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UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES FACULTAD DE MEDICINA ENFERMERIA NUTRICION Y TECNOLOGIA
MEDICA DIVISION DE POST GRADO
EFECTO EN EL CICLO VITAL DE DIPTEROS DE IMPORTANCIA MEDICO LEGAL EN CADÁVERES
DE Cavia porcellus ( conejo cuy)FALLECIDOS POR ORGANOFOSFORADO Y DIAZEPAM EN LA
CIUDAD DE COCHABAMBA BOLIVIA, MAYO A JUNIO DEL 2009
Para optar al título de Magister Scienciatarum Medicina Forense
Presentado por
MARIA LUISA CALLE DAVILA
TUTORA: DRA. NOEMÍ SANDRA TIRADO BUSTILLOS
LA PAZ - BOLIVIA
ii
DEDICATORIA
A mis padres por estar siempre a mi lado,
a mi esposo por su apoyo en mi trabajo de
investigación y a mis hijos por su amor y
comprensión.
iii
AGRADECIMIENTOS
Mis más sinceros agradecimientos al Dr. Delfo Carballo docente de la
Universidad Mayor de San Andrés, quien hizo posible la realización de la maestría
en medicina forense para médicos del área rural, dándome la oportunidad de
realizar mi maestría en esta universidad
A la Dra. Tirado quien dedico parte de su tiempo, en la revisión del
manuscrito y por las recomendaciones necesarias para el desarrollo de este
estudio.
Al Lic. Miguel Limachi, por su extraordinario apoyo quien me guió en mi
trabajo de investigación y compartió generosamente sus conocimientos en el tema
y contactarme con la entomóloga Rosario Apaza para la identificación del material.
A la entomóloga Rosario Apaza por su invaluable colaboración en la
identificación de los dípteros, haciendo posible este estudio.
A la Universidad Mayor de San Andrés donde termine mis estudios de
Maestría.
iv
INDICE
RESUMEN………………………………………………..…..…………Pág. 1
1. INTRODUCION............................................................................Pág. 3
1.1 Estudios Realizados……… …………...…… …………………Pág. 5
2. MARCO TEÓRICO..................................................................... Pág. 6
2.1 Historia…………………………… …………….…………..…...Pág. 6
2.2. Entomología Forense……………… ………...….…….….…..Pág. 7
2.2.1 Insectos de Importancia Forense………………….…..Pág. 8
2.2.1.1 Dípteros………………………………….....….. Pág. 9
2.2.1.2 Coleópteros……………………………………..Pág.16
2.2.1.3 Himenópteros………………………………….. Pág. 17
2.2.1.4 Oviposición……………………………….……. Pág. 17
2.2.2 Clasificación……………………………………….....….. Pág. 18
2.3 Fenómenos Cadavéricos……………………………………... Pág. 21
2.3.1 Estados de descomposición de un cadáver……..…... Pág. 21
2.4 Toxico o Veneno………………………………….……………..Pág. 23
2.4.1 Vías de Absorción…………………………………….…..Pág. 24
2.5 Intoxicación……………………………..………………………..Pág. 25
2.5.1 Clasificación…………………………………..………….. Pág. 26
2.5.1.1 Por duración a la exposición (SSA 1993)…….. Pág. 26
2.5.1.2 Según severidad………………………………… Pág. 26
2.5.1.3 Por el sitio de acción en el que actúa………… Pág. 27
2.6 Grupos de Sustancias Toxicas……...………………………....Pág. 28
2.6.1 Plaguicidas o Pesticidas………..……….………………..Pág. 28
2.6.1.1 Clasificación de los plaguicidas………………...Pág. 28
2.6.1.2 Organofosforados………………….……………. Pág. 28
2.6.2 Benzodiacepinas………………………..…………………Pág. 33
2.6.2.1 Diazepam……… ………………………………...Pág. 33
2.7 Cavia porcellus………………………………….………….……Pág. 35
v
2.8 Normas Legales……………………………………………………... Pág. 36
2.8.1 Ley Nº 1970 Código de Procedimiento Penal…………...… Pág. 36
2.8.2 Código de salud……………………………………………..… Pág. 40
2.8.3 Leyes nacionales y convenciones firmadas por Bolivia……Pág. 41
3. JUSTIFICACIÓN..................................................................................Pág. 42
4. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN...................................................... Pág. 44
4.1 Pregunta de Investigación............................................................. Pág. 44
4.2 Objetivo General…………………..………………………………..… Pág. 44
4.3 Objetivos Específicos……..……………………………….………….Pág. 44
4.4 Diseño Metodológico......................................................................Pág. 45
4.5 Muestra………………................................................................... Pág. 45
4.6 Población........................................................................................Pág. 45
4.7 Aspectos Éticos..............................................................................Pág. 45
4.8 Variables.........................................................................................Pág. 46
5. MATERIAL Y METODOS.....................................................................Pág. 46
5.1 Localización del área de estudio………………………….…………Pág. 46
5.2 Animales usados……………………………………………….……...Pág. 48
5.3 Tiempo de estudio……………………………………………………..Pág. 48
5.4 Técnicas de campo y laboratorio…………………………………….Pág. 48
5.5 Recolección de dípteros adultos…………………….……………….Pág. 50
5.6 Recolección de inmaduros de dípteros…………………………..…Pág. 51
5.7 Cría de huevos y larvas……………………………………………....Pág. 52
5.8 Identificación de insectos…………………………………………….Pág. 52
6. FUENTE DE RECOLECCIÓN DE DATOS..........................................Pág. 53
7. RESULTADOS…… ............................................................................Pág. 53
8. DISCUSIÓN..........................................................................................Pág. 64
9. CONCLUSIONES…………………………………………………….….…Pág. 67
10. RECOMENDACIONES........................................................................Pág. 69
11. BIBLIOGRAFÍA....................................................................................Pág. 70
12. GLOSARIO..........................................................................................Pág. 75
13. ANEXOS.............................................................................................Pág. 78
1
RESUMEN
La Entomología Forense, determina el tiempo Post-Mortem, lugar y
probable causa de muerte. El presente trabajo fue determinar el efecto del
diazepam y organofosforados sobre el ciclo vital de los dípteros e identificar
taxonómicamente las especies implicadas en todo el proceso de descomposición.
El estudio fue de tipo experimental, en cadáveres de cavia porcellus
(conejos cuy), uno envenenado con organofosforado, otro con sobredosis de
diazepam y un control muerto por asfixia por ahorcamiento. Se recolectó huevos,
larvas, pupas y adultos de dípteros diariamente de horas 14:00 a 17:00 durante 30
días hasta la emergencia de dípteros adultos de las pupas. Al segundo día de
colocados los cadáveres se observó dípteros adultos de la familia Sarcophagidae
y Muscidae, al tercer día Calliphoridae, el número de dípteros que ovipositaron no
varió mucho en los conejos.
Se evidenció muy pocas larvas en el conejo con organofosforado, y en gran
cantidad en el conejo con diazepam en relación al conejo control. La pupación
ocurrió primero en el conejo control luego de seis y siete días siguientes en los
otros conejos. Luego de uno a tres día después de la emergencia de las pupas de
conejo control lo hicieron de los conejos con organofosforado y diazepam,
pudiendo ser posible su uso como medidor principal del intervalo post mortem.
2
La temperatura ambiente promedio varió entre 11 y 16 ºC. En la curva de
crecimiento larval se evidencia que existe un retraso en el desarrollo de las larvas
provenientes del conejo con organofosforado y diazepam, existiendo el mayor
promedio en longitud de larvas provenientes del cadáver del conejo con diazepam.
El conejo con organofosforado se momificó manteniendo la postura
anatómica en la que fue depositado y sin desprendimiento de pelo observándose
en el transcurso muy pocas larvas las cuales no fueron suficientes para consumir
en su totalidad el cuerpo. Por otro lado los conejos con diazepam y control
quedaron reducidos a algo de cuero, huesos disgregados y pelos repartidos en la
superficie en que se encontraban.
Entre los especímenes identificados se registraron: 7 especies, 12 géneros
pertenecientes a 5 familias. Musca doméstica fue más abundante, seguido por
Chrysomya alpiceps, Lucilia sericata y en menor cantidad morfoespecie
perteneciente a Sarcophagidae
3
1. INTRODUCCIÓN
La Entomología Forense, también llamada Entomología Médico-legal,
donde la ciencia de los artrópodos es empleada como herramienta en las
investigaciones de la escena del crimen y otros casos forenses, cuando el cadáver
es hallado bajo condiciones extraordinarias, resultando insuficientes los métodos
de la Patología Clásica.
La entomología forense es una herramienta valiosa que aporta evidencia en
casos de homicidio, suicidio, violación, negligencia, traslado de cuerpo y
contribuye con la determinación del tiempo o Intervalo Post-Mortem (I.P.M.).1
La entomotoxicología estudia las drogas presentes en los insectos que se
alimentan del cadáver, e investiga los efectos de las sustancias toxicas en el
desarrollo de los mismos, con tal finalidad, se debe observar el ciclo vital de los
insectos.
Este proceso es dependiente casi en su totalidad de un gran cúmulo de
variables como la temperatura, la humedad relativa, el tipo de vegetación, el pH
del suelo, la temporada estacional y las circunstancias de la muerte, por lo que en
los últimos años el objetivo fundamental de la Entomología Forense se ha
enfocado hacia el estudio del comportamiento de estas oleadas necrófagas con
respecto a tales factores, y dirigido principalmente hacia la determinación del
intervalo post mortem. 2
4
Los sitios usuales de depósito de huevos en humanos muertos son las
aberturas naturales, inclusive aquí hay preferencia, los moscardones
generalmente pondrán sus huevos en las regiones faciales, y más raramente en la
zona genito-anal, si ha habido asalto sexual con anterioridad a la muerte, llevando
al sangrado de la región, los moscardones depositarán sus huevos con más
probabilidad en la región genito-anal; pudiendo sospechar de un crimen sexual,
esto por supuesto deberá ser corroborado con otra evidencia. Los sitios de
infestación de moscardas en los cuerpos pueden ser importantes en la
determinación de la causa de deceso, o al menos en la reconstrucción de los
eventos previos a la muerte. Por ejemplo: si ha habido trauma o mutilación del
cuerpo previos a la muerte, esto puede llevar a los moscardones a poner huevos
en las heridas.2
Cabe señalar que las intoxicaciones agudas por plaguicidas es un problema
de salud pública mundial, de igual manera las intoxicaciones por medicamentos,
ambos son usados en intentos de suicidios, siendo más letal la ingestión de
plaguicidas.
En función a lo descrito se puede señalar que el análisis cuidadoso y la
identificación de los insectos que se encuentran en el cadáver en descomposición
puede proporcionar información forense valiosa.
Al respecto existen pocos estudios que han identificado los efectos de las
sustancias toxicas sobre el ciclo vital de los insectos carroñeros, constituyendo un
área importante de estudio de la entomotoxicología forense.
5
1.1 Estudios realizados
Nuorteva 1982, interesado por el aspecto de la contaminación, había
detectado mercurio (Hg) en larvas de moscas alimentadas con pescado
contaminado y en coleópteros alimentados con las moscas adultas producidas por
esas larvas. Se han detectado organofosforados, Gunatilake y Goff (1989),
metabolitos de la cocaína, Goff (1989), opiáceos, Goff, Brown (1991), amitriptilina,
nortriptilina, Goff (1993), fenciclidina, Goff (1994), y anfetaminas Goff (1997).
