universidad central del ecuador …€¦ · megacariopoyesis ..... 11 figura 3. cámara de neubauer

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO

“Evaluación de la concordancia de resultados de trombocitopenia mediante el

principio de impedancia y el frotis en sangre periférica en el servicio de Consulta

Externa de Hematología del Hospital Carlos Andrade Marín-Quito, durante el

periodo de Septiembre - Diciembre del 2016”

Proyecto de Investigación presentado como requisito previo a la obtención del Título de:

Licenciado en Laboratorio Clínico e Histotecnológico

Autor: Cajo Andrango Andrés Isaac

Tutor Académico: Dr. Alarcón Benítez Ángel Enrique

Quito, junio 2017

ii

DERECHOS DE AUTOR

Yo, Cajo Andrango Andrés Isaac en calidad de autor del trabajo de investigación:

“EVALUACIÓN DE LA CONCORDANCIA DE RESULTADOS DE

TROMBOCITOPENIA MEDIANTE EL PRINCIPIO DE IMPEDANCIA Y EL

FROTIS EN SANGRE PERIFÉRICA EN EL SERVICIO DE CONSULTA EXTERNA

DE HEMATOLOGÍA DEL HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARÍN-QUITO,

DURANTE EL PERIODO DE SEPTIEMBRE - DICIEMBRE DEL 2016”, autorizo a la

Universidad Central del Ecuador a hacer uso de todos los contenidos que me pertenecen o

parte de los que contiene esta obra, con fines estrictamente académicos o de investigación.

Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente autorización,

seguirían vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5, 6, 8, 19

y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento.

También, autorizo a la Universidad Central del Ecuador a realizar la digitalización y

publicación de este trabajo de investigación en el repositorio virtual, de conformidad a lo

dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior

Quito, 27 de Abril del 2017

Firma:

………………………………………….

Cajo Andrango Andrés Isaac

C.I. 172540424-6

Teléf. 0995378221

E-mail: [email protected]

iii

INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR

Yo, Dr. Alarcón Benítez Ángel Enrique, en calidad de Tutor del Trabajo de Titulación,

modalidad Proyecto de Investigación, elaborado por el señor Cajo Andrango Andrés Isaac,

cuyo título es: “EVALUACIÓN DE LA CONCORDANCIA DE RESULTADOS DE




DURANTE EL PERIODO DE SEPTIEMBRE - DICIEMBRE DEL 2016”; previo a la

obtención del Título o Grado de Licenciado en Laboratorio Clínico e Histotecnológico;

considero que el mismo reúne los requisitos y méritos necesarios en el campo metodológico

y en el campo epistemológico, para ser sometido a la evaluación por parte del tribunal

examinador que se designe, por lo que le APRUEBO, a fin de que el trabajo investigativo

sea habilitado para continuar con el proceso de titulación determinado por la Universidad

Central del Ecuador.

En la ciudad de Quito, a los 27 días del mes de Abril del 2017.

………………………………….......

Firma

Dr. Alarcón Benítez Ángel

Docente-Tutor

CI. 060120914-1

iv

APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL

El Tribunal constituido por: Dr. Chiriboga Marcelo (Presidente), MSc. Tapia Mercedes

(Vocal 1), Lic. Champutiz Eliana (Vocal 2).

Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención del

título de Licenciado en Laboratorio Clínico e Histotecnológico, presentado por el señor

Cajo Andrango Andrés Isaac.

Con el título:





DURANTE EL PERIODO DE SEPTIEMBRE - DICIEMBRE DEL 2016”

Emite el siguiente veredicto: Aprobado

Fecha: 06 de julio de 2017

Para constancia de lo actuado firman:

Nombre y Apellido Calificación Firma

Presidente: Dr. Chiriboga Marcelo ……19…….

Vocal 1: MSc. Tapia Mercedes …….19…….

Vocal 2: Lic. Champutiz Eliana …….19……..

v

DEDICATORIA

Esta investigación la dedico a Dios quien desde el cielo siempre ha estado

conmigo y me ha permitido llegar a cumplir mis metas, a mis padres Aida

Andrango y Manuel Cajo quienes me han brindado el apoyo y cariño

incondicional durante toda la vida, a mis hermanos Oscar, Edison y Francisco

que con su alegría han hecho mi vida más plena.

vi

AGRADECIMIENTO

Agradezco a Dios por estar a mi lado en cada momento siendo mi guía espiritual.

A mi familia por sus consejos, cariño y valores los cuales han sido el pilar fundamental que

me ha ayudado a superar los retos presentados en toda mi vida.

Al Dr. Ángel Alarcón por su paciencia, ayuda y colaboración, en este proyecto de

investigación.

Al Dr. Roberto Yajamín que a más de ser mí maestro lo considero como un amigo por

brindarme su apoyo incondicional.

Al equipo que conforma el Laboratorio Clínico del Hospital Carlos Andrade Marín

especialmente al Dr. Patricio Yánez y a la Lic. Anita Andrade por darme la apertura para

poder realizar mi proyecto de investigación.

A todos mis amigos de los cuales me llevo gratos recuerdos, especialmente a Nicole por

alentarme en todo momento.

A mis maestros a lo largo de la carrera de los cuales a más de enriquecer mis conocimientos

han inculcado valores para toda mi vida.

vii

ÍNDICE DE CONTENIDOS

DERECHOS DE AUTOR ..................................................................................................... ii

INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR .................................................................... iii

APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL ........................................ iv

DEDICATORIA .................................................................................................................... v

AGRADECIMIENTO .......................................................................................................... vi

RESUMEN .......................................................................................................................... xiii

INTRODUCCIÓN ................................................................................................................. 1

CAPÍTULO I .......................................................................................................................... 2

EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN .............................................................................. 2

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................... 2

1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ........................................................................ 3

1.3 PREGUNTAS DIRECTRICES .................................................................................. 3

1.4 OBJETIVOS ............................................................................................................... 4

1.4.1 OBJETIVO GENERAL. ...................................................................................... 4

1.4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ............................................................................... 4

1.5 JUSTIFICACIÓN ....................................................................................................... 5

CAPÍTULO II ........................................................................................................................ 7

MARCO TEÓRICO ............................................................................................................... 7

2.1 PLAQUETAS ............................................................................................................. 7

2.1.1 ESTRUCTURA DE LAS PLAQUETAS ............................................................ 8

2.1.2 FORMACIÓN DE LAS PLAQUETAS............................................................... 9

viii

2.1.3 FUNCIÓN DE LAS PLAQUETAS ................................................................... 11

2.1.4 VALORES REFERENCIA DE LAS PLAQUETAS ........................................ 12

2.2 MÉTODOS PARA EL RECUENTO DE PLAQUETAS ......................................... 12

2.2.1 MÉTODOS MANUALES ................................................................................. 12

2.2.2 MÉTODOS AUTOMÁTICOS .......................................................................... 15

2.2.3 SYSMEX XE-2100 ............................................................................................ 17

2.3 TROMBOCITOPENIA ............................................................................................ 19

2.3.1 PREVALENCIA DE LA TROMBOCITOPENIA ............................................ 19

2.3.2 CLASIFICACIÓN DE LA TROMBOCITOPENIA ......................................... 19

2.3.3 MANIFESTACIONES CLÍNICAS DE LA TROMBOCITOPENIA ............... 20

2.4 PSEUDOTROMBOCITOPENIA ............................................................................. 21

2.4.1 PREVALENCIA DE LA PSEUDOTROMBOCITOPENIA ............................ 21

2.4.2 FACTORES INTERVINIENTES ....................................................................... 21

CAPÍTULO III ..................................................................................................................... 25

METODOLOGÍA ................................................................................................................ 25

3.1 DISEÑO DE INVESTIGACIÓN .............................................................................. 25

3.2 POBLACIÓN Y MUESTRA .................................................................................... 25

3.2.1 POBLACIÓN ...................................................................................................... 25

3.2.2 CÁLCULO DE MUESTRA ............................................................................... 25

3.3 CRITERIOS DE INCLUSIÓN ................................................................................. 26

3.4 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ................................................................................ 27

3.5 SISTEMA DE VARIABLES .................................................................................... 27

3.6 OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES ................................................ 28

3.7 DISEÑO METODOLÓGICO .................................................................................... 29

ix

3.7.1 APROBACIÓN DEL TEMA EN EL HOSPITAL ............................................. 29

3.7.2 RECOLECCIÓN DE DATOS ............................................................................ 29

3.7.3 ANÁLISIS DE DATOS ..................................................................................... 29

3.7.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS ........................................................................ 30

CAPÍTULO IV ..................................................................................................................... 31

RESULTADOS .................................................................................................................... 31

DISCUSIÓN ........................................................................................................................ 38

CONCLUSIONES ............................................................................................................... 40

RECOMENDACIONES ...................................................................................................... 41

BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................. 42

ANEXOS ............................................................................................................................. 48

x

ÍNDICE DE GRÁFICOS

Gráfico 1. Número de casos con trombocitopenia y pseudotrombocitopenia. .................... 31

Gráfico 2. Coeficiente de correlación de Pearson en casos de trombocitopenia. ................ 32

Gráfico 3. Concordancia de Bland Altman en casos de trombocitopenia............................ 33

Gráfico 4. Coeficiente de correlación de Pearson en casos de pseudotrombocitopenia. ..... 34

Gráfico 5. Concordancia de Bland Altman en casos de pseudotrombocitopenia. ............... 35

Gráfico 6. Número de casos con pseudotrombocitopenia según el factor interviniente. ..... 36

