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1

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE ODONTOLOGIA

CARRERA DE ODONTOLOGÌA

INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO DE STREPTOCOCCUS SANGUINIS

MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL FENÓLICO VS INFUSIONES

NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE VERA)

Proyecto de investigación presentado como requisito previo a la obtención del título de

odontólogo

Autor: Chochos Muyòn Joe Avelino

Tutor: Cevallos Gonzales Fabricio Marcelo

Quito 2016

2

AUTORIZACIÓN DE LA PROPIEDAD INTELECTUAL

Yo Joe Chochos Muyón en calidad de autor del trabajo de investigación: “Inhibición del

crecimiento de Streptococcus sanguinis mediante colutorio comercial fenólico vs

infusiones naturales (menta, eucalipto, aloe vera)” autorizo a la Universidad Central del

Ecuador a hacer uso del contenido total o parcial que me pertenecen, con fines

estrictamente académicos o de investigación.

Los derechos que como autor me corresponde, con excepción de la presente autorización,

seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5,6 8, 19 y

demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento.

También autorizo a la Universidad Central del Ecuador realizar la digitalización y

publicación de este trabajo de investigación en el repositorio virtual, de conformidad a lo

dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.

JOE AVELINO CHOCHOS MUYÓN

17201346736

3

APROBACIÓN DE TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN

Yo Fabricio Marcelo Cevallos Gonzáles en mi calidad de tutor del trabajo de titulación,

modalidad Proyecto de Investigación, elaborado por JOE AVELINO CHOCHOS

MUYÓN; cuyo título es: INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO DE

STREPTOCOCCUS SANGUINIS MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL

FENÓLICO VS INFUSIONES NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE

VERA), previo a la obtención de Grado de Odontólogo, considero que el mismo reúne los

requisitos y méritos necesarios en el campo metodológico y epistemológico, para ser

sometido a la evaluación por prte del tribunal examinador que se designe, por lo que lo

APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con el proceso de

titulación determinado por la Universidad Central del Ecuador.

En la ciudad de Quito, a los 7 días del mes de diciembre de2016

Dr. Fabricio Marcelo Cevallos Gonzáles

DOCENTE-TUTOR

1313427492

4

APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN TRIBUNAL

El tribunal constituido por Dr. Edison López, Dra. María Isabel Zambrano, Dra. Nilda

Navarrete.

Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención de

Odontólogo presentado por el señor Joe Avelino Chochos Muyón.

Con el título

Emite el siguiente veredicto: Aprobado

Fecha: 16 de diciembre de 2016

Para constancia de lo actuado firman:

Calificación Firma

Presidente: Dr. Edison López 20

Vocal 1 Dra. María Isabel Zambrano 19

Vocal 2: Dra. Nilda Navarrete. 19

5

DEDICATORIA

A Dios por sobre todas las cosas, por brindarme fe, salud, sabiduría y guiarme en todo

momento.

A mis padres José y Beatriz por el apoyo incondicional, sus consejos y experiencias

transmitidas

A mis hermanos y sobrinos Rosa, Tania, Yolanda, Eduardo, Henry, Daniel y Jeremy por

brindarme apoyo, alegría y fortaleza durante todo el periodo educativo.

A Amanda por servirme de soporte para lograr este objetivo.

Joe Chochos Muyón.

6

AGRADECIMIENTO

A mi familia por su apoyo, confianza, cariño y por enseñarme que las metas se alcanzan

con paciencia, esfuerzo, constancia.

A mi tutor Dr. Fabricio Cevallos por brindarme sus conocimientos para cumplir con uno de

mis objetivos más anhelados.

A la Facultad de Odontología por abrirme sus puertas del saber para culminar la profesión

más maravillosa de todas.

Joe Chochos Muyón

7

INDICE DE CONTENIDOS

DEDICATORIA .................................................................................................................... 5

AGRADECIMIENTO ........................................................................................................... 6

INDICE DE CONTENIDOS ................................................................................................. 7

INDICE DE TABLAS ......................................................................................................... 10

INDICE DE GRAFICOS .................................................................................................... 11

INDICE DE FIGURAS ....................................................................................................... 12

ÍNDICE DE ANEXOS ........................................................................................................ 13

RESUMEN .......................................................................................................................... 14

ABSTRACT ........................................................................................................................ 15

INTRODUCCION ............................................................................................................... 16

CAPÍTULO 1 ...................................................................................................................... 17

1. DESCRIPCIÓN DE LA INVESTIGACIÓN ....................................................... 17

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ........................................................ 17

1.2 JUSTIFICACIÓN .............................................................................................. 18

1.3 OBJETIVOS ....................................................................................................... 19

1.3.1 Objetivo General ........................................................................................ 19

1.3.2 Objetivos Específicos .................................................................................. 19

1.4 HIPÓTESIS ........................................................................................................ 20

1.4.1 HIPÓTESIS NULA .................................................................................... 20

CAPÍTULO II ...................................................................................................................... 21

2. MARCO TEÓRICO ............................................................................................... 21

2.1 Placa bacteriana ................................................................................................. 21

2.1.1 Concepto ....................................................................................................... 21

2.1.2 Características ............................................................................................... 22

2.1.3 Tipos ............................................................................................................. 22

2.1.4 Metabolismo ................................................................................................. 23

2.1.5 Métodos de diagnóstico ................................................................................ 23

2.1.6 Métodos de eliminación ............................................................................... 24

2.1.7 Composición ................................................................................................. 24

2.1.8 Formación ..................................................................................................... 25

2.2 Streptococcus sanguinis ..................................................................................... 29

2.2.1 Características ............................................................................................... 29

2.2.2 Importancia ................................................................................................... 29

2.3 Enjuagues bucales .............................................................................................. 30

8

2.3.1 Generalidades ........................................................................................... 30

2.3.2 Propiedades ............................................................................................... 31

2.3.3 Definición ................................................................................................. 31

2.3.4 Tipos ......................................................................................................... 32

2.4 Enjuagues comerciales .................................................................................. 32

2.4.1 Generalidades ........................................................................................... 32

2.4.2 Composición ............................................................................................. 33

2.5 Colutorios naturales ...................................................................................... 36

2.5.1 Generalidades ........................................................................................... 36

2.5.2 Menta ........................................................................................................ 37

2.5.3 Eucalipto ................................................................................................... 38

2.5.4 Aloe vera................................................................................................... 39

2.6 Infusiones naturales ....................................................................................... 41

2.7 Medios de cultivos bacteriológicos ............................................................... 42

2.7.1 Generalidades ........................................................................................... 42

2.7.2 Requisitos Generales ................................................................................ 42

2.7.3 Tipos ......................................................................................................... 43

2.7.4 Métodos de siembra .................................................................................. 43

CAPÍTULO III…………………………………………………………………………45

3. METODOLOGÍA……………………………………………………………..45

3.1 Tipo de investigación ..................................................................................... 45

3.2 Población y muestra ....................................................................................... 45

3.2.1 Selección y tamaño de la muestra ......................................................... 45

3.2.2 Criterios de Inclusión ............................................................................. 46

3.2.3 Criterios de Exclusión ............................................................................ 46

3.2.4 Variables .................................................................................................. 47

3.3 Materiales y métodos ..................................................................................... 48

3.3.1 Recursos materiales ................................................................................ 48

3.3.2 Recursos humanos .................................................................................. 51

3.4 Estandarización .............................................................................................. 51

3.4.1 Estandarización para preparación de colutorios naturales ................ 51

3.4.2 Estandarización para elaboración de cultivo microbiológico ............ 52

3.5 Procedimiento ................................................................................................. 52

3.5.1 Adquisición cepas ..................................................................................... 52

3.5.2 Fase en laboratorio.................................................................................... 53

9

3.6 ASPECTOS ÉTICOS ........................................................................................ 60

CAPÍTULO IV ................................................................................................................... 61

4. ANÁLISIS DE DATOS .......................................................................................... 61

4.1 ANÁLISIS ESTADÍSTICO .............................................................................. 62

4.2.1 Pruebas no paramétricas: Kruskal-Wallis ............................................... 65

4.3 DISCUSIÓN ....................................................................................................... 70

CAPÍTULO V ..................................................................................................................... 73

5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................................... 73

5.1 CONCLUSIONES ............................................................................................. 73

5.2 RECOMENDACIONES ................................................................................... 74

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................................ 75

ANEXOS ............................................................................................................................. 79

10

INDICE DE TABLAS

Tabla 1: Resultados medición halos .............................................................................. 61

Tabla 2: Resultado medición halos sustancias control .................................................. 62

Tabla 3: Media o promedio entre halos de inhibición ................................................... 62

Tabla 4: Mediana y moda .............................................................................................. 63

Tabla 5: Pruebas de normalidad .................................................................................... 64

Tabla 6: Prueba de Kruskal- Wallis .............................................................................. 66

Tabla 7: Prueba dos a dos .............................................................................................. 68

11

INDICE DE GRAFICOS

Gráfico 1: Esquema formación biofilm ......................................................................... 25

Gráfico 2: Esquema mecanismos de adhesión película adquirida................................. 26

Gráfico 3: Esquema colonización primaria ................................................................... 27

Gráfico 4: Esquema modo de siembra........................................................................... 44

Gráfico 5: Media de halos de inhibición ....................................................................... 63

Gráfico 6: Curvas de normalidad .................................................................................. 65

Gráfico 7: Prueba de Kruskal-Wallis ............................................................................ 67

Gráfico 8: Comparaciones por parejas de sustancias .................................................... 68

12

INDICE DE FIGURAS

Figura 1: Sustancias a investigar ................................................................................. 48

Figura 2: Cepas puras S. sanguinis y discos en blanco ............................................... 48

Figura 3: Agar Muller Hinton ..................................................................................... 49

Figura 4: Incubadora ................................................................................................... 49

Figura 5: Esterilizadora ............................................................................................... 50

Figura 6: Micropipeta .................................................................................................. 50

Figura 7: Implementos de Bioseguridad ..................................................................... 51

Figura 8: Cepas Streptococcus sanguinis .................................................................... 52

Figura 9: Hisopado agar sangre ................................................................................... 53

Figura 10: Envasado y rotulado infusiones naturales.................................................... 54

Figura 11: Medición de turbidez Mc Farland................................................................ 55

Figura 12: Inoculación en agar Müller Hinton .............................................................. 55

Figura 13: Colocación soluciones en discos blanco ...................................................... 56

Figura 14: Control positivo (clorhexidina).................................................................... 57

Figura 15: Control negativo (suero fisiológico) ............................................................ 57

Figura 16: Rotulación de discos 1 menta, 2 eucalipto, 3 aloe vera, 4 colutorio fenólico, 5

control positivo, 6 control negativo ................................................................................ 58

Figura 17: Medición halos de inhibición ...................................................................... 59

Figura 18: Colocación de desechos en contenedor ....................................................... 60

13

ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1: Aceptación de tutoría...................................................................................... 79

Anexo 2: Cambio de tema .............................................................................................. 80

Anexo 3: Formato para recolección de datos ................................................................. 81

Anexo 4: Manejo de desechos ....................................................................................... 82

Anexo 5: Solicitud uso de laboratorio ............................................................................ 83

Anexo 6: Certificado autentificación streptococcus sanguinis ...................................... 84

Anexo 7. Certificado estadístico .................................................................................... 85

Anexo 8: Certificado comité de ética ............................................................................. 86

Anexo 9: Certificado antiplagio ..................................................................................... 87

14

TEMA: “INHIBICION DEL CRECIMIENTO DE STREPTOCOCCUS SANGUINIS

MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL FENOLICO VS INFUSIONES

NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE VERA).”

