UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO

TÉCNICAS HISTOLOGICAS

PROCESAMIENTO DE TEJIDOS: FASES (FINALIDAD Y

OBJETIVOS), LÍQUIDOS UTILIZADOS O SUSTITUTOS (VENTAJAS

Y DESVENTAJAS), TIEMPOS DE CADA UNO (OPCIONES Y

TEMPERATURAS).

AUTOR:

José David Guayanlema Chávez

PROFESOR: Iván Peñafiel

CURSO: Tercero Semestre

PERIODO: Septiembre 2013-Marzo 2014

FECHA: 03 de Diciembre del 2013

RIOBAMBA-ECUADOR

OBJETIVOS:

Objetivo General:

Conocer el procedimiento que debe realizarse ante una muestra de Anatomía Patológica.

Objetivos Específicos:

Conocer en que consiste la recepción de la muestra. Conocer en que consiste la fijación de la muestra y cuáles son los más usados. Conocer tiempo de fijación y la manera correcta de fijar una muestra. Conocer en que consiste la inclusión e infiltración de una muestra. Conocer en que consiste el tallado de una muestra. Conocer en que consiste el corte y tinción de una muestra.

PROCESAMIENTO DE TEJIDOS: FASES (FINALIDAD Y

OBJETIVOS), LÍQUIDOS UTILIZADOS O SUSTITUTOS (VENTAJAS

Y DESVENTAJAS), TIEMPOS DE CADA UNO (OPCIONES Y

TEMPERATURAS).

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RECE

PCIO

N D

E LA

MU

ESTR

A Comienza en la sala de operaciones o en la consulta médica; la enfermera tiene la responsabilidad de preguntar con anticipación

al cirujano si el material requiere examen urgente.

Se dispondrá de recipientes de diferentes tamaños, plásticos con tapa hermética y fijador.

Es muy importante que el Servicio de Patología elabore un instructivo para la toma, manejo y envío de las muestras, los

recipientes, formularios, horario etc.

Una vez extraída la pieza quirúrgica o biopsia debe ser colocada en el fijador (formol buferado al 10%) cuando la pieza quirúrgica requiere de fotografías, esta debe preservarse en refrigeración a 4 grados C.

El recipiente con la muestra debe estar debidamente rotulado con el nombre del paciente, con letra legible, sitio de origen de la

muestra y fecha.

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DESCRIPCION MACROSCÓPICA

Estará a cargo del patólogo y del

residente de segundo año de post-grado

bajo tutoría.

Deben utilizarse términos anatómicos,

palabras y frases concretas y precisas, de

tal manera que quien lea pueda reconstruir

mentalmente los datos fundamentales.

Existen sistemas informáticos que

contienen una cámara que realiza los cálculos para medidas y otros detalles y notaciones.

Se identificará en primer lugar el origen del tejido, las medidas en sus ejes mayores, el peso, una descripción

de la superficie externa indicando las

características visuales, la consistencia al tacto, el color de la superficie

y las estructuras anatómicas adheridas,

características de la neoplasia, etc.

Luego se describirá la superficie de corte

indicando la uniformidad del tejido o la presencia de cavidades, áreas de hemorragia, necrosis,

calcificaciones, tumores, etc.

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(1)

FIJACIÓNpreservar la constitución química y la

morfología de los componentes titulares.

El formaldehído no buferado con PH bajo (ácido, debido al ácido fórmico diluido) puede

producir depósitos en el tejido de pigmento de formalina que

al mezclarse con la sangre produce un precipitado

(hemateína ácida).

Este material fino, granular, café refringente, se precipita en los sitios de concentración

de la hemoglobina, especialmente alrededor de

los glóbulos rojos.

Entre los factores que

influyen en los resultados de

una buena fijación están:

a. intervalo entre la toma de biopsia en fijadorb. pH del fijador

c. tiempo de fijaciónd. temperatura del fijador

e. tamaño del tejido, yf. volumen del fijador

Fijadores de tejidos más empleados en anatomía patológica:

(1)

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DESHIDRATACION, INCLUSION E INFILTRACION

Se debe lavar el tejido para quitar exceso de

fijador, luego se deshidrata y se pasa por un líquido intermediario

que es miscible con la parafina.