Gráfico 7. Número de casos de pseudotrombocitopenia con y sin alarma para contajes de

plaquetas bajas. .................................................................................................................... 37

xi

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1. Plaquetas en frotis de sangre periférica ............................................................. 7

Figura 2. Megacariopoyesis ............................................................................................ 11

Figura 3. Cámara de Neubauer........................................................................................ 13

Figura 4. Técnica del frotis de sangre periférica ............................................................. 14

Figura 5. Principio de impedancia o “Principio de Coulter” .......................................... 16

Figura 6. Satelitismo plaquetario. ................................................................................... 22

Figura 7. Macrotrombocitos ............................................................................................ 23

Figura 8. Agregados plaquetarios ................................................................................... 24

Figura 9. Sistema de variables ........................................................................................ 27

xii

ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1. Recuento de plaquetas por impedancia del equipo Sysmex XE-2100 ............ 48

Anexo 2. Certificado de aprobación del tema en el Hospital “Carlos Andrade Marín” de

Quito. ............................................................................................................................... 49

Anexo 3. Hoja de recolección de datos ........................................................................... 50

Anexo 4. Carta de confidencialidad ................................................................................ 51

Anexo 5. Cronograma de actividades ............................................................................. 53

Anexo 6. Imágenes .......................................................................................................... 54

xiii

TEMA: “EVALUACIÓN DE LA CONCORDANCIA DE RESULTADOS DE

TROMBOCITOPENIA MEDIANTE EL PRINCIPIO DE IMPEDANCIA Y EL FROTIS EN

SANGRE PERIFÉRICA EN EL SERVICIO DE CONSULTA EXTERNA DE HEMATOLOGÍA

DEL HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARÍN-QUITO, DURANTE EL PERIODO DE

SEPTIEMBRE – DICIEMBRE DEL 2016”

Autor: Cajo Andrango Andrés Isaac

Tutor: Dr. Alarcón Benítez Ángel Enrique

Fecha: 26 de Abril del 2017

RESUMEN

JUSTIFICACIÓN.- La trombocitopenia es un marcador importante de varias enfermedades, a pesar

del avance de la tecnología todavía se producen casos de pseudotrombocitopenia en analizadores

automáticos. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.- Los macrotrombocitos, el satelitismo

plaquetario y los agregados plaquetarios son factores intervinientes que causan problemas en la

exactitud y precisión en el contaje de plaquetas provocando pseudotrombocitopenia en los

analizadores automáticos que utilizan el principio de impedancia. OBJETIVOS.- Demostrar la

concordancia de resultados de trombocitopenia mediante el principio de impedancia y el frotis en

sangre periférica en el servicio de Consulta Externa de Hematología del Hospital Carlos Andrade

Marín en Quito, durante el periodo de Septiembre a Diciembre del 2016. DISEÑO

METODOLÓGICO.- El estudio fue de tipo descriptivo, retrospectivo y observacional; la población

fue de 726 pacientes, de los cuales se obtuvo una muestra representativa de 251 casos.

RESULTADOS.- Del total de la muestra, 40 pacientes que corresponden al 15,94% presentaron

pseudotrombocitopenia; el coeficiente de correlación de Pearson fue de 0,86 en los casos de

trombocitopenia y de 0,08 en la pseudotrombocitopenia; la concordancia de Bland Altman demostró

una menor diferencia promedio y desviación estándar en los casos de trombocitopenia respecto de los

casos de pseudotrombocitopenia; los factores intervinientes encontrados fueron los agregados

plaquetarios con el 56,10% y los macrotrombocitos con el 43,90%, también se observó que el 70%

de casos con pseudotrombocitopenia no presentó ninguna alarma de error para los contajes de

plaquetas bajas. CONCLUSIONES.- Existen casos de pseudotrombocitopenia obtenidos por el

principio de impedancia, además hay una menor correlación y concordancia entre las dos técnicas

en los casos de pseudotrombocitopenia, causado por los factores intervinientes que afectan los

contajes, los cuales se pueden identificar en el frotis de sangre periférica.

Palabras Clave: FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA / PRINCIPIO DE IMPEDANCIA /

PSEUDOTROMBOCITOPENIA / FACTORES INTERVINIENTES.

xiv

SUBJECT: "EVALUATION OF AGREEMENT OF RESULTS FOR THROMBOCYTOPENIA

THROUGH IMPEDANCE PRINCIPLE AND SMEAR OF PERIPHERAL BLOOD IN THE

AMBULATORY SERVICE FOR HEMATOLOGY OF HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARIN-

QUITO, DURING SEPTEMBER - DECEMBER 2016”

Author: Cajo Andrango Andrés Isaac

Tutor: Dr. Alarcón Benítez Ángel Enrique

Date: April 26, 2017

ABSTRACT

RATIONALE.- Thrombocytopenia is a relevant marker for various diseases. In spite of the technologic

advance, cases of pseudo-thrombocytopenia are still found in automatic analyzers. PROBLEM

STATEMENT.- Macro-thrombocytes, platelet satelliteism and platelet aggregated are factors causing

troubles in the accuracy of platelet counting, which in turns cause pseudo-thrombocytopenia in automatic

analyzers, using impedance principle. OBJECTIVES.- Demonstrating agreement of results for

thrombocytopenia through the impedance principle and smears of peripheral blood in the ambulatory

service of hematology of Hospital Carlos Andrade Marín in Quito, during period September to December

2016. METHODOLOGICAL DESIGN.- The study was descriptive, retrospective and observational.

The population was composed by 726 patients, out of which a representative sample of 251 cases was

obtained. RESULTS.- Out of the total sample, 40 patients (15.94%) showed pseudo-thrombocytopenia;

the Pearson correlation coefficient was 0.86 for thrombocytopenia cases, and 0.08 for pseudo-

thrombocytopenia cases. Bland Altman’s agreement showed a lower average difference and standard

deviation for pseudo-thrombocytopenia cases in comparison to thrombocytopenia cases. Factors found

were platelet factors with 56.10% and macro-thrombocytes with 43.90%. There were also 70% of cases

with pseudo-thrombocytopenia with no error alarm for low platelet counts. CONCLUSIONS.- Cases of

pseudo-thrombocytopenia exist, obtained through impedance principle; additionally a lower correlation

and agreement was found between the two techniques in cases of pseudo-thrombocytopenia, caused by

influencing factors, that affect counts, which can be identified in the smear for peripheral blood.

Keywords: SMEAR FOR PERIPHERAL BLOOD / IMPEDANCE PRINCIPLE / PSEUDO-

THROMBOCYTOPENIA / INFLUENCING FACTORS.

1

INTRODUCCIÓN

Las plaquetas, son fragmentos del citoplasma del megacariocito que miden de 2-3 μm de

diámetro, circulan en la sangre periférica participando directa e indirectamente en el

mecanismo de la coagulación de la sangre además su función es clave en la hemostasia

primaria. Su número y distribución en sangre periférica está controlado al igual que su

destrucción, a través de un proceso fisiológicamente predeterminado (1).

En ocasiones se producen trastornos de las plaquetas de naturaleza cuantitativa o cualitativa,

las anormalidades cuantitativas de las plaquetas son aquellas en las cuales su cifra está muy

baja (trombocitopenia) o muy alta (trombocitosis) según su concentración normal (130.000/

μl-400.000/ μl) (2).

La trombocitopenia es usada como marcador de la existencia de enfermedades agudas o

crónicas, adquiridas o hereditarias. Es la segunda alteración más frecuente relacionada con

el hemograma en la práctica médica (3).

La introducción de contadores hematológicos automatizados que usan en su mayoría la

tecnología de impedancia mejoró la precisión de los contajes de plaquetas, sin embargo a

pesar de su amplio uso, el recuento por impedancia todavía tiene limitaciones significativas

ya que existen factores que pueden provocar una pseudotrombocitopenia (conteos bajos de

plaquetas erróneos).

Por lo que resulta de gran importancia la confirmación de los resultados con un contaje de

plaquetas mediante el frotis de sangre periférica ya que a más de proporcionar el número de

plaquetas también permite observar sus características morfológicas.

Con esta investigación se evaluó la concordancia de los resultados de contajes bajos de

plaquetas obtenidos mediante el principio de impedancia del analizador automático Sysmex

XE - 2100 con el contaje en frotis de sangre periférica, con el afán de aclarar los resultados.

2

CAPÍTULO I

EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La trombocitopenia es utilizada como un importante marcador de varias enfermedades, es el

hallazgo más frecuente en el hemograma después de la anemia; aproximadamente el 0,9%

de los pacientes con una enfermedad aguda, cerca del 25% al 46% de los pacientes en unidad

de cuidados intensivos presentan algún grado de trombocitopenia (4).

A pesar de los grandes avances tecnológicos cada vez más sofisticados y completos del

hemograma, el frotis de sangre periférica continúa siendo una herramienta usada para aclarar

resultados de hemogramas que muestren alguna desviación en los contajes tanto por la

rapidez y la facilidad de su técnica, ya que existen factores que pueden provocar problemas

de exactitud y precisión en el recuento de plaquetas en los analizadores automáticos (5).

El principio de impedancia es ampliamente usado en los contadores hematológicos ya que

mejoro la precisión del contaje, sin embargo a pesar de su amplio uso, el recuento por

impedancia todavía tiene limitaciones significativas. Uno de los mayores problemas se

produce en muestras con trombocitopenia, ya que el número de factores intervinientes

(satelitismo plaquetario, los macrotrombocitos y agregados plaquetarios) brindan un falso

contaje bajo de plaquetas (pseudotrombocitopenia) (6).