La cocaína acelera el desarrollo de la moscarda Sarcophaga, mientras que
la presencia del antidepresivo aminotriptilina puede retrasar su ciclo más de 77
horas. Los investigadores también han observado que el insecticida malathion,
que es ingerido con frecuencia por los suicidas estadounidenses, hace que la boca
sea en un principio despreciada por las moscardas y otros dípteros. El análisis de
todos estos datos entomológicos ofrece a la policía pistas que de otro modo no
obtendrían.3
Ferrari (2008) observo mayor sobrevivencia y tamaño del grupo de larvas
de dípteros tratado con testosterona, e indico que debe ser considerado como un
factor más, para evitar errores durante la estimación del intervalo post mortem.4
6
2. MARCO TEORICO
2.1 Historia
La presencia de las moscas está documentada en escritos tempranos como
la “Tabla 14”, de la serie Farra-Hubulla (lista sistemática de animales salvajes
terrestres de la época de Hammurabi), hace unos 3 600 años, en el se menciona
por primera vez la “mosca verde” (Lucilia) y la “mosca azul” (Calliphora), comunes
en casos forenses. En las civilizaciones antiguas, moscas y escarabajos aparecen
como amuletos, en sellos cilíndricos, como un dios, y como una de las plagas de la
historia bíblica del Éxodo, pero fue Aristóteles quien aportó datos anatómicos y
biológicos que describió y clasificó dentro del orden científico.5
El primer documento sobre un caso resuelto por la entomología forense se
remonta al siglo XIII y se encuentra en un manual chino de medicina legal, el cual
refiere a un homicidio en el que apareció un labrador degollado por una hoz, se
describe que el día después de la muerte, el investigador pidió a todos los
labradores que pusieran su herramienta de trabajo (hoz) en el piso; trazas
invisibles de sangre atrajeron moscas a una única hoz, confrontado con la
evidencia el dueño de la hoz confesó su crimen.2,4,5
El uso de insectos en la rama forense empezó a trabajarse como ciencia a
mediados del siglo XIX, en Francia, cuando la ciencia surgió como tal. Orfila
(1848), listó 30 insectos y otros artrópodos que colonizaron un cuerpo, sus
observaciones pueden ser las primeras en sistematizar el conocimiento de la
sucesión de artrópodos; aunque a Bergeret el año 1850, hizo la primera
7
determinación del tiempo de muerte en un cadáver, basándose en el desarrollo de
las larvas y pupas que contenía.6 Este fue uno de los primeros casos en que la
evidencia entomológica fue admitida en un tribunal de justicia. Posteriormente,
Megnin expandió los métodos de sus predecesores, proponiendo que un cuerpo
expuesto al aire sufre una serie de cambios, y caracterizó la sucesión regular de
artrópodos que aparecen en cada estado de descomposición.
En el año 1978, Leclercq publicó "Entomología y Medicina Legal: Datación
de la Muerte" y, en 1986, Smith publicó "Manual de Entomología Forense", a partir
de este momento la trayectoria de la entomología forense ha venido en asenso.7
2.2 Entomología forense
La entomología forense interpreta la información que suministran los
insectos como testigos indirectos de un deceso, donde la patología clásica no
provee todos los datos necesarios para resolver un caso.2
Los objetivos principales de esta ciencia son: determinar el intervalo post
mortem a través del estudio de la fauna cadavérica, establecer la época del año
en que ocurrió la muerte y verificar si un cadáver ha sido trasladado, también nos
puede ayudar a descubrir la causa especialmente en cadáveres en
descomposición franca o mutilados,8 mediante la identificación de drogas y
toxinas en los insectos,9 aportando así a descubrir la causa de la muerte, y por lo
anteriormente mencionado el uso de esta rama es de gran utilidad.
8
Algunas moscas tienen características que las hacen únicas para ser
utilizadas en la ciencia forense; los más importantes grupos de insectos que se
alimentan de cadáveres son los Dípteros (moscas) Calliphoridae y los Coleópteros
(escarabajos) necrófagos Dermestidae y Cleridae. La familia Calliphoridae
usualmente ovipone a partir de las pocas horas de muerte del cadáver, la
antropofauna en un cadáver está ligada a los cambios naturales que tienen lugar
en un cuerpo muerto y también las condiciones.10
Otras características de las moscas están relacionadas con su morfología y
fisiología, como la capacidad de detectar el olor emanado por un cadáver a
kilómetros de distancia y el tamaño pequeño que les facilita el acceso a casi
cualquier lugar, ya sea un sótano, el baúl de un auto o una habitación cerrada,
logrando ser las primeras en hallar un cadáver. Además, su capacidad de volar les
permite desplazarse a grandes distancias en tiempos relativamente cortos.
2.2.1 Insectos de importancia forense
Cuando se estudian los cadáveres en descomposición es importante
evaluar los insectos que se encuentren sobrevolando el área y los que se
encuentren en el cadáver. Al respecto, mencionan que las especies de mayor
relevancia forense son las que se encuentran en el cadáver, ya sea como larvas o
como adultos.11
9
2.2.1.1 Dípteros
Los dípteros forman uno de los órdenes más grandes de insectos, muchos
de éstos, están asociados a materia orgánica (animal o vegetal) en
descomposición. Otros son depredadores o parásitos de insectos. Los dípteros de
las familias Calliphoridae, Muscidae y Sarcophagidae son más en etapa larval
como en etapa adulta, siendo así las familias más útiles en la evidencia forense,
hay muchas otras familias asociadas a la descomposición o a remanentes de ésta,
y la importancia que tienen para determinar el intervalo post mortem.12
Se las clasifica por familia, genero y especie citaremos algunas:
FAMILIA
Familia Piofílidas (Piophilidae): incluye a la mosquita del queso, Piophila casei.
Adultas pequeñas, negras, con cabeza redonda; las alas en reposo se cruzan sobre
el dorso, casi a lo largo del cuerpo, Las larvas tienen el extremo posterior
redondeado, con placas espiraculares planas, y un par de papilas carnosas
filiformes en posición ventral. Al sujetar las papilas posteriores con sus piezas
bucales y soltarlas bruscamente, pueden dar saltos de varios decímetros,
asignadas por Mégnin (1894), en Buenos Aires han aparecido en forma ocasional
en cebos de carne, formando una segunda o tercera oleada hacia el final de la
primavera. Sobre restos humanos tienden a penetrar, ya sea en la cavidad
craneana, ya sea en las cavidades medulares de los huesos.12
10
Familia Fánidas (Fannidae): Larvas deprimidas, con largos procesos dorsales y
laterales, simples o ramificados, que se conservan en el pupario; espiráculos
posteriores en tubos ramificados (raramente simples, piriformes). Adultas medianas
a pequeñas, negras con manchas de pubescencia plateada. Alas con celda discal
abierta; segunda vena anal curvada hacia adelante, de modo que intersecta la
prolongación imaginaria de la primera anal.13 De vuelo ágil; los machos pueden
formar enjambres que revolotean en ambientes iluminados, sin posarse.12
Familia Múscida (Muscidae): Huevos alargados, dispersos sobre el sustrato, sin
formar paquetes. Larvas subcilíndricas con extremo posterior truncado y levemente
convexo, sin papilas, con placas espiraculares elevadas sobre la superficie,
fuertemente esclerotizadas. Larvas II con mandíbulas débiles, apenas ganchudas.
Adultas por lo común de vuelo perezoso.12
Familia Sarcofágidas (Sarcophagidae): Adultas vivíparas; venación alar de tipo
“musca”. Por lo común moscas robustas, de vuelo potente y ruidoso. Especies de
interés forense son grandes (más de 10 mm de longitud); tórax con pubescencia
plateada, con cinco rayas negras longitudinales; abdomen con diseño tornasolado
semejante a un damero. Larvas con extremo posterior excavado en forma de
embudo, en cuyo fondo se encuentran los espiráculos posteriores. Larvas II con
potentes ganchos maxilares. Pupas no angostadas en el cuarto segmento, con
extremo posterior formando un embudo.14
11
En forma ocasional aparecen Sarcofágidas de la subfamilia Raviniinae, como
Oxysarcodexia paulistanensis, mosca mediana (6-7 mm de longitud), con cabeza
amarilla (pubescencia dorada bajo el microscopio), terminalia amarillos,
pubescencia del cuerpo con un débil matiz azulado.14
Familia Califóridas (Calliphoridae): Huevos alargados, de 1,2-1,7 mm de longitud,
formando paquetes de algunas decenas a varios centenares. Adultas robustas,
medianas a grandes, con venación alar tipo “musca”; abdomen siempre con brillo
metálico; vuelo potente. Larvas con extremo posterior cóncavo en mayor o menor
grado, pero nunca formando embudo. Larvas II con potentes ganchos maxilares.
Pupas angostadas a nivel del cuarto segmento, con extremo posterior convexo o
bien con un surco abierto lateralmente.12
Subfamilia Calliphoridae: Adultas con vena basal desnuda (sin hilera de pelos).
Larvas con extremo posterior truncado, levemente cóncavo. Placas espiraculares
posteriores con peritrema completo; botón evidente (larvas maduras). Bandas de
espinas cuticulares claras, pero siempre cerradas por el dorso en los 11
segmentos, por lo menos en las larvas III.15
Subfamilia Chrysomyinae: adultas con vena basal provista de una hilera de pelos
por arriba, desnuda por debajo; perfil de la cabeza saliente en la parte inferior.
Larvas con extremo posterior excavado en escalón. Pupario muy grueso; pupas
con frecuencia enterradas a poca profundidad o dispersas sobre la superficie del
sustrato.
12
GENERO
Género Muscina: Adultas medianas, robustas; celda discal del ala poco
angostada en el ápice. Tegumentos negros con pubescencia gris; diseño del
tórax: por delante de la sutura transversa, 4 bandas negras; por detrás, 3
pequeñas líneas en la base del escutelo. Larvas con placas espiraculares
moderadamente elevadas, separadas por un espacio igual a su diámetro o poco
menor. Pupas elípticas, sin estrangulamiento del cuarto segmento.
Género Musca: Adultas con celda discal fuertemente angostada hacia el ápice,
con venas anales cuyas prolongaciones imaginarias no se cruzan. Larvas con
placas espiraculares posteriores apenas elevadas, con hendiduras sinuosas.
Pupas elípticas, sin estrangulamiento, sin cuernos respiratorios. Las larvas; son
más frecuentes en excrementos y detritos que sobre cadáveres.
Género Calliphora: Adultas moderadamente grandes (8-10 mm), robustas, con
brillo metálico fuerte en el abdomen; tórax algo grisáceo y opaco, por delante de
la sutura transversa se distinguen cuatro líneas castañas.
Género Chrysomya: Adultas con palpos maxilares normales. Larvas III con
bandas de espinas cerradas en el dorso en los segmentos 10 y 11. El nombre del
género se conserva con la ortografía original, aunque ésta no sea
etimológicamente correcta (del griego; chrysós, oro; myia, mosca).
13
ESPECIE
Musca domestica: Patrón del tórax: cuatro lineas negras longitudinales, las dos
medianas prolongadas hasta penetrar en la base del escutelo la colocó entre las
especies primarias, Smith la considera rara en situaciones forenses; su presencia
dependería de la presencia de excrementos en el entorno, o estaría asociada con
perforación de los intestinos.13
Phaenicia sericata: mosca verde común. Adultas con espiráculo anterior
(ubicado entre el protórax y el mesotórax) color café, que no se destaca del color
de fondo. Escamas alares de un blanco lechoso, patas negras. Las larvas III a
término se reconocen por sus grandes espiráculos posteriores separados por un
espacio menor que su diámetro; el peritrema, apenas más oscuro que las
hendiduras, forma hacia adentro un pico entre las hendiduras inferior y media,
pero una saliente redondeada entre la media y la superior. Papilas posteriores
regulares y espaciadas, está presente al aire libre durante la época de calor. En
particular, P. sericata es famosa en el ambiente médico por su tendencia a volar a
la cara de pacientes moribundos. Puede aparecer en seguida de la muerte, y
según algunos autores poco antes.13 Comienza a poner paquetes de huevos
dentro de las fosas nasales y en las hendiduras palpebrales, continúan
oviponiendo en la boca, las orejas, las heridas si existen; más tarde, al día
siguiente, en las regiones genital y anal, si están accesibles. En crímenes
sexuales y en casos de abandono con presencia de excrementos, la oviposición
14
puede comenzar por los orificios inferiores. La atractividad de los orificios
naturales cesa luego de un tiempo variable, que no suele exceder los dos días;
parece relacionarse con la humedad natural de las mucosas.
Calliphora vicina: Mosca azul común, introducida desde Europa. Adultas con
bucca amarillenta o pardusca, abdomen azul intenso, a veces índigo; básico esta
castaña. Espiráculo anterior café muy claro, que contrasta con el fondo oscuro.
