clase de sifilis
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Universidad Dr. Andres BelloUniversidad Dr. Andres Bello
Tema: Prueba de R. P. R.Tema: Prueba de R. P. R.
Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Navidad O.Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Navidad O.
La sífilis es una enfermedad de transmisión La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ITS).sexual (ITS).
1905 descubierta1905 descubierta
Treponema pallidumTreponema pallidum, (espiroqueta), , (espiroqueta), originalmente se le denominó Spirochaeta originalmente se le denominó Spirochaeta pallida.pallida.
Infección por T. pallidum subespecie Infección por T. pallidum subespecie pallidumpallidum
Huésped produce anticuerpos:Huésped produce anticuerpos:
1. contra material lipoidal liberado por las 1. contra material lipoidal liberado por las células dañadas (reaginas)células dañadas (reaginas)
2. contra material lipoproteico y 2. contra material lipoproteico y cardiolipina liberada por los treponemas cardiolipina liberada por los treponemas (anticuerpos específicos)(anticuerpos específicos)
REAGINAREAGINA (Anticuerpos Reagínicos o No-Treponémicos) (Anticuerpos Reagínicos o No-Treponémicos)
Es una proteína similar a un anticuerpo, que se une Es una proteína similar a un anticuerpo, que se une a un antígeno (cardiolipina, lecitina y colesterol) a un antígeno (cardiolipina, lecitina y colesterol) en las pruebas RPR o VDRL, producidos por un en las pruebas RPR o VDRL, producidos por un individuo infectado con T pallidum, contra sus individuo infectado con T pallidum, contra sus propios tejidos o contra células de mamíferos. propios tejidos o contra células de mamíferos.
No son exclusivos de la sífilis No son exclusivos de la sífilis
Anticuerpo: son glucoproteínas que forma el organismo como respuesta al contacto con un antígeno, y que reaccionan específicamente con él.
Antígeno: sustancia capaz de provocar una reacción o respuesta inmunitaria, tras su unión específica provoca una respuesta inmune.
Infección por TreponemaInfección por Treponemasubespecie pallidumsubespecie pallidum
Anticuerpos antilipídicos: Anticuerpos antilipídicos:
Se detectan en etapa primaria Se detectan en etapa primaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Disminuyen en etapas posteriores Disminuyen en etapas posteriores Se producen en otras enfermedades Treponémicas Se producen en otras enfermedades Treponémicas Se producen en respuesta a enfermedades No Se producen en respuesta a enfermedades No treponémicas agudas o crónicastreponémicas agudas o crónicas
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILISPARA SÍFILIS
MicroscopíaMicroscopía directa Ex. Treponémicos directa Ex. Treponémicos (muestra de lesión o tejido) (muestra de lesión o tejido)
Ex. No TreponémicosEx. No Treponémicos Ex. Serológicos Ex. Serológicos (muestras de sangre y LCR)(muestras de sangre y LCR)
Ex. TreponémicosEx. Treponémicos
TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS
Ex. de microscopía directaEx. de microscopía directa
Microscopía de Campo Oscuro (CO)Microscopía de Campo Oscuro (CO)
Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum pallidum (DFA-TP(DFA-TP))
TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS
Microscopía de Campo OscuroMicroscopía de Campo Oscuro
Lesiones húmedasLesiones húmedas Examen inmediatoExamen inmediato Observación de organismos móvilesObservación de organismos móviles
RequisitosRequisitos Microscopio adecuadoMicroscopio adecuado CapacitaciónCapacitación Buena toma de muestraBuena toma de muestra PerseveranciaPerseverancia
Ex. de microscopía directaEx. de microscopía directa
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILISPARA SÍFILIS
Examen de microscopía directa positivaExamen de microscopía directa positiva
Demostración del T. Demostración del T. pallidumpallidum:: MorfologíaMorfología MovilidadMovilidad
Diagnóstico de sífilis:Diagnóstico de sífilis: PrimariaPrimaria SecundariaSecundaria Congénita precoz Congénita precoz Recaída infecciosa Recaída infecciosa
Examen de microscopía directa positivaExamen de microscopía directa positiva
TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILIS PARA SÍFILIS
Examen de microscopía directa negativaExamen de microscopía directa negativa
No descarta sífilisNo descarta sífilis
Tiempo o condición de la lesiónTiempo o condición de la lesión
Tratamiento previo (local o sistémico)Tratamiento previo (local o sistémico)
Mala toma de muestraMala toma de muestra
Mala identificación del T. Mala identificación del T. pallidumpallidum
TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS
Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum (DFA-TP)(DFA-TP)
Reemplaza al examen C.O.Reemplaza al examen C.O.