El satelitismo plaquetario: es la adhesión de las plaquetas a la superficie de otras células

circulantes, los macrotrombocitos: son plaquetas de un tamaño más grande y los agregados

plaquetarios: la aglutinación plaquetaria; son considerados los factores intervinientes más

comunes que provoca pseudotrombocitopenia en los analizadores automáticos que usan el

principio de impedancia (7).

3

1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

¿Existe concordancia en resultados de trombocitopenia medidos por el principio de

impedancia y el frotis en sangre periférica, en pacientes del servicio de Consulta Externa de

Hematología del Hospital Carlos Andrade Marín-Quito, durante el periodo de Septiembre -

Diciembre del 2016?.

1.3 PREGUNTAS DIRECTRICES

¿Cuál es la frecuencia de casos con pseudotrombocitopenia en los contajes bajos de

plaquetas?

¿Cuál es el grado de concordancia y correlación de los resultados en casos de verdadera

trombocitopenia y pseudotrombocitopenia?

¿Cuáles son los factores intervinientes que provocaron pseudotrombocitopenia?

4

1.4 OBJETIVOS

1.4.1 OBJETIVO GENERAL.

Demostrar la concordancia de resultados de trombocitopenia mediante el principio de

impedancia y el frotis en sangre periférica en el servicio de Consulta Externa de Hematología

del Hospital Carlos Andrade Marín-Quito, durante el periodo de Septiembre - Diciembre del

2016.

1.4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Determinar la frecuencia de casos con pseudotrombocitopenia.

Establecer la concordancia y correlación de los resultados en casos de trombocitopenia y

pseudotrombocitopenia.

Determinar los factores intervinientes que provocan pseudotrombocitopenia.

5

1.5 JUSTIFICACIÓN

La trombocitopenia es usada como marcador de una amplia gama de enfermedades, con la

incorporación de los analizadores automáticos hematológicos en la mayoría de los

laboratorios clínicos, el hallazgo de trombocitopenias es cada vez más frecuente (3).

Investigaciones previas realizadas en el “Hospital Privado de Córdoba” (Argentina)

comparando dos contadores hematológicos, mostraron gran concordancia de los resultados

obtenidos de la mayoría de parámetros del hemograma, pero se observaron grandes

diferencias con el contaje bajo de plaquetas y la diferenciación de formas inmaduras de

leucocitos (8).

En un estudio prospectivo de 20761 muestras de sangre de rutina realizado por García Suarez

J, Merino JL, Rodríguez M, Velazco A y Moreno MC muestra que el 49% de contajes bajos

de plaquetas son pseudotrombocitopenias (5).

Un análisis realizado en el “Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas” (Lima-Perú),

también demostró que existen factores intervinientes que provocan pseudotrombocitopenia

siendo los más comunes los agregados plaquetarios (6).

En casos de alguna alteración hematológica la observación del frotis de sangre periférica

tiene prioridad para el diagnóstico hematológico ya que en los contajes de plaquetas a más

de brindar una estimación cuantitativa, también permite observar anormalidades en la

morfología: macrotrombocitos, plaquetas agranulares, agregación plaquetaria, satelitismo

plaquetario; es decir factores intervinientes que puedan provocar pseudotrombocitopenia (6).

Pero cabe aclarar que la observación de frotis en sangre periférica no está exenta de errores

ya que su calidad depende de varias condiciones: un frotis de sangre periférica óptimo,

coloración óptima y el grado de capacitación del profesional que realiza la visualización (9).

6

Por lo tanto con la ayuda del Área de Laboratorio Clínico del Hospital Carlos Andrade Marín

de Quito que cuenta con el equipo y personal altamente calificado, surgió la inquietud de

evaluar los contajes bajos de plaquetas obtenidos mediante el principio de impedancia del

equipo Sysmex XE-2100 con la observación en el frotis de sangre periférica.

Es de suma importancia observar los factores intervinientes que causan

pseudotrombocitopenia en los analizadores automáticos, además de establecer el grado de

concordancia y correlación entre los dos métodos, de tal manera que el Licenciado en

Laboratorio Clínico e Histotecnológico pueda aportar información en este campo tan

controversial de la hematología, con el fin de verificar el resultado, aportar al médico

información que le permita de acuerdo con la clínica y estudios complementarios en cada

caso, llegar a un diagnóstico adecuado.

7

CAPÍTULO II

MARCO TEÓRICO

2.1 PLAQUETAS

Las plaquetas son fragmentos citoplasmáticos que carecen de núcleo producidos por la

ruptura y liberación del citoplasma del megacariocito en la médula ósea, con un volumen

medio plaquetario (VMP) de 8,3 a 11,6 fl y 10 pg de peso, poseen una vida media en la sangre

de 7 a 10 días, circulan en la sangre periférica y participa en la hemostasia (mecanismo de la

coagulación de la sangre) (10).

Las plaquetas observadas con tinción Romanowsky (Wright o Giemsa), aparecen como

estructuras granulosas, pequeñas, con forma discoide, con un tamaño aproximado de 2-3 μm

de diámetro.

Figura 1. Plaquetas en frotis de sangre periférica

Fuente: Campuzano Maya G. Utilidad del extendido de sangre periférica: las plaquetas. Medicina &

Laboratorio [Internet]. 2008; [citado 11 Septiembre 2016]; 14: 511-531. (11). Disponible en:

http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2008/myl0811-12b.pdf


8

2.1.1 ESTRUCTURA DE LAS PLAQUETAS

Las plaquetas están constituidas por cuatro regiones o zonas: la zona periférica, la zona

estructural, la zona de organelos y los sistemas de membranas.

Zona Periférica

Es la zona externa formada por: el glucocálix, una membrana citoplasmática y por proteínas

integrales (2).

El glucocálix: Es la cubierta superficial; son varias glucoproteínas, proteínas y

mucopolisacáridos que se absorben del plasma.

La membrana citoplasmática: Posee una estructura clásica con bicapa fosfolipídica y

proteínas integrales.

Las proteínas integrales: Actúan como receptores para los estímulos implicados en la

función de las plaquetas, son alrededor de 30. Las más importantes son: la Ib

glucoproteína (receptor del factor von Willebrand), el complejo glucoproteína IIb/IIIa

(receptor del fibrinógeno), el ácido araquidónico (precursor de estímulos que causan la

agregación plaquetaria).

Zona Estructural

Constituida por microtúbulos y una red de proteínas (actina, proteína fijadora de la actina,

miosina), dan soporte a la membrana plasmática, mantiene la forma discoide de la plaqueta

en reposo y proporcionan un medio para el cambio de forma cuando la plaqueta se activa.

9

Zona de Organelos

Situada debajo de la capa de microtúbulos, formado por mitocondrias, partículas de

glucógeno y tres tipos de gránulos dispersos dentro del citoplasma: cuerpos densos, gránulos

alfa y gránulos lisosómicos (2).

Los cuerpos densos: Contienen mediadores de la función plaquetaria y de la hemostasia

que no son proteínas: ADP, ATP y otros nucleótidos; además posee fosfato, iones de

calcio y serotonina.

Los gránulos alfa: Son los más abundantes, contiene dos grupos principales de proteínas:

proteínas similares a las proteínas hemostásicas del plasma (factor von Willebrand, el

factor V, el fibrinógeno) y proteínas exclusivas de las plaquetas (el factor 4 de la plaqueta,

la β-tromboglobulina, el inhibidor activador del plasminógeno).

Los gránulos lisosómicos: Contienen varias enzimas hidrolíticas y son similares a los

lisosomas que se encuentran en las células.

Sistema de membranas

Existen dos tipos de sistemas: el sistema canalicular abierto conectado a la superficie (SCA)

y el sistema tubular denso (STD). Los dos sistemas de membrana se fusionan en varias áreas

del citoplasma para formar complejos de membrana, estos regulan la concentración

intracelular de calcio que es importante en la regulación del metabolismo y activación

plaquetaria (2).

2.1.2 FORMACIÓN DE LAS PLAQUETAS

El proceso de formación de nuevas plaquetas o trombocitos, dura alrededor de 7 días, son

producidos en la médula ósea a partir de una célula progenitora multipotencial llamada

10

unidad formadora de colonias de granulocitos, eosinófilos, macrófagos y megacariocitos

(UFC-GEMM), la cual se diferencia constituyendo así la unidad formadora de

megacariocitos (UFC-Meg).

La interleucina-3 (IL-3) y el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos

(FEC-GM) son factores de crecimiento que provocan que las células progenitoras se

diferencien y proliferen en megacariocitos. La trombopoyetina también actúa en las etapas

de maduración de los megacariocitos, es decir en el tamaño y el número de plaquetas

producidas (2).

Megacariopoyesis

Proceso por el cual los megacariocitos derivados de la célula madre hematopoyética

multipotente (UFC-GEMM) producen plaquetas (trombopoyesis). Existen cuatro estadios

evolutivos: megacarioblasto, promegacariocito, megacariocito granular y el megacariocito

liberador de plaquetas (2).

Megacarioblasto: Tienen escaso citoplasma basófilo, sin gránulos visibles, con núcleo

redondo (los nucléolos pueden ser visibles), con un tamaño de 6 a 24 μm de diámetro.

Promegacariocito: Tienen gránulos azurófilos visibles, el núcleo es lobulado y puede

parecer una herradura o muescas, no hay nucléolos, con un tamaño de 14 a 30 μm de

diámetro.