Larvas con papilas regulares en tamaño, separadas por distancias pequeñas,
excepto que las papilas superiores internas están muy separadas entre sí, y las
externas superiores e inferiores también separadas por una distancia
considerable. C. vicina tiene peritrema más oscuro que las hendiduras, entre las
cuales forma dos picos bien definidos. Estos caracteres no son fáciles de
observar en larvas parcialmente desarrolladas. Algunas observaciones sugieren
que el peritrema con picos hacia adentro está ya formado en C. vicina, pero que
sencillamente tarda en oscurecerse.
El carácter más confiable cuando se tienen larvas III es el esclerito bucal
accesorio, impar y mediano, de las larvas de C. vicina, aparece como una pieza
en forma de Y invertida.
La mosca azul suele recolonizar cuerpos en descomposición ya avanzada o
entrar en habitaciones mal iluminadas cuando hay dentro un cadáver; en cambio,
la mosca verde raramente entra a una habitación que no esté muy bien
iluminada.16
15
Chrysomya albíceps: Especie originaria del Mediterráneo, invasora, ya extendida
por grandes áreas de Argentina y Brasil. Mosca adulta más ancha en silueta que
P. sericata, a la cual se parece en la coloración: cabeza con pubescencia
plateada y tegumentos con brillo metálico verde. Se diferencia por el espiráculo
anterior blanco y por las bandas oscuras que bordean por detrás las placas
dorsales del abdomen. Larvas con hileras de papilas carnosas cónicas, cada una
con una mancha apical de verdaderas espinas cuticulares negras. Espiráculos
posteriores sin botón. Larvas II y III predadoras y caníbales. Pupas con vestigios
de papilas cónicas. Primarias al aire libre en casos de heridas sangrantes.
Secundarias atraídas por masas de larvas preexistentes, al aire libre o en
encierro.
Las moscas son los primeros animales que llegan a un cadáver. Su ciclo de
vida permite determinar el intervalo post mortem, si se considera el tiempo que
tardan en pasar de un estado a otro.
La metamorfosis completa de la mosca consta de cuatro estados bien
definidos, el huevo es seguido por un período larval de intensa actividad
alimenticia, con posterior ingreso a uno de inmovilidad (pupa), período en el cual
se desarrollan las características del adulto, quien surge pasadas una o dos
semanas.6
16
Los huevos incuban típicamente en uno a tres días, intervalo postmortem
varía de un caso a otro,6 dependiendo de la especie, las condiciones ambientales
y causa de muerte. Las larvas de mosca crecen rápidamente, pasando por tres
estadios larvales antes de alcanzar su tamaño final, estas se crían juntas en
grandes números y se mueven entorno al cadáver promoviendo, así, la
diseminación de bacterias y secreción de enzimas, lo cual hace posible el
consumo de los tejidos blandos del cadáver.
A mayor temperatura y mayor humedad relativa el insecto se desarrollará
más rápido y viceversa. Por ejemplo, Chrysomya rufifacies (Calliphoridae) tarda en
pasar de huevo a adulto 612 horas a 15.6 ºC, 289 horas a 25 ºC y 180 horas a 32
ºC. Si tenemos en cuenta un modelo de referencia donde el desarrollo de las
larvas de dípteros es una curva de crecimiento, entonces la mejor estimación de la
edad para una larva es el valor que corresponde a su tamaño en la curva.10,17
El análisis de los huevos de moscas colectados de los cadáveres
(disección, microscopia óptica, microscopia electrónica y toxicología) puede
ayudar a los investigadores en la estimación precisa del intervalo post mortem y
probable causa aplicando la toxicología forense.14
2.2.1.2 Coleópteros
Este orden contiene muchos grupos de importancia forense, los coleópteros
son el grupo más diverso en un cuerpo en descomposición. Sin embargo, debido
a las diferencias en el papel que juegan las diferentes especies en la
descomposición, no hay un tiempo característico de aparición.
17
Los depredadores de las familias Staphylinidae y Carabidae arriban al
cuerpo desde las primeras etapas de descomposición y perduran hasta las etapas
finales, los depredadores de la familia Histeridae permanecen durante las primeras
etapas de descomposición, alimentándose de larvas. Los coleópteros de la familia
Silphidae llegan durante la fase de descomposición activa y perduran hasta la fase
seca, mientras que las familias Dermestidae y Cleridae llegan en la etapa
esqueletal.12
2.2.1.3 Himenópteros
Los himenópteros también juegan un papel importante en la
descomposición de cadáveres. Varias especies de hormigas son depredadores de
huevos y larvas, retardando así los procesos de descomposición.
Los miembros de las familias Ichneumonidae, Braconidae y Chalcidae son
parasitoides de larvas y pupas de dípteros, coleópteros y otros insectos,
influenciando así la descomposición del cadáver.6,12
2.2.1.4 Oviposición
Generalmente los artrópodos hacen la puesta en las aberturas naturales del
cuerpo, las moscardas o moscas azules, por ejemplo, suelen dejar los huevos en
la región facial, pero raramente lo hacen en la zona ano genital. Los entomólogos
han observado que en los crímenes con violencia sexual, la concentración de las
moscardas es mucho mayor en la parte del cadáver que ha sufrido la agresión.12
18
2.2.2 Clasificación
Megnin designaba a toda agrupación de insectos que contribuye a la
destrucción del cadáver en un período determinado con el nombre de cuadrilla de
obreros de la muerte. Según el autor, los insectos de los distintos grupos no se
presentan a la vez en un mismo cadáver; se sustituyen los unos a los otros,
estando atraídos cada grupo por una etapa especial de la fermentación
cadavérica, encargándose de cierta parte de la faena de la destrucción, a la que
no puede proceder hasta que las cuadrillas que los precedieron han terminado su
cometido. Las especies que componen cada grupo pueden variar con la región,
clima, estación, etc., pero dentro de estas condiciones es constante y
característica la composición de la cuadrilla en los distintos períodos. Los insectos
que componen la fauna cadavérica son dípteros, coleópteros, micro lepidópteros y
acarianos.2
En total el autor identificó ocho cuadrillas a los que llamaba “trabajadores de la
muerte”, relacionadas con las etapas de descomposición de un cadáver al aire
libre.
1. Primera cuadrilla: Está formada por dípteros, moscas de las especies Musca
y Curtonevra, en un primer momento, y después por otras moscas Caliphora
y Anthomia. Ataca solamente los cadáveres frescos.
2. Segunda cuadrilla: Actúa tan pronto se hace sentir al aire libre el olor
cadavérico. Sus componentes son moscas Lucilia y Sarcophaga.
19
3. Tercera cuadrilla: Interviene de tres a seis meses después de la muerte,
atraída por las grasas fermentadas (fermentación butírica). La componen
coleópteros (Dermestes) y lepidópteros (Aglossa).
4. Cuarta cuadrilla: Es atraída por la fermentación caseica o albuminoidea y se
compone de moscas (Anthomia, Pyophila casei) y coleópteros (Corynetes).
5. Quinta cuadrilla: La atrae la fermentación amoniacal. Se compone de
dípteros de los géneros Tyreophora, Lochea, Ophyra y Phora; de
coleópteros de la familia de los Sílfidos y de los géneros Necrophora, Silpha,
Hister y Saprinus.
6. Sexta cuadrilla: Absorbe el resto de los humores líquidos dejados por las
anteriores cuadrillas, con lo que se desecan y hasta momifican las partes
orgánicas que aún resistían. Son todos acarianos de los géneros Uropoda,
Trachinotus, etc.
7. Séptima cuadrilla: Aparece cuando ya sólo quedan restos momificados que
no dan pábulo a los agentes fermentativos; los obreros de esta cuadrilla son
los mismos que roen los vestidos, tapices, pieles, etc. Son coleópteros
(Dermestes, Attagenes, Anthrenes) y lepidópteros (Aglossa y Tineola).
8. Octava cuadrilla: La componen tan sólo dos especies de insectos que hacen
desaparecer los restos que dejaron los demás géneros: Tenebrio y Ptinus.
Según Megnin, concurren a la desaparición del cadáver las distintas
especies de insectos de una manera sucesiva.
20
Siguiendo un orden cronológico de acuerdo a los estados de descomposición las
clasifica en cuatro períodos:
1. El primer período dura tres o cuatro meses. Se caracteriza por la presencia
de larvas de dípteros: Curtonevra, Calliphora, Lucilia, Sarcophaga. Por lo
demás, de un modo general, cuando faltan los dípteros de este grupo en un
cadáver, se puede deducir que en el momento de la muerte no había
moscas; es decir, que ha ocurrido en invierno (1ª y 2ª cuadrillas).
2. El segundo período dura de tres a cuatro meses. Se encuentran en el
cadáver los coleópteros del género Dermestes y los lepidópteros del género
Aglossa (3ª cuadrilla).
3. El tercer período dura de cuatro a ocho meses. El cadáver aparece
convertido en una papilla negruzca, líquida o semilíquida, de olor que
recuerda el queso podrido. Se aprecian en él larvas de dípteros como los
Phora u Anthomia, y coleópteros como los Silpha, Hister y Saprinus (4ª y 5ª
cuadrillas).
4. El cuarto período dura de seis a doce meses. En los restos del cadáver,
reducido a casi polvo, aparecen acarianos, tales como los Uropoda,
Trachynotus, Anthrenes, Tenebrio y Ptinus (6º, 7º y 8ª cuadrillas).
La aplicación de estos datos al tanatocronodiagnóstico exige amplios
conocimientos entomológicos desde la recogidas de muestras de los insectos
presentes en el cadáver y de los restos de larvas, pupas, etc, e identificar las
21
especies presentes, y determinar las cuadrillas a que pertenecen y, por la
sucesión de los ciclos vitales de los géneros correspondientes, podría deducirse la
data de la muerte, también reconocer las fases de descomposición.
2.3 Fenómenos Cadavéricos
Los fenómenos cadavéricos son modificaciones físicas, químicas y biológicas
que suceden al cadáver, desde el comienzo de la muerte. Se evidencia por signos,
que debidamente comprobados y analizados, son de gran utilidad para la
reconstrucción cronológica de los hechos, especialmente en casos de muerte
sospechosa o violenta, y para establecer la data aproximada de muerte, de
acuerdo a los cambios ocurrido en el cadáver se divide en estados de
descomposición.19
2.3.1 Estados de descomposición de un cadáver:
a). Cromática o colorativo: Constituida por la aparición de la "mancha verde
del abdomen" en la región cecoapendicular (fosa ilíaca derecha) a partir de las 24
horas después del deceso. Es consecuencia del hidrogeno sulfurado producido
por la putrefacción intestinal. También comienza a verse después de las primeras
24-48 hs. el entramado venoso de color verde oscuro por la transformación de la
hemoglobina. Sin embargo, cabe aclarar que en las muertes violentas la
putrefacción comienza en forma temprana en los lugares donde el cuerpo presenta
heridas y que en pacientes que sufren problemas en órganos torácicos (infartos,
asfixias) la mancha verde puede comenzar en esa zona.5
22
b). Enfisematosa o de desarrollo gaseoso: Presencia de vesículas gaseosas
cutáneas que al romperse llevan al desprendimiento de la epidermis (36-72 hs.
post mortem), distensión voluminosa del abdomen, del escroto, de la vulva, de los
labios (24-48 hs.). La sangre por la misma presión de los gases se ve desplazada
de los planos profundos a los superficiales, dando lugar a la llamada "circulación
póstuma".5
El contenido gástrico puede refluir por la boca y las heces por la región anal,
por un mecanismo análogo puede prolapsar el útero o el recto y puede ocurrir que
un feto detenido en el canal vaginal, después de la muerte de la madre pueda ser
expulsado totalmente. Puede durar un par de semanas.
c). Colicuativa o de licuefacción: Hay una licuación de los tejidos
transformándose estos en un magma putrilaginoso haciendo desaparecer la forma
habitual, existe fácil desprendimiento epidérmico por la simple presión de los
dedos, en este periodo el cuerpo disminuye de volumen y se hunden los tejidos,
este periodo puede durar de ocho a diez meses.19
d). Reductivo o de esqueletización: Constituido por una serie de fenómenos
que determinan la transformación o desaparición de las partes blandas y óseas y
de acuerdo a fenómenos que dependen del cadáver y del ambiente en que se
halla sepultado irán desapareciendo a lo largo de dos a cinco años.19
23
2.4 Tóxico o veneno
Se define como toda sustancia que es susceptible de generar, por un
mecanismo químico, acciones adversas o nocivas en los seres vivos. Algunos
autores prefieren hablar de toxicidad como una cualidad de las sustancias y no de
sustancias tóxicas, por cuanto todo depende de la cantidad, o dosis, que es capaz
de producir lesiones.20
Es imposible enumerar todos los tóxicos, ya que algunas sustancias
correctamente utilizadas son inofensivas, pero al utilizarlas erróneamente pueden
convertirse en tóxicos (por ejemplo, el alcohol).
