resumen-urocultivo-4102c
TRANSCRIPT
Instituto Politécnico Nacional
Centro de Estudios Científicos y Tecnológicos No. 6 “Miguel Othón de Mendizábal”
García Ruiz Alan JairHernández Osornio NancyHernández Zavala Oscar
López Obregón Ana KarinaLucas Pineda Marina
Pérez Mendieta Lucia BrendaRomero Galicia Elizabeth
Semestre: Cuarto Grupo: 4IM2/4102C
Unidad de Aprendizaje: Bacteriología Clínica
Tema: Urocultivo
Q.B.P. Miguel Ángel Morales Gil
Turno: Matutino
Ciclo Escolar: Enero 2012 – Agosto 2012
Urocultivo
I. Introducción
Las enfermedades crónicas que suelen ser reconocidas en un estadio
relativamente tardío, es decir, después de que ha ocurrido un daño severo, y que
evidentemente en tales circunstancias el tratamiento es menos eficaz, y que por lo
tanto se requiere de un conocimiento oportuno de este tipo de enfermedades con
el objeto de efectuar una prevención adecuada.
El diagnóstico de las infecciones de las vías se hace demostrando bacteriuria por
medio del cultivo.
El urocultivo cuantitativo permite distinguir la bacteria significativa de la simple
contaminación de la muestra.
II. Fundamento
Entre las enfermedades crónicas debilitantes destaca la insuficiencia renal como
consecuencia de un proceso infeccioso que se manifiesta tardíamente. La
presencia de bacterias en la orina debe detectarse a tiempo para evitar el
desarrollo de una infección en las vías urinarias de graves consecuencias.
La orina que normalmente se encuentra estéril en la vejiga resulta un medio de
cultivo excelente para diversos microorganismos como las enterobacterias. La
orina de pacientes con pielonefritis tiene mayor número de leucocitos que el
normal, y el número de bacterias viables de la porción media de la micción excede
de 100 000 en un ml.
En la actualidad existen diversos métodos para cuantificar las bacterias en la
orina; la eficiencia reproductibilidad y facilidad de cada uno de ellos ha sido
cuidadosamente valorado.
III. Material y equipo
1. Asas calibradas (de 4 mm de diámetro de 0.01 ml).
2. Medios de cultivo: gelosa sangre y EMB.
3. Solución de cloruro de benzalconio.
4. Algodón.
5. Equipo habitual en un laboratorio de microbiología.
IV. Método
IV.1 Material biológico
La orina es tomada por el paciente en su domicilio con previo aseo general,
haciendo énfasis en los órganos genitales externos. La orina se recolecta en un
frasco estéril.
Una vez que empieza la micción, se desecha la primera orina que arrastrará los
organismos contaminantes; se interrumpe la micción para recoger el frasco estéril
la porción media de la muestra y se desecha el resto de la orina.
En los niños también se asean los órganos genitales externos y regiones vecinas,
se aplica después el dispositivo de Machuca o bolsas de plástico adhesivas.
El urocultivo debe hacerse, dentro de la hora siguiente a la recolección de la orina,
o bien si esto no es posible, debe guardarse la orina en el refrigerador a 4°C hasta
que pueda cultivarse, sin exceder de algunas horas.
IV. 2 Cuenta de bacterias
Método con asa calibrada. El método cuantitativo que se utiliza de rutina es el de
asa calibrada para inocular. Dicha asa es de 4 mm de diámetro y de 0.01 ml de
capacidad.
Se toma una asada de la orina y se hace una siembra por estrías en toda la
superficie de la placa. Como en las infecciones del tracto urinario pueden
encontrarse bacterias Gram positivas (estreptococos y estafilococos) y bacilos
Gram negativos (E. coli, Proteus) es conveniente sembrar la orina en una placa de
agar sangre y en uno de los medios selectivos para las bacterias Gram negativas
tal como el medio EMB. En ambas placas la orina debe sembrarse del modo
descrito anteriormente, incubarlas a 37°C y examinarlas después de 24 a 48 horas
y se multiplica por 100 el número de colonias que aparecen en la placa para
determinar el número de bacterias que existen en un mililitro de orina.
Ordinariamente se hace antibiograma a las bacterias encontradas en el urocultivo.