Megacariocito Granular: Posee un tamaño de 16 a 56 μm, con varios gránulos en el

citoplasma, el cual es de color rosado, posee un núcleo multilobulado, sin nucléolos

visibles.

11

Megacariocito Maduro: Poseen un citoplasma muy rosado y granuloso, dentro de zonas

que están separadas por membrana limitante, miden de 20 a 60 μm de diámetro, sin

nucléolos visibles (2).

Figura 2. Megacariopoyesis




Liberación de las plaquetas

Se requiere aproximadamente 5 días para que un megacarioblasto se desarrolle hasta

plaqueta, los megacariocitos maduros esparcen las plaquetas directamente en los senos

venosos situados a menos de 1 μm de la médula ósea, mientras que el núcleo del

megacariocito continúa en la médula ósea hasta su degeneración por el sistema de

macrófagos. Durante la vida, un megacariocito maduro puede producir hasta 10000 plaquetas

(12).

2.1.3 FUNCIÓN DE LAS PLAQUETAS

Las plaquetas están encargadas de mantener la continuidad e integridad de los vasos

sanguíneos cuando estos sufren daños (rupturas), en lesiones de los vasos sanguíneos las

plaquetas forman un agregado llamado tapón de plaquetas hemostásico primario lo que


12

detiene la hemorragia producidas por la lesión y que mediante los fosfolípidos de la

membrana de las plaquetas agregadas proporcionan una superficie de reacción para la

formación de la fibrina lo que forma el tapón hemostásico secundario (2).

Además, las secreciones de las plaquetas como el mitógeno almacenado en los gránulos alfa

ayuda a reparar los tejidos lesionados, estimulando a las células musculares lisas y a los

fibroblastos a multiplicarse para sustituir las células dañadas por la lesión.

2.1.4 VALORES REFERENCIA DE LAS PLAQUETAS

El valor de referencia de plaquetas manejado en el Laboratorio Clínico del Hospital Carlos

Andrade Marín es de 130000 y 400000 por μl. Cuando la cifra de plaquetas está por debajo

del límite inferior (130000 por μl) se denomina trombocitopenia y cuando está por encima

del límite superior (400000 por μl) se denomina trombocitosis (2).

2.2 MÉTODOS PARA EL RECUENTO DE PLAQUETAS

El recuento de plaquetas anteriormente se realizaba de forma manual con el transcurso del

tiempo el uso de la tecnología ha proporcionado analizadores automáticos que realizan el

contaje de plaquetas electrónicamente.

2.2.1 MÉTODOS MANUALES

El contaje manual de plaquetas puede hacerse de dos formas, mediante el uso de la cámara

de Neubauer y en el frotis de sangre periférica.

2.2.1.1 CÁMARA DE NEUBAUER

Es un método directo en el que se utiliza la cámara de Neubauer, donde se mezcla la sangre

en la pipeta de Thoma con un diluyente (oxalato de amonio al 1%), que causa la hemólisis

de los eritrocitos.

13

Se carga la cámara de Neubauer con la mezcla, se cuentan las plaquetas en la cuadrícula

central con microscopio (13).

Figura 3. Cámara de Neubauer.

Fuente: Campuzano Maya G. Del hemograma manual al hemograma de cuarta generación. Medicina &

Laboratorio [Internet]. 2007; [citado 16 Diciembre 2016]; 13: 538-543. (13). Disponible en:


2.2.1.2 FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA

En hematología, la preparación del frotis de sangre periférica es una técnica fundamental, se

realiza en sangre recolectada en tubo con anticoagulante EDTA (etilen diamino tetra acético),

y teñida con Wright o Giemsa, brindando una observación clara de las células sanguíneas

(14).

Para realizar los extendidos sanguíneos existen varias técnicas, pudiendo escogerse aquella

que según sus características y ventajas, resulte más conveniente para su observación.


14

Figura 4. Técnica del frotis de sangre periférica

A: Ángulo correcto al sostener el frotis extensor. B: La sangre se extiende en toda la superficie de contacto

entre los portaobjetos. C: Frotis en cuña completado.

Fuente: Rodak B, Jacqueline H. Atlas de Hematología Clínica. [Internet]. 4ª ed. Médica Panamericana. 2014

[citado 17 Diciembre 2016]. (15). Disponible en:

http://www.herrerobooks.com/pdf/pan/9786079356156.pdf

Para el contaje de plaquetas se visualiza el frotis usando el lente objetivo 100 X en aceite de

inmersión. La zona correcta del frotis para el recuento de plaquetas debe tener alrededor de

200 a 250 eritrocitos por campo. Se cuenta el número de plaquetas en 5 a 10 campos, se saca

el promedio de los campos y se multiplica por 20000, calculando así el número de plaquetas

por muestra. Esta cifra debe estar relativamente aproximada con el contaje plaquetario dado

por el analizador hematológico automatizado (15).


15

2.2.2 MÉTODOS AUTOMÁTICOS

En la actualidad se cuenta con una gran variedad de equipos electrónicos que facilitan el

trabajo, la mayoría de estos instrumentos son totalmente automatizados.

Para el contaje de las plaquetas existen tres principales métodos usados que son: principio de

impedancia, fluorescencia óptica y mediante el uso de marcadores inmunológicos (16).

2.2.2.1 PRINCIPIO DE IMPEDANCIA

El principio de la impedancia o “Principio Coulter”, fue descrito por Wallace Coulter en 1953

constituyendo así el primer método automatizado en el contaje de células.

En hematología cada célula es considerada como una partícula que es diluida en una solución

electrolítica y pasa una tras otra a través de un orificio con un determinado diámetro, por

donde circula una corriente eléctrica con cierta intensidad inducida por dos electrodos

dispuestos a ambos lados del orificio (6).

Con el paso de cada célula a través del orificio se produce un cambio en la resistencia

eléctrica que genera un pulso de voltaje cuya altura o amplitud es proporcional al tamaño o

volumen de la célula. El número de pulsos eléctricos que se generan es proporcional a la

cantidad de células que atraviesan el orificio.

En la actualidad esta tecnología se aplica en los contadores hematológicos en el recuento

celular ya que se puede calificar los distintos tipos de células dependiendo de su volumen

(tamaño), ya que en un inicio el principio de impedancia solo se aplicó para el recuento de

hematíes y leucocitos, posteriormente se aplicó para el recuento de plaquetas; mediante el

enfoque hidrodinámico.

16

En el enfoque hidrodinámico el campo eléctrico es aplicado a través de un canal en donde

los electrodos se encuentran en unidos a cada extremo lo que permite un análisis de células

continuo, obteniendo un recuento más exacto de plaquetas en sangre periférica, diferenciando

hematíes de plaquetas (17).

Figura 5. Principio de impedancia o “Principio de Coulter”

Fuente: SlideShared [Internet]. Lizbethhzr; 2013 [actualizado 1 Agosto 2013; citado 5 Enero 2016]. (18).

Disponible en: http://es.slideshare.net/lizbethhzr/automatizacin-en-hematologa-25188095

2.2.2.2 FLUORESCENCIA ÓPTICA

El recuento de plaquetas por fluorescencia usa una tinción de polimetina que tiñe los ácidos

nucleicos de las células reticuladas, también la membrana de las plaquetas y los gránulos.

Con la fluorescencia óptica se cuentan simultáneamente los reticulocitos, hematíes y

plaquetas fluorescentes.

Cada célula pasa por un rayo de luz láser semiconductor en una celda de flujo, se analiza la

intensidad de la fluorescencia lo que diferencia las plaquetas, de eritrocitos y de reticulocitos.

http://es.slideshare.net/lizbethhzr/automatizacin-en-hematologa-25188095

17

Además la tinción fluorescente de las plaquetas permite descartar las partículas que no son

plaquetas e inclusión los macrotrombocitos (6).

2.2.2.3 MARCADORES INMUNOLÓGICOS

Un avance importante en el recuento de plaquetas ha sido el desarrollo de un método

inmunológico, aplicado en muestras de sangre con EDTA, en el cual mediante el uso de

anticuerpos monoclonales anti plaquetarios específicos de plaquetas (CD41 y el CD61) los

cuales están conjugados con una sustancia fluorescente (isotiocianato de fluoresceína)

permiten diferenciar las plaquetas de otras las partículas y células (18).

Este método es actualmente es propuesto por la Sociedad Internacional de Laboratorios de

Hematología (ISLH) como el “Gold Estándar” en el recuento de plaquetas (19).

2.2.3 SYSMEX XE-2100

Analizador hematológico automático que utiliza citometría de flujo fluorescente y el

principio de impedancia con enfoque hidrodinámico. El XE-2100 ofrece un conteo de

plaquetas por fluorescencia óptica (PLT-O) a la vez que realiza el conteo tradicional por

impedancia (PLT-I) permitiendo así diferenciar las plaquetas, eritrocitos, leucocitos

normales de las poblaciones anormales, de este modo disminuye la cantidad de

intervenciones manuales (20).

El XE-2100 agiliza su flujo de trabajo permitiendo analizar hasta 150 muestras por hora,

permitiendo un tiempo de análisis rápido.

Además brinda nuevos parámetros de análisis como el volumen medio plaquetario (VPM),

el ancho de distribución de las plaquetas (PDW), el plaquetocrito (PCT).

18

El volumen medio plaquetario (VPM): Se mide en fl e indica el tamaño de las plaquetas,

su valor de referencia es de 6,5 fl a 13,5 fl.

