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1. INTRODUCCIÓN
La superficie plantada de limoneros en Chile se estimó el año 2001 en alrededor de
7.700 ha, de las cuales siguen predominando las variedades tradicionales: Génova y
Eureka. Se ha observado que los productores citrícolas chilenos han buscado
condiciones agroclimáticas más protegidas para desarrollar este cultivo, desde la RM
hacia el norte, favoreciendo de esta manera la producción de verano. Si bien, Chile
tiene una escasa participación en el mercado mundial de cítricos, exporta cantidades
atractivas de limones, crecientes de clementinas y más moderadas de naranjas
(ODEPA, 2002).
Desde 1996 las exportaciones de limones han mostrado una tendencia al alza, esto
influenciado directamente con el inicio de las exportaciones a Japón, el cual
constituye un importante mercado para la colocación de las frutas cítricas, siempre y
cuando se logren cumplir las elevadas exigencias de calidad de los consumidores
japoneses (ODEPA, 2002; MAGDAHL, 1998). Las transacciones con Japón han
evolucionado desde valores extremadamente altos a niveles normales e incluso bajos.
No obstante, se piensa que los retornos a productor para la fruta enviada a ese
mercado, aún se mantendrían por sobre el doble que los que se reciben por las
exportaciones al mercado norteamericano. Los precios FOB han fluctuado alrededor
de US$ 1,1/kg para Japón y en Estados Unidos se han localizado en los US$ 0,55/kg
(ODEPA, 2002).
La producción nacional se concentra principalmente entre los meses de julio y agosto.
Esta distribución se debe a que las principales variedades plantadas en Chile
corresponden a Génova y Eureka, las cuales concentran su producción en los meses de
invierno (MAGDAHL, 1998). Los mayores volúmenes de embarques se realizan en
los meses de invierno, concentrándose en julio y agosto. Rechazos por residuos de
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fungicidas o por alteraciones de calidad en partidas de productos orgánicos, son
indicadores de las dificultades que significa incursionar en mercados de alta exigencia,
como es Japón (ODEPA, 2002).
Según ÁLVAREZ (1997), los envíos al mercado nipón han tenido problemas de
condición de la fruta a su llegada a destino. Los principales inconvenientes se han
presentado por desarrollo de hongos y especialmente por la presencia del desorden
fisiológico llamado peteca.
RAZETO (2000) señala que una de las principales pérdidas en la producción de
limones es la alteración denominada peteca, si bien este desorden no llega a la pulpa,
si provoca problemas en la apariencia externa del fruto, el cual puede perder parcial o
totalmente su valor para la venta en fresco.
La peteca, es un desorden fisiológico, que se presenta generalmente en postcosecha y
se caracteriza por la presencia de depresiones circulares necrosadas, algunas veces de
color grisáceo, comprometiendo al albedo (cáscara) del fruto (LATORRE, 1995;
RAZETO, 1987; KLOTZ, 1973; KHALIDY, JAMALI Y BOLKAN, 1969).
Aún no se tiene la certeza absoluta de cual es la causa de este desorden fisiológico,
pero si se tiene cierta claridad en los elementos que participarían en el desarrollo de
peteca. Uno de los factores que estaría muy relacionado con el fenómeno, es la
presencia de un desbalance y déficit de calcio. Se ha observado además, una gran
presencia de cristales de oxalato de calcio en los frutos que desarrollan este fenómeno
(LUTTGES, 2000; BONELLI, 1998; KHALIDY, JAMALI Y BOLKAN, 1969).
RAZETO (2000) indica que el problema estaría relacionado con las condiciones
meteorológicas reinantes durante el periodo de maduración del fruto. Según
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FAWCETT (1936), citado por SCHULTZE (2000), la incidencia de peteca es
importante cuando los frutos se desarrollan durante largos periodos de bajas
temperaturas, con presencia de una alta humedad relativa y lluvias en los meses de
invierno. Según SCHULTZE (2000) la peteca aparece coincidentemente con el
ascenso de la humedad relativa, el descenso de la temperatura y con el inicio de las
lluvias invernales.
Hipótesis:
El presente trabajo plantea que existe relación entre la fecha de cosecha, estado de
madurez y ubicación del fruto en la copa del limonero cv. Eureka, y el desarrollo de
peteca en postcosecha.
Para el siguiente ensayo se han fijado los siguientes objetivos:
Objetivo general:
• Determinar si existe efecto de la fecha de cosecha, estado de madurez y ubicación
del fruto en la copa del limonero cv. Eureka, sobre la incidencia de peteca en
postcosecha.
Objetivos específicos:
• Evaluar el efecto de la influencia de la fecha de cosecha sobre la incidencia de
peteca.
• Evaluar el efecto de la influencia de dos estados de madurez de la fruta sobre el
desarrollo de peteca en postcosecha.
• Evaluar el efecto de la influencia de la ubicación (Norte superior e inferior y Sur
superior e inferior) sobre la incidencia de peteca en postcosecha.
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• Evaluar el efecto del almacenaje refrigerado, ubicación del fruto en el árbol y
estado de madurez sobre los parámetros de calidad (grosor de cáscara, porcentaje
de jugo, sólidos solubles, pH, acidez titulable y color).
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2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
2.1. Características del fruto :
El fruto del limonero es un hesperidio, que es un tipo de baya. La cáscara o pericarpio
está compuesta por una capa externa llamada epicarpio o flavedo, coloreada por
carotenos, otra capa interna esponjosa y blanca llamada mesocarpio o albedo. Flavedo
y albedo envuelven al endocarpio que es la pulpa de ocho o más segmentos. Estos
segmentos contienen vesículas de jugo que desarrollan células grandes denominadas
vacuolazas (GIL, 2000).
El albedo (mesocarpio interno), corresponde a parénquima esponjoso, el cual se
encuentra adherido a las paredes externas de los lóbulos, es un tejido bastante
desorganizado y de color blanco en la mayoría de los frutos cítricos (SCHNEIDER,
1968).
Las frutas cítricas poseen una curva de crecimiento del tipo sigmoidea simple y su
crecimiento se desarrolla en tres etapas bien marcadas (UNDURRAGA, 1998). La
etapa I abarca desde la antesis hasta el final de la caída fisiológica de los frutos y se
caracteriza por una intensa división celular, especialmente del pericarpio, el cual al
término de esta etapa alcanza su espesor máximo. La etapa II es un período que se
prolonga por varios meses, y va desde el final de la caída fisiológica hasta poco antes
del cambio de color de la fruta. En esta fase las vesículas de jugo comienzan a
acumular agua lo que provoca un aumento de su tamaño, la tasa de crecimiento de la
piel baja, pero comienza la elongación celular. En la etapa III hay un reducido
crecimiento del fruto y se produce el cambio de color, es decir, la degradación de la
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clorofila y el paso de cloroplasto a cromoplasto. En esta etapa se desarrolla el proceso
de maduración de la fruta (ERICKSON, 1968).
2.2. Características de la especie y la variedad:
El limón o limonero en Chile se cultiva en lugares con mesoclima abrigado en las
regiones IV, V, Metropolitana y VI. Las variedades más importantes son Fino 49,
Génova, Eureka y Lisboa (GIL, 2000). Tener un clima adecuado para la producción de
cítricos de calidad es un factor muy importante. Tanto en el hemisferio Sur como en el
Norte las áreas de producción donde se obtiene la fruta de mayor calidad se encuentra
entre las latitudes 32 y 40 grados (LEE, 1998).
El cv. Eureka fue obtenido en California en el año 1858, es el más importante en
California y la primera variedad del mundo. Es reflorescente, con mayor o menor
intensidad dependiendo del clima del lugar, de vigor y tamaño medio, poco espinoso y
con tendencia a fructificar al final de largas ramas, muy precoz, sensible al frío y a la
salinidad. El fruto es de tamaño medio, con forma elíptica, mamelón apical delgado y
de longitud variable. Corteza de espesor medio y de superficie finamente punteada
con glándulas de aceite hundidas. Su producción está distribuida a lo largo de todo el
año, aunque la más importante es la de finales de invierno (GARCÍA, 1998). Eureka
es una variedad muy importante en Chile debido principalmente a ser altamente
productivo sobretodo cuando está sobre portainjerto Citrus macrophylla. El problema
de Eureka radica en que presenta incompatibilidad con los principales híbridos de
naranjo trifoliado, lo que sería un factor que estaría limitando su plantación
(ORTUZAR, 1997).
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2.3 Variables climáticas importantes que determinan la calidad de las frutas cítricas:
2.3.1 Temperatura
La variable climática más importante a tener en cuenta en el cultivo de los cítricos es
la temperatura, la cual ocupa un lugar determinante en aspectos tan importantes como
la floración, el desarrollo vegetativo, el cuajado y la calidad de los frutos.
Temperaturas de 25ºC a 30ºC se consideran óptimas para la actividad fotosintética.
Las bajas temperaturas y el estrés hídrico traen como consecuencia la detención del
desarrollo radicular, lo que restringe el aporte de giberelinas a la copa. Temperaturas
por debajo de los 13º inducen al cambio de color en los frutos, mientras que por el
contrario el reverdecimiento se ha relacionado con las temperaturas elevadas. La
mayor degradación de clorofilas y la mayor síntesis de carotenoides tienen relación
con la exposición de los frutos a combinaciones de días cálidos y noches frías, además
de bajas temperaturas de suelo. Temperaturas menores a 0ºC afectan de forma
importante el desarrollo del árbol y la calidad del fruto. El limonero es la especie
cítrica como árbol más sensible a las bajas temperaturas, seguida del pomelo y el
naranjo dulce, siendo el mandarino el más resistente. Como fruta el limón en cambio,
es el más resistente, seguido de la mandarina, la naranja y el pomelo (AGUSTÍ, 1999).
Las bajas temperaturas nocturnas durante la estación de crecimiento inducen a un
retraso de la maduración de la fruta en comparación a otros países del hemisferio sur
como Argentina y Sudáfrica. Estas condiciones no permiten expresar el mayor
potencial de crecimiento del fruto, por que el tamaño del fruto a igual nivel de carga y
manejo podría ser inferior al obtenido en climas más cálidos. Sin embargo el clima
mediterráneo que existe en la zona central de Chile, es muy favorable para producir
fruta de alta calidad, con un cáscara libre de daños de enfermedades fungosas y de
plagas como lo que ocurre en zonas tropicales (ORTUZAR, 1997).
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SCHULTZE (2000), indica que los huertos con mayores temperaturas, tanto máxima
como mínima y de mayores oscilaciones térmicas durante el período de maduración,
presentan frutos de coloración más amarilla.
2.3.2 Lluvia y humedad relativa:
Los cítricos en general se adaptan muy bien a una gran variedad de valores de
humedad relativa, por eso es posible cultivarlos en regiones desérticas, subtropicales y
tropicales. Este factor ambiental es muy importante en lo que respecta a la calidad del
fruto. Lluvias otoñales en los climas templados mejoran el tamaño final de la fruta y
su contenido de jugo. Las estaciones secas y calurosas coinciden con el período de
crecimiento y desarrollo activo del fruto. Déficit hídricos durante este período pueden
provocar retrasos irrecuperables en la determinación del tamaño final de la fruta
(AGUSTÍ, 1999).
Fruta cosechada bajo condiciones de elevada humedad (rocío, lluvias, etc.)
comprometen su calidad, al aparecer desordenes fisiológicos, como oleocelosis debido
a ruptura de glándulas de aceite en la fruta (MAZZUZ, 1996). Por otro lado se sabe
que fruta cosechada alejada de una lluvia implica una menor incidencia de peteca en
limones (BONELLI, 1998).
2.4 Peteca y factores que inciden en su desarrollo:
La peteca (gr., mancha), es un desorden fisiológico observable en limones de invierno,
que se caracteriza por depresiones circulares que aparecen en forma dispersa en la
superficie del fruto (Figura 1), afectando al albedo el cual se necrosa y deseca
(LATORRE, 1992; RAZETO, 1987; KLOTZ, 1973; KHALIDY, JAMALI Y
BOLKAN, 1969).
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Figura 1. Limón con claros daños de peteca.
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La peteca, es un problema que se manifiesta generalmente luego que la fruta es
cosechada, aunque en algunas ocasiones se presenta con la fruta en el árbol
(SCHULTZE, 2000; LATORRE, 1992; WILD, 1991; RAZETO, 1987).
Según SCHULTZE (2000) los síntomas de peteca en los frutos almacenados, se
detectan luego de una a tres semanas conservados a una temperatura de entre 7 y 9ºC
y con una humedad relativa del 90 a 95%.
La influencia de factores climáticos, principalmente temperatura y humedad relativa
son muy importantes en su manifestación. La peteca tiende a aparecer
coincidentemente con el descenso de la temperatura ambiente y con el aumento de la
humedad relativa (SCHULTZE, 2000; GOMEZ, 1984; KLOTZ, 1978).
