soluciones de preparación de muestras y cromatografía ... · con ostro es menor que en la...
TRANSCRIPT
SOLUCIONES DE CONSUMIBLES PARA BIOANÁLISIS
Soluciones de preparación de muestras y
cromatografía líquida para operaciones cuantitativas de
BIOANÁLISIS
En Waters comprendemos los singulares desafíos a los que se enfrenta la comunidad
bioanalítica, como la necesidad de aumentar al máximo la sensibilidad, incrementar el
rendimiento y crear nuevos métodos robustos que se puedan transferir a laboratorios
de todo el mundo. En consecuencia, creamos soluciones de preparación de muestras y
cromatografía líquida para bioanálisis cuantitativo en torno a un flujo de trabajo sencillo
y lógico que ofrece muestras limpias y separaciones selectivas.
Y para llegar al cenit en la calidad de los datos bioanalíticos, la productividad del
laboratorio y el cumplimiento normativo, integramos estas químicas punteras con
la solución del Sistema de bioanálisis regulado de Waters. Combina
deliberadamente la nueva ACQUITY UPLC® I-Class de dispersión reducida
–la mejor entrada actual de su clase para MS– con el espectrómetro de
masas de alta sensibilidad Xevo® TQ-S, bajo el control de un nuevo
software utilizando el sistema de información científica UNIFI™,
preparado para ajustarse a la normativa.
2
SOLUCIONES DE CONSUMIBLES PARA BIOANÁLISIS
3
■ Un diseño singular elimina pasos dilatorios para aumentar el rendimiento.
■ Filtrado libre de precipitados para lograr el máximo de actividad del sistema frente a los métodos clásicos.
■ Perfecto por su limpieza, compatibilidad con MS y recuperación del analito.
Principales Ventajas:
SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS
4
COMPARACIÓN DE TIEMPOS DE PROCESAMIENTO
Con las placas Sirocco, las muestras pueden procesarse en un tiempo significativamente menor que con PPT clásica, aumentando así el rendimiento del laboratorio.
RECUPERACIÓN
La placa Sirocco fue analizada para determinar la recuperación del analito utilizando 7 analitos salpicados en plasma de rata, empleando un estándar interno. Los resultados muestran excelentes recuperaciones en todos los analitos enumerados.
SIMPLEMENTE TRANSPARENTE
La placa de precipitación de proteínas (PPT) Sirocco™ elimina los pasos adicionales dilatorios de manipulación de muestras que se emplean tradicionalmente con la PPT clásica. La singular tecnología de las membranas y puntas de válvula permite que el analista lleve a cabo la precipitación de proteínas en el pocillo seguida del paso final de filtración. Este enfoque permite un procesamiento eficiente de las muestras que obtiene filtrados transparentes con pequeños volúmenes de muestra. Sirocco puede automatizarse para procesar gran número de muestras de forma eficiente.
PPT Clásica PPT Sirocco
Ejemplo de carga
Mix
Vacío
45 minutos 15 minutos
Ejemplo de carga
Mezcla
Centrifugación
Transferencia del
sobrenadante
Inyección Directa
Mezcla
80
100
60
40
20
0
Recu
pera
ción
por P
PT (%
)
Atenolo
l
Nado
lol
Metopro
lol
Oxpren
olol
Labe
talol
Alpre
nolol
Propra
nolol
PLACA DE PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS SIROCCO
5
ELIMINACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS
El nivel restante de 5 fosfolípidos tras la preparación de muestras con Ostro es menor que en la extracción líquido-líquido y que en la extracción líquida respaldada por sólidos.
REPRODUCIBILIDAD
Eliminación % comparativa de fosfolípidos totales de 6 lotes diferentes de plasma utilizando Ostro (RSD 0.19%), placa de eliminación de fosfolípidos del competidor A (RSD 24.5%) y placa de eliminación de fosfolípidos del competidor B (RSD 40.9%).
El camino más rápido a lo más limpio
Los productos de preparación de muestras Ostro™ ofrecen una solución novedosa para la limpieza de fosfolípidos en plasma y suero. Con un desarrollo de métodos mínimo o nulo y utilizando un protocolo sencillo, esta tecnología puede incorporarse rápidamente para optimizar el flujo de trabajo de su laboratorio. La placa Ostro de 96 pocillos proporciona extractos más limpios y reproducibles que otros dispositivos o técnicas de eliminación de fosfolípidos y permite análisis más sensibles, mayor rendimiento de muestras y menos tiempo de parada de los instrumentos.
Suma de 5 fosfolípidos abundantes portadores de fosfatidilcolina con m/z 496, 524, 704, 758 y 806.