En general toda sustancia es potencialmente toxica dependiendo de la
dosis; de ahí que ese término sea más amplio.
El termino de veneno se restringe a sustancias que en cualquier dosis van a
causar alteración de la salud, es un término más de uso legal o jurídico que
médico. El concepto implica las sustancias tóxicas que son empleadas de manera
intencional, por esto se habla de envenenamiento sólo cuando las intoxicaciones
son homicidas o suicidas.
El diagnóstico es difícil, porque gran cantidad de tóxicos no producen
síntomas característicos y otros producen síntomas parecidos a los de otras
enfermedades. Por otro lado, estos síntomas dependerán de la cantidad del tóxico
ingresado en el organismo.21
24
2.4.1 Vías de absorción
La vía por la cual el elemento tóxico irrumpe en contacto con el individuo es
el factor que más influye sobre los efectos tóxicos de una sustancia, las vías de
absorción más comunes se citan a continuación.22
Piel
La piel se constituye como una barrera adecuada, sin embargo varias
sustancias pueden ser absorbidas a través de ella, sobre todo cuando esta cuenta
con lesiones o excoriaciones la absorción a través de ella puede ser muy rápida.
Cuando una sustancia entra en contacto con la epidermis puede sobrevenir que la
piel sea un parapeto eficiente, o bien que se genere prurito o sensibilización en la
área de contacto, y posteriormente pase la sustancia a la corriente sanguínea.
Gastrointestinal
El ingreso por vía oral, como se denomina también enteral, ocurre por la
ingestión directa de agua, o alimentos contaminados, o la misma sustancia tóxica
también. Es relevante señalar que la absorción de la sustancia, dentro de sistema
gastrointestinal, puede ser rápida o muy lenta, dependiendo de las características
intrínsecas de la misma.
25
Respiratoria
Hay que hacer hincapié, que esta vía de exposición es la más trascendental
en el área laboral, sobre todo en las fábricas y actividades manufactureras, debido
al uso frecuente de sustancias inestables y/o corpúsculadas. Lo sobresaliente de
esta ruta consiste en que permite ser difundido y pueda producir un daño local, o
bien, introducirse de manera directa al torrente sanguíneo.
No obstante, se debe tener en cuenta que los factores que modifican la
respuesta a un agente tóxico están en función de la triada agente-receptor-
ambiente.
Donde debe tenerse en cuenta aspectos como la estructura genética,
estado nutricional, sexo, edad y estado emocional del receptor, así como la
temperatura, presión parcial elevada del oxígeno en el ambiente, los factores del
agente tóxico que incluyen, la estructura, composición química, tamaño de la
partícula, la cantidad y concentración.20, 23
2.5. Intoxicación
Es el conjunto de perturbaciones funcionales, físicas y anatomopatológicas
producidas por sustancias toxicas de diferente severidad clínica, originadas en un
organismo vivo (animal o humano) a corto o a mediano plazo, de diferente
gravedad y que pueden conducir o no a la muerte, dependiendo de calidad,
cantidad, vía de penetración y susceptibilidad.22
26
2.5.1Clasificación: Se puede clasificarla
2.5.1.1 Por duración a la exposición (SSA 1993).
Exposición aguda
Se produce por una exposición de corta duración en el cual el agente
químico o físico es absorbido rápidamente, ya sea en una o varias dosis, en un
período no mayor de 24 horas; los efectos aparecen de manera inmediata.
Exposición subaguda
Se produce ante exposiciones frecuentes o repetidas durante varios días o
semanas; los efectos aparecen en forma relativamente retardada.
Exposición crónica
Se produce con exposiciones repetidas a bajas dosis durante largo tiempo,
los efectos se manifiestan porque el agente tóxico se acumula en el organismo, es
decir, la cantidad eliminada es menor que la absorbida; o bien, porque los efectos
producidos por la exposiciones repetidas se suman.20
2.5.1.2 Según severidad: En grados aplicando el Pone Score propuesto
por el programa Internacional de Seguridad Química (IPCS/EC/EAPCCT-OMS)
Grado 0: no intoxicación
Grado 1: intoxicación leve: síntomas irritativos o síndrome muscarínico
27
incompleto, o ambos, con colinesterasas normales, no siendo necesario
utilizar antídoto.
Grado 2: intoxicación moderada: presencia de síntomas del síndrome
muscarinico o nicotínico, o ambos, descenso del nivel de colinesterasa
plasmática, tratamiento antidotico.
Grado 3: intoxicación severa: al grado anterior se agrega compromiso
cardiovascular, respiratorio o del sistema nervioso central, o ambos,
requiriendo además del tratamiento antidotico y sintomático, soporte de
funciones vitales.
Grado 4: muerte.
2.5.1.3 Por el sitio de acción en el que actúa
Efectos locales
Refiere a la acción que toma lugar en el punto o área de contacto. El sitio
puede ser la piel, mucosas de los ojos, nariz, boca, vagina, o cualquier otra parte
del sistema respiratorio o gastrointestinal.
Efectos sistémicos
Este término refiere a un sitio de acción que puede estar muy ajeno al lugar
de contacto y se asume que la absorción se ha llevado a cabo, es decir, tras la
absorción y distribución de la sustancia tóxica, a través de la sangre, se aloja en
un órgano blanco o bien es manifiesta su acción en todo el organismo.
28
2.6 Grupos de sustancias toxicas
2.6.1 Plaguicidas o pesticidas
Cubren una amplia gama de compuestos, los cuales son utilizados en un
sin número de labores. Dentro de los grupos más importantes tenemos a los
organofosforados, carabamatos, rodenticidas y herbicidas.20
2.6.1.1 Clasificación de los plaguicidas
Por su composición: organoclorados, organofosforados, carbamatos ,
piretroides, órgano bromado, ácidos fenoxiacéticos, bipiridilos, triazinicos
derivados y fosfaminas
Por su función en: insecticidas, fungicidas, herbicidas o rodenticidas.
Por peligro toxicológico: clase Ia extremadamente preligroso, Ib altamente
peligroso, II moderadamente peligroso, III levemente peligroso, U poco
probable de presentar algún daño en el uso y O obsoletos.
2.6.1.2 Organofosforados
Son derivados del ácido fosfórico, menor poder residual que los órganos
clorados y mayor nivel de toxicidad que los órganos clorados.
Por lo común, se preparan en polvos para su dilución, solventes orgánicos o
agua. Los compuestos más comunes envueltos en este síndrome son: Metil
Paration, Feution y el diametrato.20,22
29
Son productos utilizados constantemente en el área agrícola, también como
insecticidas, nematicidas, herbicidas, funguicidas, plastificantes y fluidos
hidráulicos; en los últimos años ha ido aumentando su uso, ocurriendo así
intoxicaciones en seres humanos, ya sean en forma accidental o voluntaria.24
Fisiopatología
Tanto en el hombre como en los insectos, los insecticidas organofosforados
causan una inhibición de la acetilcolinesterasa por fosforilación, lo que conduce a
una acumulación del neurotransmisor acetilcolina en los receptores, ya que la
enzima es incapaz de degradar la acetilcolina, la consiguiente hiperestimulación y
posterior interrupción de la transmisión nerviosa, a nivel de la unión neuroefectora,
del sistema músculo esquelético, SNC y autónomo. Que puede llevar, en casos
graves, a la insuficiencia respiratoria y a la muerte.
También inhiben la esterasa neurotóxica, una enzima que se ha relacionado
con la neuropatía retardada, impiden la transmisión de impulsos nerviosos
cerebrales, causando trastornos a nivel del sensorio, en la función motora, en el
comportamiento y en el ritmo respiratorio, la depresión de la respiración, constituye
la causa de muerte más común, en envenenamiento por órgano fosforados.20
Absorción:
Los órganos fosforados, se absorben fácilmente; por inhalación, ingestión y
a través de la piel, la toxicidad depende hasta cierto punto de la proporción en que
los órganofosforado específicos se metabolizan en el organismo.
30
Metabolismo
Son biodegradables y no se acumulan en el organismo, principalmente
por hidrólisis en el hígado limitando así la cantidad de plaguicida disponible para
atacar la enzima acetilcolinesteraza en otros tejidos.
La acetilcolina actúa como mediador en las terminales de las fibras
nerviosas, los órganofosforados compiten con ella la acetilcolinesterasa, por ello
se va acumulando cantidades excesivas de acetilcolina en la sinapsis ganglionar
periférica del sistema nervioso central y órganos efectores. Los síntomas son por
lo tanto de acción colinérgica.20
Eliminación:
Tiempo medio de eliminación es de 3 horas a 2 días y tienen lugar por la
orina y en menor cantidad por heces.
Intoxicación:
Este tipo de intoxicación por organofosforado puede ser aguda en personas
que se autoeliminan o en homicidios y crónica en personas que están expuestas
diariamente a este producto, como en fumigadores o en campesinos que los
utilizan en labores agrícolas.
La clínica dependerá del tipo de organofosforado, vía de entrada, dosis y
susceptibilidad individual.
31
Tras la exposición aguda, el cuadro clínico presentan combinaciones de los
signos y síntomas. Los trastornos del ritmo cardíaco, el coma convulsivo y la
insuficiencia respiratoria son posibles causas de muerte de estos pacientes, dada
su alta lipofilia, algunos organofosforados, como el fentión, pueden permanecer
días o semanas en el organismo y ocasionar una persistencia de la sintomatología
o una recidiva del cuadro clínico tras un período de recuperación.21
Algunos autores han definido un síndrome intermedio que aparece a las 24-
96 h de la intoxicación y tras haber superado la fase colinérgica, caracterizado por
la afectación de los músculos respiratorios, proximales de las extremidades y
flexores del cuello; este síndrome, que puede persistir durante varios días y
acompañarse de una importante insuficiencia ventilatoria, no responde al
tratamiento con antídoto.5
Los síntomas de intoxicación por órganofosforados son de 3 clases:
a) Efectos Mucarínicos: Imitación de la acción estimulante de la acetilcolina
sobre el musculo liso y las glándulas dando lugar a los siguientes efectos 25:
1. Gastrointestinales: salivación, náuseas, vómitos, cólicos, eructos, calambres,
diarreas, tenesmo e incontinencia.
2. Respiratorios: Opresión torácica, tos, bronco espasmo con aumento de las
secreciones bronquiales (broncorrea), disnea, cianosis, edema pulmonar.
3. Vesicales: Poliaquiuria e incontinencia.
32
4. Otros: Sudoración, sialorrea, visión borrosa y bradicardia. Lagrimeo, miosis.
b) Efectos nicotínicos: Bloqueo de la transmisión de impulsos de las neuronas
preganglionares a las neuronas postganglionares
Sinapsis ganglionares: Cefalea, hipertensión pasajera, mareos, palidez,
taquicardia, hipoglucemia. Placa motora: Calambres, debilidad generalizada,
disminución del esfuerzo respiratorio (músculo respiratorio); espasmos
musculares, fasciculaciones, mialgia, parálisis flácida y fatiga muscular.
c) Sistema Nervioso Central:
Produce un daño a nivel nervioso traducido en ansiedad, ataxia, cefalea,
nerviosismo, habla torpe, labilidad emocional confusión, convulsiones
generalizadas, depresión del centro respiratorio y del centro cardiovascular,
perturbación mental, irritabilidad y somnolencia, respiración de Cheyne Stokes,
parálisis respiratoria central, coma. Los signos aparecen cuando los niveles de
colinesterasa eritrocitaria son menores del 50%
Formas de presentación
Su presentación más frecuente es en líquidos, con diferentes tipos de
solventes, generalmente hidrocarburos derivados del petróleo como tolueno,
xileno. Estas presentaciones reciben el nombre de concentrados emulsionables.