El ancho de distribución de las plaquetas (PDW): Similar al ancho de distribución de los

eritrocitos, que determina las diferencias en el tamaño de las plaquetas, su valor de

referencia es de 15,4% a 16,8%.

El plaquetocrito (PCT): Similar al hematocrito, representa el porcentaje del volumen de

plaquetas sobre el volumen total de la sangre (Plaquetocrito = recuento de plaquetas ×

volumen medio plaquetario), su valor de referencia es de 0,085 y 0,287; el plaquetocrito

tiene poca utilidad clínica (21).

Alarmas

El objetivo de todo analizador automático es diferenciar los distintos tipos de células y avisar

al usuario en caso de anomalías. En muestras que no coincidan con los valores establecidos

en el software son marcados con una alarma (20).

En el analizador hematológico Sysmex XE-2100 cuando existe un recuento erróneo de

plaquetas bajas se producen principalmente dos tipos de alarmas:

PLT Abn Dst: Distribución Anormal de Plaquetas, se presenta cuando hay la posibilidad

de encontrar macrotrombocitos y agregados plaquetarios (21).

PLT Clumps?: Cúmulos de Plaquetas, se presenta cuando hay la posibilidad de encontrar

agregados plaquetarios (21).

19

2.3 TROMBOCITOPENIA

La trombocitopenia es la disminución del número total de plaquetas en sangre por debajo de

los valores normales (valor de normal: 130000 a 400000 por μl), es decir menor a 130000

por μl, es la causa más común de hemorragia excesiva o anormal, además puede ser una

causa principal o una manifestación segundaria de varios trastornos (2).

2.3.1 PREVALENCIA DE LA TROMBOCITOPENIA

Con la incorporación de los analizadores automáticos hematológicos en los laboratorios

clínicos, la trombocitopenia es uno de los hallazgos más frecuente en el hemograma, después

de la anemia; se estima que del 0,9% de los pacientes con una enfermedad aguda y entre en

25% y el 46% de los pacientes en unidad de cuidados intensivos presentan trombocitopenia

(4).

2.3.2 CLASIFICACIÓN DE LA TROMBOCITOPENIA

Aumento de la destrucción

Es una de las principales causas de trombocitopenia, cuando las plaquetas se eliminan de la

circulación más rápido de lo que se producen en la médula ósea. Las causas del aumento de

su destrucción se dividen en dos categorías: inmunitarias y no inmunitarias (12).

Disminución en la producción de plaquetas

Es la insuficiencia de la médula ósea en producir cantidades adecuadas de plaquetas, puede

ser a causa de: hipoplasia de megacariocito (por trastornos de los megacariocitos o de sus

precursores.), por trombopoyesis ineficaz (disminución del ingreso de plaquetas en sangre

periférica) y por carácter hereditario (2).

20

Aumento del secuestro esplénico

El bazo almacena la tercera parte de las plaquetas producidas en la médula ósea, cuando hay

un aumento de su tamaño (esplenomegalia) el número de plaquetas almacenadas puede

aumentar alcanzando el 90% de la masa total de las plaquetas, por lo que disminuye el

número de plaquetas circulantes (22).

Trombocitopenia por hemodilución

Existen dos situaciones definidas: la trombocitopenia gestacional y la trombocitopenia que

se puede presentar en pacientes que han sido sometidos a transfusiones masivas con líquidos,

incluida la sangre (3).

Otras causas

Algunos factores que contribuyen con la trombocitopenia son el alcoholismo, enfermedades

linfoproliferativas y causas de derivación cardiopulmonar (2).

2.3.3 MANIFESTACIONES CLÍNICAS DE LA TROMBOCITOPENIA

Las manifestaciones clínicas aparecen cuando el recuento de plaquetas es menor a 50.000

por μl, cuando el recuento de plaquetas está por debajo de 30.000 por μl se producen la

sintomatología provocando: hemorragia, petequias, equimosis; con valores menores a 10.000

por μl puede provocar sangrado de las mucosas gastrointestinales, genitourinarias y de la

nariz (3).

21

2.4 PSEUDOTROMBOCITOPENIA

El aumento de la automatización en hematología ha provocado que el contaje de plaquetas

se vea afectado por artefactos que causan una falsa trombocitopenia denominada


La pseudotrombocitopenia es definida como una falsa disminución en el contaje plaquetario

producto de un artefacto de laboratorio o por un mal contaje de los analizadores automáticos.

La pseudotrombocitopenia es un fenómeno in vitro que se presenta sólo con los analizadores

hematológicos automáticos (23).

2.4.1 PREVALENCIA DE LA PSEUDOTROMBOCITOPENIA

La pseudotrombocitopenia representa aproximadamente el 49% de las trombocitopenias que

se presentan en muestras procesadas por los analizadores hematológicos automáticos (24).

2.4.2 FACTORES INTERVINIENTES

Satelitismo plaquetario

Se define como la adhesión de las plaquetas a la superficie de otras células circulantes,

generalmente a los neutrófilos. La adhesión provoca que las plaquetas no se cuenten, la

observación en del frotis de sangre periférica permite identificar esta anomalía (11).

La pseudotrombocitopenia por satelitismo plaquetario usualmente se producen como un

fenómeno in vitro, la hipótesis que se maneja es que cuando la muestra es fresca las plaquetas

tienen una alta expresión de CD62P (un marcador de activación plaquetaria), por lo que son

más activas y tienden a formar complejos con leucocitos (6).

22

El satelitismo plaquetario puede estar presente en diferentes enfermedades como la vasculitis,

la enfermedad hepática crónica, en síndromes mieloproliferativos, también se ha encontrado

en gestantes sin ninguna enfermedad asociada.

Figura 6. Satelitismo plaquetario.




Macrotrombocitos

Se refiere a las plaquetas de un tamaño más grande de lo normal, llegando en algunos casos

incluso a ser más grandes que un hematíe (mayor a 7 μm), es producido por el aumento de la

megacariocitopóyesis con hiperplasia megacariocítica en la médula ósea (13).

Son comunes en el síndrome de Bernard-Soulier, la anomalía de May-Hegglin y en

enfermedades adquiridas como los síndromes mieloproliferativos (leucemia mieloide

crónica, trombocitemia esencial y policitemia vera).

Los contadores de células pueden ser engañados e interpretar incorrectamente plaquetas

como eritrocitos; el contaje se puede corregir con la observación de las plaquetas en el frotis

de sangre periférica (24).


23

Figura 7. Macrotrombocitos




Agregados plaquetarios

Se define como la conglomeración de plaquetas que generalmente provocan

pseudotrombocitopenia, es más común en pacientes con enfermedades autoinmunes,

hepatopatías como la cirrosis hepática, neoplasias, arteriosclerosis y sepsis. La agregación

plaquetaria también puede deberse a factores pre analíticos, o por la exposición con EDTA.

Factores pre analíticos: El error preanalítico causa con más frecuencia

pseudotrombocitopenia. Distintos estudios señalan que su frecuencia está en un 17%,

31% o incluso porcentajes superiores. Comúnmente causados por la coagulación parcial

de la muestra y fallas en la técnica de extracción (24).

En la extracción de sangre venosa difícil (niños pequeños, ancianos) puede originar

activación plaquetaria y formación de microcoágulos, también cuando no se agita bien el

tubo para mezclar la muestra de sangre con el anticoagulante puede causar la formación

de microcoágulos que dan lugar a una pseudotrombocitopenia (25).


24

Agregación plaquetaria por EDTA: Es la aglutinación causada por los anticuerpos

específicos a plaquetas IgM o IgG o ambos, los cuales reaccionan mejor a temperatura

ambiente y provocan la aglutinación (2).

El fenómeno fue reconocido por Gowland et al; en 1969 y Watkins y Shulman en 1970,

quienes describieron un factor en el suero que provocaba aglutinación de las plaquetas in

vitro, en presencia de EDTA y a temperaturas menores de 37 °C. La formación de estos

agregados es dependiente del tiempo por lo que una progresiva reducción del contaje

plaquetario puede ser observado al procesar las muestras en distintos momentos (24).

Figura 8. Agregados plaquetarios


Laboratorio [Internet]. 2008; [citado 11 Septiembre 2016]; 14: 511-531. (11) Disponible en:



25

CAPÍTULO III

METODOLOGÍA

3.1 DISEÑO DE INVESTIGACIÓN

El presente estudio fue de tipo observacional, retrospectivo, todos los casos se obtuvieron de

la base de datos del Laboratorio Clínico del Hospital Carlos Andrade Marín de Quito en el

periodo de Septiembre a Diciembre del 2016; los datos obtenidos de contajes bajos de

plaquetas del contador hematológico automático Sysmex XE-2100 se correlacionaron con

los obtenidos en el frotis de sangre periférica.

3.2 POBLACIÓN Y MUESTRA

3.2.1 POBLACIÓN

Se obtuvo una población de 726 pacientes con contajes bajos de plaquetas que cumplieron con

los criterios de inclusión y de exclusión del estudio, estos pacientes pertenecen al servicio de

Consulta Externa de Hematología del Hospital de Carlos Andrade Marín de Quito, en el

período Septiembre a Diciembre del 2016.

3.2.2 CÁLCULO DE MUESTRA

La población fue de 726 pacientes que cumplieron con los criterios de inclusión y exclusión en

el periodo de Septiembre a Diciembre del 2016; de los cuales se obtuvo un tamaño de muestra

de 251 pacientes con un nivel de confianza del 95% y un margen de error del 5% (26).