Autor: Joe Avelino Chochos Muyón

Tutor: Fabricio Marcelo Cevallos Gonzales

RESUMEN

El Streptococcus sanguinis se muestra como el microorganismo pionero en la

formación de biofilm, entidad con gran prevalencia, por lo que se han dispuesto sustancias

para su control como los colutorios con bases sintéticas e inclusive elementos naturales

como infusiones. Es así que el objetivo de esta investigación fue valorar la inhibición del

crecimiento de S. sanguinis mediante un colutorio comercial fenólico vs infusiones

naturales de menta eucalipto y aloe vera. Para esto se realizó cultivos bacterianos de

Streptococcus sanguinis en agar Müller Hinton a los que se colocó discos de papel

impregnados en las sustancias antes mencionadas y al cabo de 24 horas se midió los

milímetros de los halos de inhibición dando como resultado que el aloe vera formó 9 mm,

eucalipto 8.5 mm, colutorio fenólico 8.41 mm y menta 8.25 mm. Por lo que se concluyó

que las infusiones naturales poseen cierto grado de superioridad sobre enjuagatorios

sintéticos para inhibir S. sanguinis.

PALABRAS CLAVE: COLUTORIO, INFUSIONES, STREPTOCOCCUS

15

TITLE: “INHIBITION OF STREPTOCOCCUS SANGUINIS GROWTH USING A

PHENOLIC MOUTHWASH VS NATURAL INFUSIONS (MINT, EUCALYPTUS,

ALOE VERA)

Author: Joe Avelino Chochos Muyòn

Tutor: Fabricio Marcelo Cevallos Gonzales

ABSTRACT

Streptococcus sanguinis is the leading and prevailingmicroorganism in the formation of

oral plaque , which is why products have been developeed in order to control it. These

products include synthetic-based mouthwashes and natural elements such as herbal

infusions. In this sense, this study has the goat of assessing growth inhibition of S.

sanguinius, comparing a comercial phenolic mouthwash whit natural mint, eucalyptus and

aloe vera infusions. To this end we produced Muller Hinton cultures on wich we planed

paper discs impregnated whit the abovementioned substances; the correspondig inhibition

halos were measured 24 hours later. The resulting inhibition halos were 9mm for aloe vera,

8.5mm for eucalyptus, 8.41mm for phenolic mouthwash, and 8.25mm for mint. Therefore,

this study concludes that the naturale infusiones are, to a certain degrre, superior to the

comercial mouthwashes in inhibiting the growth of S. sanguinis.

KEYWORDS: STREPTOCOCCUS, MOUTHWASH, INFUSIONS

16

INTRODUCCION

Hace algunos años atrás se consideraba a la película bacteriana como un núcleo

de aspecto viscoso y amorfo capaz de crear enfermedad dental,(1)

con la ayuda de los

avances tecnológicos se la puede describir como una pared sin color, aglutinada al

diente, constituida por células descamadas, glóbulos blancos, macrófagos y bacterias

dentro de un centro de proteínas y polisacáridos.(2) Para que se forme es necesaria la

aparición de bacterias como el Streptococcus sanguinis quien se adhiere a las

glicoproteínas de la película adquirida,(3) razón por la cual este microorganismo toma

mención especial ya que es el pionero en la conformación de biofilm.

Esta placa dentobacteriana al ser una de las principales causas de patología

gingival y dental requiere de control y eliminación a través de técnicas que incluyen el

cotidiano cepillado dental, aunque con la desventaja de dejar restos bacterianos (4)

,

debido a que las personas carecen de tiempo y estimulación para hacerlo de forma

correcta y continua (5)

se observa como consecuencia que este método sea exiguo para

su fin y que se necesite del manejo de otras estrategias como el uso de colutorios que

posean grandes beneficios para los individuos no solo a nivel clínico sino también a

nivel socioeconómico.

Es así que en la presente investigación se realizó un estudio comparativo de la

eficacia de colutorios comerciales con bases fenólicas vs infusiones naturales (menta,

eucalipto, aloe vera) para inhibir la primera bacteria en aparecer durante la formación

de biofilm como es el Streptococcus sanguinis, mediante la realización de cultivo

bacteriano en el laboratorio microbiológico, a los que se les introdujo un disco de

papel filtro impregnados en cada una de las sustancias expuestas, luego de cierto

tiempo se midió el diámetro en milímetros de los halos de inhibición producidos en

cada uno de ellos.

Todo con el propósito de identificar el colutorio más idóneo para la población

actual de acuerdo a ventajas y desventajas que cada uno posee, facilitando de este

modo la selección del colutorio no solo a ser utilizado sino incluso a ser recomendado

por alumnos, docentes y profesionales de la carrera de Odontología.

17

CAPÍTULO 1

1. DESCRIPCIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Gracias a estudios recientes se expone que toda superficie bucal está constituida

por una película adquirida, compuesta por una serie de glicoproteínas a las cuales se

adhiere el Streptococcus sanguinis, quien es el primero en aparecer incluso después de

un par de horas de una limpieza profesional, este recibe mención especial en este

contexto puesto que permite la colonización de otras bacterias no patógenas (S. mitis,

S. oralis y otras) y estas a su vez consienten la adhesión de microorganismos

patógenos, lo cual resulta en la formación de placa bacteriana. (6)

Es así que el biofilm se constituye como uno de los principales agentes

desencadenantes de afecciones e infecciones bucodentales como la inflamación

gingival y enfermedad cariosa, puesto que presenta un alto grado de prevalencia en el

común de las personas, inclusive desde la infancia, lo cual es resultado del escaso,

pobre o nulo conocimiento que ellos poseen acerca de cómo eliminar o controlar la

placa dentobacteriana, sumado además a otros factores que incluyen el tiempo, el

estrés bajo el que viven y las múltiples ocupaciones que poseen. De hecho el control y

la eliminación de biofilm se realizan mediante una serie de métodos y técnicas que

incluyen el uso de colutorios, estos deben satisfacer las necesidades no solo clínicas

sino también socio-económicas requeridas por la población del mundo actual. (5)

Es así que surge la interrogante: ¿Entre los colutorios a base de infusiones

naturales y el enjuague de composición fenólica, cuál será el más eficaz para inhibir

Streptococcus sanguinis?

18

1.2 JUSTIFICACIÓN

A lo largo de los últimos años se ha dispuesto una variedad de mecanismos para

prevenir la exacerbación de placa bacteriana, como lo es el uso de colutorios sin

embargo hasta hace pocos años no se conocía ni el tipo ni la funcionalidad de cada

microorganismo presente en dicho biofilm, por lo que al inicio los enjuagues orales

poseían sustancias nocivas para los tejidos orales. Luego, con el avance tecnológico se

dio a conocer que una de las bacterias pioneras en la formación de placa

dentobacteriana es el Streptococcus sanguinis quien permite la adhesión de muchas

otras bacterias. (6) (7)

En este sentido el presente trabajo investigativo se realizó el análisis del tamaño

de halos de inhibición formados alrededor de cepas puras de Streptococcus sanguinis

en cultivos bacterianos realizados en el laboratorio microbiológico, cada uno con

cuatro discos de papel filtro embebidos en infusión de menta, eucalipto, aloe vera y

enjuague de compuestos fenólicos, respectivamente.

De esta manera esta investigación estuvo encaminado a la utilización de una de

las metodologías alternativas a la odontología tradicional para control y eliminación de

placa bacteriana mediante la inhibición de colonizadores primarios, con el uso de

colutorios naturales, con el fin de que los pacientes eviten el uso de enjuagues bucales

con bases químicas no solo por sus efectos adversos sino también por sus altos costos.

Además se busca despertar el interés por parte de alumnos y docentes, a que se

preocupen en el futuro éxito que podría tener el uso de colutorios a base de plantas

naturales como una estrategia en la solución de problemas odontológicos,

concretamente la placa bacteriana, aumentado la frecuencia de recomendación a

pacientes sobre dichos métodos.

19

1.3 OBJETIVOS

1.3.1 Objetivo General

Analizar la inhibición del crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis a

través del uso de colutorio comercial fenólico vs infusiones naturales de menta,

eucalipto y aloe vera mediante la medición de halos inhibitorios en cultivos

bacterianos.

1.3.2 Objetivos Específicos

Medir los halos de inhibición producidos por los colutorios naturales y fenólicos

utilizados por medio de una regla milimetrada.

Determinar la capacidad inhibitoria de Streptococcus sanguinis a través de

infusiones naturales realizadas con menta, eucalipto y el aloe vera mediante la

medición de halos de inhibición.

Establecer la capacidad para la inhibición del crecimiento de Streptococcus

Sanguinis de los enjuagues comerciales fenólicos por medio de la medición de

halos de inhibición.