Infiltración: En este paso la muestra se coloca en

parafina liquida, de manera que se impregne

con ella.

Inclusión: Aquí se forman bloques de

parafina y dentro de estos bloques están las muestras a estudiar. Se

deja enfriar para que adquiera dureza.

A continuación un gráfico en el que podemos apreciar tiempos y como se lleva a cabo la deshidratación, infiltración e inclusión:

(4)

Formas en las que se debe realizar el corte en diferentes tipos de muestras:

CORTE

El micrótomo es un instrumento que permite

obtener cortes muy delgados de muestra

(5μm).

CorteLos cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta.

Luego se echan a un baño de flotación para que se estiren y se

rescatan con un portaobjetos, que luego se calienta para

evaporar el agua y que los cortes queden adheridos.

TalladoPrevio al corte, se debe tallar

el bloque para el obtener secciones adecuadas en el

micrótomo.

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En las biopsias de piel se cortan los 4 márgenes de 1 a 2 mm, dejando al centro

una pieza rectangular.

En una lesión pigmentada de la piel deben realizarse cortes seriados a través de

esa área y particularmente a través de las pápulas o

nódulos.

En el caso de una vesícula o pápula, el corte debe ser a

través de ésta, pues muchas veces nos dará valiosa

información diagnóstica.

En los cortes de paredes de órganos deben tomarse en

cuenta el espesor y sus capas.

Los cortes de un tumor deben comprender tejido

sano y tumoral, además los bordes de resección en sus

cuatro cuadrantes.

En casos de cortes de órganos, debe seguirse el

eje longitudinal y perpendicular a la

superficie.

TALLADO

MICROTOMO

(4)

CORTE

(4) y (1)

NOTA: Para las biopsias de piel, riñón, hígado y médula ósea se utilizarán de rutina, además de H&E, las coloraciones de PAS y tricrómico de Masson, hierro, reticulina, mucicarmin, Giemsa, Pas alcian blue, fibras elásticas, rojo congo, plata (Jones) etc. (1)

TINCION

La muestra debe desparafinarse y pasar por

una serie de soluciones.

Finalmente, las muestras se deshidratan y se montan

para ser vistas al microscopio.

En las biopsias pulmonares, además de las tinciones

rutinarias H&E, fibras elásticas, tricrómico deben

emplearse las tinciones para hierro y otros.

Las placas se tiñen con la técnica de hematoxilina/eosina u otra

especial.

(1)

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Conclusiones y Recomendaciones:

Conclusiones:

Conocí el procedimiento que debe realizarse ante una muestra de Anatomía Patológica. Conocí en que consiste la recepción de la muestra. Conocí en que consiste la fijación de la muestra y cuáles son los más usados. Conocí tiempo de fijación y la manera correcta de fijar una muestra. Conocí en que consiste la inclusión e infiltración de una muestra. Conocí en que consiste el tallado de una muestra. Conocí en que consiste el corte y tinción de una muestra.

Recomendaciones:

El micrótomo es un equipo muy peligroso ya que podemos cortarnos con él y debemos trabajar con mucho cuidado cuando lo usemos.

Aprender el uso de cada equipo ya que así evitaremos accidentes innecesarios al momento de trabajar con él.

Saber los tiempos y cuando debemos quitar o agregar algo en los procesos de fijación.

Linkografía:

Trabajos citados1. Díaz, Dr. Nicolás Vivar. MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN ANATOMIA PATOLOGICA. QUITO-ECUADOR : ROCHE, 2010.

2. Contreras, Sonia Sacsaquispe. ACTUALIDAD ODONTOLOGICA Y SALUD. [En línea] 13 de 09 de 2013. http://www.actualidadodontologica.com/interpretacion_examen_anatomo_patologico.php.

3. Gobierno de España. Situaciones de trabajo peligrosas. [En línea] 04 de 10 de 2013. http://stp.insht.es:86/stp/basequim/010-tallado-de-muestras-en-anatom%C3%ADa-patol%C3%B3gica-exposici%C3%B3n-formaldeh%C3%ADdo.

4. Chile, Estudiantes de Universidad de. Slideshare.com. [En línea] 29 de 11 de 2010. http://www.slideshare.net/cosaparahacerunblog/procesamiento-de-muestras-para-anatoma-patolgica-5969905.