El cálculo del tamaño de muestra es el siguiente:

𝑛 =𝑁 ∙ 𝑍2 ∙ 𝑝 ∙ 𝑞

𝑑 ∙ (𝑁 − 1) + 𝑍2 ∙ 𝑝 ∙ 𝑞

26

𝑛 =726 ∙ (1.96)2 ∙ 0.5 ∙ 0.5

(0.05)2 ∙ (726 − 1) + (1.96)2 ∙ 0.5 ∙ 0.5

𝑛 =726 ∙ 3.84 ∙ 0.25

0.0025 ∙ 725 + 0.96

𝑛 =696.96

2.77

𝑛 = 251

Donde:

n =? (Número de muestra)

d = 0.05 (error sistemático para un nivel de confianza del 95%)

Z = 1.96 (para el 95% de confiabilidad y 0.5% error)

N = 1000 (población)

p = 0.50 (proporción de individuos que poseen en la población la característica de estudio)

q = 0.50 (proporción de individuos que no poseen en la población la característica de estudio)

3.3 CRITERIOS DE INCLUSIÓN

Pacientes del servicio de Consulta Externa de Hematología del Hospital de Carlos

Andrade Marín – Quito, del periodo de Septiembre a Diciembre del 2016.

Pacientes con contajes bajos de plaquetas menores a 130.000 por μl procesados en el

analizador automático Sysmex XE-2100 por el principio de impedancia a los que

posteriormente se realizó el contaje en el frotis de sangre periférica.

27

3.4 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

Pacientes que tengan un contaje de plaquetas normales y elevadas; es decir iguales o

superiores a 130.000 por μl.

3.5 SISTEMA DE VARIABLES

Variable independiente: Contaje plaquetario en sangre <130000 μl.

Variables dependientes: Trombocitopenia y pseudotrombocitopenia.

Variables Intervinientes: Método utilizado (frotis de sangre periférica y el principio de

impedancia).

Figura 9. Sistema de variables

Elaborado por: Cajo Andrango Andrés Isaac

28

3.6 OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES


Variable Definición Conceptual Definición Operacional Tipo de

Variable

Escala de

Medición Indicador

Instrumento de

Medición Metodología

aplicada en el

recuento de

plaquetas

Diferentes

procedimientos que se

realizan para obtener el

contaje de plaquetas en

unidades por μl, en

muestras de sangre con

EDTA

Principio de impedancia

Cuantitativo Continua

Número de

plaquetas obtenidas

por cada método

Sistema DataLab y el

analizador Sysmex

XE-2100

Frotis de sangre periférica

Cuantitativo Continua Sistema DataLab y el

analizador Sysmex

XE-2100

Concordancia

entre los

contajes

Grado en el que dos o

más, métodos, técnicas u

observaciones están de

acuerdo sobre el mismo

fenómeno observado

Trombocitopenia Cualitativo Nominal

Concordancia de

los resultados

obtenidos por

ambos métodos

Sistema DataLab y el

analizador Sysmex

XE-2100 Pseudotrombocitopenia Cualitativo Nominal

Factores

Intervinientes

en el contaje

bajo de

plaquetas

Presencia de artefactos

que producen una

sobreestimación o

subestimación en el

recuento de plaquetas

Evaluación del contaje bajo

de plaquetas en el frotis de

sangre periférica

Cualitativo Nominal Macrotrombocitos

Satelitismo

plaquetario

Agregados

plaquetarios

Sistema DataLab

Alarmas para contajes

bajos de plaquetas del

Sysmex XE-2100

Cualitativo Nominal Alarmas para

contajes bajos de

plaquetas.

Analizador Sysmex

XE-2100

29

3.7 DISEÑO METODOLÓGICO

El desarrollo del estudio se realizó de la siguiente manera:

3.7.1 APROBACIÓN DEL TEMA EN EL HOSPITAL

Con la aprobación del tema en el Hospital de Carlos Andrade Marín de Quito se obtuvo

el permiso por escrito del departamento de investigación. Ver Anexo 2

3.7.2 RECOLECCIÓN DE DATOS

Los datos fueron obtenidos del sistema DataLab y del analizador Sysmex XE-2100,

por lo que no se requirió un consentimiento informado de los pacientes. Se elaboró una

hoja de recolección de datos donde se registró la siguiente información: número de

caso, contaje de plaquetas por el principio de impedancia, contaje de plaquetas del

frotis de sangre periférica, alarma para contaje bajo de plaquetas, evaluación de la

concordancia del contaje. Ver Anexo 3

3.7.3 ANÁLISIS DE DATOS

Los datos fueron analizados en Excel, obteniéndose los resultados con cálculos

estadísticos como: porcentaje, coeficiente de correlación de Pearson, concordancia con

el método de Bland-Altman. De los resultados obtenidos además se realizaron tablas y

gráficos.

Coeficiente de correlación de Pearson

Es un índice usado para medir el grado de relación de dos variables siempre y cuando

ambas sean cuantitativas, mediante este coeficiente se obtienen valores entre -1 y +1

(27).

30

Cuando el valor es igual a +1 se refiere a una correlación positiva perfecta; si el

resultado es 0 significa que no existen relación; si el resultado es -1 quiere decir que

hay una correlación negativa; mientras más se acerque el valor del coeficiente de

Pearson a +1 existe una mayor correlación (28).

Método de Bland Altman

Es un método grafico que permite saber el grado en que dos o más observadores,

métodos, técnicas u observaciones es decir ver si se obtienen resultados equivalentes,

se representa en forma gráfica las diferencias entre dos mediciones del mismo sujeto o

fenómeno en el eje de las ordenadas (y) frente a la media obtenida de ambas mediciones

en el eje de las abscisas (x). Además se obtiene entre los dos métodos una media o

promedio, desviación estándar, cuando existe concordancia perfecta la media o

promedio de las diferencia entre los dos métodos es “0” y el 95% de las diferencias se

encuentran dentro de 1,96 desviaciones estándar del promedio (29).

3.7.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS

Todos los datos obtenidos del Hospital de Carlos Andrade Marín de Quito necesarios

en este estudio se manejaron con total confidencialidad y discreción. Ver Anexo 4

31

CAPÍTULO IV

RESULTADOS

El presente estudio se lo realizó a 251 pacientes del servicio de Consulta Externa de

Hematología del Hospital Carlos Andrade Marín de Quito en el cual se obtuvieron los

siguientes resultados:

Gráfico 1. Número de casos con trombocitopenia y pseudotrombocitopenia.

Fuente: Sistema DataLab y analizador Sysmex XE-2100 del Hospital Carlos Andrade Marín de Quito.

Del periodo Septiembre –Diciembre del 2016.


Interpretación: Como se puede observar de los 251 casos con contajes bajos de

plaquetas, 211 casos que corresponden al 84,06% presentaron verdadera

trombocitopenia mientras que 40 casos que corresponden al 15,94% presentaron


84,06%

15,94%

Trombocitopenia Pseudotrombocitopenia

32

Gráfico 2. Coeficiente de correlación de Pearson en casos de trombocitopenia.

Fuente: Sistema DataLab y analizador Sysmex XE-2100 del Hospital Carlos Andrade Marín de

Quito. Del periodo Septiembre –Diciembre del 2016.


Interpretación: De los 211 casos con verdadera trombocitopenia se obtuvo un

coeficiente de correlación de Pearson de 0,86 que indica una alta correlación puesto

que se acerca al valor de 1; cada punto representa a una medición individual obtenida

de los dos métodos y la línea de color anaranjado representa la tendencia.

0

20000

40000

60000

80000

100000

120000

140000

0 20000 40000 60000 80000 100000 120000 140000

Pri

nci

pio

de

imp

eda

nci

a


Trombocitopenia

p=0,86

33

Gráfico 3. Concordancia de Bland Altman en casos de trombocitopenia.




Interpretación: De los 211 casos con verdadera trombocitopenia se obtuvo la

concordancia de Bland Altman en donde cada punto representa a una medición

individual obtenida de los dos métodos, la línea de color negro que representa la media

y las líneas anaranjadas los límites de confianza al 95% (uno alto y uno bajo).

34

Gráfico 4. Coeficiente de correlación de Pearson en casos de





Interpretación: De los 40 casos con pseudotrombocitopenia se obtuvo un coeficiente

de correlación de Pearson de 0,08 que indica una baja correlación puesto que se acerca

al valor de 0; cada punto representa a una medición individual obtenida de los dos

métodos y la línea de color anaranjado representa la tendencia.

0

20000

40000

60000

80000

100000

120000

140000

0 50000 100000 150000 200000 250000 300000

Pri

nci

pio

de

imp

eda

nci

a


Pseudotrombocitopenia

p=0,08

35

Gráfico 5. Concordancia de Bland Altman en casos de pseudotrombocitopenia.




Interpretación: De los 40 casos con pseudotrombocitopenia se obtuvo la concordancia

de Bland Altman en donde cada punto representa a una medición individual obtenida

de los dos métodos, la línea de color negro que representa la media y las líneas

anaranjadas los límites de confianza al 95% (uno alto y uno bajo).

36

Gráfico 6. Número de casos con pseudotrombocitopenia según el factor

interviniente.

Fuente: Sistema DataLab y Analizador Sysmex XE-2100 del Hospital Carlos Andrade Marín de Quito.



Interpretación: Para analizar el número de casos con pseudotrombocitopenia según el

factor interviniente se sumó un caso el cual tenían más de un factor interviniente

quedando un total de 41, de los cuales 18 casos que corresponden al 43,90%

presentaron macrotrombocitos y 23 casos que corresponden al 56,10% presentaron

agregados plaquetarios. Cabe aclarar que en ningún caso se observó la presencia de

satelitismo plaquetario.