Lesiones húmedasLesiones húmedas
Lesiones oralesLesiones orales
Líquidos corporalesLíquidos corporales
TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS
Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum (DFA-TP)(DFA-TP)
Macerado de tejidosMacerado de tejidos
Examen no inmediatoExamen no inmediato
Envío a Laboratorio de ReferenciaEnvío a Laboratorio de Referencia
Emplea anticuerpos monoclonalesEmplea anticuerpos monoclonales
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes AntígenoExámenes AntígenoAnticuerpoAnticuerpo
No treponémicos Cardiolipina ReaginaNo treponémicos Cardiolipina Reagina
Treponémicos T. pallidum EspecíficosTreponémicos T. pallidum Específicos
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes serológicosExámenes serológicos
No treponémicos (RPR, USR, VDRL)No treponémicos (RPR, USR, VDRL)
Treponémicos (MHA-TP, FTA-ABS, Treponémicos (MHA-TP, FTA-ABS, Inmunocromatografía, ELISA)Inmunocromatografía, ELISA)
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos
VDRL en láminaVDRL en lámina ((VVenereral enereral DDiseaseisease
RResearch esearch LLaboratory)aboratory) USRUSR ((UUnheated nheated SSerum erum
RReagin)eagin) RPR en TarjetaRPR en Tarjeta ((RRapid apid PPlasma lasma RReagin)eagin)
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos
Emplean antígeno lipoidal (cardiolipina, lecitina, Emplean antígeno lipoidal (cardiolipina, lecitina, colesterol)colesterol)
Son exámenes de floculación (lámina o tarjeta)Son exámenes de floculación (lámina o tarjeta)
Fáciles de realizarFáciles de realizar
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos
Miden anticuerpos IgG e IgMMiden anticuerpos IgG e IgM
Examen cualitativo de tamizaje (RPR)Examen cualitativo de tamizaje (RPR)
Examen cuantitativo de seguimiento (VDRL, Examen cuantitativo de seguimiento (VDRL, USR)USR)
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos
Nivel aceptable de especificidadNivel aceptable de especificidad
Sensibilidad altaSensibilidad alta
Costo relativamente baratoCosto relativamente barato
Lectura macroscópica (RPR)Lectura macroscópica (RPR)
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos
Lectura microscópica (VDRL, USR)Lectura microscópica (VDRL, USR)
Tiempo de ejecución 40 a 90 minutosTiempo de ejecución 40 a 90 minutos
Estabilidad ag. 12 hrs VDRL, 1 año RPR, USREstabilidad ag. 12 hrs VDRL, 1 año RPR, USR
Se realiza en suero (RPR, VDRL, USR) o en LCR Se realiza en suero (RPR, VDRL, USR) o en LCR (VDRL)(VDRL)
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
% SENSIBILIDAD Y % DE ESPECIFICIDAD % SENSIBILIDAD Y % DE ESPECIFICIDAD EXAMENES NO TREPONÉMICOSEXAMENES NO TREPONÉMICOS
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Anticuerpos anti-T.Anticuerpos anti-T.pallidumpallidum
Se detectan en etapa primariaSe detectan en etapa primaria
Aumenta cantidad en etapa secundariaAumenta cantidad en etapa secundaria
Permanecen de por vidaPermanecen de por vida
TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos
FTA-ABSFTA-ABS ( (FFluorescent luorescent TTreponemal reponemal AAntibody ntibody AAbsorption)bsorption)
MHA-TPMHA-TP ( (MMicroicroHHemagglutination emagglutination AAssay for antibodies to ssay for antibodies to TT. .