Ostro Competidor A Competidor B
1 2 3 4 5 60
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
% d
e el
imin
ació
n de
fosf
olíp
idos
0
50000
100000
150000
200000
250000
300000
350000
400000
Sum
a de
recu
ento
s del
áre
a de
5 fo
sfol
ípid
os
Ostro LLE SSLE
SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS
6
■ Elimina significativamente más fosfolípidos que las técnicas de la competencia, para obtener extractos más limpios.
■ Mejora la reproducibilidad para lograr métodos más homogéneos y consistentes.
■ Aumenta el rendimiento con un protocolo fácil de poner en práctica.
Principales Ventajas:
PRODUCTOS DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS OSTRO
7
■ Máxima sensibilidad para compuestos farmacéuticos tradicionales y péptidos terapéuticos.
■ Mínimos efectos de la matriz para análisis por LC/MS/MS.
■ Inigualable calidad del producto, rendimiento y reproducibilidad.
Principales Ventajas:
SOLUCIONES DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS
8
SENSIBILIDAD
CALIDAD
El cuidadoso diseño de procesos y los exhaustivos controles de calidad de Waters han establecido un nuevo estándar en reproducibilidad lote a lote para rellenos EFS. Esto permite a los investigadores desarrollar métodos bioanalíticos consistentes, exactos y precisos.
EFECTOS DE LA MATRIZ
Tras la extracción con un relleno mixto Oasis, se evaluaron los efectos de la ma-triz para un grupo de 5 antidepresivos en varios lotes de orina. Se determinó que la RSD de los factores de la matriz se hallaba entre el 5.5 y el 8.4 %, bastante inferior al límite del 15 % exigido por los organismos reguladores.
SenSibilidad en Su forma máS pura
La sensibilidad es uno de los principales requisitos para el éxito de un análisis biológico. Lograr la máxima sensibilidad requiere el aislamiento de compuestos de interés de las interfases presentes en las muestras biológicas. Los productos patentados Oasis® para extracción en fase sólida (SPE) están disponibles en una amplia gama de formatos y rellenos, que permiten a los investigadores desarrollar metodologías selectivas para los compuestos de interés. Los productos Oasis facilitan a los investigadores la creación de métodos de SPE reproducibles y de alta precisión, insuperables en su sensibilidad y selectividad.
Los rellenos mixtos Oasis, creados en torno al singular copolímero Oasis HLB humectable con agua, ofrecen dos modos de retención, lo que permite mayor selectividad y sensibilidad de limpieza para compuestos ácidos o básicos, incluso si el relleno de los pocillos se seca. Obtenga una sensibilidad inigualable con la placa Oasis µElution, que puede concentrar una muestra hasta 15x sin necesidad de evaporación o reconstitución.
RSD de la recuperación para: Procainamida: 1.90% Ranitidina: 1.68% Paracetamol: 1.65%
105
95
850 5 10 15 Años
% d
e re
cupe
ració
n
No hacen falta reservas de lotes: Altas recuperaciones homogéneas a lo largo de más de 15 años de producción.
Analito % RSD de los factores de
la matriz
Amitriptilina 6.03
Nortriptilina 5.53
Imipramina 8.36
Desipramina 7.15
Doxepina 5.96
PRODUCTOS OASIS PARA ExTRACCIÓN DE MUESTRAS
9
1.19
1.01
0.88
1.18
1.061.50
1.28 1.382.031.73
1.82 1.92
A. Muestra enriquecida
B. Blanco de matriz
A. Muestra enriquecida
B. Blanco de matriz
0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 min
%
0
100
0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0
%
0
100
%
0
100
%
0
100
1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78
1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 min
1.61
1.521.55
1.66
1.73
LOQ de la benzodiacepina alprazolam 1 pg/mL de 375 µL de plasma LOQ del propionato de fluticasona 5 pg/mL de 375 µL de plasma
Tecnología de columnas
Gracias a la mayor sensibilidad, mejor rendimiento y excepcional fiabilidad analítica que ofrece la tecnología UPLC®, el Sistema ACQUITY UPLC® se ha convertido en la plataforma de LC de elección para análisis biológicos. Con 5 sustratos de partículas y 20 químicas de columna inferiores a 2 µm disponibles para aplicaciones biofarmacéuticas y de moléculas pequeñas, Waters tiene una columna de UPLC para satisfacer cualquier exigencia de sus aplicaciones.
Con niveles sin precedentes de forma de los picos, eficiencia y estabilidad química, la columna C18 BEH Technology™ [ híbrida con puentes de etileno] de 1.7 µm es una solución de separación versátil y de rendimiento extremo para una amplia gama de analitos. Con la capacidad de operar en un pH entre 1 y 12, la columna BEH C18 utiliza el poder del pH para actuar sobre la retención, selectividad y sensibilidad de los compuestos ionizables, mejorando la sensibilidad de los análisis por LC/MS.