Se ha observado que el máximo número de frutos que manifiestan este desorden se
presenta a fines de junio, siendo nulos los que la presentan a fines de agosto, todo esto
muy correlacionado con la disminución de la humedad relativa y el aumento de la
temperatura mínima y máxima diaria (SCHULTZE, 2000).
Por otro lado SALERNO (1963), citado por WILD (1991), señala que la posición del
fruto en el árbol es un factor importante en la incidencia de peteca, mostrando una
mayor susceptibilidad la fruta ubicada en la cara este de la copa. Se ha visto que la
ocurrencia de peteca es mayor en los frutos ubicados en la parte exterior de la copa del
árbol, mientras que aquellos ubicados en el interior muestran una menor incidencia del
desorden (SCHULTZE, 2000).
Según GOMEZ (1984) los mayores problemas de peteca se observan en fruta
cosechada en condiciones de alta humedad sobre los frutos por efecto de la lluvia o
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del rocío. Además observó que el desorden se presenta con mayor frecuencia en
árboles sombríos que en árboles ubicados en sectores más soleados. BONELLI
(1998), indica que a medida que la recolección se realiza más distanciada de una
lluvia, la incidencia de peteca es menor, lo que estaría relacionado a condiciones de
elevada humedad del aire y bajas temperaturas durante la cosecha.
Un factor que también podría estar incidiendo en el desarrollo de peteca, es el estado
de latencia, en que los árboles de limonero se encuentran en el momento en que
aparece el desorden. En junio, mes en que el desarrollo de peteca es máximo, el
limonero generalmente experimenta una fuerte desfoliación, probablemente bajo estas
condiciones, el fruto aumente su sensibilidad al desorden, el cual se estaría expresando
en plenitud, cuando se separa la fruta del árbol (RAZETO, 2000).
Diversos antecedentes indican que una planta sometida a stress presenta una mayor
incidencia de peteca. BLOKHINA (2003), señala que bajo condiciones de estrés, las
plantas superiores generan compuestos reactivos al oxígeno como son peróxidos de
hidrógeno, anión superóxido y radical hidroxilo, los cuales pueden aumentar la
capacidad de lignificación y reaccionar con proteínas y lípidos de membrana,
modificando su estructura y función. Frente a estos eventos, la planta responde
activando mecanismos de defensa que dan origen al aumento en la expresión de genes,
que codifican ciertas enzimas como es el caso de peroxidasas e inhibidores de
proteasas (MARTINS, 1995).
Otro factor que se ha relacionado con este desorden fisiológico, es el déficit de calcio.
El calcio, es un elemento esencial para los vegetales y juega un rol fundamental en
muchos eventos fisiológicos. En variados tipos de fruta, bajos en niveles de calcio
pueden afectar drásticamente la calidad y el valor comercial de la fruta. Se ha visto
que desordenes fisiológicos como el bitter pit y la mancha corchosa en manzanas
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están relacionadas con déficit de calcio. Además en el último tiempo se ha dado
mucha importancia al ablandamiento y pudrición de postcosecha, como resultado de
deficiencias de calcio en la fruta, problemas que claramente se reducen al aumentar el
contenido de este elemento (BRAMLAGE, 1995).
LUTTGES (2000), al hacer análisis histológicos de la fruta, observó gran cantidad de
cristales de oxalato de calcio en la corteza de la fruta dañada (tipo rafidios y drusas).
Por otro lado KHALIDY, JAMALI Y BOLKAN (1969) al hacer cortes histológicos a
las zonas afectadas con peteca pudieron observar como las células epidermales
presentan un aspecto normal, aunque se encuentran fuertemente cutinizadas, las
células hipodérmicas se encontraron completamente resecas y encogidas, además de
presentar una coloración oscura. Por medio de estas observaciones pudieron concluir
que la peteca ocurre debajo de la pared externa del epicarpio y sobre la capa interna
del mesocarpo de la corteza del fruto.
En lo que respecta a madurez de cosecha BONELLI (1998) y LUTTGES (2000)
indican que los limones plateados son significativamente menos susceptibles a
desarrollar peteca, que aquellos cosechados de color amarillo con una madurez más
avanzada. Esto estaría relacionado que los limones plateados tienen una mayor
facilidad para formar cristales de oxalato de calcio a nivel de albedo.
No existe una recomendación que solucione el problema, sin embargo una medida
conveniente para disminuir su incidencia en la fruta que será exportada, es la de
postergar el embalaje por dos a cuatro días para que así los frutos que desarrollen el
desorden sean descartados antes de ser embalados (LATORRE, 1992).
ARTES, ESCRICHE Y MARIN (1993), determinaron que existe relación entre las
condiciones de almacenaje de limones “Primofiori” y la incidencia de peteca y otros
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desordenes fisiológicos de postcosecha. Estos autores determinaron que almacenando
limones a una temperatura de 13 ºC es posible evitar el desarrollo de peteca,
oleocelosis, membranosis y pitting.
BONELLI (1998), indica que no existe efecto de inmersiones durante 10 minutos de
Calcio (Nitrato de calcio al 0,8% y Basfoliar Ca SL al 0,5 y 1%) como tratamiento de
postcosecha sobre la incidencia de peteca en limones cv. Génova, cosechados en
invierno.
Una práctica habitual en el proceso de producción del limón de invierno, es el
denominado “curado” de la fruta, que se realiza para evitar problemas de oleocelosis,
esto es, mantener la fruta por algunos días a temperatura ambiente para de este modo
deshidratar la epidermis de la fruta. Se ha visto que este procedimiento permite
descartar fruta que manifieste síntomas de peteca (RAZETO, 2000).
2.5 Parámetros y atributos de calidad en frutos cítricos:
La calidad, es el conjunto de propiedades o características de un producto que
determinan su valoración por parte del consumidor. Los parámetros de calidad como
el peso del fruto, porcentaje de jugo, pH, acidez, grosor de cáscara, etc. son
características objetivamente medibles. Los atributos de calidad en cambio son
factores difícilmente medibles como son la facilidad de pelado, el sabor, olor, etc.
(ORTUZAR, 1997).
2.5.1 Grosor de cáscara:
Varios autores señalan que el grosor de cáscara va disminuyendo a medida que el
fruto madura. (BALDWIN, 1993, BARTHOLOMEW Y SINCLAIR, 1951). Esto
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estaría asociado según MUÑOZ (1970) a condiciones climáticas. Por otro lado,
ensayos realizados por FUCHS Y VIAL (1971) señalan que los frutos de color verde
claro presentan mayor grosor de cáscara que los frutos amarillos. Sin embargo si se
comparan los de color verde con los de color verde amarillento, estos últimos
presentan un mayor grosor de cáscara que los primeros.
Si bien no existen normas de calidad específicas para este parámetro, se señala que un
grosor de cáscara ideal para naranjas y limones está entre los 5 y 7 mm (ORTUZAR,
1997).
2.5.2 Porcentaje de jugo:
Este parámetro es muy usado como índice de cosecha en limones. Según COHEN et
al. (1990), limones con un 28 % de jugo por volumen se consideran maduros para
exportación. Durante la maduración de la fruta los contenidos de jugo aumentan hasta
el final de la madurez, donde el porcentaje de jugo se tiende a estabilizar (MAZZUZ,
1996; FUCHS Y VIAL, 1971).
En lo que respecta al comportamiento de este parámetro durante el almacenaje,
BARTHOLOMEW (1951) señala que el contenido de jugo aumenta, esto
especialmente en limones inicialmente más verdes. Esto se debería a cambios físicos y
químicos que dejan libre humedad de los tejidos circundantes a las vesículas de jugo,
principalmente de la cáscara, llegando esta humedad a dichas vesículas. Sin embargo
EAKS (1961) señala que gran parte del aumento del contenido de jugo en la fruta, se
debe a cambios dentro del tejido de la pulpa y no a un movimiento de agua desde la
cáscara a la pulpa.
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2.5.3 Sólidos solubles:
Los principales sólidos solubles presentes en el limón son glucosa, sacarosa y fructosa
(MAC CREADY, WALTER Y MAC CLAY, 1950).
La influencia de los factores climáticos son de gran importancia en la concentración
de sólidos solubles. Frutos que se desarrollan bajo condiciones tropicales acumulan
una mas rápida y mayor concentración de sólidos solubles que aquella fruta que se
desarrollo bajo condiciones más frías o costeras (BERGER, 1994).
Según YAKUSHIJI (1996), los árboles sometidos a estrés hídrico tendrían fruta con
una mayor concentración de sólidos solubles, especialmente de sacarosa, glucosa y
fructosa.
En lo que respecta al comportamiento de los sólidos solubles en almacenaje, se sabe
que este aumenta, tanto para naranjas como limones, aunque las causas de este
aumento serían diferentes. En el caso de los limones aumentarían los ácidos, mientras
que en el caso de las naranjas aumentarían los azúcares solubles (BARTHOLOMEW,
1951).
2.5.4 pH:
El pH, en el caso de los limones disminuye durante el desarrollo y madurez de la fruta,
aproximadamente de 5 a 2,5. Durante el periodo final de la maduración, aumenta la
acidez libre valorable, pero el pH baja un poco, por un efecto tampón (SÁENZ Y
ZAPATA, 1987). Se sabe que el pH del zumo aumenta a medida que el fruto madura,
pero por un efecto tampón cítrico-citrato, las variaciones de ácidos libres sólo generan
cambios pequeños de pH (COOK, 1983).
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FUCHS Y VIAL (1971), al analizar limones en distintos estados de madurez, desde el
color verde hasta el amarillo, no encontraron diferencias significativas de pH. Sin
embargo, REDARD (1993) analizó la evolución del pH de frutos marcados de color
verde y plateado y observó una tendencia a la disminución de este parámetro.
2.5.5 Acidez titulable:
La acidez del limón se debe principalmente a la presencia de ácido cítrico y ácido
málico (ERICKSON, 1968). Otro ácido que regularmente aparece es el ácido
galacturónico libre, como producto de la degradación de las pectinas (BRADDOCK,
1995).
Cuando la fruta cítrica madura baja la acidez y aumentan los sólidos solubles a
excepción del limón, en el que los ácidos aumenta debido a la acumulación de citratos
(BALDWIN, 1993)
En lo que respecta al almacenaje del limón, BARTHOLOMEW (1951) indica que
existe un aumento de la acidez del jugo, expresada en ácido cítrico.
2.5.6 Color de la fruta:
El color de la cáscara en cítricos, es un atributo de calidad debido a que el aspecto
externo de la fruta es relacionado por el consumidor con la calidad interna
(UNDURRAGA, 1998).
Uno de los factores más determinantes en el desarrollo del color en las frutas cítricas
es la temperatura. Plantas expuestas a temperaturas diurnas de 20 ºC y nocturnas de
7ºC con temperaturas de suelo de 12 ºC promedio, tienden a producir frutos
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fuertemente coloreados debido a la pérdida de clorofila y a la acumulación de
carotenoides. Temperaturas mayores a las señaladas desarrollan frutos pobremente
coloreados (COGGINS et al., 1981). Otro factor que influye en el desarrollo del color,
es la luz, ya que esta participa directamente en la síntesis de carotenoides y
antocianos. Debido a esto, los frutos expuestos a la luz del sol serán más coloreados
que aquellos ubicados en lugares más sombríos (MAZZUZ, 1996).
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3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. Lugar del ensayo:
El ensayo se realizó en un huerto de limoneros (Citrus limon Burm.) cv. Eureka
propiedad de Inversiones Quintil, ubicado en el sector La Palma, Provincia de
Quillota, V Región. Dicho huerto cuenta con antecedentes históricos de presencia de
peteca.
Los análisis de laboratorio, fueron realizados en el laboratorio de Postcosecha e
Industrialización de la Facultad de Agronomía de la Pontificia Universidad Católica
de Valparaíso.
Los análisis bioquímicos, fueron llevados a cabo en los laboratorios del Instituto de
Química de la Pontificia Universidad Católica de Valparaíso.
3.2 Descripción del ensayo:
El ensayo se realizó en limoneros de tres años y medio de edad, injertados sobre
patrón Citrus macrophylla, establecidos a una distancia de plantación de 6x3 y riego
por goteo.
Se seleccionaron y marcaron tres árboles homogéneos en cuanto a desarrollo
vegetativo, cantidad de fruta y estado sanitario. En cada árbol se procedió a instalar
cuatro sensores de humedad relativa y temperatura (marca Dickson, modelo TP120),
que se ubicaron en las caras: norte-superior, norte-inferior, sur-superior y sur-inferior
de la copa del árbol.