Comparar la eficacia del enjuague bucal comercial fenólico frente a infusiones

naturales (menta, eucalipto y aloe vera) para inhibir cepas de Streptococcus

sanguinis.

20

1.4 HIPÓTESIS

H1: Los enjuagues bucales a base de infusiones naturales tendrán mayor

efectividad para inhibir el crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis en

comparación con colutorios orales comerciales a base de compuestos fenólicos.

1.4.1 HIPÓTESIS NULA

H0: Los colutorios preparados con plantas naturales NO tendrán mayor

capacidad para inhibir el crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis en

comparación con colutorios orales comerciales a base de compuestos fenólicos.

21

CAPÍTULO II

2. MARCO TEÓRICO

2.1 Placa bacteriana

Fuente: https://mireiasalvador.wordpress.com/2013/09/15/placa-dental-biofilm-oral-o-placa-bacteriana/

Autor: El investigador

2.1.1 Concepto

La placa bacteriana es un concepto muy antiguo ya que fue considerada por

Leeuwenhoek en 1683 como un conjunto de microbios y residuos alimenticios

dispuestos como un depósito inconsistente, y por Black en 1898 como láminas

suaves y amorfas. (1)

Tiempo después se la describe como una pared clara sin color

aglutinada al diente, constituida por bacterias y células descamadas, glóbulos

blancos, macrófagos, situadas en un centro de proteínas y polisacáridos. (2)

Hoy en

día se especifica aún más al decir que se trata de una biopelícula o biofilm, ya que

se determina que esta no solo se adhiere al diente sino también a cualquier material

no exfoliativo y que se trata de un ecosistema ecológico. (3)

22

2.1.2 Características

La placa bacteriana se describe como una sustancia que ofrece gran

resistencia, que posee un color amarillo-grisáceo y que además tiene la capacidad

de adherirse tanto a la superficie dental como a ciertos materiales utilizados para la

rehabilitación de pacientes edéntulos; esta aparece incluso después de pocas horas

de haber realizado un cuidadoso y exhaustivo aseo de la cavidad oral, (8)

y se

advierte además que se la puede hacer visible mediante ciertas sustancias que

actúan como tinción para revelar el lugar exacto donde se ubica el biofilm. (9)

Dentro de las cualidades más sobresalientes y que es motivo de estudio, está

el hecho de que la biopelícula es la causante de enfermedades del periodonto dentro

de las que resalta la gingivitis. (3)

En el mismo contexto se expone que la placa

dentobacteriana tiene las características esenciales que posee cualquier biopelícula

tales como poseer un gradiente de concentración para el O2, contener canales de

agua e incluso mantener comunicaciones íntimas entre las células que la componen.

(10)

2.1.3 Tipos

Dentro de lo concerniente al tipo se puede citar que el biofilm se lo considera

de acuerdo a su localización en placa supragingival la cual se ubica en toda la

corona clínica de la pieza dental y en placa subgingival que se extiende apical al

margen gingival. (11)

La primera se compone de bacterias, células epiteliales,

glóbulos blancos y macrófagos inmersas en una matriz orgánica que se forma de

acuerdo a los aspectos que se indican más adelante. (8)

En el segundo caso comienza

su formación a partir de la aparición de la película supragingival la cual influye en

su composición aunque en general la biopelícula subgingival se compone de

bacterias Gram negativas, y anaerobios. (12)

23

2.1.4 Metabolismo

Los microorganismos de la placa dentobacteriana enfrentan un terreno hostil

lleno de dificultades como el pH o la temperatura por ejemplo, para lo cual

necesitan encontrar un lugar seguro denominado nicho biológico donde se realiza

además simbiosis frente a bacterias ajenas a cada colonia. (13)

Pero para esto los

microbios requieren de una fuente de energía sino no podrían subsistir, la cual es

suministrada principalmente por alimentos a base sobre todo de carbohidratos. (14)

Es así que una vez que el individuo ingiere alimentos las bacterias

descomponen los elementos orgánicos y los sintetiza en metabolitos ayudados de la

glucólisis anaerobia. Sin embargo la difusión en la placa bacteriana de los

carbohidratos de elevado peso molecular no es posible, contrario a lo que ocurre

con la sacarosa y la lactosa. Por otra parte cabe mencionar que el Streptococcus

mutans es capaz de formar polisacáridos extracelulares que se ubican en la matriz

para ser usados cuando exista escases de azúcares. (11)

2.1.5 Métodos de diagnóstico

En ocasiones para diagnosticar la presencia de biofilm únicamente es

necesaria la inspección ya que esta se presenta de un color que difiere al de la pieza

dental, mostrándose como coloraciones grisáceas o amarillentas de acuerdo al

estadío en el que se encuentra. (10)

Sin embargo está técnica visual suele ser muy

generalizada ya que no provee una buena delimitación, por lo que el profesional

utiliza elementos de tinción, como es el caso de la eritrosina que se presenta como

pastillas o como líquido. (8)

Además también se puede identificar la placa

dentobacteriana mediante el uso de un explorador, al pasarlo por las caras

vestibulares de las piezas dentales y observando la acumulación de material

amarillento en el extremo cóncavo de dicho instrumental para registrar los

resultados en el denominado IHOS (Índice de Higiene Oral Simplificado). (9)

24

2.1.6 Métodos de eliminación

Al hablar de la eliminación de placa bacteriana se debe tomar en cuenta

diferentes tipos de técnicas para lograr dicho objetivo, así se tiene el lavado

mecánico, ya sea con ayuda de limpieza técnica realizada por el profesional o

simplemente mediante el uso cotidiano de cepillo dental ayudado de elementos

químicos como es la pasta o dentífrico. (11)

Además del uso diario de hilo dental y

coadyuvado en la mayoría de los casos por elementos denominados colutorios

quienes permiten la remoción de placa dentobacteriana que no se eliminó con los

métodos antes mencionados. (5)

Elementos que se denominan colutorios o

enjuagatorios, que están dispuestos por una serie de sustancias bases quienes les

proveen de sus características diferenciales, y que se pondrá en consideración más

adelante.

2.1.7 Composición

La placa dentobacteriana consta en su mayoría de microorganismos, es así

que un gramo de película bacteriana puede llegar a poseer 1010

microbios

acomodadas de forma definida y complicada. (12)

Estas bacterias incluyen sobretodo

Streptococcus, Actinomyces, enterococcus y bacterias filamentosas Gram positivas

así como microorganismos Gram negativos como Neisserias por ejemplo, en la

superficie supragingival, y Prevotella, Porphyromonas y fusobacterias, y muchas

otras de tipo anaerobio en la zona subgingival. (11)

Además posee células epiteliales,

glóbulos blancos y macrófagos; todos estos elementos inmersos en una matriz

intracelular que contiene elementos orgánicos e inorgánicos. (15)

Orgánicos como

hidratos de carbono y proteínas en su mayoría y lípidos en menor cantidad, e

inorgánicos como calcio, fósforo en mayor proporción y magnesio potasio y sodio

en menor número. (16)

25

2.1.8 Formación

Gráfico 1: Esquema formación biofilm

Fuente: Katz 1989

Autor. El investigador

Al hablar de la formación de placa bacteriana se puede citar que para que

ocurra son necesarios una serie de factores ayudados de varios procesos complejos

que involucran una gran variedad de microorganismos y de un huésped que sería la

cavidad oral. (13)

Estas bacterias que actúan de manera conjunta entran en contacto

de forma fortuita con la zona orgánica que se encuentra en la superficie dental. (17)

Por otra parte como dato extra se expone que la formación de biofilm es más rápida

en la noche debido a la acción mecánica de alimentos y el flujo salival de la

masticación. (16)

De este modo se podría pensar que el estudio de la formación de la

biopelícula dental es extremadamente difícil, sin embargo se ha descrito una

secuencia un tanto más simplificada que hace que este evento sea más

comprensible. (9)

Así se tiene una formación de película dental adquirida como

26

inicio de todo el proceso, que se basa en el hecho de que todas las superficies de la

cavidad oral se encuentran revestidas de una superficie de material orgánico. (10)

Seguida por una colonización de microorganismos, lo que ya en sí es la verdadera

formación de placa con los esenciales procesos de adhesión microbiana y su

actividad metabólica. Y finalmente una fase de crecimiento y maduración dada por

la multiplicación bacteriana, en un inicio aquella con microorganismos más

comunes y por último aquellas englobadas en la ecología alogénica y autogénica.

(13)

2.1.8.1 Película adquirida

Fuente: Harris & García-Godoy 2001

Autor: el investigador

Se forma sobre la superficie de los dientes incluso a pocos minutos

después de una limpieza con el profesional, además esta membrana es la que

permite la adhesión selectiva de microorganismos pioneros como el Streptococcus

sanguinis, mitis y oralis. Se encuentra constituida por elementos tales como: iones

de calcio, sodio, potasio, entre otros; lípidos y proteínas como las sialomucinas, y

otras ricas en glicosiltransferas, prolina y lactoferrina, entre las más

sobresalientes, quienes son los verdaderos puentes de unión entre la película

adquirida y los microorganismos. (7)

Gráfico 2: Esquema mecanismos de adhesión película adquirida

27

2.1.8.2 Colonizadores primarios o pioneros

Como ya se mencionó, la segunda y tercera etapa de formación de placa

bacteriana consta de manera más específica de la colonización de bacterias en el

huésped (superficie dental), esta inicia inmediatamente después de la formación

de la película adquirida mediante las glicoproteínas, (18)

cuando aparece en la

cavidad bucal la especie talvez más común de la flora oral denominada

Streptococcus (19)

dentro de la cual el primero en aparecer es el Streptococcus

sanguinis incluso de 2 a 4 horas después de realizarse una limpieza profesional,

(20) con el pasar de los minutos aparecen además los Streptococcus oralis, mitis e

inclusive el S. mutans, quien es talvez el microorganismo bucal más estudiado de

los últimos tiempos, acompañados además de Actinomices naeslundii, como los

más reconocidos. (21)

Fuente: Barrancos & Barrancos 2006


Gráfico 3: Esquema colonización primaria

28

2.1.8.3 Colonizadores secundarios

Todos los mecanismos y secuencias de conformación de placa bacteriana en

su segundo estadío contribuyen a la formación de un ambiente idóneo para que

bacterias más complejas lleguen hasta el huésped, es así que las bacterias pioneras

como el S. sanguinis por ejemplo, libera una serie de sustancias y elementos (20)

que atraen a más bacterias como el S. mutans y S. salivarius quienes a su vez

atraen mediante adhesinas, polisacáridos, lectinas, fimbrias y enzimas, a aquellas

que se denotan como más patógenas como es el caso de las Porphyromonas,

Agragatibacter, Veillonella, Neisserias (7)

quienes llegan a colonizar la cavidad

oral al cabo de pocos días, en condiciones en las que el individuo no se realice

una correcta limpieza oral. (22)

2.1.8.4 Adhesión bacteriana

Para que se pueda realizar el segundo y tercer periodo de formación de placa

es necesaria la adhesión, que en sus etapas iniciales suele ser reversible, esta se

da entre las cuatro horas inmediatas a la formación de la película adquirida.