Existen además presentaciones sólidas en forma de polvo, polvos mojables,
gránulos, tabletas, que son algunos menos tóxicos por la forma de presentación
dada la menor absorción.
33
2.6.2 BENZODIACEPINAS
Sustancias de origen sintético, tranquilizantes menores potentes, también
anticonvulsivantes.26
2.6.2.1 Diazepam
Acción farmacológica
El principio activo de diazepam pertenece al grupo de los tranquilizantes
benzodiazepínicos, sustancias que tienen propiedades ansiolíticas y
antineuróticas, psicosedativa, antiagresivas, sedantes, miorrelajantes (del
músculo estriado y uterino), anticonvulsivantes y potencializadoras de hipnóticos,
anestésicos y analgésicos. Se sabe actualmente que estos efectos se basan en un
refuerzo de la acción del ácido gama-aminobutírico (GABA), principal
neurotransmisor inhibidor, en el cerebro.27
Vías de absorción:
La absorción de la inyección intramuscular (i.m) es completa, aunque no
siempre más rápida que con la administración oral, y es rápida de 1 a 3 minutos
por vía intravenosa (v.i.).
Distribución:
Diazepam y sus metabolitos se ligan en una fuerte proporción a las
proteínas plasmáticas (diazepam: 98%), pasan tanto la barrera hematoencefálica
como la placentaria y se hallan igualmente en la leche materna donde alcanzan la
34
décima parte de la concentración plasmática materna. El volumen de distribución
en estado de equilibrio es de 0,8-1,0 l/kg. La vida media de distribución es de
hasta 3 horas.
Metabolismo:
Diazepam se metaboliza principalmente en hígado, metabolizado en
metabolitos farmacológicamente activos, tales como el N-desmetil-diazepam,
temazepam y oxazepam.
Eliminación:
La curva de eliminación del diazepam después de la administración i.v. es
bifásica: comprende una fase de distribución inicial rápida y extensa seguida de
otra de eliminación terminal prolongada (vida media de hasta 48 horas). La vida
media de eliminación del metabolito activo N-desmetil-diazepam es de hasta 100
horas. El diazepam y sus metabolitos se excretan en su mayor parte con la orina,
principalmente bajo sus formas conjugadas.26,27
Interacciones Medicamentosas:
No se aconseja el empleo simultáneo con alcohol debido a la potenciación
del efecto sedativo, cuando el diazepam es utilizado asociado con antisicóticos,
hipnótico, ansiolíticos/sedantes, antidepresivo, analgésicos narcóticos,
antiepilépticos, anestésicos y sedantes antihistamínicos, puede manifestarse una
intensificación del efecto depresor central..27
35
Sobredosificación:
La sobredosis con benzodiazepinas se manifiesta frecuentemente por
depresión del sistema nervioso central. En los casos leves se observa
somnolencia, confusión mental y letargo, en casos más graves los síntomas
pueden incluir ataxia, hipotonía, hipotensión, depresión respiratoria, coma
(raramente) y muerte (muy raramente) que aumenta si se combina con alcohol.
2.7 Cavia porcellus
Cavia porcellus especie de roedor de la familia Caviidae. Es originario de la
Cordillera de los Andes. La especie fue descrita por primera vez por el naturalista
suizo Conradvon Gesner en 1554.1 Su nombre científico se debe a la descripción
de Erxleben en 1777, es una mezcla de la designación del género de Pallas (1766)
y el nombre específico dado por Linneo (1758).
En su zona de origen se le conoce como cuy (del quechua quwi), nombre
onomatopéyico que aún lleva en el Perú, sur de Colombia, Ecuador, Bolivia, Chile
(Cuyi) y Uruguay. También en el Noroeste de Argentina se conoce con este
nombre, aunque en otras regiones de este país se le llama de otras formas.
El cuy es un popular espécimen para la experimentación en investigación
biomédica. De ahí que la expresión cobaya o conejo de Indias se utilice
popularmente como sinónimo de objeto de experimentación.
El cuy, además de servir de alimento, es utilizado como mascota. Los
cobayos, al ser criaturas de hábito, no toleran muy bien los cambios en la
36
presentación, sabor, olor, textura o forma de su comida y agua. Cualquier cambio
brusco en su dieta puede conducirle una enfermedad y algunas plantas pueden
ser nocivos para el cuy (perejil, cicuta, cola de caballo, diente de león, yerba mala,
mora, culantrillo, mostaza, acerba, leche) que le pueden ocasionar la muerte.
2.8 Normas legales
Se incluye las normas legales de la ley Nº 1970. Nuevo Código de
Procedimiento Penal, por que se encuentra en estrecha relación con los resultados
que se obtengan del estudio entomotoxicológico del caso o de los casos
estudiados, que servirán como pruebas de apoyo para aclarar una muerte en un
proceso judicial.
2.8.1 Ley Nº 1970. Nuevo Código de Procedimiento Penal
Libro tercero actividad procesal. Título VI
Cooperación judicial y administrativa internacional.
Capítulo I. Normas generales de cooperación.28
Artículo 147.- (pericias) La autoridad judicial podrá solicitar el dictamen de
peritos extranjeros en el país o en el exterior y la cooperación judicial para el
control de las operaciones técnicas que deban realizarse en el exterior.
Regirán, en lo pertinente, las normas de la pericia y del anticipo jurisdiccional de
prueba.
37
Los peritos pueden ser de distintas especialidades, los cuales darán su
dictamen de acuerdo al área de trabajo, el entomólogo forense podrá aportar
respecto a la causa, data y lugar de la muerte por la presencia de insectos
carroñeros.
Libro cuarto medios de prueba
Título II
Comprobación inmediata y medios auxiliares
Artículo 174.- (Registro del lugar de los hechos). La policía deberá
custodiar el lugar del hecho y comprobará, mediante el registro del lugar y de las
cosas, los rastros y otros efectos materiales que sean consecuencia del delito.
El funcionario policial a cargo del registro elaborará un acta que describa
detalladamente el estado de las cosas y, cuando sea posible, recogerá y
conservará los elementos probatorios útiles, dejando constancia.
Si el hecho produjo efectos materiales se describirá el estado actual de los
objetos, procurando consignar el estado anterior, el modo, tiempo y causa de su
desaparición o alteración y los medios de prueba de los cuales se obtuvo ese
conocimiento.
Se convocará un testigo hábil para que presencie el registro y firme el acta;
bajo esas formalidades podrá ser incorporada al juicio por su lectura.
Excepcionalmente, cuando no sea posible contar con un testigo, se podrá
prescindir de su presencia, debiendo asentarse en el acta los motivos.
38
El fiscal concurrirá al lugar del hecho, dirigirá el registro y firmará el acta;
actuaciones que podrán realizarse sin su presencia únicamente en casos de
urgencia.
Si el funcionario policial estuviese entrenado en el recojo de muestras de la
fauna asociada al cadáver, con el material adecuado y oportuno, daría una
información valiosa para responder o aportar a las tres preguntas fundamentales
que se plantea “causa, data y lugar” de la muerte.
Artículo 177.- (levantamiento e identificación de cadáveres). La policía
realizara la inspección corporal preliminar y la descripción de la situación o
posición del cuerpo y de la naturaleza de las lesiones o heridas conforme a lo
previsto en el artículo 174 de este código.
Procederá a levantar el cadáver, disponiendo su traslado a los gabinetes
médicos forenses o al lugar en el que se practicara la autopsia, a su identificación
final y a la entrega a sus familiares.
Artículo178.- (Autopsia o necropsia). El fiscal ordenará la autopsia o
necropsia conforme a las reglas de la pericia y bajo esas formalidades podrá ser
introducida al juicio para su lectura.
Si el fiscal no ha ordenado la realización de la autopsia o necropsia, las
partes podrán solicitar al juez que la ordene de conformidad a los artículos 307 y
siguientes de este código.
39
La entomología forense puede usarse como parámetro para determinar el
tiempo transcurrido desde la muerte, aportando al diagnostico de una autopsia.
Libro IV
Pericia
Artículo 204.- (Pericia). Se ordenará una pericia cuando para descubrir o
valorar un elemento de prueba sean necesarios conocimientos especializados en
alguna ciencia, arte o técnica.
La entomotoxicología es un elemento de prueba importante.
Artículo205.- (Peritos). Serán designados peritos quienes, según
reglamentación estatal, acrediten idoneidad en la materia.
Si la ciencia, técnica o arte no está reglamentada o si no es posible contar
con un perito en el lugar del proceso, se designará a una persona de idoneidad
manifiesta.
Las reglas de este Titulo regirán para los traductores e intérpretes. (26)
Al no existir entomólogos forenses en nuestro medio, un médico forense
podrá actuar como tal siempre que tenga los conocimientos necesarios en el tema.
Artículo 207.- (Consultores Técnicos). El juez o tribunal, según las reglas
aplicables a los peritos podrá autorizar la intervención en el proceso de los
consultores técnicos propuestos por las partes.
40
El consultor técnico podrá presenciar la pericia y hacer observaciones
durante el transcurso, sin emitir el dictamen. En las audiencias podrán asesorar a
las partes en los actos propios de su función, interrogar directamente a los peritos,
traductores o interpretes y concluir sobre la prueba pericial, siempre bajo la
dirección de la parte a la que asisten. La fiscalía nombrará a sus consultores
técnicos.28.
Un consultor técnico en entomología o entomotoxicología puede ser un
asesor valioso y poder aportar datos de interés forense que aclaren el caso como
parte del equipo forense.
2.8.2 Código de salud
Libro cuarto de las actividades sujetas a control sanitario
Titulo único del control de medicamentos, aparatos y equipos de salud,
estupefacientes y sustancias peligrosas, venenos tóxicos, reactivos y
disolventes orgánicos, laboratorios de salud, bancos de sangre, plaguicidas,
cosméticos y perfumería y tabacos.29
Capítulo IV
Art. 112.- Los venenos, sustancias químicas toxicas, reactivos y disolventes
organicos `para su fabricación, importación y comercialización deberán ser
autorizados por la Autoridad de Salud.
41
Capítulo VII
Art. 119.- Las personas naturales o jurídicas que importen, formulen,
fabriquen, manipulen, almacenen, transporten, comercien, suministren o apliquen
los productos denominados plaguicidas en Virtud de la Ley de Sanidad Vegetal, en
lo que corresponde a la salud humana, quedan sujetas a las disposiciones
reglamentarias que dice la Autoridad de Salud en estrecha coordinación con las
autoridades competentes.
2.8.3 Leyes nacionales y convenciones firmadas por Bolivia
Existen tratados internacionales para minimizar el uso de plaguicidas más
tóxicos, Bolivia a firmado las convenciones de Rótterdam, Estocolmo y el pacto
andino, la Norma Andina Nº 436 de los plaguicidas, y Bolivia tiene que acatar
estas disposiciones que al momento parece una dificultad.
De acuerdo a estudios del proyecto plaguicida Bolivia (PLAGBOL)
demuestran que: 1) Plaguicidas ilegales entran al país y son de venta libre 2)
Plaguicidas altamente tóxicos y prohibidos aun se utilizan 3) El transporte,
almacenamiento y venta de plaguicidas está en contacto con los alimentos 4) No
existe adecuada eliminación de plaguicidas y envases vacíos 5) Los plaguicidas
son vendidos por personas sin licencia y sin conocimientos de los riesgos 6) El
control nacional de los distribuidores no es tomado en cuenta.