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Cada sensor fue programado para efectuar mediciones de humedad relativa (%) y
temperatura (ºC) cada 30 minutos, a partir del día 16 de abril del 2003. Debido a
instrucciones dadas por el fabricante de los equipos, dichos sensores debieron ser
protegidos de la humedad excesiva (lluvia, llovizna, rocío), para lo cual se utilizaron
maceteros plásticos (Figura 2). La información contenida en los sensores fue
descargada semanalmente para posteriormente ser llevadas a tablas de Excel.
Ensayo 1: Presencia de peteca epidermal y subepidermal
Para este ensayo (Cuadro1) se realizaron dos cosechas, la primera el 18 de junio luego
de una lluvia intensa y una segunda el 21 de agosto. Se cosechó fruta por sector (N-
superior, N-inferior, S-superior, S-inferior) con dos índices de color, plateados y
amarillos, de calibre 140 aproximadamente.
Cuadro 1. Ensayo 1: Presencia de peteca epidermal y subepidermal
Donde P: Posición R: Repetición
Índice de color amarillo Índice de color plateado
Cosecha 1 (18 junio)
Cosecha 2 (21 Agosto)
Cosecha 1 (18 Junio)
Cosecha 2 (21 Agosto)
P1: Norte-Superior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P2: Norte-Inferior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P3: Sur-Superior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P4: Sur-Inferior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
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Figura 2. Sensor de Humedad Relativa y Temperatura marca Dickson, modelo TP120 protegido de la lluvia.
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La fruta luego de dos días de curado, se trasladó al Laboratorio de Postcosecha, para
ser almacenada en cámara frigorífica a 7ºC y con un 95% de humedad relativa,
durante 40 días. La evaluación sobre la presencia de peteca se realizó sobre 13 frutos
por tratamiento, con tres repeticiones cada uno y fue hecha al final del almacenaje. Se
evaluó tanto la presencia de peteca epidermal, como subepidermal. Además se
clasificó la fruta utilizando una escala de daño (Cuadro 2) de acuerdo al número de
manchas de peteca presentes en la fruta y la superficie afectada.
Cuadro 2 . Escala de daño por peteca en limones
Escala Nº de manchas Superficie dañada
(cm2)
Nivel de daño
0 0 0 Sin daño
1 1 – 2 ≤ 0,5 Leve
2 3 – 5 >0,5 ≤1,5 Moderado
3 6 o más > 1,5 Severo
Fuente: LUTTGES, 2000.
Como complemento a este ensayo se realizó en el Laboratorio de Suelos de la
Pontificia Universidad Católica de Valparaíso un análisis nutricional a la corteza de la
fruta.
Diseño Experimental Ensayo 1:
Para el ensayo se contó con tres repeticiones de 13 frutos cada una, que fueron
asignadas a los diferentes tratamientos, que resultaron de las combinaciones de los
siguientes factores:
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Punto Cardinal: Norte y Sur.
Posición: superior e inferior.
Índice de madurez: amarillos y plateados.
Fechas de cosechas: Cosecha 1 (18 de junio) y Cosecha 2 (21 de agosto).
Para el análisis estadísticos de las variables: Peteca Epidermal y Peteca Subepidermal,
se utilizó un Modelo Completamente al Azar con arreglo factorial de (2x2x2x2) de la
siguiente forma:
Yijklm = µ+Oi +Pj +Mk +Fl +OPij +OMik +OFil +PMjk +PFjl +MFkl +OPMijk +OPFijl
+OMFikl + PMFjkl +OPMFijkl +�ijk
Donde
Yijkl : Variables en estudio (%Pet. Epid., % Pet. Subepi.)
µ : Media general
Oi : i-ésimo punto cardinal
Pj : j-ésima posición
Mk : k-ésimo índice de madurez
Fl : l-ésima fecha de cosecha
OPij : Interacción entre punto cardinal y posición
OMik : Interacción entre punto cardinal e índice de madurez
OFil : Interacción entre punto cardinal y fecha de cosecha
PMjk : Interacción entre posición e índice de madurez
PFjl : Interacción entre posición e fecha de cosecha
MFkl : Interacción entre índice de madurez y fecha de cosecha
OPMijk : Interacción entre punto cardinal, posición e índice de madurez
OPFijl : Interacción entre punto cardinal, posición y fecha de cosecha
OMFikl : Interacción entre punto cardinal, índice de madurez y fecha de cosecha
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PMFjkl : Interacción entre posición, índice de madurez y fecha de cosecha
OPMFijkl : Interacción entre punto cardinal, posición, índice de madurez y fecha
de cosecha.
�ijk : Error aleatorio ~ N(0;σ²)
En los casos que existió efecto significativo de las interacciones de los factores, se
compararon las medias con Test de Tukey al 5%.
40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
Ensayo 2: Evaluación de parámetros de calidad.
Las evaluaciones de los parámetros de calidad de la fruta se realizaron sólo sobre
limones de la primera cosecha (18 de junio), en dos momentos, antes de almacenaje
refrigerado y al término de este (Cuadro 3). El almacenaje refrigerado fué de 40 días a
7ºC y con una humedad relativa del 95%. Para este ensayo se tomaron 3 frutos
(repeticiones) por tratamiento y se sacaron promedios de las muestras.
Cuadro 3. Ensayo 2: Tratamientos resultantes de la combinación de factores en análisis.
Índice de color Amarillo Índice de color Plateado
Fecha 0 Antes de
Almacenaje
Fecha 1 Después de Almacenaje
Fecha 0 Antes de
Almacenaje
Fecha 1 Después de Almacenaje
P1: Norte-Superior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P2: Norte-Inferior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P3: Sur-Superior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
P4: Sur-Inferior R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3 R1-R2-R3
Donde P: Posición R: Repetición
25
• Parámetros de calidad evaluados:
a) Grosor de cáscara: Para determinar este punto se utilizó un pie de metro
digital. Se cortaron los frutos por la mitad y se midió el grosor de cáscara en
dos partes de una de las secciones. Las mediciones fueron opuestas una de
otra, promediándose ambos valores. Los datos obtenidos fueron expresados en
milímetros.
b) Porcentaje de jugo: Se pesó el fruto, luego se extrajo el jugo con un sacajugo
manual, luego se pesó el jugo, para posteriormente expresarlo en porcentaje
sobre el peso del fruto.
c) Sólidos solubles: Para establecer la cantidad de SS del jugo sin filtrar, se
utilizó un refractómetro manual autocompensado marca Atago. Los resultados
se expresaron en grados Brix.
d) pH: El valor del pH del jugo, se determinó mediante un pHmetro digital y
termocompensado marca Handylab 1.
e) Acidez titulable: Se midió mediante la titulación de 20 ml de muestra de jugo
de limón con NaOH 0,5N hasta lograr neutralizar la muestra a un pH de 8,2.
Los resultados se expresaron en gr. de ácido cítrico/100 cc de jugo mediante la
siguiente fórmula:
Acidez = Gasto de NaOH (ml) x Normalidad NaOH x 6,41
Volumen de muestra (ml)
f) Color: Para determinar el color, se utilizó un colorímetro marca Minolta C-
200, el cual entrega las coordenadas L, a y b. Para interpretar lo datos se usó la
26
relación de b/a para obtener la evolución del color de los limones en
almacenaje refrigerado.
Diseño experimental Ensayo 2:
Para el ensayo se contó con tres repeticiones, que fueron asignadas a los diferentes
tratamientos, que resultaron de las combinaciones de los siguientes factores:
Punto Cardinal: Norte y Sur.
Posición: superior e inferior.
Índice de madurez: amarillos y plateados.
Fechas de evaluación: F0 (Antes de almacenaje refrigerado) y F1 (después de
almacenaje refrigerado).
Para el análisis estadísticos de las variables: grosor de cáscara, porcentaje de jugo,
sólidos solubles, pH y acidez titulable, se utilizó un Modelo Completamente al Azar
con arreglo factorial de (2 x 2 x 2 x 2) de la siguiente forma:
Yijklm = µ+Oi +Pj +Mk +Fl +OPij +OMik +OFil +PMjk +PFjl +MFkl +OPMijk +OPFijl
+OMFikl + PMFjkl +OPMFijkl +�ijk
Donde:
Yijkl : Variables en estudio (Grosor de cáscara, Porcentaje de Jugo, Sólidos
solubles, pH y Acidez titulable).
µ : Media general
Oi : i-ésimo punto cardinal
Pj : j-ésima posición
Mk : k-ésimo índice de madurez
27
Fl : l-ésima fecha de evaluación
OPij : Interacción entre punto cardinal y posición
OMik : Interacción entre punto cardinal e índice de madurez
OFil : Interacción entre punto cardinal y fecha de evaluación
PMjk : Interacción entre posición e índice de madurez
PFjl : Interacción entre posición e fecha de evaluación
MFkl : Interacción entre índice de madurez y fecha de evaluación
OPMijk : Interacción entre punto cardinal, posición e índice de madurez
OPFijl : Interacción entre punto cardinal, posición y fecha de evaluación
OMFikl : Interacción entre punto cardinal, índice de madurez y fecha de
evaluación.
PMFjkl : Interacción entre posición, índice de madurez y fecha de evaluación
OPMFijkl : Interacción entre punto cardinal, posición, índice de madurez y fecha
de evaluación.
�ijk : Error aleatorio ~ N(0;σ²)
En los casos en que existió efecto significativo de las Interacciones de los factores, se
compararon las medias con Test de Tukey al 5%.
3.3. Análisis bioquímicos :
Estos análisis se hicieron en base a fruta del ensayo 1, proveniente de los tratamientos
con mayor y menor incidencia de peteca en las evaluaciones de ambas cosechas. De
estos sectores se llevaron a laboratorio tres tipos de fruta: limones amarillos con
peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca, esto con el fin de contrastar los
resultados. Todos los ensayos fueron realizados al albedo de la fruta.
28
Se realizaron cinco tipos de análisis bioquímicos para determinar y cuantificar la
presencia de distintos compuestos.
3.3.1. Determinación de la actividad de Peroxidasas totales.
El método de determinaciones basa en la reacción normal de la Peroxidasa (POD) y
consiste en la transferencia de electrones de hidrógeno al H2O2.
Principalmente, la actividad de la POD puede determinarse por la disminución del
peróxido de hidrógeno o del hidrógeno donado o por la formación de compuestos
oxidados. En este caso se utiliza ABTS como donador de hidrógeno, según la
siguiente reacción:
Así, la expresión de actividad de POD en µmoles de sustrato convertido por minuto
puede ser aplicada para un sustrato en particular y en condiciones óptimas
particulares.
Se usaron como reactivos para el análisis, ABTS 2*10-3 Molar en tampón fosfato a
pH 6.0; 0.067M H2O2 10-2 M previamente estandarizada por titulación con solución
patrón de KMnO4 (0.02M). Todas las soluciones fueron preparadas con agua de alto
grado de pureza.
POD ABTS + H2O2 ABTS+ + 2H2O
29
Se pipeteó 0.2 ml de ABTS, 0.2 ml de peróxido de hidrógeno y 2.0 ml de tampón
fosfato pH 6.0 y 0.2 ml de muestra. Se mezcló rápidamente y se leyó la absorbancia a
420 nm, desde el minuto 1 al minuto 6 con respecto al blanco.
3.3.2. Determinación de la actividad de Polifenol Oxidasa (PPO).
La PPO oxida la Tirosina a dihidroxifenilalanina y a su vez es oxidada a o-quinona.
Esto va acompañado por un aumento en la absorbancia a 280 nm. El aumento de la
velocidad catalítica es proporcional a la concentración de enzima, esto durante un
periodo lineal de 5 a 10 minutos después de un período inicial no lineal.
Definición de Unidad de Actividad: Una unidad catalítica corresponde a un cambio de
absorbancia a 280 nm de 0.001 por minuto a 25ºC a pH 6.5 bajo condiciones
específicas.
Se utilizaron como reactivos para el análisis 0.5 M buffer fosfato pH 6.5 y 0.001M l-
Tirosina.
Se ajustó el espectrofotómetro a 280 nm a una temperatura de 25ºC. Luego se pipeteó
1 ml de buffer fosfato, 1 ml de l-Tirosina y 0.9 ml de agua de alto grado de pureza. Se
registró la absorbancia y luego se añadió 0.1 ml de un homogenizado que contenga la
enzima. Después se registró la absorbancia por 10 a 12 minutos y se determinó la delta
absorbancia desde la región lineal de la curva .
Unidad de Actividad/ mg ptna Total = (Delta absorbancia *1000)/ mg ptna total
30
3.3.3 Determinación de la actividad de Glutatión Peroxidasa (Método de Gunzler).
Se usó Ter-butil-hidroperóxido como sustrato, ya que este evita cualquier problema
por presencia de la enzima catalasa. El ensayo se basó en la oxidación de Glutatión
reducido (GSH) por la enzima, acoplado a la desaparición de NADH por la glutatión
reductasa.