(23)Donde actúan una serie de elementos como las adhesinas específicas, que son

el ligando más definido de este proceso, las mismas que unen las bacterias a la

superficie dental. (22)

Así como uniones electrostáticas o las fuerzas de Van der

Waals; además es necesario considerar que en esta unión tan compleja pueden

actuar inclusive ácidos teicoicos y lipoteicoicos. (9)

La adhesión permite en sí la

agregación y coagregación bacteriana.

2.1.8.5 Matriz extracelular

La matriz extracelular de la placa dentobacteriana también actúa en la

adhesión microbiana puesto que en su conformación se presentan proteínas,

polisacáridos y ADN, además debido a que suministra una alta densidad a las

células constituyentes de la placa, por lo que se menciona que además permite la

agregación y coagregación, puesto que le proporciona también una especie de

retención mecánica y una protección a todas las bacterias que conviven en su

29

interior. Además participa del metabolismo bacteriano puesto que proporciona

una especie de red para compuestos orgánicos e inorgánicos. (7)

2.2 Streptococcus sanguinis

Fuente: http://higienistabucodental.blogspot.es/categoria/general/4


2.2.1 Características

El S. sanguinis fue descrito en 1990 y se expone que se trata de un

microorganismo de la especie Streptococcus porque se exhibe al microscopio como

una cadena, además se evidencia como positivo ante la tinción Gram, (24)

es un

aerobio facultativo, pudiendo desarrollarse en medios aerobios y anaerobios, su

metabolismo lo hace mediante el consumo de sacarosa y está previsto de proteínas

y genes como el SrtA quienes le sirven en el proceso de adhesión con otras

bacterias, (25)

por último se menciona que aunque no sea patógeno se lo ha

encontrado no solo en la superficie oral sino también en la superficie cardiaca de

algunas endocarditis. (26)

Asimismo en un estudio realizado en 2007 por científicos

estadounidenses se describió la presencia de este microorganismo en cavidades

cariosas acompañando al Streptococcus mutans.

2.2.2 Importancia

Este microorganismo merece una especial mención en este ámbito puesto que

a pesar de formar parte de la flora oral normal y no ser patógeno o virulento, es la

30

primera bacteria que se adhiere a la superficie dental mediante una serie de

mecanismos que se describieron anteriormente, y es esta la que permite o facilita la

adhesión de muchas otras bacterias entre patógenas y habituales, (16)

quienes serán

las encargadas de permitir asimismo la adhesión y coagregación de más bacterias

pero netamente patógenas, por lo que se evidencia de esta manera la importancia

del Streptococcus sanguinis al ser el pionero en la formación de biofilm. (22)

2.3 Enjuagues bucales

Fuente: http://www.imujer.com/salud/5073/agua-oxigenada-como-enjuague-bucal


2.3.1 Generalidades

La remoción cotidiana de biofilm está dada principalmente por métodos

mecánicos como los más aceptados (cepillado e hilo dental), pero estos no pueden

llevarse a cabo de forma eficiente o solitaria por los individuos, ya que consta de

varias aptitudes y destrezas difíciles en ciertos casos de conseguir, por lo que es

necesario el apoyo de métodos más sencillos como es el uso de colutorios.

(27)Puesto que estos no requieren de mucho tiempo o una gran habilidad para su

utilización y además debido a que ejecutan un trabajo directo contra las bacterias

de la boca. (28)

De esta manera los enjuagues orales van tomando espacio por las

personas al momento de pensar en la higiene oral ya que estos se transforman en

una alternativa verdaderamente atrayente. (1)

31

De hecho la humanidad ha utilizado sustancias como enjuagues orales desde

hace mucho tiempo atrás, incluso previo a los estudios realizados por Joseph Lister

y Louis Pasteur que evidenciaban a las bacterias como promotoras de enfermedad.

(28)Aunque se los consideraba en un principio como un simple medio cosmético ya

que su única función era proveer frescura y contrarrestar el mal aliento. (14)

Por lo

que en los últimos años y gracias a la evidencia científica se ha tomado a los

enjuagatorios más bien como métodos terapéuticos y coadyuvantes en la

disminución de placa. (13)

2.3.2 Propiedades

De esta manera hoy en día uno de los objetivos principales de los colutorios

orales es afectar no solo cuantitativa sino cualitativamente el biofilm tanto

supragingival como el subgingival. (1)

Lo cual efectúa a través de ciertas

propiedades tales como la sustantividad que trata del tiempo de permanencia del

enjuague en las superficies orales, o la potencia que trata en cambio de la cantidad

de concentración necesaria para inhabilitar la acción de ciertos microorganismos. (9)

Además deben presentar baja toxicidad, nulos efectos adversos y un efecto

netamente local. (27)

Y por sobre todo acción anti placa adoptando ya sea una

función bactericida o bacteriostática. (5)

2.3.3 Definición

De acuerdo a lo expuesto anteriormente se puede decir que los colutorios son

soluciones que poseen sustancias que ayudan en la higiene oral cotidiana; (29)

mediante simples buchadas y que acompañan al método mecánico de limpieza oral,

aunque con mayor frecuencia de uso por quienes aceptan cada vez más a esta

técnica (13)

debido a que estas sustancias en un principio constaban únicamente de

agentes cosméticos y hoy en día gracias a las investigaciones están ayudadas de

elementos terapéuticos. (14)

Aunque con un cierto grado de aparecimiento de efectos

adversos.

32

2.3.4 Tipos

En base a los más recientes estudios acerca de la efectividad de enjuagues

bucales y su relación con ciertos efectos adversos se ha tomado mucho en cuenta

las sustancias naturales. (30)

Por otro lado las casas comerciales que distribuyen

estos productos se han preocupado en verificar dichas circunstancias mediante

estudios científicos con el fin de generar aceptación y seguridad. Sin embargo es

importante considerar que tiempo atrás el personal de salud tenía como única

opción el uso de la fitoterapia. (31)

Por lo que es necesario considerar con fines

didácticos y para la presente investigación dos tipos de colutorios orales: aquellos

realizados a base de sustancias químicas denominados como comerciales y aquellos

dispuestos a base de plantas medicinales designados como naturales.

2.4 Enjuagues comerciales

Fuente: https://odontologiapreventiva2.wordpress.com/


2.4.1 Generalidades

Al hablar de enjuagues orales comerciales se puede citar que se trata de

sustancias capaces de atenuar las bacterias de la cavidad oral y que se encuentran de

venta en cualquier establecimiento afín a estos producto sin la necesidad de una

receta médica. (12)

Esta comercialización está regida bajo los parámetros dictados

por la Asociación Dental Americana (ADA). Como por ejemplo: cantidades

33

mínimas de alcohol, debido a que algunos estudios suponen la relación de este

agente contenido en colutorios orales con la aparición de cáncer oral; o la

disposición de tapas a prueba de niños e inclusive etiquetas de peligro en los

envases. (29)

Además de proveer efectos clínicos significativos, gran aceptación y

sobretodo mínimos efectos adversos. (27)

En cuanto a los criterios de selección de los enjuagatorios comercializados,

estos no deben estar guiados únicamente por el individuo sino deben estar basados

en la recomendación del profesional. (1)

Debido a que por lo general el comercio de

estos productos están relacionados con el aroma, coloración, sabor y efecto

satisfactorio que proveen, minimizando así la importancia de la acción terapéutica.

(13) Además un colutorio podría estar indicado para un individuo pero

contraindicado para otro, puesto que existen diferencias entre cada caso. (29)

2.4.2 Composición

En sí la mayoría de enjuagues orales tienen composiciones similares o más

bien elementos de base, y otros agentes que determinan la diferenciación de cada

uno de ellos. (11)

De hecho Herazo (28)

en 2012 cita a Gudiño y Prety quienes aducen

la existencia de cuatro elementos activos en lo colutorios como son: compuestos de

amonio cuaternario, peróxidos, compuestos fenólicos sin carga y antibióticos. Sin

embargo Perry (12)

en 2014 como muchos autores citados en este trabajo

investigativo le dan una mención especial a la clorhexidina. Por lo que en este

contexto se describirá algunos de los colutorios más utilizados.

2.4.2.1 Colutorios a base de Compuestos fenólicos ( LISTERINE)

Fuente: http://www.listerine.ca/products/classic-clean

Autor. El investigador

34

A estos compuestos también se los denomina como aceites esenciales ya

que están formados a base de elementos que incluyen fenol, timol, eucaliptol,

entre otros. Además es el enjuagatorio pionero aceptado por la ADA como

antiplaca y anti gingivitis. (13)

Su acción bactericida trata de la ruptura de la pared

celular y precipitación de las proteínas por lo que en concentraciones altas tienen

cierto grado de toxicidad. (9)

De esta manera las investigaciones denotan a este

producto como aceptado por la población ya que incluso actúa sobre Candida

albicans. (27)

Más específicamente se menciona por Madrigal (29)

en 2009 que los aceites

esenciales que componen dicho colutorio son un potente agente antiplaca,

eliminándola por un largo periodo de tiempo, asimismo Sharma (32)

en 2004

gracias a su estudio los describe como uno de los mejores tratamientos para la

gingivitis. Estos colutorios se comercializan en la gran mayoría de países bajo la

casa comercial Johnson & Johnson bajo el nombre de Listerine.