42
3. JUSTIFICACIÓN
La entomotoxicología forense estudia a los insectos necrófagos y realiza
análisis toxicológicos con el fin de identificar drogas y toxinas presentes o como
afectan estas sustancias en el desarrollo de los insectos, en vista que provee
excelentes resultados en otros países del mundo, se debe dar un primer paso para
incluir este estudio, con el fin de establecer estrategias que sean herramientas
útiles a los procesos legales.30
Relacionado con lo anterior, los insectos que se alimentan de la carroña
pueden representar una fuente de información toxicológica muy útil para analizar y
establecer la causa de muerte con propósitos medico legales, en los que se
sospecha de un crimen o suicidio. Por lo tanto pueden servir como especímenes
alternativos y seguros para hacer análisis toxicológicos en aquellos casos en que
no exista fluidos y tejidos humanos debido a la descomposición o momificación de
los cadáveres. Además ser muy útil para determinar el tiempo transcurrido desde
que un individuo murió hasta el momento que se encontró y si el cadáver fue
trasladado a otro lugar, por ello al encontrar un cuerpo en descomposición se debe
realizar un análisis cuidadoso de la fauna cadavérica presente basado en el
conocimiento de la biología del insecto y las condiciones del medio ambiente
local.31
Las intoxicaciones y envenenamientos causados por sustancias, como los
plaguicidas, raticidas, benzodiacepinas, que son fáciles de adquirir en nuestro
medio por no existir un control continuo de la comercialización de los mismos, es
43
un gran problema y es urgente la implementación de un programa que haga
cumplir con normas de manejo y venta de plaguicidas.
El proyecto plaguicidas Bolivia demostró que el 90% de los agricultores
utilizan plaguicidas organofosforados de la clase mas toxica I y II, dando lugar a
intoxicaciones no fatales de 67%, y fatales de 92% que fueron intentos de suicidio,
confirmados por los registros de salud.
Por lo mencionado resulta de gran interés el estudio y perfeccionamiento de
las ciencias forenses. Siendo importante buscar nuevas alternativas que permitan
esclarecer la causa de muertes cuando no existe suficiente material para ser
colectado para análisis toxicológicos.
Al respecto existen pocos estudios que han identificado los efectos de las
sustancias toxicas sobre el ciclo vital de los insectos carroñeros y ningún estudio
en Bolivia, siendo un área importante de estudio la entomotoxicología forense
para esclarecer la causa de muerte de un individuo.
44
4. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN
4.1. PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN
¿Pueden afectar al ciclo vital de los dípteros necrófagos la presencia de
organofosforado y diazepam en cadáveres de cavia porcellus (conejo cuy) ?
4.2. OBJETIVO GENERAL
Determinar si el ciclo vital de los dípteros se ve afectado por exposición a
organosfoforados y diazepam en cavia porcellus fallecidos por estas sustancias.
4.3 . OBJETIVOS ESPECIFICOS
-Relacionar la presencia de dípteros con los estados de descomposición en
cadáveres de cavia porcellus (conejo cuy) fallecidos por organofosforado,
diazepam y el control fallecido por asfixia.
- Identificar los sitios de oviposición de dípteros en cadáveres de cavia porcellus
(conejo cuy) fallecidos por organofosforado, diazepam y en el conejo control
fallecido por asfixia.
- Comparar el desarrollo de los huevos y larvas de dípteros que colonizaron
cadáveres de cavia porcellus fallecidos por organofosforado, diazepam y control.
45
-Realizar la curva de crecimiento larval, extraídos de los tres conejos in situ en
relación a la temperatura ambiente promedio.
-Identificar taxonómicamente las especies de dípteros que colonizaron los
cadáveres de los conejos.
4.4. DISEÑO METODOLOGICO
El presente estudio es de tipo experimental.
4.5. MUESTRA
Huevos, larvas y adultos de insectos necrófagos recolectados del área de trabajo.
4.6. POBLACION
Huevos de los insectos que se encuentra en la población
Larvas de los insectos que se encuentran en la población.
Población accesible
Dípteros adultos
4.7. ASPECTOS ETICOS
De acuerdo con lo referido en la normas éticas de Helsinki y códigos de
bioética correspondiente a la prohibición de la destrucción de ciclo vital de
cualquier especie animal (acápite 12), en nuestro medio los conejos son criados
46
domésticamente y frecuentemente sacrificados para el consumo alimenticio es
por esto que no se destruye ningún ciclo vital de nuestro medio, por lo cual el
sacrificio de conejos para este experimento no constituye incumplimiento a las
normas de ética.
4.8 VARIABLES
Causa de muerte.
Temperatura ambiente
Estados de descomposición.
Dípteros
5. MATERIAL Y METODOS
5.1 Localización del área de estudio
El trabajo experimental en cadáveres de cavia porcellus (conejo cuy)
fallecidos por organofosforado y diazepam para ver el efecto del ciclo vital de
dípteros de importancia médico legal, se realizó en la ciudad de Cochabamba, en
la zona Chimba Central, zona urbanizada a 2 Km al norte de la ciudad de
Cochabamba con relativa vegetación y viviendas a (17º 23´ S. y los 66º 09’ W.)
en una terraza de cemento a cielo abierto correspondiente al tercer piso, esto con
el fin de que las larvas de los dípteros no sean afectadas por las hormigas y otros
insectos de tierra (Figura 1).
47
Figura 1. Lugar donde se realizó el estudio
Fuente: Calle Ma. Luisa
48
5.2 Animales usados
Como modelo animal se uso cavia porcellus (conejo cuy), se consideró por
la facilidad de manejo y de obtención fácil de ejemplares de tamaño uniforme y la
posibilidad de comparación de resultados obtenidos con trabajos anteriores en
otros países con el mismo cebo. Chapman & Sankey, (1955), Peschke (1987) y
Tantawi (1993).32
5.3 Tiempo de estudio:
El estudio se realizo del 23 Mayo al 23 de junio del 2009, correspondiente a
otoño e inicio de invierno con una temperatura entre -1ºC a 28,3ºC. Instalado en
una terraza de cemento.
5.4 Técnicas de campo y laboratorio:
Se sacrificaron tres conejo, un conejo con organofosforado, con una dosis
letal de 50mg/kg vía oral, el otro conejo con una sobredosis de diazepam de
457mg/Kg administrados por vía oral e intramuscular concomitantemente (75%
vía oral y 25% i.m.) y un tercer conejo control muerto por asfixia por
estrangulación con cuerda, El peso promedio de los tres conejos fue de 650 grs.
puestos en cajas de plastoformo de 5cm de alto, 37 cm de largo y 29 cm de ancho
con arena tamizada y expuesta anteriormente a los rayos solares para su
desinfección.
Y a su vez estas cajas se ubicaron sobre sus respectivos mesones, de
50cm de altura separados cada uno a 1 metro de distancia, con las
49
correspondientes jaulas de malla metálica de 40 cm de alto, 40 cm de largo y 29
cm de ancho a fin de restringir el acceso de los depredadores como los gatos y las
aves de rapiña del lugar33 (Figura. 2).
Figura 2. Materiales utilizados Fuente: Calle Ma. Luisa.
Se monitoreo durante 30 días, durante los cuales se vio la llegada de los
dípteros adultos y el lugar de oviposición. Se recolectó moscas adultas, huevos y
larvas de cada uno de los conejos, se midió el crecimiento larval sin considerar la
especie, tomando en cuenta la causa de muerte, temperatura ambiente y el estado
de descomposición, todos los datos se registraron diariamente en las fichas de
recolección y manejo de muestras entomológicas.33 (Tabla 4 anexos)
Las muestras recogidas se enviaron para su identificación al laboratorio de
la Sección de Invertebrados de la Colección Boliviana de Fauna perteneciente al
Instituto de Ecología.
50
5.5 Recolección de dípteros adultos:
Se colectó con red aérea de horas 14:00 a 17:00 dípteros que volaban
cerca del cadáver y los que se posaban en ellos, se sacrifico a los dípteros adultos
en cámara letal con papel absorbente empapado en cloroformo,12,33 por que
elimina de manera rápida al díptero sin causarle daño a su color y el papel evita
que las patas de los dípteros se enganchen, luego se hizo el montaje respectivo
con la introducción del alfiler en la región torácica del díptero (Figura 3).
Figura 3. Adultos recolectados para identificación.
Fuente: Calle Ma. Luisa.
51
5.6 Recolección de inmaduros de dípteros:
De cada cuerpo de los conejos se colectaron huevos y larvas de dípteros
diariamente, teniendo en cuenta área cefálica, torácica, abdominal y extremidades.
Se depositaron en un recipiente de metal y se echo agua caliente del termo, luego
se preservó en frascos de plástico con alcohol etílico al 70% para su estudio.12,33
Algunos huevos y larvas se las deposito en frascos de crianza para
completar su ciclo de vida como lo recomienda Tantawi y Greenberg16, 34
(Figura 4).
Figura 4. Recolección de larvas y preservación en alcohol
Fuente: Calle Ma. Luisa.
52
5.7 Cría de huevos y larvas:
Se colecto huevos y larvas de los tres cadáveres, usando pinzas
entomológicas sin alterar la posición de los conejos,33 posteriormente fueron
depositadas en frascos de boca ancha de 500ml con arena en el fondo,
inicialmente con hígado, luego con alimento de gato a base de hígado y carne
(galletas de gato) hidratadas, tapados con tela de fibra sintética para evitar la
oviposición por otros dípteros. (Martinez e Idrobo, 2000; Shahidetal et al., 2003)
diariamente se suplió parte del alimento y se espero hasta la emergencia del
adulto. Los frascos a su vez se colocaron en una cámara de plastoformo al medio
ambiente. (Figura 5).
Figura 5. Cría de larvas en frascos a temperatura ambiente.
Fuente: Calle Ma. Luisa
5.8 Identificación de insectos:
La identificación se realizó en el laboratorio de la Sección de Invertebrados
perteneciente a la Colección Boliviana de Fauna, por la entomóloga Rosario Apaza
Vera.
53
6 FUENTE DE RECOLECCION DE DATOS
Primarias, por que se trabajó directamente con la recolección de los
insectos adultos, huevos, larvas de los dípteros y la observación de los cambios
en descomposición de los cadáveres de cavia porcellus (conejo cuy).
7 RESULTADOS
Estados de descomposición de los cadáveres de cavia porcellus (conejo cuy).
Estado fresco a cromático
Fresco a cromático: (0 a 10 horas) Desde el sacrificio de los cobayos hasta
cierto hinchamiento del cuerpo, se evidencio fenómenos cadavéricos tempranos
como rigidez cadavérica, disminución de la temperatura y deshidratación (Figura
6). Cabe señalar que el conejo sacrificado con organofosforado presento relajación
de esfínteres, dando lugar a la eliminación de heces y orina.
Organofosforado Control Diazepam
Figura 6. Estado Fresco a Cromático
Fuente: Calle Ma. Luisa
54
Estado Enfisematoso
Enfisematosos: (De 11 horas a 5 días) Evidente abombamiento del
abdomen, debido a los gases producidos por la actividad metabólica de bacterias
anaerobias que causaron primero una hinchazón ligera del abdomen, la cual fue
aumentando gradualmente hasta asumir una hinchazón total,5 con ampollas de
aire a nivel de los pezones, los fluidos corporales empezaron a filtrase por las
aberturas naturales de la cabeza y recto con olor evidente a putrefacción
(Figura 7).
Organofosforado Control Diazepam
Figura 7. Estado Enfisematoso
Fuente: Calle Ma. Luisa
Estado Colicuativo
Colicuativo: (6 a 11 días) Se caracterizó por el colapso y la disminución del
cuerpo, cuando la epidermis se rompe como consecuencia de la presión de los
gases putrefactos y la alimentación de las larvas de Díptera.5,34 Se vio algunas
vísceras del abdomen, alrededor de las vísceras, se fijó una extensa mancha
negra y fuerte olor de putrefacción que fue disminuyendo al finalizar esta etapa.
55
En el conejo control este periodo fue hasta el día 8, y se evidenció migración de
larvas fuera de la caja, hasta localizar el lugar adecuado para pupar (Figura 8).
Organofosforado Control Diazepam
Figura 8. Estado Colicuativo
Fuente: Calle Ma. Luisa
Estado reductivo
Reductivo: (En el conejo control se inicio a partir del día 9 y comenzando el
día 12 en los otros conejos) A lo largo de esta fase se inició con la pupación de las
larvas de Díptera y hubo gran remoción de tejido blando. El olor fue menos intenso
que en la fase anterior. Todo el cuerpo tomo una forma uniforme, confundiéndose
con los órganos, terminando las larvas con la limpieza total de la materia orgánica
(Figura 9).