Como reactivos para este análisis se utilizaron 50 mM tampón fosfato de potasio pH
7.0 con 50 mM DTPA; 8 mM NADPH; 0,1 M GSH; 50 U/ml glutatión reductasa
(GSR); 30 mM t-butil-hidroperóxido.
A una cubierta de 1,5 ml se añadió 0,9 ml de buffer, 20 ul de GSH, 20 ul GSR y 20 ul
NADPH. Se equilibró todo a 37ºC (blanco y ensayo) y se registraron todos los
cambios en el primer minuto a 340 nm. A la cubierta del blanco, se añadió 20 ul de t-
butil-hidroperóxido y se siguió la reacción por tres minutos. Esto da la velocidad de
oxidación espontánea del NADPH y que es inducida por adición de t-BOOH. A la
cubierta de la muestra, se añadió más de 50 ul de muestra y se registraron los cambios
en la oxidación del NADPH por un minuto. Luego se añadió 20 ul de t-BOOH y se
siguió con la reacción.
Cuantificación de Peróxido de Hidrógeno: El peróxido de hidrógeno fue detectado y
cuantificado por titulación volumétrica usando como titulante el permanganato de
potasio ( KMnO4). Se diluyó la muestra en agua destilada, a la que posteriormente se
le añadió ácido sulfúrico al 10%. La solución resultante fué valorada inmediatamente
con la disolución patrón de KMnO4 hasta que se obtuvo un color rosado que
permanezca durante 30 segundos. Esto indicó el punto final de la titulación. Se realizó
una prueba blanco con agua destilada y ácido sulfúrico al 10% de la misma manera
31
antes descrita. Con este dato se corrigieron los volúmenes gastados en las
valoraciones.
Cálculo: ( miliequivalente MnO4 ) / volumen alícuota muestra = N peróxido
N = normalidad de peróxido.
3.3.4. Calidad de Pectinas.
La cáscara fue separada de la pulpa y cortada en trozos de 0.5 cm. Luego se procedió
al secado de esta y finalmente fueron usadas para su análisis.
Para la extracción de pectinas se procedió a pesar a temperatura ambiente las cáscaras
de los limones. Según el peso de cada muestra se les añadió ácido cítrico disuelto en
agua en una relación de por cada 20 grs de cáscara seca 500 ml de ácido cítrico. Se
dejó hervir y luego de una hora de extracción, la solución resultante fue filtrada con
gasa quirúrgica. El extracto fue nuevamente filtrado al vacío con filtro de 1 mm de
diámetro de poro.
Las pectinas fueron precipitadas por adición de dos volúmenes de etanol p.a al 95%
por ml de extracto. Las pectinas precipitadas fueron recuperadas por centrifugación a
2500 g por cuatro minutos y disueltas en agua desionizada para lavarlas. Las pectinas
precipitadas fueron secadas por frío y almacenadas a 4 ºC antes de usar.
a) Contenido de Metoxilos: El contenido de metoxilos fue determinado usando el
método de McCready´s. Se añadió etanol a la muestra secada en frío en una relación
de 5 ml de etanol por 0.5 grs de muestra. Luego de completada la humedificación, se
añadieron 100 ml de NaCl 1% p/v a la muestra. Se disolvieron las muestras de
pectinas y se ajustó el pH a 7.5 por adición de NAOH. Una vez ajustado el pH, se
32
añadió 25 ml de NaOH y se incubó por 30 minutos a temperatura ambiente. Luego se
añadieron 25 ml de HCL 0.25 N a la muestra previamente incubada y se tituló
potenciometricamente con NaOH.
El contenido de metoxilos se determinó por el volumen de titulante gastado según la
siguiente relación:
b) Contenido de ácido Galacturónico: La concentración de ácido galacturónico se
determinó usando el método de Taylor`s modificado. La solución estándar de ácido
galacturónico se preparó añadiendo 0 a 100 µg de ácido D-galacturónico
monohidratado en un tubo de ensayo que contenía 200 µl de agua. Después se
añadieron 3 ml de ácido sulfúrico concentrado (98%) a la solución estándar preparada,
para luego añadir 100 µl de carbazol y 0.1% en etanol. La mezcla se incubó por una
hora a 60ºC. Después de la incubación se equilibró a temperatura ambiente y se midió
la absorbancia a 530 nm. Los datos obtenidos se interpolaron a los de la curva patrón.
% metoxilos = 0.1 x Vol x (3.1/0.5) Vol = volumen de NaOH gastado.
33
4. PRESENTACIÓN Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
4.1 Ensayo 1
4.1.1 Peteca epidermal:
Del análisis del porcentaje de peteca epidermal de los limones (Anexo 1), se
determinó que existe efecto del color de cosecha y de la fecha de cosecha, no así del
punto cardinal ni de la posición de los limones en el árbol. Por otra parte, existe
efecto solamente de las interacciones entre punto cardinal con fecha de cosecha y de
punto cardinal con posición y con fecha de cosecha.
4.1.1.1 Efecto del color de cosecha sobre peteca epidermal
Los limones cosechados de color amarillo muestran claramente mayores porcentajes
de peteca epidermal, que los cosechados con un índice de color plateado (Cuadro 4).
Cuadro 4. Porcentaje de peteca epidermal en limones cv Eureka según color de cosecha, después de 40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
Tratamientos Porcentaje peteca epidermal Amarillos 36,86 b Plateados 14,42 a
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
Estos resultados concuerdan con lo señalado por BONELLI (1998) y LUTTGES
(2000), quienes indican que los limones cosechados con un índice de color plateado
son menos susceptibles a desarrollar el desorden, a diferencia de aquella fruta
cosechada con un estado de madurez más avanzado que presenta una coloración
amarilla. SILVA (1991), indica que en el proceso de senescencia vegetal ocurre un
34
quiebre en la estructura celular, lo que implica que un limón amarillo, ha iniciado su
proceso de degradación celular propio de la madurez de la fruta, por lo que estaría mas
predisponente a presentar peteca. Si se observa el análisis nutricional realizado a la
fruta (Cuadro 5), se muestra como los limones amarillos tienen un menor porcentaje
de Calcio en su corteza que los de color plateado del mismo sector de la copa del
árbol.
Cuadro 5. Análisis nutricional de la corteza de limones según ubicación del fruto en el árbol y color de cosecha.
TRATAMIENTO Potasio (%) Calcio (%) Magnesio (%)
Norte-Arriba-Amarillos 0,50 0,56 0,03
Norte-Arriba-Plateados 0,61 0,57 0,05
Norte-Bajo-Amarillos 0,61 0,48 0,04
Norte-Bajo-Plateados 0,57 0,53 0,03
Sur-Arriba-Amarillos 0,53 0,49 0,03
Sur-Arriba-Plateados 0,53 0,50 0,03
Sur-Bajo-Amarillos 0,65 0,50 0,05
Sur-Bajo-Plateados 0,57 0,52 0,04
Por lo tanto, es probable que los limones plateados presenten una menor incidencia de
peteca, debido a que al tener un mayor porcentaje de calcio disponible en su corteza,
pueden formar con mayor facilidad cristales de oxalato de calcio y así neutralizar
compuestos tóxicos para la planta, como el ácido oxálico el cual provoca una
desorganización y colapso celular (RETAMALES et al., 2000; BRAMLAGE, 1995;
SILVA, 1991).
35
4.1.1.2 Efecto de la interacción punto cardinal, posición y fecha de cosecha
Al comparar las medias para la interacción entre punto cardinal con posición y
cosecha (Cuadro 6), se encontró que los frutos con mayor porcentaje de petaca
epidermal son los del norte arriba de la cosecha 1, los del norte abajo de la cosecha 1 y
los del sur arriba de la cosecha 1.
Cuadro 6. Porcentaje de peteca epidermal en limones según punto cardinal, posición y
fecha de cosecha después de 40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
Tratamientos Porcentaje de peteca epidermal
Norte; Arriba; Cosecha 1 38,46 cd Norte; Arriba; Cosecha 2 8,97 a Norte; Abajo ; Cosecha 1 48,72 d Norte; Abajo ; Cosecha 2 5,13 a Sur ; Arriba; Cosecha 1 41,03 cd Sur ; Arriba; Cosecha 2 16,67 ab Sur ; Abajo ; Cosecha 1 28,21 bc Sur ; Abajo ; Cosecha 2 17,95 ab Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
La peteca, se presenta principalmente en limones que han pasado por condiciones
climáticas adversas para la planta, como son baja temperatura ambiental, alta
humedad relativa e inicio de las precipitaciones. Cabe señalar que las precipitaciones
en invierno en Chile golpean al árbol por el norte y por la parte alta de la copa lo que
podría explicar estos resultados. Además, SCHULTZE (2000) observó que los niveles
de peteca llega a un máximo a fines del mes de junio y desaparece en la fruta
cosechada a fines de agosto, lo que es coincidente con el aumento de de la temperatura
y una disminución de la humedad relativa. Lo anterior concuerda con los resultados
obtenidos en este trabajo, aunque si bien, en la cosecha del 21 de agosto la peteca
36
epidermal no desaparece del todo, si la cantidad de fruta dañada es muy inferior a la
que se presentó en la cosecha del 18 de junio.
Por medio de la utilización de sensores de humedad relativa y temperatura, se
pudieron obtener datos de estas variables para cada sector de la copa del árbol
involucrado en los tratamientos. El Figura 3 muestra como las temperaturas máximas,
tanto para el norte como para el sur, fueron más bajas para la primera cosecha que
para la segunda, observándose en los meses de mayo y junio las más bajas
temperaturas máximas diarias. Lo anterior explicaría en parte el mayor daño por
peteca en la cosecha de junio. Las temperaturas mínimas diarias en cambio se
presentaron más bajas durante los primeros 20 días de mayo, el mes de julio y la
primera semana de agosto, por lo que las más bajas temperaturas mínimas (incluyendo
dos heladas) se presentaron en mayor medida para la cosecha de fines de agosto. Esto
podría ser una de las posibles causas de por que la peteca no desaparece del todo en la
segunda cosecha.
37
-5
0
5
10
15
20
25
30
35
16/0
4/20
03
23/0
4/20
03
30/0
4/20
03
07/0
5/20
03
14/0
5/20
03
21/0
5/20
03
28/0
5/20
03
04/0
6/20
03
11/0
6/20
03
18/0
6/20
03
25/0
6/20
03
02/0
7/20
03
09/0
7/20
03
16/0
7/20
03
23/0
7/20
03
30/0
7/20
03
06/0
8/20
03
13/0
8/20
03
20/0
8/20
03
T Max Norte
T Min Norte
T Max Sur
T Min Sur
Cosecha
18 de junio 21 de agosto
Figura 3. Temperaturas máximas y mínimas diarias de las caras Norte y Sur de la copa del limonero cv Eureka.
38
Si se trazan líneas de tendencia para las temperaturas medias de la cara norte y sur de
los árboles (Figura 4), se observa como la temperatura va bajando hasta mediados de
mayo, para luego subir hasta mediados de junio y bajar nuevamente hasta fines de
julio, fecha en la que comienza a subir nuevamente. Este último aumento de la
temperatura hacia el mes de agosto explicaría la disminución ostensible del
porcentaje de fruta dañada en la cosecha de agosto (SCHULTZE, 2000; RAZETO,
2000).
Otro factor que estaría directamente involucrado en el efecto de la interacción punto
cardinal, posición y fecha de cosecha sobre la variable peteca epidermal es la
humedad relativa. Diversos autores señalan que una alta humedad relativa durante la
maduración de la fruta sería un factor predisponerte para que se desarrolle peteca
(FAWCETT, 1936; KLOTZ, 1973; RAZETO, 1987; SCHULTZE, 2000).
La Figura 5, muestra como la humedad relativa máxima diaria se mantuvo entre el 90
y 100% en forma bastante uniforme durante todo el periodo de medición de los
sensores. Las diferencias en este caso fueron hechas por la humedad relativa mínima
diaria, la cual manifestó un alza desde mediados de mayo, lo que podría haber
influido directamente sobre la presencia de peteca epidermal en la cosecha de junio.
Al observar las líneas de tendencia en la humedad relativa mínima se comprueba
como existió un alza en los meses de mayo y junio lo que reafirma lo señalado
anteriormente.
39
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
16-4
-03
30-4
-03
14-5
-03
28-5
-03
11-6
-03
25-6
-03
9-7-
03
23-7
-03
6-8-
03
20-8
-03
T Media Norte
T Media Sur
Linea de tendencia
Linea de tendencia
Cosecha
18 de junio 21 de agosto
Figura 4. Temperaturas medias diarias y líneas de tendencia de las caras Norte y Sur de la copa del limonero cv Eureka.
40
Figura 5. Humedad Relativa máxima y mínima diaria de las caras Norte y Sur de la copa del limonero cv Eureka.