2.4.2.2 Enjuagues a base de compuestos de amonio cuaternario

Fuente: http://www.brushwithromance.com/mexico/products/Oral-B_Pro-Salud/


Estos colutorios están elaborados en base sobre todo a un compuesto

denominado cloruro de cetilpiridinio. (12)

Aunque también poseen cloruro de

benzalconio, cuya función principal es romper la pared celular de las bacterias y

dañar su citoplasma lo cual les provee de una acción antibacteriana similar a la de

la clorhexidina aunque con menor función inhibitoria de biofilm. (33)

Por otra parte

35

se les atribuye a estos cloruros actuar como detergentes, antisépticos y

desinfectantes. Además se expone que estos enjuagues poseen una sustantividad

baja y es posible que su uso prolongado produzca pequeñas manchas reversibles

con profilaxis. (28)

Existen varias marcas comerciales compuestas con estos

elementos como por ejemplo Oral B.

2.4.2.3 Enjuagatorios a base de triclosán

Fuente: http://www.colgateprofesional.com.co/productos/Enjuague-Bucal-Colgate-Plax


El triclosán es un elemento con efecto comprobado contra bacterias y

hongos, sin embargo no actúa sobre esporas; además posee una función contra la

inflamación según algunos autores, y al parecer su acción antiplaca es un tanto

restringida aunque se expone que mejora su efectividad después de extensos

períodos de utilización. (1)

No obstante existen investigaciones que demuestran su

efectividad en la disminución de la cantidad y calidad de placa.

Por otra parte cabe anotar que al inicio se lo usó con fines cosméticos y en

los últimos tiempos se lo introdujo en colutorios y pastas dentales. (9)

Estos

enjuagues incluyen marcas reconocidas como Colgate y Sensodyne, este último

cabe citar posee como elemento principal el nitrato de potasio que le atribuye su

principal característica contra la sensibilidad. (34)

36

2.5 Colutorios naturales

Fuente: http://www.lavidalucida.com/remedios-naturales-para-el-cuidado-de-las-encias.html


2.5.1 Generalidades

El uso de plantas con propiedades curativas o Fitoterapia tiene una historia

bastante amplia, ya que se la conoce incluso desde inicios de la humanidad, puesto

que era la única opción que tenían nuestros ancestros para tratar dolencias, quienes

fueron heredando sus conocimientos acerca de las características de varias especies

vegetales, de generación en generación aunque sin bases científicas. (29)

Es así que

en las últimas décadas se han realizado estudios in vivo sobre las propiedades de

varios agentes naturales no solo en cuanto a medicina general se refiere sino

también en Odontología. (14)

Puesto que los individuos últimamente reflexionan más

acerca del uso de productos sintetizados químicamente por los problemas que

conlleva su uso prolongado. (30)

De esta manera se expone que la utilización de enjuagues bucales a base de

elementos netamente naturales para controlar la cantidad y calidad de biofilm

consiente su uso habitual con una disminución notable de contraindicaciones.

(35)1Sin embargo y a pesar de esto, no se prioriza en la práctica diaria la

recomendación de su uso. (29)

Es así que en esta investigación se tratará de ciertas

características de plantas tales como la menta, el eucalipto y aloe vera o sábila

37

2.5.2 Menta

Fuente: http://misremedios.com/sustancias/menta/


La menta es una planta perdurable y que posee un crecimiento bastante rápido

y se la cultiva generalmente con fines ornamentales en varias partes del mundo. (36)

Es así que si se trata de utilizar esta planta con objetivos terapéuticos se

recomienda el uso tan solo de sus hojas. (37)

Las cuales poseen propiedades

curativas extensas sobre todo en el sistema respiratorio para el tratamiento por

ejemplo de gripes y afecciones bronquiales, además funciona en el aparato

digestivo como anestésico a nivel estomacal. (38)

Ya a nivel de la Odontología se consideran ciertas propiedades como el hecho

de ostentar un principio activo denominado mentol (39)

que le provee cierta

propiedad contra microorganismos, por lo que se la cataloga como antiséptico,

razón por la cual se la comercializa en varios elementos de higiene bucal. (27)

Es así

que en 2007 se hizo un trabajo de investigación acerca de su eficacia para el control

de placa dental con resultados aceptables, al igual que un estudio similar realizado

en 2009 cuya conclusión la expone como buena contra biofilm. (29)

38

2.5.2.1 Composición química

La menta está constituida químicamente por una serie de elementos que le

proveen sus más sobresalientes propiedades como son: el mentol (5-metil-2-

isopropilciclohexanol) o denominado también químicamente como hexa-hidro-

timol quien le provee a esta planta su sabor especial, también están presentes

hidrocarburos como el metano, cetonas como la mentona y acetatos de metilo y

cineol. (39)

Además se ubican flavonoides como el apingenol, luteol, eriodictiol, e

inclusive existen en su composición taninos. (19)

2.5.3 Eucalipto

Fuente: http://www.plantasmedicinales10.com/articulo/eucalipto-catarro.html


El eucalipto es un árbol que consigue grandes tamaños de altitud ya que

alcanza en algunos casos los 80 metros. (40)

Dentro de sus propiedades generales

más sobresalientes se encuentran las de poseer una acción balsámica y además de

provocar sudoración en quienes la utilizan. (41)

Por lo que se usa en mayor

porcentaje para afecciones de vías respiratorias. (42)

Por otra parte y como dato

curioso se cita que en distintas zonas se lo conoce como “árbol de la fiebre” puesto

que actúa en la malaria. (43)

En cuanto al uso de este árbol en la rama de la Odontología es necesario

acotar que posee una sustancia designada como eucaliptol acompañada de citrinetol

y muchas otras sustancias. (39)

Este eucaliptol tiene su importancia ya que es

utilizado en ciertas marcas comercializadas de limpieza dental, debido a que se trata

de uno de los antisépticos de mayor potencia cuando se usa como aceite esencial.

39

(36) Además posee características contra la inflamación.

(24) Por lo que en el estudio

realizado en 2009 acerca de eficacia de colutorios contra biofilm reflejó obtener el

mejor resultado. (29)

2.5.3.1 Composición química

El eucalipto químicamente se encuentra constituido por una serie de

elementos que le proporcionan sus propiedades dentro de las cuales se ubican en

mayor porcentaje el eucaliptol y el citronetol, además posee aldehídos (butílico),

alcoholes (etílico), timol, borneol, terpinol, citrol, aromadendreno, eudesmol,

felandreno, fenchona, (39)

Asimismo se considera de importancia la presencia de

sustancias tales como las resinas, el tanino y el ácido gálico. (44)

2.5.4 Aloe vera

Fuente: http://aerobicsalud.com/los-beneficios-de-la-sabila-para-la-belleza/


El aloe vera o más comúnmente conocida como sábila es una planta

perdurable, de mucha historia, que se la encuentra en Ecuador en mayor

porcentaje en los valles. (36)

Posee espinas en toda su superficie y para utilizarla en

algún procedimiento terapéutico es necesario emplear el jugo gelatinoso que se

ubica en su interior, el cual tiene un sabor desagradable. (43)

Este líquido es

utilizado en general como cicatrizante y desinflamante sobre todo en zonas

gástricas. (40)

Como dato curioso cabe mencionar que existen narraciones que

relatan que Cleopatra utilizaba la sábila en cosméticos de belleza para el cutis. (45)

40

Ahora bien, si se requiere conocer la utilidad que se le da al aloe vera en

Odontología, es necesario acotar que no existe variedad de publicaciones acerca

de esto; sin embargo se puede mencionar que debido a que posee numerosas

acciones farmacológicas, como ser antinflamatoria, antimicrobiana y

regeneradora, es posible utilizarla en tratamientos no solo periodontales sino

además en procesos endodónticos, patología oral y tratamientos pos extracción.

(45) De hecho hace 30 años se realizó una investigación en la que se comprobó su

acción contra bacterias bucales con un aceptable resultado ya que en

concentraciones altas actúa como bactericida incluso para Streptococcus fecalis y

Cándida albicans. (46)

Ahora bien al utilizarlo como colutorio se menciona en una

publicación más reciente que es efectivo para la reducción de biofilm así como de

gingivitis, sin presentar además contraindicaciones tras su uso frecuente. (47)

2.5.4.1 Composición Química

Presenta una composición química verdaderamente compleja: azúcares tales

como: glucosa-6-fosfato, manosa-6-fosfato, fructosa, así como los denominados

glucomanamos; vitaminas: A, C, E, B1, B2, B6, B12 complementadas con ácido

fólico y colina; aminoácidos: 20 de los 22 aminoácidos del ser humano y 7 de los

8 esenciales; ácidos grasos: colesterol, campesterol,; enzimas: amilasa,

bradiquinasa, catalasa (45)

en su pulpa, el aloe vera presenta además carbohidratos,

resinas, y ácidos. (39)

41

2.6 Infusiones naturales

Fuente: http://www.terra.org/categorias/articulos/la-infusion-paso-paso


Las infusiones tienen una historia amplia puesto que su uso fue muy común y

aceptado por nuestros antecesores debido a su fácil elaboración; en sí, son

preparaciones realizadas a partir de los componentes de diversas plantas, entre los

que se tiene: las hojas, flores, semillas, raíces, frutos, y corteza.(36)

Resulta

conveniente mencionar que si se requiere elaborar una infusión con raíces, semillas

u otra parte de la planta que se encuentre en contacto con la tierra es necesario

realizar más bien una decocción. Las infusiones además se diferencian del té

habitual puesto que estos necesitan sumergir la bolsita en agua hirviendo mientras

que las infusiones no necesariamente requieren esto sino basta con que

permanezcan en la superficie.

Para preparar una infusiones existen algunos métodos pero el más común es

aquel dispuesto por White (36)

, Duke (48)

y Bruno del médico (49)

quienes exponen

que lo primero es colocar agua en un recipiente resistente al calor, luego someterla

a fuego hasta llegar a punto de hervor, e inmediatamente depositar hojas o flores

secas de cualquier planta que se requiera utilizar, (48)

y dejar reposar hasta su

enfriamiento con el fin de permitir que los aceites esenciales se volatilicen en toda

la superficie del agua (36)

por último en ocasiones se requiere realizar una filtración

mediante un tamiz o colador .