Organofosforado Control Diazepam
Figura 9. Estado Reductivo
Fuente: Calle Ma. Luisa
56
Fueron pocas las larvas que culminaron su ciclo en el conejo con
organofosforado y no fueron suficientes para consumir el total de cuerpo, como se
observó en el estadio reductivo, que se momificó manteniendo la postura
anatómica en la que fue depositado, y no se evidencio desprendimiento de pelos,
como sucedió en los otros conejos que quedaron reducidos a algo de cuero,
huesos disgregados y pelos repartidos en todo el suelo.
Al vaciar la arena de las cajas de plastoformo se pudo ver la cantidad de
restos de pupas, pupas que migraron a la base y se enterraron en el plastoformo,
se observa que fue menor en la caja que se encontraba el conejo con
organofosforado que se ubicaron a nivel de la cadera del conejo, y en los otros
conejos (control y diazepam) fue superior la presencia de pupas, su ubicación en
ambos conejos fue a nivel cefálica, torácica y extremidades (Figura 10).
Importante hacer notar que la mayoría de las larvas abandonaron las cajas, para
pupar lo más lejos posible y así evitar ser consumidos por otros insectos.
Organofosforado Control Diazepam
Figura 10. Lugar de pupación de larvas en las base de caja de plastoformo de los conejos.
Fuente: Calle Ma. Luisa.
57
La presencia de dípteros en relación a las etapas de descomposición y causa de
muerte de los conejos fue la siguiente:
Fresco a cromático: No hubo presencia de dípteros (Tabla 1).
Enfisematoso: Llegaron primero las Muscidaes al cadáver con órgano fosforado,
asentándose en boca y ano. Luego se presentaron de la familia Sarcophagidae las
que mostraron preferencia por el conejo control y el conejo con diazepam. En los
días siguientes se incrementaron en número haciendo su aparición dípteros de la
familia Calliphoridae (Tabla.1).
Colicuativo: Estuvieron presentes las tres familias ya mencionadas, las masas
larvales se ubicaron en boca, abdomen, entre la epidermis y la dermis,
alimentándose y desprendiendo el pelaje, pero no desprendieron el pelo en el
conejo con organofosforado. El final de esta fase estuvo marcada por la migración
de las larvas de dípteros previa a la pupación (Tabla1).
Reductivo: Los califoridos disminuyeron considerablemente al igual los de la
familia Sarcophagidae, se observó más individuos de la familia Piophilidae
pululando entre los restos y en menor número de la familia Fannidae (Tabla 1).
58
Tabla 1. Sucesión de la entomofauna en relación con la causa de muerte y
estados de descomposición.
CONEJO CON ORGANO FOSFORADO
ORDEN FAMILIA F E C R
DIP
TE
RA
CALLIPHORIDAE X X X X X X
SARCOPHAGIDAE X X x X X X
MUSCIDAE X X X x X X X X X X
PIOPHILIDAE x X x x X x x x
FANNIDAE x
DIA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
CONEJO CONTROL
ORDEN FAMILIA F E C R
DIP
TE
RA
CALLIPHORIDAE X X X X X
SARCOPHAGIDAE X X x X X
MUSCIDAE X X . X
PIOPHILIDAE x x x x x x x x x X x x x
FANNIDAE x x x
DIA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
CONEJO CON DIAZEPAM
ORDEN FAMILIA F E C R
DIP
TE
RA
CALLIPHORIDAE X X x X X X X X
SARCOPHAGIDAE X X x x x X X x x
MUSCIDAE X X X X X X X X x x x x
PIOPHILIDAE x x x X x X x x X
FANNIDAE X .
DIA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
F= Fresco. E= Enfisematoso. C= Colicuativo. R= Reductivo.
59
Se observó que la familia Muscidae (Figura11) fue la más abundante
seguida de la familia Calliphoridae, donde se destaca la Chrysomia albiceps,
seguida de la Lucilia sericata (Figura12), registró su mayor actividad entre el
tercero y noveno día en los tres conejos por igual.
Figura 11. Familia Muscidae. Fuente: Calle Ma. Luisa.
Figura 12. Familia Calliphoridae. Fuente: Calle Ma. Luisa.
60
Al inicio se observaron larvas en boca del conejo con órganofosforado,
luego se vio en todos los conejos en boca y debajo de abdomen, pero en el
momento de la colecta se pudo apreciar, dípteros adultos muertos alrededor del
cadáver con organofosforado, (Figura 15 anexos) y muy pocas larvas en relación
con los otros conejos (Figura 13).
Organofosforado Control Diazepam
Figura 13. Lugares de oviposición de los dípteros en los cadáveres de conejos cuy.
Fuente: Calle Ma. Luisa.
La temperatura ambiente promedio vario entre 11 y 16 ºC, del 23 de mayo
al 23 de junio, llegando el mínimo a -1ºC y la máxima a 28ºC, con una leve
precipitación el 28 de mayo del 2009 (Tabla 2). Se registro la temperatura de horas
5:00 a 6:00 por la mañana y por la tarde de horas 14:00 a 16:00, las mismas que
coincidieron con la temperatura tomada por la estación meteorológica.
61
Tabla 2. Temperatura ambiente y humedad relativa registrada del 23 de mayo al 23 de junio.
TEMPERATURA
ºc HUMEDAD RELATIVA % CLIMA
FECHA MINIMA MAXIMA MEDIA SOL LLUVIA NUBLADO
23/05/2009 5 28.3 15.6 53 X
24/05/2009 6 28.3 16.1 53 X
25/05/2009 5 28.3 16.4 50 X
26/05/2009 4 28.3 15.1 47 X
27/05/2009 6 26.1 16.2 52 X
28/05/2009 10 26.1 14.7 70 X
29/05/2009 8 23 14.4 65 X
30/05/2009 5 26.1 15.3 51 X
31/05/2009 1 26.1 13.9 45 X
01/06/2009 2 25.8 13.4 48 X
02/05/2009 2 25.7 12.4 43 X
03/06/2009 1 24.4 11.8 50 X
04/06/2009 0 25.7 11.8 46 X
05/06/2009 -0.2 27.2 12.4 45 X
06/06/2009 4 27.2 14.4 51 X
07/06/2009 3 27.4 13.4 46 X
08/06/2009 4 27.4 14.3 42 X
09/06/2009 1 27.3 12.9 45 X
10/06/2009 0 27.3 12.7 46 X
11/06/2009 1 27.3 12.5 48 X
12/06/2009 4 25 13.3 56 X
13/06/2009 2 24.4 12.8 45 X
14/06/2009 2 27.8 13.3 47 X
15/06/2009 2 27.8 12.5 42 X
16/06/2009 0 26 11.1 41 X
17/06/2009 0 26.2 11.3 49 X
18/06/2009 -1 26.8 11.6 41 X
19/06/2009 1 27.2 12.1 41 X
20/06/2009 1 27.2 13.3 - X
21/06/2009 2 26.8 13.4 54 X
22/06/2009 3 26.7 14 53 X
23/06/2009 3 26.7 14 49 X
Fuente .Estación meteorológica: 852230 (SLCB) Latitud: -17.41 | Longitud: -66.1 | Altitud: 2548
62
Se realizo la curva de crecimiento sin diferenciar familias considerando la
temperatura y las causa de muerte, esta curva muestra un retraso en el desarrollo
de las larvas del cadáver de conejo con organofosforado y diazepam en relación
con el conejo control, se observo que la etapa larval fue menor y puparon 7 días
antes que en los otros conejos, (Figura 16 anexos) y luego emergieron de las
pupas los dípteros adultos de 1 a 3 días antes que en los otros (Figura 14).
En los frascos de crianza no desarrollaron las larvas provenientes del
conejo con organofosforado, pero si completaron su ciclo las larvas colectadas del
conejo control y diazepam (Figura 18 anexos)
Figura 14. Curvas de crecimiento de las larvas colectadas de los tres conejos en
relación a la temperatura ambiente promedio por día
63
Tabla 3. Identificación taxonómica de las familias de dípteros encontrados
FAMILIA SUBFAMILIA GENERO ESPECIE AUTOR
Calliphoridae Calliphorinae Lucilia sericata Meigen
Calliphoridae Chrysomyniinae Chrysomya albíceps Wiedemann
Calliphoridae Chrysomyniinae Chrysomya putoria Wiedemann
Calliphoridae Calliphora Vicina Robineau-Desvoide
Sarcophagidae Sarcophaginae Liopygia Enderlein
Sarcophagidae Sarcophaginae Udamopyga Hall
Sarcophagidae Ravinia Robineau-Desvoide
Sarcophagidae Boettcheriini
Muscidae Musca domestica Linnaeus
Muscidae Dasymorellia Malloch
Muscidae Atherigona orientalis Schiner
Phiophilidae Phiophila Casei Linnaeus
Fanniidae Fannia Robineau-Desvoide
Fuente: Entomóloga Rosario Apaza, Laboratorio de la sección de invertebrados de la Colección Boliviana de Fauna
Se identificaron 7 especies, 12 géneros pertenecientes a 5 familias,
(Tabla 3) y (Tabla 6 anexos).
64
8 DISCUSIÓN
Las variaciones de descomposición se debieron a las características
particulares de la causa de muerte.
En los tres cadáveres de cavia porcellus estudiados en la presente
investigación, al igual que en el trabajo de Wolff,7 La Musca doméstica fue la
especie más abundante, seguido por Chrysomya alpiceps de acuerdo a Yusseff.10
Lucilia sericata y de la familia Sarcophagidae según Smith13 que prefieren
condiciones soleadas. De forma similar, Campobasso demostró que las especies
de Chrysomya toleran la exposición solar, al igual que en este trabajo, lo que hizo
posible su presencia de los géneros de Lucilia y Sarcophaga.13,35
Llego primero Musca domestica al conejo con organofosforado
probablemente porque hubo relajación de esfínteres, dando lugar a la eliminación
de contenido gástrico, intestinal, y orina.13
Al conejo con diazepam y al conejo control las primeras en llegar fueron de
la familia Sarcophagidae al tercer día llegaron de la familia Calliphoridae y es así
también en otros estudios publicados por Smith, (1986), Greenberg, (1991),
Golf, (1993) y Byrd y Castner, (2001) se reconoce a los miembros de la familia
Calliphoridae como los primeros insectos en descubrir y colonizar restos humanos.
En el presente trabajo, aunque la familia Calliphoridae hizo su aparición durante el
estado fresco, no fue el primer grupo en llegar.
65
Un estudio llevado a cabo en áreas templadas por Leccese, (2004)
evidenció la presencia de sarcofágidos durante las primeras etapas de
descomposición. Del mismo modo en este estudio los sarcofágidos se presentaron
al segundo día, se mantuvieron en los estados fresco, enfisematoso y colicuativo .
En contraposición Carvallo (2004) reporta la presencia de sarcofágidos a partir del
quinto día.
En el estado reductivo la presencia de dípteros se redujo
considerablemente contrastando con los datos de Centeno.38
Los lugares preferidos para la oviposición en los tres cuerpos en
descomposición fueron boca, nariz, debajo de abdomen y ano, no variaron de un
conejo a otro tal cual indica Greenberg (1991) que las larvas de primer estadio se
inician en la boca. Vario la cantidad de larvas que lograron desarrollar siendo muy
poco en el conejo con organofosforado y abundante en el conejo con diazepam en
relación al conejo control.
Otra observación importante en la presente investigación va dirigida a la
demora de formación de pupas en los conejos con organofosforado y con
diazepam, que fue 7 días después que en el conejo control, probablemente las
larvas fueron afectados por las sustancias, conforme a Martinez (2006) que
reporta el retraso de 24 horas por plaguicidas en el desarrollo de la entomofauna
necrófaga. En el cadáver con órgano fosforado muchas larvas murieron y pocas
lograron concluir con su desarrollo.
66
En cuanto a la emergencia de dípteros de las pupas no hubo gran variación
siendo la diferencia de 1 día después para el conejo con organofosforado y 3
días después para el conejo con diazepam en relación con el conejo control
pudiéndose ser posible su uso como medidor principal del intervalo post mortem,
estableciendo así un límite temporal por la presencia o no de puparios
eclosionados en relación con un cadáver, siempre considerando la temperatura
ambiente.