ppallidumallidum))
ELISAELISA Enzimoinmunoensayo Enzimoinmunoensayo
InmunocromatografíaInmunocromatografía
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos
Reacciones antígeno-anticuerpo, de aglutinación, Reacciones antígeno-anticuerpo, de aglutinación, coloración, de inmunocromatografíacoloración, de inmunocromatografía
Antígeno T. pAntígeno T. pallidumallidum subespecie subespecie pallidumpallidum
Detectan anticuerpos dirigidos contra Detectan anticuerpos dirigidos contra componentes treponémicos celularescomponentes treponémicos celulares
Son exámenes cualitativosSon exámenes cualitativos
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos
Son exámenes confirmatoriosSon exámenes confirmatorios
Son sensiblesSon sensibles
Son específicosSon específicos
Permanecen reactivos de por vidaPermanecen reactivos de por vida
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Examen Treponémico FTA-ABSExamen Treponémico FTA-ABS
Es un método de fluorescencia indirectoEs un método de fluorescencia indirecto
Se hace reaccionar un frotis de T. pallidum con Se hace reaccionar un frotis de T. pallidum con suero del pacientesuero del paciente
Se agrega conjugado marcadoSe agrega conjugado marcado
Se observa al microscopio de fluorescenciaSe observa al microscopio de fluorescencia
FTA-ABS REACTIVOFTA-ABS REACTIVO
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Examen Treponémico MHA-TPExamen Treponémico MHA-TP
Hemaglutinación pasiva de eritrocitos sensibilizados con Hemaglutinación pasiva de eritrocitos sensibilizados con T. pall. y anticuerpos del sueroT. pall. y anticuerpos del suero
Muestras reactivas forman una malla suave de células Muestras reactivas forman una malla suave de células aglutinadasaglutinadas
Muestras no reactivas forman un botón compacto de Muestras no reactivas forman un botón compacto de células no aglutinadascélulas no aglutinadas
Menos sensible en sífilis primariaMenos sensible en sífilis primaria
Examen Treponémico MHA-TPExamen Treponémico MHA-TP
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA
Método indirecto para detectar anticuerposMétodo indirecto para detectar anticuerpos
El antígeno recubre los pocillos de la placa de El antígeno recubre los pocillos de la placa de microtitulaciónmicrotitulación
Se agrega una dilución de suero para que los Se agrega una dilución de suero para que los anticuerpos se unan al antígenoanticuerpos se unan al antígeno
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA
Se usan Igs. antihumanas marcadas para detectar Se usan Igs. antihumanas marcadas para detectar anticuerpos del paciente anticuerpos del paciente
Se agrega un sustrato para su detección Se agrega un sustrato para su detección
Si el paciente tiene anticuerpos a T.Si el paciente tiene anticuerpos a T. pallidum pallidum se se produce una reacción de colorproduce una reacción de color
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA
La intensidad del color desarrollado es La intensidad del color desarrollado es proporcional a la cantidad de anticuerpos proporcional a la cantidad de anticuerpos presentespresentes
El cambio de color se lee en un lector ELISAEl cambio de color se lee en un lector ELISA
Ventaja de la técnica: elimina la interpretación Ventaja de la técnica: elimina la interpretación subjetiva de los resultadossubjetiva de los resultados
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Técnica de inmunocromatografía Técnica de inmunocromatografía
Emplea combinación Igs. antihumanas y conjugado Emplea combinación Igs. antihumanas y conjugado coloreado como fase móvilcoloreado como fase móvil
Emplea proteínas recombinantes de sífilis fijadas en las Emplea proteínas recombinantes de sífilis fijadas en las líneas de prueba y controllíneas de prueba y control
La muestra fluye y las Igs. humanas son capturadas por el La muestra fluye y las Igs. humanas son capturadas por el conjugado Ig. antihumano coloreado formando un conjugado Ig. antihumano coloreado formando un inmunocomplejoinmunocomplejo
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Técnica de inmunocromatografíaTécnica de inmunocromatografía
El inmunocomplejo se une a las proteínas El inmunocomplejo se une a las proteínas recombinantes de sífilis en la línea de prueba y se recombinantes de sífilis en la línea de prueba y se produce una línea rojo-violetaproduce una línea rojo-violeta
Un exceso de conjugado reacciona en la línea de Un exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una 2ª líneacontrol formando una 2ª línea
Técnica de inmunocromatografíaTécnica de inmunocromatografía
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas
Para distinguir reacciones debidas a sífilis de las Para distinguir reacciones debidas a sífilis de las falsas positivas en las pruebas No treponémicas.falsas positivas en las pruebas No treponémicas.