42

2.7 Medios de cultivos bacteriológicos

Fuente: http://revistaialimentos.com/ediciones/ediciones-2012/edicion-31/inocuidad-2/la-evolucion-del-

diagnostico-microbiologico-en-la-industria.htm


2.7.1 Generalidades

En el ámbito de la medicina existen formas o métodos para estudiar los

agentes microbiológicos que causan la enfermedad, los mismos que se denominan

cultivos bacterianos. (23)

En otras palabras un cultivo no es más que hacer crecer

bacterias o microorganismos fuera de su hábitat, en una superficie sólida o líquida,

con diferentes fines como realizar conteo bacteriano o antibiograma, por ejemplo. (9)

Para lo cual son necesarios una serie de requisitos o circunstancias como son los

nutrientes o el medio ambiente en el que se desarrollan los microorganismos. (50)

2.7.2 Requisitos Generales

Para que un cultivo sea exitoso existen diferentes requerimientos que debe

cumplir y uno de ellos es la presencia de ciertos nutrientes como fuente de energía

como es el caso de la sangre de ciertos animales, o nutrientes vegetales como la

soya e inclusive elementos artificiales. (6)

Además está el hecho de cumplir con una

serie de normativas estrictas que se deben efectuar de acuerdo al tipo de cultivo, así

como a la necesidad de quien investiga en la siembra, así se tiene la seguridad

43

biológica, el medio ambiente óptimo para el crecimiento bacteriano. (30)

Asimismo

se necesita un pH óptimo, temperatura adecuada, ausencia o presencia de oxígeno,

entre los más importantes. (41)

2.7.3 Tipos

A los cultivos bacteriológicos se los puede clasificar de acuerdo a la

funcionalidad, a la consistencia y al origen. Los primeros se diferencian en medios

de cultivo selectivos, donde se provee al medio con sustancias de tal manera que

favorezcan el crecimiento de ciertas bacterias y la muerte de otras; además existen

medios diferenciales en los que se agrega un elemento que permita determinar el

lugar exacto donde se localizan diferentes colonias de acuerdo a su metabolismo.

(51) Además se encuentran medios selectivos-diferenciales donde se ayuda de

tinciones para diferenciar las colonias. En lo concerniente a los clasificados según

su consistencia se encuentran los sólidos como el agar o líquidos como el

tioglicolato. (9)

En cuanto a su origen se distinguen tres tipos como son: los

naturales, sintéticos y semisintéticos.

2.7.4 Métodos de siembra

Cuando se realiza una toma una muestra bacteriológica, sea cual sea el lugar

de donde se la hizo, es posible realizar una siembra bacteriana, es decir se puede

hacer crecer los microorganismos presentes en la muestra tomada, para lo cual

existen diferentes formas de hacerlo como es el método de superficie en un medio

sólido donde se coloca la muestra en la superficie del medio de cultivo (17)

para

luego proceder a realizar estriaciones con un asa que debe estar esterilizada

mediante el sometimiento a fuego en un mechero hasta que se muestre al rojo vivo

(52); las estrías deben realizarse de tal manera que se forme un pentágono.

(53)

44

Esto a su vez debe realizarse en 3 periodos, sin olvidarse de esterilizar el asa

al terminar cada tiempo, el primero debe ser tomado a partir de la siembra inicial, el

segundo debe ser en sentido contrario al primero y el tercero en el mismo sentido

que el anterior pero en diferente dirección como se observa en el gráfico 4:

Gráfico 4: Esquema modo de siembra

Fuente:http://gsdl.bvs.sld.cu/greenstone/collect/preclini/index/assoc/HASH01eb.dir/fig122a17.png


45

CAPÍTULO III

3. METODOLOGÍA

3.1 Tipo de investigación

Esta investigación es de tipo experimental in vitro.

IN VITRO: puesto que se realizó en un laboratorio microbiológico

EXPERIMENTAL: ya que utiliza métodos y técnicas para la obtención de los

resultados.

3.2 Población y muestra

El universo consta de un número infinito de cultivos de cepas puras de

Streptococcus sanguinis ATCC 10556.

3.2.1 Selección y tamaño de la muestra

Para el cálculo de la muestra se tomó el muestreo estadístico denominado

discrecional o por juicio en el cual el laboratorio microbiológico indica que se

deben realizar 12 cultivos cada uno con 4 discos impregnados en las diferentes

sustancias a investigar, evitando de esta manera una excesiva repetitividad.

Se tomó como referente comercial el colutorio a base de compuestos fenólicos

(Listerine) puesto que en base a evidencia bibliográfica y científica revela un buen

porcentaje de actividad antiplaca y antimicrobiano, también presenta muy pocos

efectos adversos como lo expone Madrigal (29)

en su publicación realizada en 2009;

y además de ser uno de los más comercializados en nuestro país.

46

3.2.2 Criterios de Inclusión

Cepas puras de Streptococcus sanguinis ATCC10556

Colutorio comercial a base de compuestos fenólicos. (Listerine)

Infusiones preparadas con hojas de menta, eucalipto y aloe vera frescas.

3.2.3 Criterios de Exclusión

Cultivos bacterianos que al momento de la medición de halos se presenten

contaminados.

Cultivos en los cuales se aprecie crecimiento de bacterias diferentes a S.

sanguinis.

Colutorios fenólicos que se encuentren caducados.

.

47

3.2.4 Variables

3.2.4.1 Definición de variables

IDENTIFICACIÓN

DE VARIABLES

CONCEPTUALIZACIÓN CLASIFICACIÓN INDICADOR

CATEGÓRICO

ESCALA DE

MEDICIÓN

Enjuagues bucales

comerciales a base de

compuestos fenólicos

Son aquellos colutorios que

poseen como base de su

constitución compuestos

fenólicos tales como los

aceites esenciales: timol,

eucaliptol, mentol y que

además denotan bajos efectos

adversos. (33)

Independiente Porcentaje de

compuestos

fenólicos en el

enjuague comercial.

Cualitativa

Infusiones naturales Aquellas infusiones que se

fabrican a partir de plantas

cuyas propiedades incluyen la

disminución de

microorganismos que forman

parte de la placa bacteriana (30)

Independiente

Infusiones naturales

a base de: menta,

eucalipto, aloe vera

Cualitativa

Inhibición del

crecimiento

La inhibición del crecimiento

de S. sanguinis se medirá de

acuerdo al halo de inhibición

que presente el cultivo

bacteriano frente a cada

colutorio utilizado.

Dependiente Milímetros Cuantitativa

48

3.3 Materiales y métodos

3.3.1 Recursos materiales

Se utilizó hojas de menta, eucalipto y aloe vera para la elaboración de

colutorios naturales; además enjuague bucal comercial con base fenólica.

Figura 1: Sustancias a investigar

Elaborado por: El investigador

Fuente: El investigador

Para el cultivo: Cepas puras de S. sanguinis, agar sangre de cordero, discos de

papel filtro estéril, asa bacteriológica, incubadora, autoclave, agar Muller-Hinton,

cajas Petri, hisopos estériles.

Figura 2: Cepas puras S. sanguinis y discos en blanco



49

Figura 3: Agar Muller Hinton



Figura 4: Incubadora



50

Figura 5: Esterilizadora



Figura 6: Micropipeta



Además se utilizó implementos básicos de bioseguridad (mascarilla, gorro,

guantes, mandil) además de lysol, vasos desechables, lápices bicolores, esferos y

libreta de apuntes.

51

Figura 7: Implementos de Bioseguridad



3.3.2 Recursos humanos

Para la realización del presente trabajo fueron necesarios la presencia del

investigador, la microbióloga, un estadístico y un ayudante.

3.4 Estandarización

3.4.1 Estandarización para preparación de colutorios naturales

El procedimiento para la elaboración de colutorios naturales se estandarizó de

acuerdo a los criterios mencionados por recetarios herbarios como el de Duke

(1998) (48)

y Bruno del Médico (2014) (49)

Es así que se colocó 1 litro de agua en un recipiente metálico para ser

sometido a fuego lento hasta llegar a hervir a 91 oC aproximadamente en la Sierra,

una vez conseguido esto se añadió 10-20 gr aproximadamente de hojas de cada

planta a investigar previamente lavada (una cucharada), se dejó reposar y se tapó el

recipiente hasta su enfriamiento, para finalizar con un embotellado en envase

plástico rotulado con el nombre del colutorio.

52

3.4.2 Estandarización para elaboración de cultivo microbiológico

La estandarización se basó en patrones mencionados por la especialista en el

campo microbiológico, quien impartió al investigador una capacitación para el

manejo de instrumentos y materiales de laboratorio así como para el procedimiento

del cultivo bacteriano.

3.5 Procedimiento

3.5.1 Adquisición cepas

Lo primero fue obtener cepas puras y liofilizadas de Streptococcus

sanguinis en el distribuidor MEDIBAC (anexo 6)

Figura 8: Cepas Streptococcus sanguinis



53

3.5.2 Fase en laboratorio

Luego en el laboratorio microbiológico de la facultad de Odontología

(anexo 5) se realizó de acuerdo a los estándares impartidos por la

licenciada especialista en el campo, lo siguiente:

I. Se toma una pequeña cantidad de la cepa para realizar la siembra y

cultivo bacteriano por el método de agotamiento de estrías con un

hisopo estéril en una caja Petri con agar sangre de cordero para

colocarlas luego en una incubadora por 24 horas a 37 oC.

Figura 9: Hisopado agra sangre



II. En el transcurso de este período se elaboró los colutorios naturales con

el fin de obtener compuestos frescos de la siguiente manera:

III. Se colocó 1 litro de agua en un recipiente metálico para ser sometido a

fuego lento hasta llegar a hervir a 91 oC aproximadamente en la Sierra,

una vez conseguido esto se añadió 10-20 gr aproximadamente de

eucalipto previamente lavado (una cucharada), se deja reposar y se tapa

el recipiente hasta su enfriamiento, para finalizar con un embotellado en

envase plástico rotulado con el nombre del colutorio. El mismo

procedimiento se realizó para la fabricación del colutorio natural de

menta.

