 3 años.
Interpretación
De lo observado en el Movimiento Internacional 24 horas de Alcohólicos
anónimos “GRUPO LATACUNGA” la mayor parte de pacientes acuden al
Movimiento de 4 a 6 años tiempo adecuado para el estudio de la investigación,
dando un porcentaje de casos estudiados del (55%), mientras que los demás
acuden al movimiento en un rango menor de tiempo.
20%
55%
25%
TIEMPO EN QUE LOS PACIENTES ACUDEN AL MOVIMIENTO PARA REHABILITARSE
1-3 años 4 a 6 años 7 a 10 años
79
Tabla N° 7.- Tiempo de consumo de alcohol
TIEMPO DE CONSUMO DE ALCOHOL
TIEMPO DE ALCOHOLISMO FRECUENCIA PORCENTAJE
1-6 años 8 20%
7-12 años 14 35%
13-18 años 7 17,5%
19-24 años 5 12,5%
25-30 años 6 15%
TOTAL 40 100%
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
Gráfico N° 4.- Tiempo de consumo de alcohol
Realizado por: Quispe Magaly
Fuente: Movimiento Internacional 24 horas Alcohólicos Anónimos
“GRUPO LATACUNGA”
1-6 años 7-12 años 13-18 años 19-24 años 25-30 años
20%
35%
17,5%
12,5%15%
TIEMPO DE CONSUMO DE ALCOHOL
80
Análisis
De los 40 pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, 35% son alcohólicos de 7 a 12
años, 20% de 1 a 6 años, 17,5% de 13 a 18 años, 15% de 19 a 24 años y el 12,5%
son alcohólicos de 25 a 30 años.
Interpretación
De acuerdo a los datos obtenidos, podemos observar que la mayor parte de
pacientes son alcohólicos en un rango de tiempo de 7 a 12 años con un total de 14
casos (35%), es decir el tiempo pertinente para el estudio planteado, ya que la
deficiencia de la vitamina B12 en conjunto con el polimorfismo de células rojas o
hematíes se dan a partir de que el paciente haya tenido antecedentes alcohólicos
en un rango de tiempo de 3 a 5 años.
81
4.2 RESULTADOS DE LABORATORIO
Tabla N° 8.- Características celulares
Autor: Quispe, Magaly; 2016
Fuente: Investigación Propia
Gráfico N°5.- Característica celulares
Autor: Quispe, Magaly; 2016
Fuente: Investigación Propia
MacrocitosisHipersegmentación de los
Neutrofilos
Positivos 82,5% 67,5%
Negativos 17,5% 32,5%
0,0%
10,0%
20,0%
30,0%
40,0%
50,0%
60,0%
70,0%
80,0%
90,0%
Títu
lo d
el e
je
RESULTADO DEL ESTUDIO MORFOLÓGICO DEL FROTIS SANGUINEO
RESULTADO DEL ESTUDIO MORFOLÓGICO DEL FROTIS SANGUINEO
CARACTERÍSTICAS
CELULARES
POSITIVOS NEGATIVOS
FRECUENCIA PORCENTAJE FRECUENCIA PORCENTAJE
Macrocitosis 33 82,5% 7 17,5%
Hipersegmentación
de los Neutrófilos
27 67,5% 13 32,5%
82
Análisis
De los 40 pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, 33 pacientes presentan
Macrocitosis mientras que 7 pacientes no lo presentan y 27 pacientes presentan
Hipersegmentación de los Neutrófilos, mientras que 13 pacientes no lo presentan,
pero si presentan otros tipos de polimorfismo como anisocitosis y esferocitosis.
Interpretación
De acuerdo a lo observado la mayor parte de los pacientes presentan una
Macrocitosis con un 82,5%, pero también existe un alto porcentaje que presenta
Hipersegmentación de los Neutrófilos con un 67,6% lo que quiere decir que los
resultados obtenidos son favorables presentando así en la mayoría de los
neutrófilos más de 6 lóbulos, lo que es característico en anemias megaloblástica
causado por deficiencia de vitamina B12 debido al consumo excesivo de alcohol,
están acordes a lo que se necesitaba en la investigación para realizar la
comprobación de la hipótesis.