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
16/0
4/20
03
23/0
4/20
03
30/0
4/20
03
07/0
5/20
03
14/0
5/20
03
21/0
5/20
03
28/0
5/20
03
04/0
6/20
03
11/0
6/20
03
18/0
6/20
03
25/0
6/20
03
02/0
7/20
03
09/0
7/20
03
16/0
7/20
03
23/0
7/20
03
30/0
7/20
03
06/0
8/20
03
13/0
8/20
03
20/0
8/20
03
Fecha
HR M ax NorteHR M in NorteHR M ax SurHR M in Sur
Cosecha
18 de Junio 21 de Agosto
Lluvia (>10mm)
41
El aumento de la humedad relativa está fuertemente influenciado por las
precipitaciones caídas en los meses de mayo y junio, siendo las lluvias más
importantes las del 20,21 y 22 de mayo, junto con las del 10 y 14 de junio, esta última
la mayor del año (35,8 mm). Posteriores a estas precipitaciones no existieron lluvias
importantes, salvo las de los días 7 y 8 de Julio las que no tendrían influencia sobre el
desarrollo de peteca en la cosecha de agosto debido a la lejanía de esta. BONELLI
(1998), realizó cosechas distanciadas tres, seis y nueve días después de una lluvia y
encontró que a medida que la cosecha se efectúa más distanciada de la lluvia, menor
es la incidencia de peteca. La cosecha del 18 de junio fue realizada cuatro días
después de la mayor lluvia del año, mientras que la cosecha del 21 de agosto se
realizó 44 días después de una lluvia importante (8 de Julio).
Por otro lado se observó que el menor porcentaje de peteca epidermal se encuentra en
la cara norte de la segunda cosecha (fines de agosto). Este resultado coincide con las
conclusiones obtenidas por GOMEZ (1984), quien determinó un menor porcentaje de
peteca en los frutos ubicados en la cara Norte de la copa del árbol comparativamente
con los de la sur, debido a que estos últimos se encontrarían en condiciones de
sombreamiento durante gran parte del día. Dicho sombraemiento implica una menor
temperatura y una mayor humedad relativa, ambos factores involucrados en el
desarrollo de peteca.
Llama la atención el alto porcentaje de peteca presente en la cara norte de la cosecha
de junio, siendo un poco mayor incluso que la de exposición sur. Esto se debería a la
gran cantidad de días nublados o con lluvias durante la época de maduración de la
fruta en la cosecha de junio. Un día nublado o lluvioso (con alta humedad relativa y
temperaturas menos fluctuantes) presenta esta característica tanto para la cara norte
42
como sur del árbol, por lo que las diferencias entre ambas caras de la copa se hacen
mínimas. En la cosecha de agosto en cambio, al presentar una mayor cantidad de días
despejados, las diferencias de humedad y temperatura entre ambas caras se hacen más
importantes influyendo esto directamente sobre el porcentaje peteca.
Al observar las figuras 6 y 7 que representan el grado de severidad con que se
presentó la peteca epidermal para ambas cosechas, se observa que además de ser la
cosecha de junio la que presenta el mayor porcentaje de peteca, es la con daños más
severos en la fruta. Esto demuestra una vez más como la fecha de cosecha es un
factor muy gravitante en el grado de importancia con que se presente el desorden en
la fruta. También se aprecia como la peteca epidermal sigue siendo importante en la
segunda cosecha para los limones amarillos cosechados desde la cara sur del árbol,
aunque con daños mas leves en la fruta que en el caso de la cosecha de junio. Esto se
debería a las condiciones de sombra que presenta este sector durante parte del día
(GOMEZ 1984) lo que está relacionado con menor temperatura y mayor humedad
relativa, además de ser los limones amarillos los más sensibles a presentar este
desorden y en forma más severa (LUTTGES, 2000; BONELLI, 1998).
43
Peteca Epidermal - Cosecha 18 de Junio
30,8
17,9
30,8
28,2
35,9
15,4
20,5
15,4
12,8
5,1
15,4
7,7
17,9
5,1
2,6 2,6
10,3
0,0
12,8
2,6
5,1
2,6
12,8
2,6
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
Norte; Alto;Amarillos;Cosecha 1
Norte; Alto;Plateados;Cosecha 1
Norte; Bajo ;Amarillos;Cosecha 1
Norte; Bajo ;Plateados;Cosecha 1
Sur ; Alto;Amarillos;Cosecha 1
Sur ; Alto;Plateados;Cosecha 1
Sur ; Bajo ;Amarillos;Cosecha 1
Sur ; Bajo ;Plateados;Cosecha 1
LEVE
MODERADO
SEVERO
Peteca Epidermal - Cosecha 21 de Agosto
12,8
5,1
7,7
0,0 0,0
25,6
2,6
0,0 0,0
2,6
0,0 0,0 0,0
5,1
2,6
0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
33,3
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
Norte; Alto;Amarillos;Cosecha 2
Norte; Alto;Plateados;Cosecha 2
Norte; Bajo ;Amarillos;Cosecha 2
Norte; Bajo ;Plateados;Cosecha 2
Sur ; Alto;Amarillos;Cosecha 2
Sur ; Alto;Plateados;Cosecha 2
Sur ; Bajo ;Amarillos;Cosecha 2
Sur ; Bajo ;Plateados;Cosecha 2
LEVE
MODERADO
SEVERO
Figuras 6 y 7. Presencia de peteca epidermal y grado de severidad del daño en limones cv Eureka cosechados plateados y amarillos en dos fechas de cosecha.
44
4.2.2 Peteca subepidermal:
Del análisis al porcentaje de peteca subepidermal de los limones (Anexo 2), se
determinó que existe efecto del punto cardinal y de la fecha de cosecha, no así de la
posición y del color de cosecha. Por otra parte, existe efecto de las interacciones:
punto cardinal con fecha de cosecha, punto cardinal con posición con fecha de
cosecha, punto cardinal con color de cosecha con fecha de cosecha y de la
interacción de los cuatro factores.
4.2.2.1 Efecto de la interacción punto cardinal, posición, color de cosecha y fecha de
cosecha.
Al comparar los promedios del porcentaje de petaca subepidermal de los limones,
para la interacción de los cuatro factores (Cuadro 7), se observa que los frutos del
norte ubicados arriba cosechados con color amarillo y plateado de la cosecha 2, son
los que presentan menor porcentaje de petaca subepidermal (2,56% y 5,13%
respectivamente). Los que presentan el mayor porcentaje son los limones del sur
ubicados en la parte baja de la copa, cosechados con color amarillo en la cosecha de
junio (46,15%). Estos resultados, son esperados, tomando en cuenta los antecedentes
que se manejan sobre los factores que favorecen el desarrollo de peteca, es decir,
fruta cosechada del lado norte del árbol tendría menos peteca que la del sur, fruta
cosechada de la parte baja de la copa tendría más peteca que en la parte alta, fruta
cosechada de color plateado tendría menos peteca que la de color amarillo y
finalmente fruta cosechada en junio, presentaría un mayor porcentaje de peteca que la
cosechada en el mes de agosto (LUTTGES, 2000; SCHULTZE, 2000; BONELLI,
1998; GOMEZ, 1984).
45
Cuadro 7. Porcentaje promedio de peteca subepidermal en limones cv Eureka según interacción de punto cardinal, posición, color y fecha de cosecha, después de 40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
Tratamientos Porcentaje promedio de peteca subepidermal
Norte; Arriba; Amarillos; Cosecha 1 30,77 cdef Norte; Arriba; Amarillos; Cosecha 2 2,56 a Norte; Arriba; Plateados; Cosecha 1 43,59 ef Norte; Arriba; Plateados; Cosecha 2 5,13 a Norte; Abajo ; Amarillos; Cosecha 1 20,51 abcd Norte; Abajo ; Amarillos; Cosecha 2 25,64 bcde Norte; Abajo ; Plateados; Cosecha 1 35,90 def Norte; Abajo ; Plateados; Cosecha 2 7,69 ab Sur ; Arriba; Amarillos; Cosecha 1 30,77 cdef Sur ; Arriba; Amarillos; Cosecha 2 28,21 cdef Sur ; Arriba; Plateados; Cosecha 1 28,21 cdef Sur ; Arriba; Plateados; Cosecha 2 15,38 abc Sur ; Abajo ; Amarillos; Cosecha 1 46,15 f Sur ; Abajo ; Amarillos; Cosecha 2 20,51 abcd Sur ; Abajo ; Plateados; Cosecha 1 30,77 cdef Sur ; Abajo ; Plateados; Cosecha 2 35,90 def Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
Estos resultados involucran la interacción de todos los elementos en estudio (punto
cardinal, posición, color de cosecha y fecha de cosecha) y reflejan como todos los
factores predisponentes de peteca funcionan en conjunto, es decir, la peteca no estaría
condicionada a un factor en particular sino que a varios factores.
Los resultados obtenidos son los esperados, pensando que el menor porcentaje de
peteca subepidermal se encuentra en la cara norte (menos sombría) de la cosecha de
fines de agosto y en la parte alta, lo que concuerda con lo señalado por GOMEZ
(1984), quien determinó que los mayores niveles de peteca se encontrarían donde
existe un mayor sombraemiento durante el día. Además la cosecha del 18 de junio
presentó los mayores porcentajes de peteca subepidermal, comparativamente con la
cosecha del 21 de agosto. Las razones de tal efecto serían las mismas que para la
46
peteca epidermal, es decir, factores ambientales como alta humedad relativa, bajas
temperaturas y precipitaciones durante la época de maduración de la fruta.
Se observa en los resultados una gran similitud entre los porcentajes de peteca de la
cara norte y sur de la cosecha de junio. Esto se debería al igual que en el caso de la
peteca epidermal a la gran cantidad de días nublados o con lluvias durante la época de
maduración de la fruta de la cosecha de junio, por lo que las diferencias de humedad
y temperatura entre ambas caras de la copa se hacen mínimas. En la cosecha de
agosto en cambio, al presentar una mayor cantidad de días despejados, las diferencias
se hacen más importantes influyendo la exposición norte o sur directamente sobre el
porcentaje peteca.
Al analizar los resultados de la interacción de factores, se observa como la posición
(arriba o abajo) de la fruta en la copa del árbol también tiene efecto en la incidencia
de peteca en postcosecha. A pesar que no se encontraron mayores diferencias de
temperatura y de humedad relativa entre el sector alto y bajo de la copa del árbol,
estas pequeñas diferencias serían suficientes para tener un efecto. A modo de ejemplo
se tomaron los datos de los sensores de humedad relativa y temperatura ubicados en
la cara sur del árbol (Figuras 8 y 9) y se puede observar como la temperatura y la
humedad relativa de los sensores ubicados en el sur-alto y sur-bajo de la copa son
muy similares.
47
-5
0
5
10
15
20
25
30
35
16/0
4/20
03
30/0
4/20
03
14/0
5/20
03
28/0
5/20
03
11/0
6/20
03
25/0
6/20
03
09/0
7/20
03
23/0
7/20
03
06/0
8/20
03
20/0
8/20
03
Máx TSA
Mín TSA
Máx TSB
Mín TSB
Figura 8. Temperatura máxima y mínima diaria de los sectores Sur-Alto y Sur-Bajo
de la copa del limonero cv Eureka.
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
16/0
4/20
03
30/0
4/20
03
14/0
5/20
03
28/0
5/20
03
11/0
6/20
03
25/0
6/20
03
09/0
7/20
03
23/0
7/20
03
06/0
8/20
03
20/0
8/20
03
Máx HRSA
Mín HRSA
Máx HRSB
Mín HRSB
Figura 9. Humedad Relativa máxima y mínima diaria de los sectores Sur-Alto y Sur-Bajo de la copa del limonero cv Eureka.
48
Por otro lado, si se observan las figuras 10 y 11 que representan el grado de
severidad con que se presentó la peteca subepidermal para ambas cosechas, estos
muestran como además de ser la cosecha de junio la con mayor porcentaje de peteca
subepidermal, es la que presenta daños más severos en la fruta. Esto demuestra una
vez más, como la condición climática es un factor muy gravitante en el grado de
importancia con que se presente el desorden en la fruta. En la figura 9 llama la
atención los altos porcentajes de peteca subepidermal leve en la cosecha de agosto.
Estos elevados porcentajes están asociados a las partes más frías y sombrías del árbol,
es decir, la cara sur (alto y bajo) y al sector norte bajo. El sector norte alto por el
contrario, presenta porcentajes muy bajos de peteca, tanto para los limones
cosechados de color plateado como amarillo. Esto debido a presentar temperaturas
más elevadas y una menor humedad relativa, ambos factores determinantes para una
menor incidencia del desorden.