43,90%

56,10%

0,00%0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

80,00%

90,00%

100,00%

Macrotrombocitos Agregados plaquetarios Satelitismo plaquetario

37

Gráfico 7. Número de casos de pseudotrombocitopenia con y sin alarma para

contajes de plaquetas bajas.

Fuente: Sistema DataLab y Analizador Sysmex XE-2100 del Hospital Carlos Andrade Marín de Quito.



Interpretación: Se puede observar que de los 40 casos con pseudotrombocitopenia,

12 casos que corresponden al 30% presentaron alarma, mientras que 28 casos que

corresponden al 70% no presentan ninguna alarma.

70%

30%

Sin alarma Con alarma

38

DISCUSIÓN

Para el contaje de plaquetas existen varios métodos, entre los más utilizados tenemos

el frotis de sangre periférica y el principio de impedancia. Es habitual encontrar casos

de pseudotrombocitopenia en los analizadores automáticos con el principio de

impedancia, que en su gran mayoría son provocados por factores intervinientes que

afectan los contajes de plaquetas bajas.

El presente estudio determinó, la frecuencia de verdadera trombocitopenia y

pseudotrombocitopenia, el grado de correlación y concordancia, además de los factores

intervinientes que provocaron pseudotrombocitopenia; entre el método de impedancia

y el frotis de sangre periférica.

A los 251 pacientes del servicio de Consulta Externa de Hematología del Hospital de

Carlos Andrade Marín de Quito se los clasificó en dos grupos: casos de verdadera

trombocitopenia y pseudotrombocitopenia. Refiriéndose a verdadera trombocitopenia

los contajes de plaquetas inferiores o iguales a 130.000 por μl obtenidos por las dos

técnicas y pseudotrombocitopenia en caso de contajes de frotis de sangre periférica

superiores a 130.000 por μl.

Los resultados obtenidos de 251 pacientes, indican una frecuencia de

pseudotrombocitopenia de 15.94%, que es menor a la obtenida por García Suarez J,

Merino J, Rodríguez M, Velazco A, Moreno MC (5) el cual obtuvo una frecuencia del

49%.

En el estudio realizado a 52 pacientes atendidos en el Hospital Universitario “Antonio

Patricio de Alcalá” (1) se obtuvo un coeficiente de correlación de Pearson de 0,88 en

pacientes con trombocitopenia y menor a 0,5 en los casos de pseudotrombocitopenia,

estos resultados son similares a los obtenidos en esta investigación puesto que en los

casos de verdadera trombocitopenia se obtuvo un coeficiente de correlación de Pearson

39

de 0,86 y 0,08 en los casos de pseudotrombocitopenia. En el estudio retrospectivo

realizado por Roberts Congona (6) se demostró que la concordancia disminuye en la

pseudotrombocitopenia, en este estudio esto se pudo comprobar mediante la

concordancia de Bland Altman que demostró que la diferencia promedio, la desviación

estándar fueron menores en los casos de pseudotrombocitopenia. Por lo tanto se pudo

demostrar que existe menor correlación y concordancia en los casos de


Según los factores intervinientes analizados en este estudio de los 40 casos con

pseudotrombocitopenia el 56,10% fueron a causa de los agregados plaquetarios y el

43,90% a causa de macrotrombocitos, estos resultados concuerdan con el estudio

realizado por Zandecki M. y Genivieve F (7) el cual afirma que la presencia de

macrotrombocitos, satelitismo plaquetario, agregados plaquetarios, entre otras causas

son interferentes que afectan el contaje bajo de plaquetas provocando

pseudotrombocitopenia. Además quedo demostrado que la revisión en el frotis de

sangre periférica ayuda a corregir los contajes bajos de plaquetas puesto que de los 40

casos con pseudotrombocitopenia el 70% no presentó ninguna alarma de contajes

erróneos de plaquetas bajas.

40

CONCLUSIONES

En relación a los resultados que se obtuvieron en el presente trabajo de investigación,

se puede concluir que:

Existen casos de pseudotrombocitopenia obtenidos por el principio de impedancia

en analizadores automáticos, por lo que la revisión del frotis de sangre ayuda a

corregir los contajes.

Existe una menor correlación y concordancia en contajes bajos de plaquetas

obtenidos por el principio de impedancia y el frotis de sangre periférica en los casos

de pseudotrombocitopenia.

Mediante la observación en el frotis de sangre periférica se pueden identificar los

factores intervinientes que provocan pseudotrombocitopenia.

41

RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar estudios a profundidad sobre otras técnicas empleadas en el

contaje de plaquetas con el objetivo de determinar casos con


Se recomienda aplicar este estudio en enfermedades específicas o circunstancias

particulares para obtener más información acerca de los factores intervinientes que

afectan el contaje bajo de plaquetas.

Se recomienda difundir al personal del laboratorio la existencia de factores

intervienes que provocan pseudotrombocitopenia con el afán de elaborar un

protocolo que ayude a obtener un reporte del resultado confiable.

42

BIBLIOGRAFÍA

1. Zabala N, Hann E. Comparación del contaje plaquetario empleando diferentes

metodologías, en pacientes con púrpura trombocitopénica y síndromes

mielodisplásicos.SciELO [Internet]. 2013 [citado 12 Julio 2016]; 25:259-264.

Disponible en:

http://www.scielo.org.ve/pdf/saber/v25n3/art04.pdf

2. Mckenzie Shirlyn B. Hematología Clínica. 2da ed. Baltimore: El Manual

Moderno; 2000.

3. Campuzano Maya G. Trombocitopenia: más importante que encontrarla es saber

porqué se presenta. Medicina & Laboratorio [Internet]. 2007 [citado 12 Julio

2016]; 13: 111-152. Disponible en:


4. Mark A, Deborah J, Maureen O, Lauren E, Gordon H, Donald M et al.

Thrombocytopenia in medical-surgical critically ill patients: prevalence,

incidence, and risk factors. Journal of Critical Care [Internet]. 2005 [citado 10

Julio 2016]; 20: 348-353. Disponible en:

http://www.jccjournal.org/article/S0883-9441(05)00089-4/pdf

5. García J, Merino J, Rodríguez M, Velazco A, Moreno M.

Pseudotrombocitopenia: incidencia, causas y métodos de detección. SciELO

[Internet]. 1991 [citado 11 Julio 2016]; 36: 197-200. Disponible en:

http://bddoc.csic.es:8080/detalles.html?tabla=docu&bd=IME&id=150716

6. Congona Rivera R. Influencia de interferentes en el recuento plaquetario en

pacientes hemato-oncológicos mediante el principio de impedancia y recuento

óptico/fluorescente en el analizador SYSMEX XE-2100 FULL [Internet]. Lima:

Mirage; 2011 [citado 11 Julio 2016]. Disponible en:

http://cybertesis.unmsm.edu.pe/xmlui/bitstream/handle/cybertesis/2890/Congon

a_rr.pdf?sequence=1

43

7. Zandecki M, Genevieve F, Gerard A. Spurious counts and spurious results on

haematology analysers: a review. Part I: platelets. ISLH [Internet]. 2007 [citado

4 Agosto 2016]; 29: 4-20. Disponible en:

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-2257.2006.00870.x/full

8. Meaca P, Freiberg M, Ferrer D, Eckhardt A, Capra R. Comparación de parámetros

Hematológicos por dos autoanalizadores diferentes [Internet]. Servicio de

Bioquímica Clínica. 2011. Córdoba; 2010 [citado 4 Agosto 2016]. Disponible en:

http://www.cobico.com.ar/wp-content/archivos/COMPARACI%C3%93N-DE-

PAR%C3%81METROS-HEMATOL%C3%93GICOS-POR-DOS-

AUTOANALIZADORES-DIFERENTES.pdf

9. Campuzano Maya G. Cómo obtener un extendido de sangre periférica de óptima

calidad. Medicina & Laboratorio [Internet]. 2008 [citado 15 Agosto 2016]; 14:

125-152. Disponible en:

http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2008/myl083-4c.pdf

10. Liyan P, Mitchell J, Mortimer P. Megakaryocyte biology and related disorders.

PMC [Internet]. 2005 [citado 15 Agosto 2016]; 12: 3332–3338. Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1297258/

11. Campuzano Maya G. Utilidad del extendido de sangre periférica: las plaquetas.

Medicina & Laboratorio [Internet]. 2008 [citado 11 Septiembre 2016]; 14: 511-

531. Disponible en:


12. Schulze H, Shivdasani R. Mechanisms of thrombopoiesis. jth [Internet]. 2005

[citado 11 Septiembre 2016]; 3: 1717–1724. Disponible en:


13. Campuzano Maya G. Del hemograma manual al hemograma de cuarta

generación. Medicina & Laboratorio [Internet]. 2007 [citado 16 Septiembre

2016]; 13: 538-543. Disponible en:




44

14. Loyo Avila A. La morfologia celular como herramienta basica en el diagnostico

hematologico [Internet]. 1ra ed. Xalapa: studylib; 1999 [citado 16 Septiembre

2016]. Disponible en:

http://studylib.es/doc/5735391/%E2%80%9Cla-morfologia-celular-como-

herramienta-basica-en

15. Rodak B, Jacqueline H. Atlas de Hematología Clínica. [Internet]. 4ª ed. Médica

Panamericana. 2014 [citado 16 Septiembre 2016]. Disponible en:


16. Fink N. Automatización en hematología. Hematología [Internet]. 2005 [citado 21

Septiembre 2016]; 9: 4-16. Disponible en:

http://www.sah.org.ar/revista/numeros/vol9.n1.4.16.pdf

17. Hernandez Reyes L. Avances y aplicación clínica de la citometría hemática

automatizada. SciELO [Internet].2013 [citado 21 Septiembre 2016]; 29: 24-39.