V. Observaciones
V. 1 Estimación cuantitativa de las colonias
En general, cuentas menos de 10 000 colonias por mililitro de orina indican
contaminación. Cuando el numero esta entre 10 000 y 100 000 se sospechará
infección cuando solo existe un tipo colonial, y si es mayor de 100 000 se
confirmará la sospecha.
Hay casos de pielonefritis en los que el número de bacterias es menor de 100 000
en un mililitro de orina. Esos casos se presentan cuando un volumen de orina es
muy grande y por lo tanto disminuye la concentración de bacterias en la unidad de
volumen. Cuando el paciente tiene micciones frecuentes, y cuando estas siendo
tratado con agentes antimicrobianos o cuando el pH de la orina es menor de 5.
V. 2 Microorganismos presentes en el tracto urinario
Las infecciones bacterianas del tracto urinario pueden presentarse en pacientes
de cualquier edad y cualquier sexo y pueden variar desde infecciones inaparentes
hasta enfermedades sistemáticas severas. El diagnóstico clínico de pielonefritis
frecuentemente pasa inadvertido, debido a la ausencia de síntomas en el tracto
urinario.
La relación entre bacteriuria y pielonefritis activa inaparentemente solo ha sido
demostrada recientemente en autopsias.
La demostración de los microorganismos por cultivos apropiados es, por lo
preciso, la única manera posible de hacer el diagnóstico.
Debido a que las muestras de orina frecuentemente se contaminan en su
recolección, el desarrollo de los microorganismos, aún de los patógenos
conocidos, no establece necesariamente el diagnóstico de infección de tracto
urinario. La cuenta de bacterias en orina fresca de pacientes con infección de las
vías urinarias es habitualmente mayor de 100 000 en un mililitro, mientras que las
muestras de personas no infectadas y normales o son estériles o no contienen
más de 10 000 colonias en un mililitro.
Por lo tanto, para valorar el significado clínico de un cultivo de orina, se
recomienda tomar en cuenta el número de bacterias presentes en la muestr
Microbiota Patógena Microbiota No Patógena
Estreptococo beta hemolítico
Staphylococcus aereus coagulasa positivo
Candida albicans
Enterobacterias
Staphylococcus coagulasa negativo
(S. epidermis)
(S. saprophyticus)
Lactobacilus
Difteroides
Bacilus subtilis
1.- Organismos que son uropatógenos reconocidos y crecen bien en medios de rutina en 24 horasEstos incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y Pseudomona aeruginosa. Estos patógenos constituyen la causa del 80% de los bacilos Gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacterson también comúnmente aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae son los Gram positivos más frecuentemente aislados.2.-Organismos que son uropatogenos reconocidos y no crecen en medios de rutina Mycobacterium tuberculosis, es un uropatógeno infrecuente que se asocia a altos recuentos de leucocitos.Chlamidia trachomatis se desarrolla solamente en cultivos celulares y se asocia a uretritis y salpingitispudiendo provocar UTI. Ureaplasma urealyticum, se asocia a otros uropatógenos. Neisseriae gonorrhoeaese desarrollla en Medio Thayer Martin.3.-Organismos que pueden ser uropatógenos, pueden requerir medios especiales y más de 24 hrs Hay microorganismos pertenecientes a la flora normal y que aislados en recuentos altos se hanasociado a UTI entre ellos se encuentran: Corynebacterium urealyticum, Corynebacterium seminale éstosse desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H. parainfluenzae, estos de desarrollan enA.chocolate Gardenella vaginalis en altos recuentos se ha asociado a UTI éste se desarrolla en Human BloodAgar. Todos estos medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En CO2
Microorganismos Patógenos
Escherichia coli , Normalmente vive en el intestino. Infección de orina o del tracto urinario son expresiones que engloban diferentes enfermedades infecciosas (producidas por un microorganismo o germen) y que afectan a cualquier parte del sistema urinario (riñón, uréteres, vejiga urinaria o uretra).E. coli es la especie tipo del género Escherichia. Incluye gérmenesgeneralmente móviles, que producen ácido y gas a partir de la glucosa, la
arabinosa, y habitualmente de la lactosa y otros azúcares. Producen reacciónpositiva de rojo de metilo, y negativa.