49
Peteca Subepidermal - Cosecha 18 de Junio
12,8
25,6
5,1
10,3
12,8
15,4
20,5 20,5
7,7
10,3
5,1
10,3
5,1
10,3
5,1
10,3
7,7
10,3
7,7 7,7
15,4
5,1
12,8 12,8
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
Norte; Alto;Amarillos;Cosecha 1
Norte; Alto;Plateados;Cosecha 1
Norte; Bajo ;Amarillos;Cosecha 1
Norte; Bajo ;Plateados;Cosecha 1
Sur ; Alto;Amarillos;Cosecha 1
Sur ; Alto;Plateados;Cosecha 1
Sur ; Bajo ;Amarillos;Cosecha 1
Sur ; Bajo ;Plateados;Cosecha 1
LEVE
MODERADO
SEVERO
Figura 10. Porcentaje y grado de severidad del daño de peteca subepidermal en la
cosecha de junio, en limones cv Eureka cosechados plateados y amarillos, después de 40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
Peteca Subepidermal - Cosecha 21 de Agosto
2,6
5,1
20,5
5,1
17,9
12,8
15,4
28,2
0,0 0,0
5,1
2,6
7,7
0,0
2,6
5,1
0,0 0,0 0,0 0,0
2,6 2,6 2,6 2,6
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
Norte; Alto;Amarillos;Cosecha 2
Norte; Alto;Plateados;Cosecha 2
Norte; Bajo ;Amarillos;Cosecha 2
Norte; Bajo ;Plateados;Cosecha 2
Sur ; Alto;Amarillos;Cosecha 2
Sur ; Alto;Plateados;Cosecha 2
Sur ; Bajo ;Amarillos;Cosecha 2
Sur ; Bajo ;Plateados;Cosecha 2
LEVE
MODERADO
SEVERO
Figura 11. Porcentaje y grado de severidad del daño de peteca subepidermal en la
cosecha de agosto, en limones cv Eureka cosechados plateados y amarillos después de 40 días de almacenaje a 7ºC con un 95% de HR.
50
• Análisis bioquímicos:
Se analizaron los niveles de actividad de peroxidasas totales, glutatión peroxidasa y
polifenol oxidasa, como indicadores de daño oxidativo. El Cuadro 8 muestra la
actividad de las peroxidasas totales en frutos amarillos con peteca, amarillos sin
peteca y plateados sin peteca para ambas cosechas.
Cuadro 8. Resultados de la actividad de Peroxidasas totales en albedos de limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con peteca)
(Amarillo sin peteca)
(Plateado sin peteca)
Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 0,614 0,675 0,782 0,690 0,069 Norte-Bajo > peteca 3,745 8,51 3,592 5,282 2,283 Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca 311,36 192,3 211,94 238,533 52,117Sur-Bajo > peteca 9,221 10 8,431 9,217 0,641
Al observar el cuadro llama la atención los altos niveles de actividad que presentaron
las peroxidasas totales de los limones pertenecientes a la segunda cosecha ubicados
en el sector norte-alto. Este sector fue el que presentó los menores porcentajes peteca
en dicha cosecha. DESMARCHELIER (1996) señala que las peroxidasas son
enzimas que juegan un rol muy importante en la defensa antioxidante de las plantas.
Esto podría ser una de las causas por que dicho sector haya presentado los menores
51
daños de peteca. Si se observa para este mismo sector, la actividad de los limones
amarillos con peteca, amarillo sin peteca y plateado sin peteca, llama la atención la
mayor actividad que presentan los limones amarillos con peteca en relación a los
otros dos. Un limón con peteca puede haber activado sus mecanismos de defensa
antioxidante, pero estos no haber sido suficientes para evitar el daño.
El Cuadro 9 se muestra la actividad de la enzima polifenol oxidasa en frutos amarillos
con peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca para ambas cosechas.
Cuadro 9. Resultados de la actividad de Polifenol Oxidasa (PPO) en albedos de limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con
peteca) (Amarillo sin
peteca) (Plateado sin
peteca) Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 539 537 498 521,33 17,211 Norte-Bajo > peteca 579 304 556 479,67 124,569Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca 387 279 373 346,33 47,954 Sur-Bajo > peteca 615 755 654 674,67 58,993
Llama la atención que los mayores niveles de actividad de la PPO se encuentren en
los sectores con mayores índices de peteca para ambas cosechas, a excepción de los
limones amarillos sin peteca del sector norte-bajo de la primera cosecha. Bajo algún
tipo de estrés las plantas superiores activan mecanismos que dan origen al aumento de
52
genes de defensa que originan entre otras moléculas PPO (VAMOS y VIGYAZO,
1981). Esto podría explicar por que en los sectores con mayor porcentaje de peteca
exista una mayor actividad de Polifenol Oxidasa.
El Cuadro 10 muestra la actividad de la Glutatión peroxidasa en frutos amarillos con
peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca para ambas cosechas.
Cuadro 10. Resultados de la actividad de Glutatión Peroxidasa en albedos de limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total UAct/mg ptna
total Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con
peteca) (Amarillo sin
peteca) (Plateado sin
peteca) Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 0,089 0,14 0,081 0,10 0,026 Norte-Bajo > peteca 0,511 1,61 0,736 0,95 0,474 Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca No Detecta 0,923 0,148 No Detecta
No Detecta
Sur-Bajo > peteca No Detecta 1 No Detecta No Detecta
No Detecta
Si se observa los resultados de la segunda cosecha, se observa que en variados casos
no existió actividad de la enzima, lo que podría estar relacionado con el menor estrés
que pudo existir en la segunda cosecha (fines de agosto) debido a mejores
temperaturas y una menor humedad relativa. La glutatión peroxidasa es una enzima
que cataliza la reducción del peróxido de hidrógeno (H2O2) utilizando como agente
53
reductor el glutatión reducido (GSH). Esta enzima desempeña un papel importante en
la defensa al estrés oxidativo (DESMARCHELIER, 1996).
El Cuadro 11 muestra la cantidad de peróxidos de hidrógeno presentes en frutos
amarillos con peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca para ambas
cosechas.
Cuadro 11. Concentración de Peróxidos de Hidrogeno en albedos de limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
uMoles/gr
tejido uMoles/gr
tejido uMoles/gr
tejido Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con
peteca) (Amarillo sin
peteca) (Plateado sin
peteca) Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 55 79 82 72 12,083Norte-Bajo > peteca 61 55 57,9 57,97 2,450 Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca 55 154 80 96,33 42,034Sur-Bajo > peteca 101 113 215 143,00 51,147
Al analizar los resultados no se observa una tendencia clara en los resultados
obtenidos, esto posiblemente debido a la naturaleza inestable del peróxido de
hidrógeno, el cual presenta radicales libres, los cuales son extremadamente inestables
y de corta vida (duran millonésimas de segundo), por lo que cualquier molécula que
se encuentre en su vecindad inmediata se verá afectada (DESMARCHELIER, 1996).
54
Calidad de Pectinas:
El Cuadro 12 muestra el porcentaje de ácido galacturónico presentes en frutos
amarillos con peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca para ambas
cosechas.
Cuadro 12. Porcentaje de Ácido Galacturónico presente en las limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
% % % Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con
peteca) (Amarillo sin
peteca) (Plateado sin
peteca) Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 81 64 78 74,33 7,409 Norte-Bajo > peteca 66 79 68 71,00 7,409 Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca 49 50 44 47,67 2,625 Sur-Bajo > peteca 61 69 75 68,33 5,735
Al analizar los resultados no se observa una tendencia clara entre los tratamientos. Se
sabe que durante la maduración de los frutos, los tejidos se reblandecen y pierden
cohesión, hay un incremento de pectina soluble en agua acompañada de una pérdida
de protopectina (BARTLEY Y KNEE, 1982). Este incremento de pectina soluble en
agua se debería a la acción de las poligalacturonasas, las que actúan sobre el ácido
galacturónico (PRESSLEY et al. 1971). El que no existan grandes diferencias entre
limones plateados y amarillos, podría ser causa de la evolución que experimentaron
los limones plateados durante los 40 días de almacenaje refrigerado.
55
El Cuadro 13 muestra el porcentaje de Metoxilos presentes en frutos amarillos con
peteca, amarillos sin peteca y plateados sin peteca para ambas cosechas y que es otro
indicador de la calidad de pectinas.
Cuadro 13. Porcentaje de Metoxilos presentes en limones cv Eureka luego de almacenaje a 7ºC por 40 días y en dos fechas de cosecha.
% % % Promedio DS Fruto 1 Fruto2 Fruto3
(Amarillo con
peteca) (Amarillo sin
peteca) (Plateado sin
peteca) Primera Cosecha Sur-Bajo < peteca 7,44 7,75 6,51 7,23 0,527 Norte-Bajo > peteca 7,44 6,82 6,51 6,92 0,387 Segunda Cosecha Norte-Alto < peteca 8,99 8,06 7,75 8,27 0,527 Sur-Bajo > peteca 7,75 8,37 6,82 7,65 0,637
El grado de metilación tiene un papel importante en la firmeza y cohesión de los
tejidos vegetales (VAN BUREN, 1991). Según el grado de metoxilación, la pectina
logrará una velocidad diferente de gelificación en función de la temperatura. Entre
menor sea el grado de metoxilación de las pectinas, menor es la temperatura a la cual
gelifican.
Durante la maduración de la fruta existe un cambio muy bajo en el grado de
metilación de la las pectinas del limón, debido a la baja actividad de la
pectinmetilesterasa en el albedo de la cáscara (ROUSE, 1977). Esto se ve reflejado en
56
el cuadro anterior, en el cual hay pequeñas variaciones en los datos, observándose un
menor porcentaje de Metoxilos en la fruta de color plateada que en la amarilla.
4.2 Ensayo 2
4.2.1 Grosor de cáscara:
Del análisis al grosor de la cáscara de los limones (Anexo 3), se determinó que existe
efecto solamente del almacenaje refrigerado, no así del punto cardinal, de la posición
ni del color de cosecha. Por otra parte, no existe efecto de las interacciones de los
factores, exceptuando la interacción entre posición y almacenaje refrigerado.
4.2.1.1 Efecto de la interacción posición y almacenaje refrigerado.
Al comparar las medias para la interacción posición del fruto en el árbol y almacenaje
refrigerado (Cuadro 14), se encontró que los limones evaluados antes de ingresar a
cámara y ubicados en el sector alto de la copa, son los que tienen un mayor grosor
promedio de cáscara.
Cuadro 14. Grosor promedio de cáscara en limones cv Eureka según posición del fruto en el árbol y almacenaje refrigerado.
Tratamientos Grosor de cáscara
(mm) Alto; Antes de almacenaje 8,17 c Alto; Después de almacenaje 6,52 a Bajo ; Antes del almacenaje 7,35 bc Bajo ; Después de almacenaje 6,72 a
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
57
Esto se debería, al igual que en el caso anterior, a la gran influencia que tiene sobre el
parámetro grosor de cáscara el almacenaje de la fruta que conlleva a una
deshidratación y pérdida de agua del limón.
4.2.2 Porcentaje de jugo:
Del análisis al porcentaje de jugo (Anexo 4), se determinó con un error del 5%, que
no existe efecto significativo del punto cardinal, de la posición, del índice de
madurez ni del almacenaje refrigerado. Por otra parte, no existe efecto de las
interacciones de los factores, exceptuando la interacción entre punto cardinal e índice
de madurez.
4.2.2.1 Efecto de la interacción punto cardinal y color de cosecha.
Al comparar los promedios de porcentaje de jugo de los limones para la interacción
entre punto cardinal y color de cosecha (Cuadro 15), se determinó que la gran
diferencia se encuentra en los limones ubicados en la orientación sur cosechados con
índice plateados, que presentan un menor porcentaje de jugo.
Cuadro 15. Porcentaje de jugo promedio en limones cv Eureka según Punto cardinal y color de cosecha.
Tratamientos Porcentaje de jugo
Norte; Amarillos 29,66 ab Norte; Plateados 30,50 ab Sur ; Amarillos 32,06 b Sur ; Plateados 28,93 a
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
Al ir madurando los limones el porcentaje de jugo va aumentando y llega a
estabilizarse en la etapa final del proceso de madurez (MAZZUZ, 1996; FUCHS Y
58
VIDAL, 1971). Esto se ve reflejado en los resultados anteriores que muestran
diferencias entre limones amarillos y plateados de la orientación sur de la copa,
teniendo los primeros una madurez más avanzada y un mayor contenido de jugo. En
general no existen grandes diferencias debido a que tanto los limones amarillos como
plateados se encuentran en un estado avanzado de madurez. Según Cohen et al.
(1990), cuando los limones han alcanzado un porcentaje de jugo del orden del 28%,
no importando el color de de piel que presenten, se consideran maduros para ser
exportados.
4.2.3 Sólidos solubles:
Del análisis a los sólidos solubles de los limones (Anexo 5), se determinó con un
error del 5%, que existe efecto significativo del color de cosecha y del almacenaje
refrigerado, no así del punto cardinal y de la posición de los limones en el árbol.