83
Tabla N° 9.- Vitamina B12
VALORES DE LA DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12
VALORES FRECUENCIA PORCENTAJE
Disminuida<150 pg/mL 32 80%
Normal 150 a 835 pg/mL 8 20%
Aumentada >835 g/mL(Alto) 0 0%
TOTAL 40 100%
Autor: Quispe, Magaly; 2016
Fuente: Investigación Propia
Gráfico N° 6.- Vitamina B12
Autor: Quispe, Magaly; 2016
Fuente: Investigación Propia
80%
20%
0%
VALORES DE LA DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12
Disminuida <150 pg/mL
Normal 150 a 835 pg/mL
Aumentada >835 pg/mL
84
Análisis
De los 40 pacientes que acuden al Movimiento Internacional 24 horas
Alcohólicos Anónimos “GRUPO LATACUNGA”, 32 pacientes presenta un bajo
nivel de Vitamina B12 (< 150 pg/mL), 8 pacientes presentan un nivel normal de
Vitamina B12 (150 a 835 pg/mL), mientras que ningún paciente presento un nivel
alto.
Interpretación
De acuerdo a lo observado existe un alto porcentaje de pacientes que presentan un
nivel bajo de Vitamina B12 es decir < 150 pg/mL con un total de 80%, lo que está
estrechamente relacionado al polimorfismo de células rojas ocasionado por el
consumo excesivo de alcohol.
4.3 VERIFICACIÓN DE LA HIPÓTESIS
Paso I.- Hipótesis estadística
Hi: Los valores bajos de Vitamina B12 se relacionan con las alteraciones
morfológicas en células rojas en pacientes alcohólicos.
Ho: Los valores bajos de Vitamina B12 no se relacionan con las alteraciones
morfológicas en células rojas en pacientes alcohólicos.
Paso II.- Estadístico de prueba
𝑡 =d
𝑠/√n
t: t de Student
85
d: promedio de la diferencia
s: desviación estándar del promedio de la diferencia
√𝑛: raíz cuadrado de n total de la población
Paso III.- Niveles de significancia.
Se acepta la hipótesis nula si el valor a calcularse de t Student es menor al valor
de t critico basada en el margen de error = 0,05.
Paso IV.- Toma de decisión.
Según lo observado se rechaza la hipótesis nula debido a que el valor de t critica
basada en su margen de error es de= 0,05 < t calculada dio un valor de error de =
0,000. Como la t calculada es menor que la t crítica permite concluir que los
valores obtenidos de la vitamina B12 y estudio morfológico del frotis sanguíneo
presentan un polimorfismo en las células rojas o hematíes como también
hipersegmentación de los neutrófilos, si los pacientes presentan Anemia
Megaloblástica
86
CONCLUSIONES
Una vez ya terminado el proyecto de investigación y relacionándolo con cada una
de las variables y objetivos, se pudo demostrar que existe una deficiencia de
Vitamina B12, como también estuvo presente el polimorfismo de células rojas
característico de anemia megaloblastica en pacientes alcohólicos.
Al Movimiento Internacional 24 horas “Grupo Latacunga” acudieron 40
pacientes de los cuales 37 hombres y 3 mujeres con un rango de edades
entre 29 – 38 años con antecedentes alcohólicos de 7 – 12 años, lo cual al
obtener los resultados de vitamina B12 y relacionarlo con el
polimorfismo de células rojas, se pudo apreciar tanto la disminución de la
vitamina B12, el polimorfismo en los eritrocitos y la hipersegmentaciòn en
los neutrófilos.
Al valorar los resultados de la formula hemática debido a las
características morfológicas de los eritrocitos como son (macrocitosis e
hipersegmentaciòn de los neutrófilos), con los resultados de la Vitamina
B12 que fueron estos <150 pg/mL relacionándola así con la anemia
megaloblastica.
Lo cual podemos definir que el consumo de alcohol ocasiona un déficit de
Vitamina B12, alteración en la forma de las células rojas e
hipersegmentaciòn de los neutrófilos las cuales son características
principales de anemia megaloblastica.
87
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95
ANEXOS
96
ANEXO N° 1.- PROCESAMIENTO DE LA TOMA DE MUESTRAS EN EL
MOVIMIENTO INTERNACIONAL 24 HORAS “GRUPO LATACUNGA”
Y PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS EN EL LABORATORIO
CLINICO “ALVAREZ”
FIGURA 1.- LUGAR DONDE SE TOMO LAS MUESTRAS PARA SU POSTERIOR
INVESTIGACIÓN
FIGURA 2.- ENTREGA DE INFORMACION HACIA LOS PACIENTES DEL
MOVIMIENTO
97
EXTRACCIÓN SANGUÍNEA
ANEXO N° 3.- PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA EL
FIGURA 3 Y 4.- TOMA DE MUESTRAS MEDIANTE PUNCION VENOSA A LOS PACIENTES
PARTICIPANTES DEL MOVIMIENTO
98
FROTIS SANGUÍNEO
FIGURA 5, 6, 7, 8.- PROCESAMIENTEO DE LA MUESTRA PARA LA REALIZACION DEL FROTIS
SANGUÍNEO.