O Si
O
O
O SiO
O
O SiO
O
O Si
CHPolar Group
3
CH 3
O SiO
O
O SiO
O
ACQUITY UPLC BEH C18
Específicamente diseñada para la retención mejorada de compuestos y metabolitos polares, la columna HSS [sílice de alta resistencia] T3 de 1.8 µm es una columna C18 de baja densidad de ligandos que ofrece una excepcional capacidad de retención sin necesidad de reactivos de par iónico. Esto permite alcanzar límites de detección y de cuantificación más bajos para métodos de LC/MS
O Si
O
O
O SiO
O
O SiO
O
O Si
CHPolar Group
3
CH 3
O SiO
O
O SiO
O
ACQUITY UPLC HSS T3
Utilizando una fase móvil rica en acetonitrilo para mejorar la retención, la eficiencia de ionización y la respuesta de la espectrometría de masas para compuestos extremadamente polares, la columna BEH HILIC [cromatografía de interacción hidrófila] de 1.7 µm permite límites de detección más bajos en comparación con los métodos convencionales de fase reversa. Además, los extractos con alto contenido orgánico de PPT, LLE o SPE pueden inyectarse directamente, lo cual mejora de forma espectacular el rendimiento de muestras, la solidez y la sensibilidad.
ACQUITY UPLC BEH HILIC
Específicamente diseñada y sometida a pruebas de QC para el análisis rápido de péptidos con alta resolución, la columna BEH C18 de 300 Å garantiza la separación con éxito de una variada gama fisicoquímica de péptidos. Ahora se puede utilizar una sola columna para retener y separar péptidos con una amplia gama de hidrofobicidad, punto isoeléctrico y peso molecular.
O Si
O
O
O SiO
O
O SiO
O
O Si
CHPolar Group
3
CH 3
O SiO
O
O SiO
O
ACQUITY UPLC BEH300 C18
SOLUCIONES DE CROMATOgRAfÍA LÍqUIDA
10
■ Mejora la productividad del laboratorio al reducir el tiempo de análisis sin dejar de mejorar la calidad de los datos.
■ Alcanza límites de detección más bajos al permitir una respuesta de MS más elevada con picos cromatográficos estrechos.
■ Mejora la caracterización de las muestras al reducir la supresión de MS debida a los componentes residuales de la matriz.
Principales Ventajas:
COLUMNAS ACqUITY UPLC
11
Waters, The Science of What’s Possible, UPLC, ACQUITY UPLC, UNIFI, Xevo, Oasis, Ostro, Sirocco y BEH Technology son marcas comerciales de Waters Corporation.
©2011 Waters Corporation. Impreso en EE. UU. Mayo de 2011 720003931ES SC-CM
www.waters.com/BA
El sistema de gestión de calidad de las instalaciones de fabricación de Waters en Taunton, Massachusetts y en Wexford, Irlanda, cumple los estándares de gestión de calidad y garantía de calidad de la norma internacional ISO 9001:2008. El sistema de gestión de calidad de Waters es auditado periódicamente por el organismo de registro para garantizar su cumplimiento.
SALES OFFICES:
Austria y exportación en Europa (Europa Central y Sureste, CEI y Oriente Medio) 43 1 877 18 07
Australia 61 2 9933 1777
Bélgica y Luxemburgo 32 2 726 1000
Brasil 55 11 4134 3788
Canadá 1 800 252 4752
China 86 10 6156 2666
República Checa 420 2 617 11384
Dinamarca 45 46 59 8080
Finlandia 358 9 5659 6288
Francia 33 1 30 48 72 00
Alemania 49 6196 400 600
Hong Kong 852 2964 1800
Hungria 36 1 350 5086
India 91 80 2837 1900
Irlanda 353 1 448 1500
Italia 39 02 265 0983
Japón 81 3 3471 7191
Corea 82 2 6300 4800
México 52 55 52 00 1860
Países Bajos 31 76 508 7200
Noruega 47 6 384 6050
Polonia 48 22 833 4400
Puerto Rico 1 787 747 8445
Russia/CEI 7 495 727 4490/ 290 9737
Singapur 65 6593 7100
España 34 93 600 9300
Suecia 46 8 555 115 00
Suiza 41 56 676 7000
Taiwán 886 2 2501 9928
Reino Unido 44 208 238 6100
Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA 01757 EE. UU. T: 508 478 2000 F: 508 872 1990 www.waters.com