Para confirmar sífilis en etapa de incubación.Para confirmar sífilis en etapa de incubación.
Para confirmar sífilis tardía en aquellos casos con Para confirmar sífilis tardía en aquellos casos con ex. No treponémico No reactivos.ex. No treponémico No reactivos.
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas
Para resolver casos con evidencia epidemiológica de Para resolver casos con evidencia epidemiológica de sífilis y la pareja presenta ex. No treponémico sífilis y la pareja presenta ex. No treponémico repetidamente No Reactivos. repetidamente No Reactivos.
Si después de efectuar repetidos ex. No treponémicos Si después de efectuar repetidos ex. No treponémicos el diagnóstico continúa siendo dudoso.el diagnóstico continúa siendo dudoso.
Si el título de VDRL permanece estable con o sin Si el título de VDRL permanece estable con o sin tratamientotratamiento
TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS
Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas
Si el título de VDRL muestra una variación de Si el título de VDRL muestra una variación de solo una dilución (mayor o menor) en dos solo una dilución (mayor o menor) en dos controles sucesivos con intervalo de más de un controles sucesivos con intervalo de más de un mes.mes.
Para ayudar al dg. de sífilis en una madre que es Para ayudar al dg. de sífilis en una madre que es No Reactiva al VDRL y que no presenta síntomas No Reactiva al VDRL y que no presenta síntomas clínicos de sífilis pero tiene un hijo con sífilis clínicos de sífilis pero tiene un hijo con sífilis congénitacongénita
EXÁMENES TREPONÉMICOSEXÁMENES TREPONÉMICOS
% SENSIBILIDAD Y % ESPECIFICIFIDAD% SENSIBILIDAD Y % ESPECIFICIFIDAD
Técnicas TreponémicasTécnicas Treponémicas
FTA-ABS IgM - 19S IgMFTA-ABS IgM - 19S IgM
Aún se encuentra en investigaciónAún se encuentra en investigación Cara de realizarCara de realizar Resultados poco sensibles y poco específicosResultados poco sensibles y poco específicos RN produce ac. IgM contra IgG maternos (Falso RN produce ac. IgM contra IgG maternos (Falso
Positivo)Positivo) Inhibición de ac. IgM por IgG materno (Falso Inhibición de ac. IgM por IgG materno (Falso
Negativo) Negativo)
PCRPCRReacc. en Cadena de la Polimerasa Reacc. en Cadena de la Polimerasa
Técnica de biología molecularTécnica de biología molecular Emplea un fragmento de ADNEmplea un fragmento de ADN Obtención de gran Nº de copiasObtención de gran Nº de copias Sirve para amplificar un fragmento del Sirve para amplificar un fragmento del
ADNADN Facilita identificación de las bacteriasFacilita identificación de las bacterias Técnica susceptible de contaminación Técnica susceptible de contaminación
WESTERNWESTERN BLOTBLOT
Técnica en estado de investigaciónTécnica en estado de investigación Ags. T. Ags. T. pallpall. se separan por electroforesis. se separan por electroforesis Polipéptidos se transfieren a hojas de Polipéptidos se transfieren a hojas de
nitrocelulosanitrocelulosa Suero se coloca en la tira, se incubaSuero se coloca en la tira, se incuba Se agrega conjugado, sustrato enzimáticoSe agrega conjugado, sustrato enzimático Si es positivo se obtiene una reacción de Si es positivo se obtiene una reacción de
color color
R.P.R CARBONR.P.R CARBON
FUNDAMENTO:FUNDAMENTO:
LAS REAGINAS DEL SUERO O PLASMA SE PUEDEN DETECTAR LAS REAGINAS DEL SUERO O PLASMA SE PUEDEN DETECTAR POR UNA REACCION DE AGLUTINACION EN PRESENCIA DE UN POR UNA REACCION DE AGLUTINACION EN PRESENCIA DE UN ANTIGENO NO TREPONEMICO. EL ANTIGENO CONTIENE ANTIGENO NO TREPONEMICO. EL ANTIGENO CONTIENE PARTICULAR DE CARBON QUE COAGLUTINAN CUANDO LA PARTICULAR DE CARBON QUE COAGLUTINAN CUANDO LA REACCION ES POSITIVA FACILITANDOSE LA OBSERVACION REACCION ES POSITIVA FACILITANDOSE LA OBSERVACION MACROSCOPICA.MACROSCOPICA.