54

IV. En el caso de aloe vera: previamente se lavó las hojas, se las peló y se

las volvió a lavar con el fin de eliminar la sustancia amarga contenida en

la superficie de la pulpa de dicha planta y luego se procedió de manera

similar al eucalipto.

V. Se envasó y rotuló las infusiones de la siguiente manera: menta: 1;

eucalipto: 2; aloe vera: 3. Asimismo se rotuló al colutorio fenólico

como: 4; control positivo (clorhexidina): 5; y control negativo(suero

fisiológico): 6.

Figura 10: Envasado y rotulado infusiones naturales



VI. Una vez obtenido crecimiento bacteriano se procedió a diluir el

microorganismo hasta que alcance una turbidez de 0,5 en la escala de

Mc Farland.

55

Figura 11: Medición de turbidez Mc Farland



VII. Luego se inoculó con hisopos estériles en agar Mueller Hinton

suplementado con 5% de sangre de la misma manera que se realizó la

siembra anterior.

Figura 12: Inoculación en agar Müller Hinton



56

VIII. Cabe destacar que se harán 12 repeticiones con el fin de no caer en una

repetitividad excesiva

IX. Se impregnaron discos de papel filtro estériles en blanco en las cuatro

sustancias a investigar mediante el uso de la micropipeta.

Figura 13: Colocación soluciones en discos blanco



X. En cada caja Petri se colocó 4 discos de papel filtro impregnados cada

uno en los diferentes colutorios obtenidos: Fenólico, menta, eucalipto,

aloe vera

XI. Además se colocó un disco de papel embebido en clorhexidina al 2%

como grupo control positivo y otro en suero fisiológico como control

negativo en un cultivo al azar.

57

Figura 14: Control positivo (clorhexidina)



Figura 15: Control negativo (suero fisiológico)



XII. Cada disco se rotuló con el respectivo número de colutorio utilizado

58

Figura 16: Rotulación de discos 1 menta, 2 eucalipto, 3 aloe vera, 4 colutorio fenólico, 5 control positivo, 6 control

negativo



XIII. Se introdujo nuevamente en la incubadora a 37 oC por 24 horas.

XIV. Al cabo de este período se midió con una regla los milímetros del halo

de inhibición producidos en cada una de las muestras anotando en el

registro para la recolección de datos los resultados obtenidos. (anexo 3).

Todo este proceso en el Laboratorio está basado en los estudios

realizados por Aguilera et al. (5)

en 2011, Yañex & Cuadro (30)

en 2012 y

Kamalinejad (54)

et al.en 2014

59

Figura 17: Medición halos de inhibición



XV. Para el adecuado manejo de desechos las cajas Petri fueron esterilizadas

en autoclave para posteriormente ser recolectados en una funda plástica

de color rojo y rotulados como infectocontagiosos conjuntamente con

otros elementos utilizados por la microbióloga y el investigador, para ser

almacenados en el contenedor general de desechos infecciosos del

laboratorio, para ser llevados por el personal encargado al contenedor

general de la Facultad de Odontología de la UCE, y finalmente ser

enviados a la empresa GADERE quienes manejan el servicio integral de

60

desechos ambientales conforme al acuerdo No. 142 Suplemento-registro

oficial No 856 del 21 de diciembre del 2012 (anexo 4)

Figura 18: Colocación de desechos en contenedor



XVI. Una vez recopilados los resultados, estos se ingresaron en el programa

Excel para ser tabulados y graficados para mejorar su comprensión

finalizando con su análisis en un paquete estadístico determinado por el

especialista en este campo.

3.6 ASPECTOS ÉTICOS

De acuerdo con los principios establecidos en la constitución de la República

del Ecuador según el Acuerdo Ministerial 4889 de julio 01 del 2014, y debido a que

esta investigación es considerada como una investigación sin riesgo y en

cumplimiento con los aspectos mencionados con el artículo 6 de la presente

resolución, este estudio se desarrolló conforme a los siguientes criterios:

Al tratarse de una investigación in vitro no existe comprometimiento en la

integridad de ningún sujeto.

61

CAPÍTULO IV

4. ANÁLISIS DE DATOS

Una vez realizada la parte experimental del proyecto de investigación se recopilaron

las medidas de los halos de inhibición producidas por cada uno de los colutorios

naturales y fenólico, lo cual fue registrado en la matriz previamente diseñada,

quedando de la siguiente manera:

COLUTORIOS UTILIZADOS

CAJA

No

(1)MENTA

mm halo

(2) EUCALIPTO

mm halo

(3)ALOE VERA

mm halo

(4)FENÓLICO

mm halo

1 8 9 9 8

2 8 8 11 9

3 8 8 8 8

4 9 8 8 8

5 8 8 8 8

6 9 10 11 10

7 8 8 8 8

8 8 8 8 8

9 8 9 11 9

10 8 8 8 8

11 9 10 10 9

12 8 8 8 8

Tabla 1: Resultados medición halos


Fuente: Laboratorio microbiológico

62

Así mismo se obtuvo la medida de los halos formados alrededor de los discos

control:

CAJA

No

(5)CONTROL

POSITIVO

CLORHEXIDINA

(6)CONTROL

NEGATIVO

SUERO

FISIOLOGICO

mm halo mm halo

1 20 0

Tabla 2: Resultado medición halos sustancias control



4.1 ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Con los datos obtenidos se puede exponer las medidas de tendencia central tales como

la media, la mediana o la moda, siendo la primera el valor promedio entre las medidas

obtenidas; así:


Fuente: In. Juan Molina

Descriptivos

HALOS (mm) Media

Desviación Error 95% del intervalo de

confianza para la media Mínimo Máximo

Estándar Estándar Límite

inferior

Límite

superior

MENTA 8,25 0,45 0,13 7,96 8,54 8,00 9,00

EUCALIPTO 8,50 0,80 0,23 7,99 9,01 8,00 10,00

ALOE VERA 9,00 1,35 0,39 8,14 9,86 8,00 11,00

FENÓLICO 8,42 0,67 0,19 7,99 8,84 8,00 10,00

CLORHEXIDINA 20,00 0,00 0,00 20,00 20,00 20,00 20,00

SUERO FISIOLOGICO 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

Total 9,03 5,90 0,70 7,64 10,41 0,00 20,00

Tabla 3: Media o promedio entre halos de inhibición

63

En esta tabla se puede apreciar el tamaño promedio de los halos de inhibición

formados por cada colutorio investigado en los 12 cultivos, así como el tamaño mínimo y

máximo.

De tal modo que se puede apreciar que ninguno de los colutorios se acercaron a la

media del control positivo, sin embargo se expone que aloe vera obtiene el mejor resultado

y menta el menor, aunque ninguno de estos con una diferencia significativa. De igual

manera se observa que el control negativo no produjo ningún valor.

Esto se puede visualizar de mejor manera en los siguientes gráficos:



Menta Eucalipto Aloe vera C. Fenólico

Mediana (Me) 8 8 8 8

Moda (Mo) 8 8 8 8

Tabla 4: Mediana y Moda



8,25 8,50 9,00 8,42

20,00

0,00

MEN

TA

EUC

ALI

PTO

ALO

E V

ERA

FEN

ÓLI

CO

CLO

RH

EXID

INA

SUER

OFI

SIO

LOG

ICO

Comparación de Medias

Gráfico 5: Media de halos de inhibición

64

En cuanto a la moda y la mediana todos los colutorios presentan un resultado de 8,

mostrando de esta manera la poca o casi nula diferencia que existe entre ellos en cuanto a

la formación de halos de inhibición.

Ahora bien para establecer si en este estudio se utilizan procedimientos estadísticos

paramétricos o no paramétricos inicialmente se verifica que las muestras tomadas

provienen de una población con distribución Normal, esto se realiza con las pruebas de

Kolmogorov - Smirnov o con la prueba de Shapiro - Wilk (menor a 20 datos), luego vamos

a probar si:

Ho (Hipótesis inicial): La muestra proviene de una población con distribución Normal

Ha (Hipótesis alterna): La muestra NO proviene de una población con distribución Normal

Pruebas de normalidad

Kolmogorov – Smirnov Shapiro – Wilk

Estadíst

ico Gl Sig. Estadístico gl Sig.

MENTA 0,460 12 0,000 0,552 12 0,000

EUCALIPTO 0,401 12 0,000 0,662 12 0,000

ALOE VERA 0,354 12 0,000 0,705 12 0,001

FENOLICO 0,400 12 0,000 0,674 12 0,000

Tabla 5: Pruebas de normalidad


Fuente: Ing. Juan Molina

De la prueba de Shapiro-Wilk todos los valores de significación (Sig.) son menores

a 0,05 (95% de confiabilidad) luego aceptamos Ha, esto es todas las muestras NO proviene

de una población con distribución Normal, como se observa en los siguientes gráficos:

65



Como se observa que ninguna gráfica se asemeja a la curva normal (forma

de campana) se verifica que las muestras no surgen de una población normal,

entonces aplicamos pruebas no paramétricas para la comparación entre las

muestras:

4.2.1 Pruebas no paramétricas: Kruskal-Wallis

Ho: (hipótesis nula) Las muestras proceden de poblaciones con la misma

distribución de probabilidad.

Ha: (hipótesis alternativa) Existen diferencias respecto a la tendencia

central de las poblaciones y puede ser direccional o no.

Gráfico 6: Curvas de normalidad

66

Descriptivos

HALOS (mm) N Media Desviación

estándar

Error

Estándar

95% del intervalo

de confianza para

la media

Mínim Máxim Límit

e

inferi

or

Límite

superior

MENTA 12 8,2500 0,45227 0,13056

7,962

6 8,5374 8,00 9,00

EUCALIPTO 12 8,5000 0,79772 0,23028

7,993

2 9,0068 8,00 10,00

ALOE VERA 12 9,0000 1,34840 0,38925

8,143

3 9,8567 8,00 11,00

FENÓLICO 12 8,4167 0,66856 0,19300

7,991

9 8,8414 8,00 10,00

CONTROL

POSITIVO

CLORHEXIDINA

12 20,000 0,00000 0,00000 20,00

0 20,0000 20,00 20,00

CONTROL

NEGATIVO

SUERO

FISIOLOGICO

12 0,0000 0,00000 0,00000 ,0000 ,0000 0,00 0,00

Total 72 9,0278 5,90052 0,69538

7,641

2 10,4143 0,00 20,00

Tabla 6: Prueba de Kruskal- Wallis Autor: El investigador


67

Gráfico 7: Prueba de Kruskal-Wallis



De la Prueba de Kruskal-Wallis Sig. asintót. = 0,000 es menor a 0,05 (95% de

confiabilidad), luego existen diferencias respecto a la tendencia central de las poblaciones.