Además, se concluye que no existe efecto de las interacciones de los factores.
4.2.3.1 Efecto del color de cosecha
Al comparar los promedios de sólidos solubles de los limones para el color de
cosecha (Cuadro 16), se determinó que los limones cosechados con color amarillo
presentan una menor cantidad de sólidos solubles que los plateados.
Cuadro 16. Grados Brix promedio de limones cv Eureka cosechados con dos estados de Madurez.
Tratamiento Promedio Sólidos solubles (Brix) Amarillos 6,07 a Plateados 6,51 b
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
59
Esto debido a que a medida que el limón va madurando y adquieren la coloración
amarilla, el contenido de jugo es mayor y se produce una difusión de los sólidos
solubles por lo que descienden gradualmente (REDARD, 1993; FUCHS Y VIDAL,
1971). En limones el contenido de sólidos solubles es casi constante al final de la
maduración, pero la acidez aumenta en cantidad y concentración y se corresponde
con un descenso de los azúcares y otros sólidos solubles. Este sería el motivo para
que limones cosechados de color plateado, tengan una mayor cantidad de sólidos
solubles que los cosechados de color amarillo con un estado de madurez más
avanzado.
4.2.3.2 Efecto del almacenaje refrigerado
Por otro lado los limones evaluados antes de ingresar a cámara (Cuadro 17), tienen un
menor promedio de sólidos solubles que a la salida de cámara.
Cuadro 17. Grados Brix promedio de limones evaluados antes y después de almacenaje.
Tratamiento Sólidos solubles (Brix)
Antes de almacenaje 5,75 a Después de almacenaje 6,83 b
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
Este aumento de sólidos solubles se debería principalmente a la solubilización de
componentes de la pared celular, tales como hemicelulosa y pectinas, por parte de
enzimas como la galactosidasa y glucosidasa (ECHEVERRÍA E ISMAIL, 1990).
Diversos autores han señalado que existe un aumento de los sólidos solubles en la
fruta cítrica a través del almacenamiento, tanto en limones como en naranjas, aunque
las razones no serían las mismas. En el limón, el aumento correspondería a un
incremento en los ácidos, mientras que en la naranja esto se debería a un aumento de
60
los azúcares solubles (BARTHOLOMEW, 1951). Otra razón que explicaría este
aumento luego del almacenaje, sería la deshidratación que sufre la fruta, es decir, por
la perdida de humedad de los tejidos, lo que produciría un aumento en la
concentración de sólidos solubles de la fruta. (LUTTGES, 2000).
4.2.4 pH:
Del análisis al pH de los limones (Anexo 6), se determinó que existe efecto
significativo sólo del almacenaje refrigerado, no así, del color de cosecha, del punto
cardinal y de la posición de los limones en el árbol. Además, se concluye que no
existe efecto de las interacciones de los factores.
4.2.4.1 Efecto del almacenaje refrigerado
Al comparar los promedios de pH de los limones con respecto al almacenaje
refrigerado (Cuadro 18), se determinó que los limones antes del almacenaje presentan
un pH mayor que al término del este.
Cuadro 18. pH promedio de limones cv Eureka evaluados antes y después de almacenaje refrigerado.
Tratamiento pH
Antes del almacenaje 2,62 b Después de almacenaje 2,33 a Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
Las sales y ácidos libres presentes en el zumo del limón crean una solución tampón
de pH, que se mantiene bastante estable frente a tratamientos térmicos (SINCLAIR,
1984). Los resultados de la tabla anterior coinciden plenamente con estudios
realizados en Chile por CORFO-ENAFRI (1971), que determinaron que el pH del
61
limón en almacenaje varía entre valores de 2,3 y 2,7 como resultado de aumentos de
ácidos libres en el jugo haciendo disminuir el pH en forma relativamente pequeña,
debido al efecto tampón antes mencionado.
4.2.5 Acidez titulable:
Del análisis al porcentaje de acidez de los limones (Anexo 7), se determinó que existe
efecto del color de cosecha y del almacenaje refrigerado, no así de punto cardinal ni
de la posición de los limones en el árbol. Por otra parte, existe efecto solamente de la
interacción entre: índice de madurez con almacenaje refrigerado.
4.2.5.1 Efecto de la interacción entre color de cosecha y almacenaje refrigerado.
En el Cuadro 19 se puede observar que antes y después de almacenaje refrigerado los
valores de acidez titulable en limones plateados son iguales, situación que no ocurre
en los amarillos, donde significativamente se incrementa la acidez. De todos modos el
nivel de acidez de los limones amarillos después de almacenaje es igual al de los
plateados después de almacenaje, demostrando así que el limón plateado es más ácido
que el amarillo recién cosechado.
Cuadro 19. Acidez titulable promedio de limones cv Eureka cosechados de color amarillo y plateado, antes y después de almacenaje refrigerado.
Tratamientos Acidez titulable (gr ácido cítrico/100cc de jugo)
Amarillos; Antes de almacenaje 3,57 a Amarillos; Después de almacenaje 5,07 b Plateados; Antes de almacenaje 4,18 ab Plateados; Después de almacenaje 5,06 b
Letras iguales indican que no existen diferencias significativas entre tratamientos, se comparan las medias con el Test de Tukey al 5%.
62
El efecto del color de cosecha sobre la acidez titulable indicado anteriormente,
concuerda con los resultados obtenidos por CARVAJAL (1970), quien al comparar
frutos amarillos, con frutos verde claro en las localidades de Melipilla y Peumo,
encontró que en ambas localidades, los limones de color amarillo presentaron menor
acidez que la fruta de color verde claro. No está absolutamente claro la disminución
de la acidez en la fruta cítrica a medida que va madurando, esto debido a que
normalmente el porcentaje de estos compuestos tiende a disminuir y la cantidad de
jugo a aumentar, por lo que puede ocurrir que la cantidad absoluta de ácido en la fruta
permanezca constante durante su desarrollo, y que su porcentaje en el jugo
aparentemente disminuya debido al aumento de la cantidad de jugo (BRAVERMAN,
1980).
Los resultados anteriores también coinciden con lo señalado por BARTHOLOMEW
(1951), quien señala que en limones durante el almacenaje existe un aumento de la
acidez total del jugo del limón, expresada en ácido cítrico.
4.2.6 Color de la fruta:
En el Cuadro 20 se observa los datos del color promedio de limones evaluados antes
y después de 40 días de almacenaje refrigerado obtenidos mediante el uso de un
colorímetro.
63
Cuadro 20. Promedio de color de limones cv Eureka evaluados antes y después de almacenaje refrigerado.
Tratamiento Antes de almacenaje Después de almacenaje
Norte; Alto; Amarillo -10,2 -14,8 Norte; Alto; Plateado -10,8 -52,9 Norte; Bajo; Amarillo -11,1 -48,3 Norte; Bajo; Plateado -9,5 -21,6 Sur; Alto; Amarillo -3,7 -10 Sur; Alto; Plateado -3,2 -5,1 Sur; Bajo; Amarillo -3,3 -6,1 Sur; Bajo, Plateado 2,8 -4,3
Para el caso de limones la relación utilizada fue b/a, la cual muestra la evolución del
color desde verde al amarillo, entre más negativo sea el valor, mayor es la tendencia
hacia el color amarillo. Según los datos expuestos en el cuadro anterior se podría
señalar que hay un efecto del punto cardinal y del almacenaje. La fruta cosechada
desde la orientación norte de la copa del árbol muestra una mayor evolución hacia las
tonalidades más amarillas y alejándose del verde, que aquella cosechada desde el lado
sur, independiente del color de cosecha. Un factor que influye directamente en esto es
la luz, ya que interviene en los procesos de síntesis de carotenoides y antocianos. Por
lo tanto los frutos del norte al tener una mayor exposición a la luz durante el día son
más coloreados que los frutos más sombreados del sur (MAZZUZ, 1996).
Otro factor que estaría involucrado en el desarrollo del color es la temperatura
ambiente. Como se señaló anteriormente cuando se tocó el tema peteca, las
temperaturas entre el lado sur y norte del árbol presentaron diferencias importantes.
En el Cuadro 20, se puede además observar que los valores de b/a de limones
provenientes de la cara sur del árbol, independiente de su posición y color de cosecha,
se hacen más negativos (tendencia hacia el amarillo) en 40 días de almacenaje
refrigerado a 7ºC y con una HR de 95%. Sin embargo, dichos valores no alcanzan a
64
llegar a los valores que presentan los frutos provenientes del Norte antes de
almacenaje.
65
5. CONCLUSIONES
En lo que respecta a Peteca se determina que:
- Existe efecto de la fecha de cosecha tanto para peteca epidermal como
subepidermal, por lo que cosechas de fines de junio presentan una mayor incidencia y
grado de severidad de peteca que fruta cosechada a fines de agosto.
- Existe efecto del color de cosecha tanto en el caso de peteca epidermal como de
peteca subepidermal, por lo que limones cosechados de color amarillo presentan una
mayor incidencia de este desorden que los cosechados de color plateado.
- Existe efecto de la posición (arriba o abajo) de la fruta en la copa del árbol sobre la
incidencia de peteca epidermal y subepidermal, pero formando parte de una
interacción con otros factores.
- Existe efecto de la posición cardinal del fruto en el árbol en el caso de peteca
epidermal y subepidermal, encontrándose menores porcentajes de peteca en los frutos
cosechados desde la cara norte que desde la sur en la cosecha de agosto.
En lo que respecta a los parámetros de calidad se concluye que:
- Existe efecto del almacenaje refrigerado sobre los parámetros de calidad: grosor de
cáscara, sólidos solubles, pH, acidez titulable y color de la fruta. Al término del
almacenaje por 40 días a 7ºC y con una HR del 95%, la fruta presenta un menor
grosor de cáscara, mayor contenido de sólidos solubles, menor pH, mayor acidez y
una coloración más amarilla que antes de ser almacenada.
66
- Existe efecto del color de cosecha de la fruta sobre los parámetros de calidad:
sólidos solubles y acidez titulable. Los limones cosechados de color amarillo,
presentan una menor cantidad de sólidos solubles y una mayor acidez, que los
cosechados de color plateado. Por otro lado también existe efecto del color de
cosecha sobre el porcentaje de jugo, pero interactuando con el punto cardinal desde
donde fue cosechada la fruta, presentándose el menor contenido de jugo en los
limones cosechados de color plateado y desde la cara sur del árbol.
- Existe efecto de posición cardinal del fruto en la copa del árbol sobre los parámetros
porcentaje de jugo y color de la fruta. La fruta cosechada desde la cara sur y de color
plateado presenta los menores porcentajes de jugo. Además, limones cosechados
desde la cara norte de la copa muestra una mayor evolución hacia las tonalidades
amarillas luego del almacenaje refrigerado que la fruta ubicada en el sur,
independientemente de su posición (arriba o abajo) y del color de cosecha.
- Existe efecto de la posición de la fruta en la copa del limonero en conjunto con
almacenaje refrigerado sobre el parámetro grosor de cáscara. Se encontró que los
limones evaluados antes de almacenaje y ubicados en el sector alto de la copa, son los
que tienen un mayor grosor promedio de cáscara.
67
6. RESUMEN
La peteca, es un desorden fisiológico en limones de invierno que se presenta generalmente en postcosecha y se caracteriza por la presencia de depresiones circulares necrosadas en el albedo de la fruta, lo que provoca problemas en la apariencia externa de la fruta lo cual hace que pierda parcial o totalmente su valor para la venta en fresco. La incidencia de peteca estaría relacionada con variados factores como son déficit de calcio y condiciones climáticas, principalmente baja temperatura y alta humedad relativa durante el período de madurez del fruto. La presente investigación buscó evaluar si existe relación entre la ubicación (cardinal y en altura) del fruto en la copa del árbol, su estado de madurez y la fecha de cosecha, sobre la presencia de peteca epidermal y subepidermal en postcosecha. Para ello, se utilizaron limones cv Eureka, con dos estados de madurez (amarillo y plateado), cosechados en forma diferenciada desde cuatro sectores de la copa: norte-alto, norte-bajo, sur-alto y sur-bajo. Además se procedió a instalar en cada uno de estos sectores sensores de temperatura y humedad relativa. Una vez cosechada la fruta se almacenó en cámara frigorífica a 7 ºC y con un 95% de HR por 40 días. Las mediciones de peteca y de los parámetros de calidad (grosor de cáscara, sólidos solubles, pH, acidez titulable, porcentaje de jugo y color de la fruta) se realizaron antes y después de almacenaje. Además para el caso de peteca se realizaron dos cosechas una a fines de junio y otra a fines del mes de agosto. Del ensayo se desprende que existe efecto de la fecha de cosecha, tanto para peteca epidermal como subepidermal. Las cosechas de fines de junio presentaron una mayor incidencia de peteca, que cosechas de fines de agosto. El color de cosecha es un factor importante tanto para peteca epidermal como subepidermal, siendo los limones amarillos los más predisponentes a presentar el desorden. Por otro lado la posición cardinal del fruto tiene efecto para la peteca epidermal y subepidermal, siendo los limones ubicados en la cara sur los más predisponentes a presentarlas. Por otro lado, se encontró que existe efecto de la posición (arriba o abajo) del fruto en la copa del árbol interactuando con otros factores sobre la aparición de peteca en postcosecha. Además se observó que existe efecto del almacenaje refrigerado sobre los parámetros de calidad: grosor de cáscara, sólidos solubles, pH, acidez titulable y color de la fruta. La fruta presenta un menor grosor de cáscara, mayor contenido de sólidos solubles, menor pH, mayor acidez y una coloración más amarilla antes de ser almacenada. Por otro lado fruta cosechada de color plateado presenta una mayor concentración de sólidos solubles y una menor acidez titulable. La posición cardinal solo tiene un efecto sobre el porcentaje de jugo y color de la fruta. La fruta cosechada desde la cara sur y de color plateado presenta los menores porcentajes de jugo.