EL ANTIGENO CONTIENE CARDIOLIPINA, LECITINA, EL ANTIGENO CONTIENE CARDIOLIPINA, LECITINA, COLESTEROL Y MICROPARTICULAS DE CARBON.COLESTEROL Y MICROPARTICULAS DE CARBON.
MATERIALES:MATERIALES:
PIPETAS AUTOMATICAS QUE DISPENSEN 50 ulPIPETAS AUTOMATICAS QUE DISPENSEN 50 ulPUNTAS PARA PIPETASPUNTAS PARA PIPETAS
ROTADOR ROTADOR TARJETAS CON CIRCULOS TARJETAS CON CIRCULOS
DISPENSADORESDISPENSADORES
MUESTRA:MUESTRA:
SUERO O PLASMA LIBRE DE HEMOLISIS Y SUERO O PLASMA LIBRE DE HEMOLISIS Y CONTAMINACION.CONTAMINACION.
LAS MUESTRAS SE PUEDEN CONSERVAR VARIOS DIAS LAS MUESTRAS SE PUEDEN CONSERVAR VARIOS DIAS DE 2-8 °C O A-20 °C.DE 2-8 °C O A-20 °C.
TECNICATECNICA
PRUEBA CUALITATIVAPRUEBA CUALITATIVA::
1.DEJAR QUE EL 1.DEJAR QUE EL REACTIVO
Y LAS MUESTRAS SE ATEMPERENY LAS MUESTRAS SE ATEMPEREN
POR LO MENOS 30 MIN.POR LO MENOS 30 MIN.
2.PREPARAR LOS CONTROLES: 2.PREPARAR LOS CONTROLES: DOS CONTROLES INTERNOS: REACTIVO CONOCIDO Y NO DOS CONTROLES INTERNOS: REACTIVO CONOCIDO Y NO
REACTIVOREACTIVO DOS CONTROLES DEL SET: REACTIVO Y NO REACTIVODOS CONTROLES DEL SET: REACTIVO Y NO REACTIVO
3. DEPOSITAR EN UN CIRCULO DE UNA DE LAS TARJETAS 50 ul O UNA GOTA DE MUESTRA Y CONTROLES.
4.CON UN AGITADOR DE UN SOLO USO EXTENDER LA MUESTRA SOBRE TODA LA SUPERFICIE DEL CIRCULO.
5.DEPOSITAR UNA GOTA DEL ANTIGENO Y COLOCAR LA TARJETAEN EL ROTADOR DURANTE 8 MIN A 100 RPM
PRUEBA CUANTITATIVAPRUEBA CUANTITATIVA
EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION SALINA EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION SALINA AL 0.85 %. NO EXTENDERAL 0.85 %. NO EXTENDER
DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRADEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA
MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR LA MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR LA FORMACION DE BURBUJAS)FORMACION DE BURBUJAS)
A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA DILUCION 1:2, A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA DILUCION 1:2, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTAR LOS 50 ul SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTAR LOS 50 ul
DE LA ULTIMA DILUCION).DE LA ULTIMA DILUCION).
DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.
