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SIFILIS GESTACIONAL Y CONGENITA
Diagnostico por Laboratorio
Abril
2018
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“Es muy sencillo el diagnóstico de la sífilis, lo difícil es tenerlo en mente”. Alfred Fournier
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Pruebas serológicas
No treponémicas
Sustancias reagínicas
(producidas por destrucción de células)
Cardiolipinas
Treponémicas
Anticuerpos contra T. pallidum
T. palidum
Grupo de Microbiología
Detectan
Ag utilizado
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PRUEBAS SEROLÓGICAS
PRUEBAS NO TREPONÉMICAS:
VDRL, RPR.
PRUEBAS TREPONÉMICAS:
TPPA, TP-HA, Elisa.IgM IgG, pruebas rápidas.
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Ag. Ac. PRUEBA UTILIDAD
NO
TREPONÉMICA
Heterólogos
VDRL
RPR USR
Diagnóstico
Control de Tto.
Seguimiento
TREPONÉMICAS
Específicos
TPHA
TPPA
PRUEBA RAPIDA
Confirmación
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CUALIDADES
SENSIBILIDAD
ESPECIFICIDAD
Capacidad de detectar muestras positivas.
Capacidad de reaccionar exclusivamente frente a casos de Sífilis.
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REACTIVO CON CONTROLES DE CASAS COMERCIALES TEMPERATURA: 23 - 29 O CFORMATO TEMPERATURA
PLACAS / LÁMINAS AGITADOR CRONÓMETRO. AGUJAS CALIBRADAS
MICROSCOPIO
EQUIPOS CON MANTENIMIENTO Y CALIBRACION PROTOCOLOS O PROCEDIMIENTO DE VERIFICACION REGISTRO INVIMA
REQUERIMIENTOS ESENCIALES
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IMPORTANTE
• NTC-ISO/IEC 17025:2005
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FLOCULACÍÓN MICROSCÓPICA
Fundamento
La prueba de VDRL es una prueba de microfloculación la
cual detecta anticuerpos heterólogos (anticuerpos
inespecíficos) y utiliza un antígeno de origen no
treponémico. El antígeno al unirse a los anticuerpos en el
suero o líquido cefalorraquídeo de pacientes con sífilis,
produce el fenómeno de floculación
VDRL
(Venereal Disease Research Laboratory)
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Interpretación VDRL cualitativa
Lectura Reporte
Grumos medianos y grandes Reactivo (R)
Grumos pequeños pero
definidos Reactivo 1 dils Antes 0
dils
Ausencia de grumos o
rugosidades mínimas
No Reactivo (NR)
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Interpretación VDRL cuantitativa Dilución de suero Reporte Suero no
diluido 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
R W N N N N Reactivo dilución 1:1 o 1 dils.
R R W N N N Reactivo dilución 1:2 o 2 dils.
R R R W N N Reactivo dilución 1:4 o 4 dils.
W W R R W N Reactivo dilución 1:8 o 8 dils.
N (rugoso) W R R R N Reactivo dilución 1:16 o 16 dils.
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No informar
Reactivo 0 dils
Reactivo 3 dils
Reactivo 10 dils
Reactivo 12 dils
R ½
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Fundamento
Es igual al VDRL pero el antígeno contiene clorhidrato de colina para eliminar la inactivación del suero por calor, EDTA que favorece la estabilidad de la suspensión y partículas de carbón como agente visualizante.
RPR (Rapid Plasma Reagent)
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Interpretación RPR cualitativa
Lectura Reporte Grumos característicos y claros dentro del anillo de
prueba (intensamente reactivo) a grumos delicados
pero definidos (mínimamente o moderadamente
reactivos).
Reactivo (R)
Rugosidades mínimas pero ausencia de grumos. No Reactivo (NR)
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R= reactivo Rm= mínima reactividad N= no reactivo
Interpretación RPR cuantitativa Dilución de suero Reporte Suero no
diluido 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16
Rm N N N N Reactivo dilución 1:1 o 1 dils.