Proteus mirabilis Es una bacteria Gram-negativa, facultativamente anaeróbico. Muestra aglutinación, motilidad, y actividad ureasa.Esta bacteria de colonias redondeadas tiene la habilidad de producir grandes niveles de ureasa. La ureasa hidroliza urea a amoníaco, (NH3) y eso hace a la orina más alcalina. Y al subir la alcalinidad puede liderar la formación de cristales de estruvita, carbonato de calcio, y/o apatia. Esta bacteria puede encontrarse en cálculos, y esas bacterias escondidas allí, pueden reiniciar una infección post tratamientos antibióticos. Al desarrollarse los cálculos, después de un tiempo pueden seguir creciendo más y causar obstrucción dando fallas renales.
Enterobacter cloacae Es una bacteria que pertenece al género Enterobacter, de la familia de las Enterobacteriaceae. Es un bacilo Gram negativo Oxidasa negativo y Catalasa positivo presente en el aparato digestivo humano.Se han descrito casos de infecciones del tracto urinario, de herida quirúrgica e incluso bacteriemia. No obstante, lo más frecuente son infecciones nosocomiales en pacientes inmunocomprometidos.El tratamiento de elección en las infecciones por E. cloacae consiste en la asociación de un carbapenem (ertapenem, imipenem, meropenem) y un aminoglucósido (gentamicina). Se recomienda hacer siempre un antibiograma, dado que se conoce la aparición de múltiples resistencias por expresión de cefalosporinasas.
Serratia marcescensEs un bacilo gramnegativo de la familia Enterobacteriaceae. Puede ser peligroso para el hombre, ya que a veces es patógena, como causa de infecciones nosocomiales y urinarias.Es un bacilo motil que puede crecer a una temperatura que oscila entre 5-40 °C, en niveles de pH que varían entre 5 y 9. El ambiente en el cual predomina es en condiciones húmedas, por esa razón es posible encontrarla creciendo en los baños y las alcantarillas, aunque puede ser eliminada mediante la aplicación de lejía y otros desinfectantes (sin abusar de la dosis, porque sino la bacteria puede volverse inmune a los efectos de los desinfectantes).
Bibliografía
Cruz Jiménez , G., Sainz Montoya, J. E., & Segura Ramírez , P. (1994). Manual de bacteriología Clínica (Primera ed.). D.F., México : Universidad Nacional Autónoma de México . Pág 82-85
Urocultivo
Cultivo Y AislamientoAI
Agar SangreAgar Sangre c/AzidaAgar Columbia con 5% Sangre
Identificación1. Tinción de Gram2.Pruebas Serológicas3. Fermentación de carbohidratos4. Hemólisis5. pyogenes
1. Solubilidad en bilis2. Hemólisis3.Tinción de Gram4. pneumoniae
II
Agar McConkeyAgar EMBAgar DesoxicolatoAgar CLED
35 + 2°CSelección de Colonias
18-24 hrs
BioquímicasTSI Agar de Hierro y TripleAzucarAgar KliglerMedio MIOAgar LIACaldo UreaH2S (TSI, Kligler)Nitratos Agar FenilalaninaAgar CitratoAgar Prueba DNasaMedio MR-VP
III
Agar Estafilococos 110Agar Sal Y ManitolAgar Columbia con 5% Sangre
35 + 2°C Selección de Colonias18-24 hrs
Identificación Serológica de Enterobacterias-Prueba de Coagulosa +-Prueba de Coagulosa –-Fermentación de Azúcares-Agar Prueba DNasa-Prueba de Susceptibilidad a Novoblocina
s. aereus
B.Con enriquecimiento Medio Líquido Tioglicolato sin Indicador
35+ 2°C24 hrs eincubar
-Seguir procedimiento Al, Alt, Alt, Allt-Pruebas de suceptibilidad
C.Hongos Y Levaduras
Agar Biggy
Agar Dextrosa Sabouraud
25 + 30°C
72 hrs
-Frotis Azul de Algodón-Agar para Clamidosporas-Prueba tubo germinal
Candida albicans
Colección de la Muestra y Transporte Frotis de sedimento Gram
OrinaTransporte:-A temperatura ambiente dentro de las primeras 2 hrs-Refrigeración hasta 24 hrs
35 + 2 °C18-24 hr5-10%
Taxo A
Taxo P
Sensibilidad a Bacitracina
Sensibilidad a Optoquina
Agar SangreAgar EMBAgar MacConkeyAgar Sal y Manitol