99
ANEXO N° 4.- PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LA
DETERMINACION DE VITAMINA B12 MEDIANTE LA TECNICA DE
FIGURA 9.- OBSERVACION DE LOS FROTIS SANGUINEOS CON LA SUPERVICIÓN DE LA DR. TATIANA
ESCOBAR EN EL LABORATORIO DE LA UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO.
FIGURA 10, 11 .- Desechamos el contenido y realizamos el lavado adicionando 350uL del
Bufer de lavado repetimos 2 veces el procedimiento, adicionamos 100 uL del suatrato
incubaamos durante 20 minutos.
100
INMUNO ENSAYO ENZIMATICO EN MICROPLACAS.
FIGURA 12,13 .- MUESTRAS Y EQUIPO UTILIZADOS PARA REALIZAR LA
DETERMINACIÓN DE VITAMINA B 12
FIGURA 14,15,16 .- INGRESO DE LA PRUEBA VITAMINA B12 AL EQUIPO STAT FAX
4700.
101
FIGURA 17,18, 19, 20 .- Agitar suavemente, cubrir los pozillos y esperar 45 minutos .
102
,
FIGURA 21,22 .- Adicion del reactivo enzimatico de vitamina B12, agitar suavemente,
cubrimos e incubamos 30 minutos.
FIGURA 23,24 .- Adicon de la solucion de parada y mezclar de 15-20 segundos suavemente
leectura despues, de los 30 minutos a 450nm.
103
ANEXO N° 2.- CARACTERISTICAS DE LAS VITAMINAS
Tabla Nª 10: Características de las vitaminas
VITAMINAS DONDE SE LAS ENCUENTRAN
Retinol o vitamina A Se la encuentra en el aceite de hígado y
bacalao
Tiamina o vitamina B1 Se la encuentra en el salvado de arroz.
Ácido ascórbico o vitamina C Se la encuentra en los cítricos y en la
mayoría de alimentos frescos.
Calciferol o vitamina D Se la encuentra en el aceite de hígado y
aceite de bacalao.
Riboflavina o vitamina B2 Se la encuentra en las carnes lácteos y
huevos.
Tocoferol o vitamina E Se la encuentran en aceites de germen
de trigo y en aceites vegetales sin freír
Cianocobalamina o vitamina B12 Se la encuentra en hígado, huevos,
productos animales
Filoquinona vitamina K1 Se la encuentra en las legumbres.
Ácido pantoténico o vitamina B5 Se la encuentra en las carnes y cereales
integrales.
Biotina o vitamina B7 Se la encuentra en carnes, lácteos y
huevos.
Piridoxina o vitamina B6 Se la encuentra en las carnes y lácteos.
Niacina o vitamina B3 Se la encuentra en las carnes y cereales.
Ácido fólico o vitamina B9 Se los encuentran en las legumbres.
Fuente: Fundamentos de Nutriciòn
104
ANEXO N° 3.- FORMATO DE RESULTADO DE LABORATORIO
105
ANEXO N° 4.- AUTORIZACIÓN DEL LABORATORIO CLÍNICO
ALVAREZ PARA LA REALIZACIÓN DE LOS ANÁLISIS DE
VITAMINA B12 Y FROTIS SANGUÍNEO.
106
ANEXO N° 5.- OFICIO PARA PEDIR AUTORIZACIÓN PARA
REALIZAR EL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN EN EL CENTRO DE
ALCOHOLICOS ANONIMOS 24 HORAS GRUPO LATACUNGA
107
ANEXO N°6.- VOLANTE INFORMATIVO ENTREGADO EN EL
CENTRO DE ALCOHOLICOS ANONIMOS 24 HORAS GRUPO
LATACUNGA
108
ANEXO N°7.- INSERTO UTILIZADO PARA LA DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12
109
110
ANEXO N° 8. AUTORIZACIÓN DEL CENTRO DE ALCOHOLICOS
ANONIMOS 24 HORAS GRUPO LATACUNGA
111