R R N N N Reactivo dilución 1:2 o 2 dils.
R R R N N Reactivo dilución 1:4 o 4 dils.
R R R Rm N Reactivo dilución 1:8 o 8 dils.
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Factores que alteran el resultado de las pruebas no treponémicas
Temperatura (óptima 23-29 ºC)
Fenómeno de prozona
Diámetro del área de reacción
No guardar la proporción antígeno-muestra
No seguir las indicaciones del fabricante
Inadecuado almacenamiento de los reactivos
Mezclar la reacción
Error técnico
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Pruebas no treponémicas
Falsos Positivos Falsos negativos
•Lupus
•Drogadicción
•Artritis reumatoidea
•Mononucleosis
•Hepatitis
•Muestras hemolizadas o
lipémicas
•Efecto prozona (alta reactividad)
•Fases muy tempranas del período
primario
•Temperatura de la prueba
Rev Cubana Med Trop 2006;58(1):
Grupo de Microbiología
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Pruebas Treponémicas
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TPHA (T. pallidum haemagglutination assay)
Fundamento
Los anticuerpos dirigidos contra T. pallidum presentes en suero humano provocan la aglutinación
de los hematíes de ave en suspensión, sensibilizados con antígenos de T.pallidum
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TPPA (T. pallidum passive aglutination)
Fundamento
Se utilizan partículas de gelatina como soporte, sensibilizadas con T. pallidum antígeno purificado (cepa Nichols). Esta prueba se basa en que en presencia de anticuerpos de T. palidum en suero o plasma humano se presenta aglutinación de las partículas sensibilizadas.
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Pruebas treponémicas ELISA
Es una ELISA usada como prueba confirmatoria
en el diagnostico de sífilis. Detecta IgG e IgM.
Consiste en micropozos sensibilizados con T.
pallidum, que al adicionar suero del paciente con
anticuerpos específicos reaccionan revelando un
color detectable por absorbancia.
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Negative
Positive
Put 20ul of WB(10ul of S,P)
into the sample hole
Add 3~4 drops of assay diluent
into the sample hole
5'~20'
Interpret test result at
5~20minutes.
Standard Diagnostic, Inc.
Prueba rápida para sífilis
Fundamento:
Las pruebas rápidas para la determinación de sífilis son un ensayo inmunocromatográfico en fase sólida para detección cualitativa de anticuerpos tipo IgG, IgM e IgA contra Treponema
pallidum.
www.themegallery.com
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Prueba rápida para sífilis
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Utilidad prueba rápida para sífilis
• Tamizaje:
-Lugares donde no se dispone de otras pruebas
-Dificultades de acceso para el retorno de pacientes por los resultados
• Confirmación:
-Diagnóstico y tratamiento oportunos
-Cuando resultan negativas se evitan tratamientos innecesarios.
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Estudio de evaluación
diagnóstica OMS
UNDP/ World Bank / WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases (TDR) The Sexually Transmitted Diseases Diagnostics Initiative (SDI). Diagnostics Evaluation Series; Laboratory-based evaluation of
rapid syphilis diagnostics Results from 8 SDI Sites. Disponible en: http://www.who.int/std_diagnostics/publications/meetings/SDI_Report.pdf
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Falsos positivos • Son transitorios y de causa desconocida
• FTA-ABS: LES, discoide e inducido por medicamentos
• Edad avanzada
• Uso de sorbentes utilizados
• Drogadictos
• Lepra
• Enfermedades del colágeno
2008 European Guideline on the Management of Syphilis
Pruebas Treponemicas
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ALGORITMO SUGERIDO No se cuente con la prueba de RPR ó VDRL
Según la OMS
Sangre
Prueba Rápida
Positiva
Tratamiento
Negativa
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UTILIZACION DE PRUEBA RÁPIDA COMO COMPLEMENTARIA
Sangre o Suero
VDRL o RPR
Reactiva
Prueba Rápida
Positiva
Tratamiento
Negativa
Realizar otra prueba en 6
semanas
Positiva
Tratamiento
Negativa
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Formato EEID
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FORMATO DE LA BASE
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ELEMENTOS PARA LA CALIFICACION DE LA CONCORDANCIA
• Diligenciamiento del formato.