No todas son similares, para verificar cuales son similares, se realizan pruebas dos a dos:

68

Gráfico 8: Comparaciones por parejas de sustancias Autor: El investigador


Tabla 7: Prueba dos a dos Autor: El investigador


69

De las pruebas dos a dos se tiene que son diferentes la CLORHEXIDINA y el

SUERO FISIOLÓGICO, el resto de sustancias son estadísticamente similares lo que

demuestra una vez más la poca diferencia que posee cada colutorio para formar halos

de inhibición frente a S. sanguinis.

70

4.3 DISCUSIÓN

La placa dentobacteriana se ha constituido como una de las entidades más

prevalentes y patógenas en cuanto a salud oral se refiere conjuntamente con la caries,

por lo que se han realizado una serie de estudios para determinar los microorganismos

que la componen, siendo el Streptococcus sanguinis el pionero en su formación. Así

también con el pasar de los años se ha intensificado la búsqueda de métodos eficaces

para disminuir, controlar o evitar la aparición de biofilm como lo es el uso de

colutorios. Por lo que el presente trabajo de investigación se realizó con el fin de

buscar el enjuague bucal ya sea con base natural (menta, eucalipto, aloe vera) o con

base sintética (fenólico) que presente mayor efectividad para inhibir el crecimiento de

Streptococcus sanguinis, cuya importancia radica como ya se expuso en distinguirse

como microorganismo pionero en la formación de placa dentobacteriana.

De este modo este estudio in vitro determinó el colutorio idóneo para controlar

biofilm, similar a lo que realizó Aguilera (5)

en 2011, pero con una gran diferencia

puesto que este autor utilizó cepas liofilizadas y puras de Streptococcus mutans

mientras que el autor de este trabajo de investigación más bien utilizó cepas de

Streptococcus sanguinis. Por otra parte Villalobos (47)

en 2001 realizó algo diferente ya

que conformó un estudio in vivo para evaluar el uso de colutorios para el control de

placa bacteriana, lo cual también se asemeja con el estudio expuesto por Ge, Caufield,

Fish & Li (55)

quienes en 2008 realizaron un análisis in vivo con 22 niños en los que

evaluaron la relación de la existencia de S. mutans y S. sanguinis en la aparición de

caries.

Además esta investigación se realiza con el muestreo denominado por juicio o

discrecional en el que el laboratorio microbiológico indica que el número de cultivos a

elaborar debe ser de 12, con el fin de evitar una excesiva repetitividad, Yáñez &

Mogollón (30)

en 2012 utiliza también el mismo tipo de muestreo, aunque en su estudio

se evidencia la elaboración de un solo cultivo por cada bacteria utilizada, tales como el

Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Bacillus subtilis y

Enterococcus faecalis. Gaete (35)

en 2012 más bien expone su trabajo mediante el

muestreo denominado no probabilístico por conveniencia similar a lo expuesto por

Cárcamo (56)

en 2011.

71

De tal manera, el presente estudio evaluó enjuagues naturales a base de menta,

eucalipto y aloe vera fabricados mediante el concepto de infusión natural y los

comparó con un enjuague a base de compuestos fenólicos, similar a lo realizado por

Madrigal (29)

en 2009 quien también valoró enjuagatorios naturales vs comerciales, sin

embargo dicho autor no utiliza infusiones sino más bien aceites esenciales, además

utiliza elementos naturales diferentes como la hierbabuena en lugar de aloe vera, y no

solo usa colutorios fenólicos sino también enjuagues comerciales (Colgate Plax y

Clorhexil), encontrando que el Listerine resulta ser el mejor para control de biofilm lo

cual también difiere con el autor del presente estudio ya que este expone que el

enjuagatorio fenólico resultó ocupar el tercer lugar. Kamalinejad (54)

en 2014 difiere de

este estudio puesto que dicho autor utiliza para su investigación el extracto de Rush

colaria la misma que se muestra eficaz contra el S. sanguinis, por su parte Sadanand

(57) en 2016 hace algo diferente ya que utiliza enjuagues de clorhexidina y granadilla

para inhibir microorganismos formadores de biofilm.

En este reporte bibliográfico se realiza la evaluación mediante la medición de los

milímetros de los halos de inhibición formados alrededor de cada disco de papel filtro

impregnado con las diferentes sustancias utilizadas, encontrando que aloe vera formó

9 mm siendo de tal modo el más eficaz, mientras que menta formó 8.25 mm siendo el

de menor eficacia; lo que se asemeja a lo elaborado por Azam Aliasghari (58)

en 2016

quien para desplegar sus resultados también se valió del análisis de los milímetros

formados alrededor de las diferentes bacterias cariogénicas utilizadas (sanguinis,

mutans, salivarius, sobrinus), encontrando que el quitosano produce un halo

inhibitorio entre 8.5-13.5mm, lo cual exhibe una validez aceptable. Cárcamo (56)

en su

artículo publicado en 2011 difiere ya que en su estudio la evaluación de los colutorios

se la hizo a través del conteo de UFC en las placas de agar y reafirmado con el índice

de Loe Silness lo que le arrojó como respuesta que el enjuagatorio con manzanilla se

muestra como eficaz debido a que tiene una duración de efecto de 4 a 6 horas.

Una vez que se realizó la medición de los halos de inhibición se conformó un

análisis de resultados, dando como consecuencia que el colutorio a base de aloe vera

presente un promedio de 9 mm, superando de este modo a los enjuagatorios a base de

menta eucalipto e inclusive al colutorio comercial fenólico. Prashant (59)

en 2007

encontró que el colutorio natural de mango producía resultados aceptables en cuanto a

72

los mm de los halos alrededor de cepas de Streptococcus cariogénicos (sanguinis,

salivarius, mutans). Mientras tanto Madrigal (29)

evidencia que los colutorios

comerciales obtienen un mejor resultado sobre los colutorios naturales, lo cual difiere

del presente estudio ya que este enjuague apenas ocupa el tercer puesto ya que

presentó una media de 8.41 mm por debajo de aloe vera y eucalipto con 9 y 8.5 mm

respectivamente. Camejo (60)

en su publicación de 1999 más bien cita que el Gluconato

de clorhexidina mantiene una media de 8.2 mm de halo alrededor de los discos, lo cual

discierne un tanto de la presente publicación ya que dicha sustancia formó un halo de

20 mm aunque en un solo cultivo ya que se lo tomó como control positivo.

Al finalizar este reporte investigativo se concluye que los colutorios naturales de

eucalipto y aloe vera muestran una leve superioridad sobre colutorios comerciales con

bases fenólicas, no solo por los promedios en cuanto a los halos de inhibición sino

además por los diversos estudios científicos que demuestran los muy pocos efectos

adversos que en ellos se distinguen. Por su parte Charles (61)

en 1999 concluyen su

trabajo expresando que los fenoles y aceites esenciales poseen una grata efectividad

para reducir placa bacteriana. Larrueca (14)

en cambio concluye su proyecto

investigativo exponiendo que las infusiones naturales a base de té natural son eficaces

para inhibir cepas de Streptococcus. Estas conclusiones diferentes entre autores se

deben quizá a las diferentes metodologías utilizadas así como también a la población

estudiada.

73

CAPÍTULO V

5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

5.1 CONCLUSIONES

Se midió los halos de inhibición producidos por los colutorios naturales y sintéticos

utilizados, exhibiéndose para aloe vera 9 mm, eucalipto 8.5, fenólico 8.41mm y

menta 8.25mm.

Se determinó que las infusiones naturales eucalipto y aloe vera poseen una

capacidad aceptable para inhibir crecimiento de Streptococcus sanguinis.

Se estableció que el enjuague comercial fenólico presenta moderada capacidad

inhibitoria frente al Streptococcus sanguinis.

Se comprobó que las infusiones naturales eucalipto y aloe vera muestran mejor

eficacia para inhibir cepas de Streptococcus sanguinis frente a colutorio fenólico.

74

5.2 RECOMENDACIONES

Es oportuno promover la realización de estudios afines a la presente

investigación, puesto que el uso de técnicas que favorezcan el control del biofilm a la

hora de ser preventivas se hacen verdaderamente necesarias debido a la prevalencia

que mantiene dicha entidad patológica. En el mismo contexto y debido a las buenas

características y resultados obtenidos en el presente estudio se invita no solo a utilizar

colutorios con bases naturales como método coadyuvante en higiene oral sino que con

la utilización de los mismos se puede realizar control de placa en grandes poblaciones

debido a su bajo costo pudiendo ser utilizado en brigadas públicas de salud oral.

75

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63. Katz S. Odontología preventiva en acción Buenos Aires: Panamericana; 1989.

79

ANEXOS

ANEXO 1: ACEPTACION DE TUTORIA

80

ANEXO 2: CAMBIO DE TEMA

81

ANEXO 3: FORMATO PARA RECOLECCION DE DATOS

CAJA

No

MENTA(1) EUCALIPTO(2) ALOE VERA(3) FENÓLICO(4)

mm halo mm halo mm halo mm halo

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

No. CONTROL

POSITIVO(5)

CONTROL

NEGATIVO(6)

mm halo mm halo

1

82

ANEXO 4: MANEJO DE DESECHOS

83

ANEXO 5: SOLICITUD USO DE LABORATORIO

84

ANEXO 6: CERTIFICADO AUTENTIFICACION STREPTOCOCCUS

SANGUINIS

85

ANEXO 7. CERTIFICADO ESTADÍSTICO

86

ANEXO 8: CERTIFICADO COMITE DE ETICA

87

ANEXO 9: CERTIFICADO ANTIPLAGIO

universidad central del ecuador facultad de … · a mi tutor dr. fabricio cevallos por brindarme...

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