La temperatura promedio fue de 11 a 16ºC y la humedad promedio de
48.93% la precipitación no fue factor importante durante este estudio porque llovió
muy poco, según Catts y Haskell (1997), son factores extrínsecos que afectan la
tasa de descomposición e influyen en la presencia de ciertos insectos la humedad
relativa promedio, Byrdy Castner (2001) sugieren que el crecimiento de las
moscas depende de la temperatura y las reacciones bioquímicas que suceden
durante el crecimiento larval también dependen de la causa de muerte, se
evidencio retrasó en el desarrollo de las larvas provenientes de los cadáveres
tratados en relación al conejo control.36
En este trabajo se vió que Chrysomya albiceps fue la más abundante
concordante con Guimaraes et al. (1978), Mariluis, Schnack (1986) que indica que
el carácter predador de sus larvas sobre otras larvas de dípteros hace que esta
especie, aumente considerablemente.35,37 Este hecho podría explicar la baja
proporción encontrada de especies nativas en este estudio, concuerda con lo
observado en la provincia de Buenos Aires por Centeno que comprueba que
C. albiceps fue la especie dominante.16
67
9 CONCLUSIONES
En los conejos tratados se evidencio retraso en el ciclo vital, en la transición
de larva a pupa mostrando un retraso marcado en relación a larvas
provenientes del conejo control, de igual manera presentaron retraso en la
emergencia de dípteros de las pupas 1 a 3 días después que eclosionaron
de las pupas del conejo control. Paralelamente también se vio la eclosión
de los puparios de los frascos de crianza de la misma manera.
La presencia de dípteros esta en directa relación con los estados de
descomposición, pero cabe mencionar la preferencia de la mosca
domestica por el cadáver con organofosforado por la presencia de
excrementos a causa de la relajación de esfínteres por el veneno empleado.
Se observó múscidos a partir del segundo día en el cadáver con órgano
fosforado, y sarcofágidos en el cadáver del conejo control y con diazepam.
Posteriormente y en mayor cantidad se presentaron los califóridos en los
tres cadáveres sin ninguna preferencia inicial.
Los sitios de oviposición fueron en boca, luego debajo de abdomen y
cadera, posteriormente se observo un ramillete de larvas en la boca del
conejo con diazepam y control, en cambio en el conejo con organofosforado
en boca se observo ausencia de larvas, pocas a nivel abdominal y algunas
larvas en cadera.
68
Fueron pocas las larvas que lograron desarrollar en el conejo con
organofosforado lo que hace notar la importancia de la causa de muerte,
también se encontró moscas adultas muertas cerca del conejo con órgano
fosforado. En tanto que en el conejo con diazepam y control se aprecio gran
cantidad de larvas, las mismas que concluyeron su ciclo vital, e igualmente
desarrollaron en los frascos de crianza, en cambio los huevos y larvas
provenientes del organofosforado ninguno desarrollo en los frascos de
crianza.
La curva de crecimiento está en relación a la temperatura ambiente y causa
de muerte, observándose un notable retraso en el desarrollo larval hasta la
pupación en larvas provenientes de los conejos con organofosforado y
diazepam en relación al control. Con respecto al tamaño de las larvas de los
dípteros se aprecia mayor longitud en larvas provenientes del conejo con
organofosforado, seguido de las larvas del conejo control.
Se identificaron 7 especies, 12 géneros pertenecientes a 5 familias, no se
logro identificar más géneros y especies por no contar con claves
taxonómicas para nuestro medio.
69
10 RECOMENDACIONES
El presente estudio es de tipo piloto y de línea de base que requiere estudiar
adicionales como:
Continuar con experimentos para analizar la diferencia en la sucesión de
insectos y presencia o ausencia de las especies necrófagas sobre
cadáveres envenenados, quemados, con heridas abiertas, ahogados etc.
Realizar curvas de crecimiento por especie que serán utilizados como una
herramienta de apoyo para determinar el intervalo post mortem con una
confiabilidad muy alta.
Realizar estudios que deben incluir el procesamiento de inmaduros para
determinar el tamaño en relación al intervalo postmorten, utilizando diversas
sustancias.
Realizar tablas taxonómicas para nuestro medio.
70
11 BIBLIOGRAFIA
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determination of the time of death. Forensic Science International
2001;120(1-2): 89-109
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75
12 GLOSARIO
ABUSO: (de sustancias). Uso inadecuado o excesivo de medicamentos,
disolventes, drogas u otras sustancias.
ADULTO: Etapa en la que el individuo ha llegado a su mayor crecimiento o
desarrollo y en la cual posee plena capacidad reproductiva.
AGUDO: Exposiciones o efectos a corto plazo.
AUTOPSIA: Se denomina a la serie de exámenes externos e internos del cadáver
con el fin de poder establecer la causa de la muerte. Se define tradicionalmente
como el "arte de hacer hablar al cadáver".
CICLO DE VIDA: Fases de desarrollo por las cuales pasan los insectos desde
huevo hasta adulto (huevo, larva, pupa, adulto) o (huevo, ninfa, adulto).
COLONIZACIÓN: Formación o establecimiento de un grupo de animales de una
misma especie que conviven en un territorio limitado.
ENTOMOLOGIA: En griego tomos significa “parte cortada”. De ahí: un ser
segmentado en – tomo; ciencia de los seres segmentados.
ENTOMOLOGÍA FORENSE: Es el estudio de los insectos y otros artrópodos
relacionados con los cadáveres, se usa a nivel médico-legal con el propósito de
obtener información para la determinación del tiempo y en casos muy particulares,
el lugar de muerte.
76
FAUNA CADAVÉRICA: Conjunto de insectos que se suceden con regularidad
cronológica en un cadáver humano, desde el momento en que se produce la
muerte hasta la destrucción completa de las partes blandas.
HUEVO: Primera fase de desarrollo de los insectos.
INSECTOS: Organismos con el cuerpo dividido en tres secciones (cabeza, tórax y
abdomen), cabeza con las partes bucales, tórax con tres pares de patas y
abdomen con 6-12 segmentos.
INTERVALO POSTMORTEM (IPM): Período de tiempo transcurrido entre la
muerte y el hallazgo del cadáver.
INTOXICACION: Proceso patológico, con signos y síntomas clínicos, causados
por una sustancia de origen exógeno o endógeno.
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA FORENSE: Investiga las sustancias tóxicas
que causan la muerte, o investiga los hechos legales donde se involucran
sustancias Tóxicas.
LARVA: Es el estado inmaduro de un insecto (con ciclo de metamorfosis completa)
que se da entre el estado de huevo y el estado de pupa.
MACROINVERTEBRADOS: Animales que no poseen esqueleto interno y que son
apreciables a simple vista.
77
NECROPSIA: Es sinónimo de autopsia, algunos lo denominan examen
postmortem, aunque este último término se usa ambiguamente para la autopsia
completa y el "reconocimiento" o examen externo del cadáver.
NECROFAGOS: Se alimentan del cadáver.
NECROFILOS: Se alimentan de los necrófagos, son predadores o parásitos.
OMNIVOROS: Comen tejidos muertos, insectos necrófagos o ambos.
PREPUPA: Estado larval inactivo posterior a la etapa de alimentación, en el cual el
cuerpo se contrae y se engrosa antes de comenzar el estado pupal.
PUPA: Estadio de transformación metamórfica, usualmente inmóvil, que ocurre
entre el último estado larval y el estado adulto.
PUTREFACCIÓN: Es la descomposición de la materia orgánica del cadáver por la
acción metabólica microbiana por fuera del alcance del control ejercido en vida del
sujeto.
TÓXICO: Es cualquier sustancia química que en contacto o absorbida por un
organismo vivo puede producir efectos adversos.
TOXICIDAD: Es la capacidad de una sustancia de producir daño, DL 50, con la
cuál muere el 50% de los animales de experimentación.
78
ANEXOS
79
TABLA 4
FICHA DE RECOLECCIÓN Y MANEJO DE MUESTRAS ENTOMOLOGICAS
Fecha
Día
Mes
Año
Hora
I INFORMACIÓN DEL CADÁVER
Marcar con X
Con organofosforado
Con diazepam
Control
II REGISTRO DE DATOS AMBIENTALES
Marcar con X
CLIMA LLUVIA TEMPERATURA AMBIENTE ºC CADAVER
SOL HUMEDAD RELATIVA %
NUBLADO TEMPERATURA AMBIENTE
DEL LUGAR
ºC
DESPEJADO ºC
III LOCALIZACIÓN DEL CADÁVER
CON SOMBRA PARCIAL, AMBIENTE ABIERTO (TERRAZA CORRESPONDIENTE AL TERCER PISO), Y CUERPO DESCUBIERTO
IV ESTADO DEL CADÁVER
ESTADO DE
DESCOMPOSICION
OBSERVACIONES
FRESCO
CROMATICO
ENFISEMATOSOS
COLICUATIVO
REDUCTIVO
V ACTIVIDAD DE INSECTOS
DATOS BIOLOGICOS
FAMILIA 1 a 5 6 a 10 11 a mas
Calliphoridae
Sarcophagidae
Muscidae
Piophilidae
Fannidae
80
Marcar con X
PRESENCIA DE
INSECTOS
HUEVOS LARVAS PUPAS ADULTOS
Abundancia de los
insectos
HUEVOS P M M
P M M
P M M
P M M
P M M
Localización en el
cuerpo
LARVAS P M M
P M M
P M M
P M M
P M M
Localización en el
cuerpo
PUPAS P M M
P M M
P M M
P M M
P M M
Localización en el
cuerpo
ADULTOS P M M
P M M
P M M
P M M
P M M
Localización en el
cuerpo
Pocos 1-5 individuos Medio: 5-10 individuos Muchos: más de 11 individuos
Fijación y preservación de insectos SI NO
Marcar con X
Huevos Fijación y preservación Huevos Conservados vivos para estudio
Larvas Fijación y preservación Larvas Conservados vivos para estudio
Pupas Fijación y preservación Pupas Conservados vivos para estudio
Adultos Fijación y preservación ctos
81
TABLA 5. VI VARIABLE LARGO PROMEDIO CORPORAL
LUGAR
Estadio Día Largo mm Menor Mayor
Huevo
Larva
Pupa
VII VARIABLE ANCHO PROMEDIO CORPORAL
Estadio Día Ancho mm Menor Mayor
Huevo
Largo
Pupa
Adulto
VI VARIABLE LARGO PROMEDIO CORPORAL
LUGAR
Estadio Día Largo mm Menor Mayor
Huevo
Larva
Pupa
VII VARIABLE ANCHO PROMEDIO CORPORAL
Estadio Día Ancho mm Menor Mayor
Huevo
Largo
Pupa
Adulto
VI VARIABLE LARGO PROMEDIO CORPORAL
LUGAR
Estadio Día Largo mm Menor Mayor
Huevo
Larva
Pupa
VII VARIABLE ANCHO PROMEDIO CORPORAL
Estadio Día Ancho mm Menor Mayor
Huevo
Largo
Pupa
Adulto
IX LABORATORIO PARA TOXICOLOGIA
LARVAS SI NO
PUPAS SI NO
82
Tabla 6. CLASIFICACIÓN DE INSECTOS COLECTADOS DURANTE LA
DESCOMPOSICIÓN CADAVÉRICA DE LOS TRES CADÁVERES DE CONEJOS
FAMILIA SUBFAMILIA GENERO ESPECIE FOTO
Calliphoridae Calliphorinae Lucilia sericata
Calliphoridae Chrysomyniinae Chrysomya albiceps
Calliphoridae Chrysomyniinae Chrysomya putoria
Calliphoridae Calliphora Vicina
83
Sarcophagidae Sarcophaginae Liopygia
Sarcophagidae Sarcophaginae Udamopyga
Sarcophagidae Ravinia
Sarcophagidae Boettcheriini
84
Muscidae Musca domestica
Muscidae Dasymorellia
Muscidae Atherigona orientalis
Phiophilidae Phiophila casei
Fuente: Calle Ma. Luisa.
85
Fig.15 Dípteros adultos muertos alrededor del cadáver del conejo con órganofosforado
Fig. 16 Larvas en distintos estadios, colectados de los tres conejos, azul diazepam, verde control, y
anaranjado organofosforado.
Fig. 17 Pupas de dípteros debajo del cadáver en estado reductivo.
Fuente: Calle Ma. Luisa.
86
Fig.18 Eclosión de dípteros adultos de las pupas de frascos de crianza Fuente: Calle Ma. Luisa.