68
7. ABSTRACT Peteca is a physiological disorder in winter lemons that appear generally in postharvest and it is characterized by the presence of necrosadas circular depressions in the Albedo of the fruit, which causes problems in the external appearance of the fruit which causes that it loses partisan or totally his value for the sale in fresh. The peteca incidence would be related to varied factors as they are calcium deficit and climatic conditions, mainly low temperature and discharge relative humidity during the period of maturity of the fruit. The present investigation evaluated the relationship between the location of the fruit in the canopy of tree (cardinal and height), its state of maturity and the date of harvest, on the presence of epidermal and subepidermal peteca during postharvest. Lemons of the cultivar Eureka were harvested at two states of maturity, yellow and silverplated, taken from four different sectors of the canopy: North-high, North-low, South-high and the South-low. In addition, temperature and relative humidity (RH) sensor were installed in each sector. Once the fruit was harvested, it was stored at 7ºC in a refrigerated chamber at 95% RH for 40 days. The measurements of peteca and fruit quality parameters: rind thickness, soluble solids, pH, titratable acidity, percentage of juice and fruit color, were made both before and after storage. In addition, to evaluate the peteca, there were two harvests, one at the end of june and the other at the end of august. From the results it can be concluded that there is as much of an effect from the harvest date for epidermal peteca as subepidermal peteca, and that the june harvest showed a greater incidence of peteca than the august harvest. The harvest color is an important factor as much for epidermal peteca as subepidermal, being prediponentes the yelow lemons to display it. On the other hand the cardinal position of the fruit has effect for the epidermal and subepidermal peteca, being the lemons located in the Southern side predisposed to display it. On the other hand, one was that effect of the position (high or low) of the fruit in the glass of the tree exists interacting with other factors on the appearance of peteca in postharvest. In addition it was observed that effect of the storage cooled on the quality parameters exists: rind thickness, soluble solids, pH, titratable acidity and fruit color. The fruit presents displays a smaller thickness of rind, greater soluble solids content, minor, pH, greater acidity and one more a yellower coloration before being stored. Fruit on the other hand harvested of silverplated color presents/displays a greater soluble solids concentration and a smaller titratable acidity. The cardinal position has an effect on the percentage of juice and color of the fruit. The fruit harvested from the Southern side and of silverplated color present/display the smaller percentage of juice.
69
8. LITERATURA CITADA
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74
ANEXOS
75
ANEXO 1. ANOVA para el Porcentaje de Peteca Epidermal de limones cv Eureka
.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-TablaPunto Cardinal (O) 1 0,0005 0,0005 0,05 n.s. 4,13 Posición (P) 1 0,0020 0,0020 0,21 n.s. 4,13 Color de Cosecha (M) 1 0,6040 0,6040 62,82 * 4,13 Fecha Cosecha (C) 1 0,8698 0,8698 90,46 * 4,13 O*P 1 0,0242 0,0242 2,51 n.s. 4,13 O*M 1 0,0316 0,0316 3,28 n.s. 4,13 O*C 1 0,1109 0,1109 11,54 * 4,13 P*M 1 0,0242 0,0242 2,51 n.s. 4,13 P*C 1 0,0000 0,0000 0,00 n.s. 4,13 M*C 1 0,0123 0,0123 1,28 n.s. 4,13 O*P*M 1 0,0079 0,0079 0,82 n.s. 4,13 O*P*C 1 0,0597 0,0597 6,21 * 4,13 O*M*C 1 0,0316 0,0316 3,28 n.s. 4,13 P*M*C 1 0,0123 0,0123 1,28 n.s. 4,13 O*P*M*C 1 0,0000 0,0000 0,00 n.s. 4,13 Error 32 0,3077 0,0096 Total 47 2,0986 C.V.= 38.2%
* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
76
ANEXO 2. ANOVA para el Porcentaje de Peteca Subepidermal de limones cv
Eureka.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 0,0770 0,0770 7,62 * 4,13
Posición (P) 1 0,0277 0,0277 2,74 n.s. 4,13
Color de Cosecha (M) 1 0,0001 0,0001 0,01 n.s. 4,13
Fecha de Cosecha (C) 1 0,2960 0,2960 29,28 * 4,13
O*P 1 0,0100 0,0100 0,99 n.s. 4,13
O*M 1 0,0149 0,0149 1,48 n.s. 4,13
O*C 1 0,0544 0,0544 5,38 * 4,13
P*M 1 0,0001 0,0001 0,01 n.s. 4,13
P*C 1 0,0277 0,0277 2,74 n.s. 4,13
M*C 1 0,0100 0,0100 0,99 n.s. 4,13
O*P*M 1 0,0208 0,0208 2,06 n.s. 4,13
O*P*C 1 0,0445 0,0445 4,40 * 4,13
O*M*C 1 0,0770 0,0770 7,62 * 4,13
P*M*C 1 0,0060 0,0060 0,60 n.s. 4,13
O*P*M*C 1 0,0770 0,0770 7,62 * 4,13
Error 32 0,3235 0,0101
Total 47 1,0669 C.V.= 39.5%* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
77
ANEXO 3. ANOVA para el Grosor de Cáscara de limones cv Eureka.
.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 0,0326 0,0326 0,05 n.s. 4,13
Posición (P) 1 1,1378 1,1378 1,59 n.s. 4,13
Color de cosecha (M) 1 1,1876 1,1876 1,65 n.s. 4,13
Almacenaje Refrigerado (F) 1 15,5838 15,5838 21,71 * 4,13
O*P 1 0,2147 0,2147 0,30 n.s. 4,13
O*M 1 1,0355 1,0355 1,44 n.s. 4,13
O*F 1 0,3251 0,3251 0,45 n.s. 4,13
P*M 1 0,0527 0,0527 0,07 n.s. 4,13
P*F 1 3,1059 3,1059 4,33 * 4,13
M*F 1 0,3251 0,3251 0,45 n.s. 4,13
O*P*M 1 0,0403 0,0403 0,06 n.s. 4,13
O*P*F 1 1,2002 1,2002 1,67 n.s. 4,13
O*M*F 1 0,0230 0,0230 0,03 n.s. 4,13
P*M*F 1 2,0792 2,0792 2,90 n.s. 4,13
O*P*M*F 1 0,0078 0,0078 0,01 n.s. 4,13
Error 32 22,9752 0,7180
Total 47 49,3260 C.V.= 11.8%* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
78
ANEXO 4. ANOVA para el Porcentaje de Jugo de limones cv Eureka.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 2,0833 2,0833 0,22 n.s. 4,13
Posición (P) 1 6,6008 6,6008 0,69 n.s. 4,13
Color de Cosecha (M) 1 15,6408 15,6408 1,63 n.s. 4,13
Almacenaje Refrigerado (F) 1 10,8300 10,8300 1,13 n.s. 4,13
O*P 1 3,4133 3,4133 0,36 n.s. 4,13
O*M 1 47,2033 47,2033 4,91 * 4,13
O*F 1 10,2675 10,2675 1,07 n.s. 4,13
P*M 1 1,5408 1,5408 0,16 n.s. 4,13
P*F 1 0,0300 0,0300 0,00 n.s. 4,13
M*F 1 28,2133 28,2133 2,93 n.s. 4,13
O*P*M 1 4,3200 4,3200 0,45 n.s. 4,13
O*P*F 1 23,2408 23,2408 2,42 n.s. 4,13
O*M*F 1 2,3408 2,3408 0,24 n.s. 4,13
P*M*F 1 13,6533 13,6533 1,42 n.s. 4,13
O*P*M*F 1 33,6675 33,6675 3,50 n.s. 4,13
Error 32 307,7667 9,6177
Total 47 510,8125 C.V.= 10.2%* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
79
ANEXO 5. ANOVA para los Sólidos Solubles ° Brix de limones cv Eureka.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 0,1408 0,1408 0,57 n.s. 4,13
Posición (P) 1 0,9075 0,9075 3,67 n.s. 4,13
Color de Cosecha (M) 1 2,3408 2,3408 9,46 * 4,13
Almacenaje Refrigerado (F) 1 13,8675 13,8675 56,03 * 4,13
O*P 1 0,0675 0,0675 0,27 n.s. 4,13
O*M 1 0,9075 0,9075 3,67 n.s. 4,13
O*F 1 0,1008 0,1008 0,41 n.s. 4,13
P*M 1 0,2408 0,2408 0,97 n.s. 4,13
P*F 1 0,0208 0,0208 0,08 n.s. 4,13
M*F 1 1,0208 1,0208 4,12 n.s. 4,13
O*P*M 1 0,9075 0,9075 3,67 n.s. 4,13
O*P*F 1 0,0008 0,0008 0,00 n.s. 4,13
O*M*F 1 0,8008 0,8008 3,24 n.s. 4,13
P*M*F 1 0,0075 0,0075 0,03 n.s. 4,13
O*P*M*F 1 0,5208 0,5208 2,10 n.s. 4,13
Error 32 7,9200 0,2475
Total 47 29,7725 C.V.= 7.9%* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
80
ANEXO 6. ANOVA para el pH de limones cv Eureka.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 0,0015 0,0015 1,42 n.s. 4,13
Posición (P) 1 0,0003 0,0003 0,24 n.s. 4,13
Color de Cosecha (M) 1 0,0033 0,0033 2,98 n.s. 4,13
Almacenaje Refrigerado (F) 1 1,0179 1,0179 948,74 * 4,13
O*P 1 0,0032 0,0032 2,95 n.s. 4,13
O*M 1 0,0002 0,0002 0,16 n.s. 4,13
O*F 1 0,0008 0,0008 0,70 n.s. 4,13
P*M 1 0,0000 0,0000 0,02 n.s. 4,13
P*F 1 0,0000 0,0000 0,00 n.s. 4,13
M*F 1 0,0015 0,0015 1,42 n.s. 4,13
O*P*M 1 0,0013 0,0013 1,21 n.s. 4,13
O*P*F 1 0,0032 0,0032 2,95 n.s. 4,13
O*M*F 1 0,0015 0,0015 1,42 n.s. 4,13
P*M*F 1 0,0039 0,0039 3,59 n.s. 4,13
O*P*M*F 1 0,0003 0,0003 0,24 n.s. 4,13
Error 32 0,0343 0,0011
Total 47 1,0870 C.V.= 1.3% * : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas
81
ANEXO 7. ANOVA para el Porcentaje de Acidez Titulable de limones cv Eureka.
Fuente de Variación G.l. S. Cuadrados S. C. Medios F F-Tabla
Punto Cardinal (O) 1 0,1541 0,1541 1,62 n.s. 4,13
Posición (P) 1 0,0000 0,0000 0,00 n.s. 4,13
Color de Cosecha (M) 1 0,0440 ,0440 11,28 * 4,13
Almacenaje Refrigerado (F) 1 17,0170 17,0170 178,70 * 4,13
O*P 1 0,2518 0,2518 2,66 n.s 4,13
O*M 1 0,2677 0,2677 2,72 n.s 4,13
O*F 1 0,0127 0,0127 0,13 n.s. 4,13
P*M 1 0,0070 0,0070 0,07 n.s. 4,13
P*F 1 0,1519 0,1519 1,60 n.s. 4,13
M*F 1 1,1907 1,1907 12,50 * 4,13
O*P*M 1 0,0954 0,0954 1,00 n.s. 4,13
O*P*F 1 0,2054 0,2054 2,16 n.s. 4,13
O*M*F 1 0,2172 0,2172 2,24 n.s 4,13
P*M*F 1 0,0432 0,0432 0,45 n.s. 4,13
O*P*M*F 1 0,2408 0,2408 2,53 n.s. 4,13
Error 32 3,0473 0,0952
Total 47 24,6586 C.V.= 6.9%* : existen diferencias significativas n.s : no existen diferencias significativas