PRUEBA CUANTITATIVA EN TUBOPRUEBA CUANTITATIVA EN TUBO
A PARTIR DE UNA DILUCION DE 1:16 A PARTIR DE UNA DILUCION DE 1:16 EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION
SALINA AL 0.85 %. NO EXTENDERSALINA AL 0.85 %. NO EXTENDER DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA 1:16DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA 1:16 MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR
LA FORMACION DE BURBUJAS)LA FORMACION DE BURBUJAS) A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA
DILUCION 1:32, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 DILUCION 1:32, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTARLOS 50 ul DE LA ULTIMA CIRCULO A OTRO (DESCARTARLOS 50 ul DE LA ULTIMA DILUCION).DILUCION).
DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: 1:32,:1:64,1:128,1:252, 1:512SIGUIENTES: 1:32,:1:64,1:128,1:252, 1:512
RECOMENDACIONES PARA EVITAR REACCIONES RECOMENDACIONES PARA EVITAR REACCIONES FALSAS EN LA REACCION DE V.D.R.L - R.P.RFALSAS EN LA REACCION DE V.D.R.L - R.P.R
ANTES DE REALIZAR ESTA REACCION EL TECNICO DEBE ESTAR ANTES DE REALIZAR ESTA REACCION EL TECNICO DEBE ESTAR ENTERADO DEL CONTENIDO (INTRODUCCION- APENDICE) DEL ENTERADO DEL CONTENIDO (INTRODUCCION- APENDICE) DEL
INSERTO QUE TRAE EL SET.INSERTO QUE TRAE EL SET.
EL SET DEBE GUARDARSE A UNATEMPERATURA 2-8 °C.EL SET DEBE GUARDARSE A UNATEMPERATURA 2-8 °C.
NO SE DEBEN UTILIZAR MUESTRAS : HEMOLISADAS, TURBIAS, NO SE DEBEN UTILIZAR MUESTRAS : HEMOLISADAS, TURBIAS, CON CONTAMINACION O QUILOSAS.CON CONTAMINACION O QUILOSAS.
CORRECTA IDENTIFICACIONCORRECTA IDENTIFICACION
TIEMPO CORRECTO DE ROTACIONTIEMPO CORRECTO DE ROTACION
USO DE CONTROLESUSO DE CONTROLES
LECTURA INMEDIATA LECTURA INMEDIATA
LOS SUEROS REACTIVOS DEBILES SE DEBEN ENSAYAR LOS SUEROS REACTIVOS DEBILES SE DEBEN ENSAYAR NUEVAMENTE POR PROCEDIMIENTOS CUALITATIVOS Y NUEVAMENTE POR PROCEDIMIENTOS CUALITATIVOS Y
CUANTITATIVOS ANTES DE NOTIFICAR LOS CUANTITATIVOS ANTES DE NOTIFICAR LOS RESULTADOS.RESULTADOS.
DEBE COMPARARSE UN LOTE NUEVO DE SUSPENSIÓN DEBE COMPARARSE UN LOTE NUEVO DE SUSPENSIÓN DE ANTIGENO CON UNA REACTIVIDAD CONOCIDA DE ANTIGENO CON UNA REACTIVIDAD CONOCIDA
ANTES DE SU USO DIARIO.ANTES DE SU USO DIARIO. EXAMINAR DIARIAMENTE LAS AGUJAS QUE SE EXAMINAR DIARIAMENTE LAS AGUJAS QUE SE EMPLEAN PARA DEPOSITAR EL ANTÍGENO QUE DEN EMPLEAN PARA DEPOSITAR EL ANTÍGENO QUE DEN
GOTAS UNIFORMES.GOTAS UNIFORMES.
TERMINADAS LAS REACCIONES DEL DIA RETIRESE LA TERMINADAS LAS REACCIONES DEL DIA RETIRESE LA AGUJA DEL FRASCO, ENJUAGUESE Y SEQUESE AL AIRE AGUJA DEL FRASCO, ENJUAGUESE Y SEQUESE AL AIRE (NO SE FROTE LA AGUJA PORQUE PIERDE LA CAPA DE (NO SE FROTE LA AGUJA PORQUE PIERDE LA CAPA DE
SILICON), TAPESE NUEVAMENTE EL FRASCO YSILICON), TAPESE NUEVAMENTE EL FRASCO Y ALMACENESE EN EL REFRIGERADOR. ALMACENESE EN EL REFRIGERADOR.