toma de muestra

INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE y MEDICINA TROPICAL“LEOPOLDO IZQUIETA PEREZ” (INHMT)

PROCESO DE INVESTIGACION Y DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICOLABORATORIO DE PARASITOLOGIA

Toma de Muestra para

LeishmaniaDra. Q.F. Yim Yan Wong Ch.

Instituto Nacional de Higiene “LIP”

Sub-Proceso de ParasitologiaMarzo 2011

Toma de Muestra para Leishmania.

Fecha de nacimiento: _____________________________Edad:__________________

Lugar de residencia:______________________________________________________

Sexo: F M

Establecimiento que solicita el examen:______________________________________

Recibe medicación? Si No Si la respuesta es sí, mencione cual_________________

Ud ha presentado:

Fiebre Pérdida de apetito Pérdida de peso

Malestar general Picaduras por mosquitos Lesiones en piel/mucosas

En el siguiente gráfico señale con una cruz dónde presenta las lesiones

:

Fichas Leishmania

: Desde cuando tiene las lesiones? _______________________________ *Estas lesiones le causan : Dolor Picazón *Estas lesiones presentan: Pus Mal olor Enrojecimiento

*Esta lesión es: Nodular Placa *Conoce a alguna otra persona que tenga Lesiones similares a la suya? __________ Dónde? ___________________________

Método Directo

Frotis Biopsia Cultivo

Método Indirecto

Reacción de Montenegro PCR Inmunofluorescencia indirecta



Metodo Directo.Frotis

Bisturi romo Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto


Lesion de ulcera

Tinciòn

Fijar con alcohol la Placa portaobjeto Colorante Wright o Guiemsa Enjuague y dejar secar la placa


Microscopio

Objetivo 100X 1 gota de aceite de inmersión

Observacion Microscopio

Amastigotes de Leishmania (tinción)

Presenta: Kinetoplasto y nucleo coloreado intensamente.



Metodo DirectoBiopsia

Sacabocado Tijeras pinza o pinza Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto

Metodo Directo Medio de Cultivo

Agar Sangre de conejo al 20% Jeringuillas de insulina (aguja 20-21) Solución Salina Estéril Mechero Guantes


Método IndirectoReacción de Montenegro

Jeringuilla de Insulina Leishmanina Alcohol y Algodón


Método IndirectoPCR Equipos Cámara de flujo tipo 2 Vortex Microcentrífuga Congelador de -80ºC Congelador de -20ºC Baño maría o termobloque Balanza


Areas en Biologia Molecular.

AREA BLANCA O DE MIX.- Espacio destinado a la preparación de reactivos y MIX para la PCR, donde no ingresa material genético ya sea ARN o ADN.

AREA GRIS O DE EXTRACCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS.- Ambiente destinado a la extracción de ARN ó ADN, también se realiza allí se mezclan los reactivos del MIX con los ácidos nucleídos extraidos.

AREA NEGRA.- Es el espacio donde se realizará la corrida electroforética del amplicón, también se observaran y documentaran los resultados obtenidos en los geles de agarosa.


Reactivos

Kit DNA Blood MINIKIT QIAmp

Muestra

Impresión de la muestras en papel filtro.


Materiales Papel absorbente Cajas para almacenar muestras de 96 células para tubos de

1,5ml Micropipetas graduable Puntas con filtro para Micropipetas de 0.5, 5, 20 y 200 ul. Gradillas Seguros para microtubo de 1,5ml Papel de parafina Marcadores permanente punta fina Guantes desechables Contenedores desechables Microtubos de 1.5 ml Tijeras



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