• Reporte del resultado (Reporte, título), siglas, fracciones y lecturas.
• Envió de muestras ( viales plásticos de polipropileno de 2ml ).
%
Concordancia
Sifilis
INTERPRETACIÓN
100 Excelente
99 -90 Bueno
89-80 Moderado
79-60 Bajo
≤ 59 Inadecuado
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PRUEBAS NO TREPONEMCAS
0
20
40
60
80
100
120
140
160
2014 2015 2016 2017
160
175
160 165
LABORATORIOS PARTICIPANTES
2100
2200
2300
2400
2500
2600
2700
2014 2015 2016 2017
2488
2644
2303
2551
NÚMERO DE MUESTRAS
Errores frecuentes: reporte, lectura, envió, formato, viales, muestras escasas-hemolizados, Instrucciones del fabricante, condiciones ambientales, instrumentos con calibración, errores humanos .
Fuente de información Silasp
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COMPORTAMIENTO DE LAS MUESTRAS
GRUPO ETAREO TOTAL DE MUESTRAS REACTIVAS
0- <1 24 14
1- 14 20 8
15-44 1168 540
45-65 249 142
> 65 118 67
Sin dato 968 310
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COMPORTAMIENTO DE LAS MUESTRAS
GRUPO
POBLACIONAL TOTAL DE MUESTRAS REACTIVAS
GENERAL 947 447
MATERNA 469 175
SIN DATO 1108 467
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Errores frecuentes: reporte, lectura, envió, formato, viales, muestras escasas-hemolizados, Instrucciones del fabricante, condiciones ambientales, instrumentos con calibración, errores humanos .
PRUEBAS TREPONEMCAS
0
20
40
60
80
100
2014 2015 2016 2017
12 18
26
55
LABORATORIOS PARTICIPANTES
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
2014 2015 2016 2017
58 152 369 1336
NÚMERO DE MUESTRAS
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
2014 2015 2016 2017
96,49 100 93,53
94
CONCORDANCIA
Fuente de información Silasp
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COMPORTAMIENTO DE LAS MUESTRAS
GRUPO ETAREO TOTAL DE MUESTRAS POSITIVA
0- <1 3 14
1- 14 5 1
15-44 751 334
45-65 176 140
> 65 123 89
Sin dato 278 89
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COMPORTAMIENTO DE LAS MUESTRAS
GRUPO
POBLACIONAL TOTAL DE MUESTRAS POSITIVAS
GENERAL 356 250
MATERNA 517 141
SIN DATO 463 236
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ERRORES MAS FRECUENTES
• Formato.
• Viales.
• Lectura-Reporte
• Tipo de pruebas.
• Muestras escasas.
• Muestras hemolizados.
• Instrucciones del fabricante.
• Condiciones ambientales.
• Instrumentos con calibración
• Errores humanos
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SILASP
0
20
40
60
80
100
IDENTIFICACION SEGUIMIENTO
63
39
LABORATORIOS PARTICIPANTES
Fuente de información Silasp
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
No registroS Reg Verdaderos
8237 7620
20894
16958
REGISTROS
Identificacion Seguimiento
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0
200
400
600
800
1000
IDENTIFICACION SEGUIMIENTO
529
910
REGISTROS INCOMPLETOS REGIMEN
Errores frecuentes:
sistema, impaciencia, articulación de las aéreas.
SILASP
Fuente de información Silasp
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"Buscando el bien de nuestros semejantes, encontraremos el nuestro". Platón (filósofo griego).