Disponible en:

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-

02892013000100004

18. SlideShared [Internet]. Lizbethhzr; 2013 [actualizado 1 Agosto 2013; citado 5

Enero 2016]. Disponible en: http://es.slideshare.net/lizbethhzr/automatizacin-en-

hematologa-25188095

19. Harrison P, Horton A., Grant D, Machin S. Immunoplatelet counting: a proposed

new reference procedure. bjh [Internet]. 2000 [citado 21 Septiembre 2016]; 108:

228–235. Disponible en:


20. Harrison P, Kenneth A, Chapman S, Charie L, Davis B, Fujimoto K et al. An

Interlaboratory Study of a Candidate Reference Method for Platelet Counting. Am

J Clin Pathol [Internet]. 2001 [citado 21 Septiembre 2016]; 115: 448–459.

Disponible en:

http://www.islh.org/web/downloads/ICSH_Standards/Platelet%20count%20refe

rence%20method%20AJCP%202001.pdf




45

21. Sysmex. XE-2100™ Sistema automatizado de hematología. [Internet]. América

Latina y el Caribe; 2011 [citado 21 Septiembre 2016]. Disponible en:

https://www.sysmex.com/la/es/Products/Documents/XE-2100-

Espa%C3%B1ol.pdf

22. Sysmex. Manual Sysmex XE-2100 Instrucciones de Uso. América Latina y el

Caribe; 2011.

23. Campuzano Maya G. Evaluación del paciente con trombocitopenia. Medicina &

Laboratorio [Internet]. 2007 [citado 21 Septiembre 2016];13: 411-435.

Disponible en:


24. Payne B, Pierre R. Pseudothrombocytopenia: a laboratory artifact with

potentially serius consequences. Mayo Clinic [Internet]. 1984 [citado 3 Octubre

2016]; 59: 123- 125. Disponible en:

http://www.mayoclinicproceedings.org/article/S0025-6196(12)60247-X/fulltext

25. Morales M, Moreno A, Mejía M, Bustamante Y. Pseudotrombocitopenia

edtadependiente: Rol del laboratorio clínico en la detección y el correcto contaje

plaquetario. SciELO [Internet]. 2001 [citado 3 Octubre 2016]; 24: 55-61.

Disponible en:

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-

04692001000100008

26. Torrens M. Interpretacion Clinica del Hemograma. CLC [Internet]. 2015 [citado

3 Octubre 2016]; 26: 713-725. Disponible en:

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0716864015001480

27. Pita Fernández S. Determinación del tamaño muestral. Cad Aten Primaria

[Internet]. 2001 [citado 15 Noviembre 2016]; 3: 138-140. Disponible en:

http://www.fisterra.com/mbe/investiga/9muestras/tamano_muestral2.pdf

28. Pita S, Peterga D. Relación entre variables cuantitativas. Cad Aten Primaria

[Internet]. 2001 [citado 15 Noviembre 2016]; 4: 141-144. Disponible en:

46

http://www.fisterra.com/mbe/investiga/var_cuantitativas/var_cuantitativas2.pdf

29. Cortés E, Rubio J, Gaitán H. Métodos estadísticos de evaluación de la

concordancia y la reproducibilidad de pruebas diagnósticas. Revista Colombiana

de Obstetricia y Ginecología [Internet]. 2010 [citado 15 Febrero 2017]; 61: 247-

255. Disponible en:

http://www.scielo.unal.edu.co/pdf/rcog/v61n3/v61n3a09.pdf

30. Bland J, Altman D. Statistical methods for assessing agreement between two

methods of clinical measurement. Lancet [Internet]. 1986 [citado 15 Febrero

2017]; 327: 307-310. Disponible en:

https://www-users.york.ac.uk/~mb55/meas/ba.pdf

31. Bain B. Diagnosis from the Blood Smear. N Engl J Med [Internet]. 2005 [citado

5 Febrero 2017]; 353: 498-507. Disponible en:

http://www.nejm.org/doi/pdf/10.1056/NEJMra043442

32. Cines D, Blanchette V. Immune Thrombocytopenic Purpura. N Engl J Med

[Internet]. 2002 [citado 5 Febrero 2017]; 346: 995-1008. Disponible en:

http://www.osuem.com/downloads/resources/NEJM+2002+ITP.pdf

33. Shehata N, Burrows, Kelton J. Gestational thrombocytopenia. Clinical Obstetrics

& Gynecolog [Internet]. 1999 [citado 10 Febrero 2017]; 42: 327-334. Disponible

en:

http://journals.lww.com/clinicalobgyn/Citation/1999/06000/Gestational_Thromb

ocytopenia.17.aspx

34. Prieto L, Lamarca R, Casado A. La evaluación de la fiabilidad en las

observaciones clínicas: el coeficiente de correlación intraclase. elsevier [Internet].

1998 [citado 18 Febrero 2017]; 110: 142-146. Disponible en:

http://www.elsevier.es/es-revista-medicina-clinica-2-articulo-la-evaluacion-

fiabilidad-las-observaciones-2202

47

35. Sysmex. XT-2000i ™ y XT-1800i ™ Analizadores automatizados de

hematología. [Internet]. América Latina y el Caribe; 2011 [citado 21 Septiembre

2016]. Disponible en:

https://www.sysmex.com/la/es/Products/Documents/XT-1800i-XT-2000i-

Espa%C3%B1ol.pdf

36. Dadu T, Sehgal K, Shaikh A, Khodaiji S. Comparison of platelet counts by

sysmex XE 2100 and LH-750 with the international flow reference method in

thrombocytopenic patients. Indian J Pathol Microbiol [Internet]. 2013 [citado 18

Febrero 2017]; 56: 114-119. Disponible en:

http://www.ijpmonline.org/article.asp?issn=0377-

4929;year=2013;volume=56;issue=2;spage=114;epage=119;aulast=Dadu

48

ANEXOS

Anexo 1. Recuento de plaquetas por impedancia del equipo Sysmex XE-2100

El recuento plaquetario mediante esta metodología aplicada por el Sysmex 2100 -XE

esta descrito en la “Guía preparatoria para entrenamiento de los analizadores

hematológicos automatizados Sysmex® serie XE”:

La sangre es aspirada de la pipeta de aspiración manual a la válvula de dosificación

de muestra.

4.0 μL de sangre, medidos por la válvula de dosificación de muestra, son diluidos

con 1.9960 mL de CellpackR a una relación 1:500, y luego enviados a la cámara

de muestra de hematíes como la muestra diluida.

El pistón inyector envía lentamente 11.7 μL de muestra diluida al detector de

plaquetas.

El detector cuenta las plaquetas por medio del Principio de impedancia con enfoque

hidrodinámico.

49

Anexo 2. Certificado de aprobación del tema en el Hospital “Carlos Andrade Marín”

de Quito.

50

Anexo 3. Hoja de recolección de datos



CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO

E HISTOTECNOLÓGICO

HOJA DE RECOLECCIÓN DE DATOS

N°

Caso

Contaje de

plaquetas por

impedancia

Contaje de

plaquetas del frotis

de sangre periférica

Género Alarma para

contajes bajos

de plaquetas

Factores

intervinientes

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30


51

Anexo 4. Carta de confidencialidad



CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO

E HISTOTECNOLÓGICO

Quito DM. 5 de Enero del 2016

CERTIFICADO DE CONFIDENCIALIDAD

Yo, Cajo Andrango Andrés Isaac, autor del Proyecto de Investigación cuyo tema es



FROTIS EN SANGRE PERIFÉRICA EN EL SERVICIO DE CONSULTA

EXTERNA DE HEMATOLOGÍA DEL HOSPITAL CARLOS ANDRADE

MARÍN-QUITO, DURANTE EL PERIODO DE SEPTIEMBRE - DICIEMBRE

DEL 2016” me comprometo a guardar la debida confidencialidad de los datos

autorizados por el Hospital de Carlos Andrade Marín de Quito y no asociar los datos

con los nombres de los pacientes y a utilizar exclusivamente en esta investigación.

Atentamente

…………………………………………..

Cajo Andrango Andrés Isaac

C.I. 172540424-6

52

Anexo 5. Cronograma de actividades


Actividad/Mes Abril Mayo Junio Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero Marzo Abril

Formulación del tema X

Búsqueda de información X X

Presentación del tema X

Aprobación del tema de investigación X

Asignación de tutor académico X

Planteamiento de objetivos X X

Desarrollo del problema de

investigación X X X

Desarrollo del marco teórico y

metodológico X X X

Presentación del protocolo X

Recolección de datos pacientes X X X X

Aplicación de técnicas X X X

Formulación de estadísticas X X

Finalización del trabajo investigativo X

Revisión del trabajo investigativo X

Impresión del proyecto de investigación X

Presentación del trabajo de investigación X

53

Anexo 6. Imágenes

Equipo Sysmex XE-2100 del Hospital Carlos Andrade Marín.


Área de procesamientos manuales de Hematología del Hospital Carlos Andrade Marín.


54

Área de microscopia de Hematología del Hospital Carlos Andrade Marín.
