TOXINAS Y ANTITOXINAS

I.-Toxinas, Clasificación y Características.-

1.-Toxinas.-,también veneno bacteriano por su capacidad de producir trastornos en animales susceptibles. las toxinas se dividen en dos grupos, exotoxinas y endotoxinas. según las propiedades.1.1.-Exotoxinas.-excretadas por bacterias:Son muy específicas-Son muy toxicas-Son inestables-Son muy antigénicas.Se convierten en toxoides debido al tratamiento con formol.

1.2.- Endotoxinas.- Sustancias intracelulares liberadas por desintegración bacteriana, en el medio en el que ha crecido el germen.Características: son específicas-poco toxicas-Son estables-No muy antigénicas-No se convierten en toxoides.

2.- Origen de las toxinas.-producidas por plantas, bacterias y animales. Algunas plantas son capaces de producir toxinas muy poderosas por ejemplo:

TOXINAS PRECURSORRicina Semilla de RicinoAbrina Semilla del AbroRobina Corteza de la acacia

Efectos de las toxinas Origen Nombre de las toxinas

Hemólisis Estrep. Pyogenes Estreptolisinas O y SHemotoxinas alfa, Beta, Gama y delta.Toxinas alfa(lecitinasa), delta y theta

Toxinas alfa y beta

Staph. AureusClost. PerfringensClost. NovyiClost. SepticumVenenos de serpiente

Produce erupción cutánea Estrep. pyogenes Toxina eritrogenica

Letal para los animales de laboratorio

Coryn. Diphteriae

Toxina letalClost. SepticumClost. NovyiClost. ChauvoeiClost. PerfringensStaph. Aureus

Produce necrosis en los tejidos

Staph. AureusToxina necrosanteClost. Perfringens

Coryn. DiphteriaeProduce síntomas nerviosos patentes

Clost. Botulinum NeurotoxinaTetanospasminasNeurotoxinaNeurotoxinas

Clost. TetanShigella dysenteriaeVenenos de serpiente

Mata los leucocitos Staph. Aureus Leucocidina

Dirige el colágeno Clost. Perfringens Colagenasa

II.-NATURALEZA DE LAS TOXINAS.-Toda toxina es de naturaleza proteica, por ejemplo:Diftérica. Botulínica.Tetánica.pueden destruirse por medio del calor, enzimas digestivas a excepción de las toxinas botulínica y titánica.

Tetánica: sensibles ante presencia de ácidos y enzimas digestivasBotulínica: es resistente; dicha toxina aglutina los hematíes de la gallina y la oveja, reacción que es inhibida específicamente por la antitoxina. Su peso molecular es de 900 000;las toxinas se precipitan con las fracciones albumosas y peptonas de las proteínas por medio del sulfato amónico, el sulfato de aluminio, el cloruro de cinc, el alcohol y el ácido nucleico.La destrucción de toxinas se da a T 60º C y a 56 º C se destruye el 95% de moléculas de la toxina; a esta regla general existe una excepción, la toxina ESTREPTOCOCICA que no se destruye tras 20 minutos de ebullición.

La toxina epsilon del Clostridium Perfringens es producida inactiva, y se activa a causa de la tripsina.La acción de las toxinas solo se puede observar con la inoculación de esta a un animal de experimentación, Es importante conocer la potencia de las toxinas tenemos que:T. Tetánica: su poder letal es tan activo que con 1ml puede matar de 50 000 – 75 000 cobayos T. Botulínica: este es uno de los venenos más letales conocidos.Para que una toxina ejerza su acción es necesario primero pasar por “PERIODO DE INCUBACIÓN” es decir un tiempo suficiente para qe la toxina se fije en los tejidos receptivos.

EHRLICH.- demostró que la molécula de toxinas se compone de 2 partes llamadas: Toxofora y Haptofora.La acción nosógena de la toxina es causado por la Toxofora ( fracción termo y quimiolabil). Por otro lado la acción Haptofora se encarga de la combinación de la toxina con la célula así como también es responsable de las funciones antigénicas. Mientras el grupo toxoforo se destruía por el simple reposo el grupo Haptoforo no se alteraba. Claro que también se puede conseguir la anulación de la toxina usando productos químicos tales como la Formalina y el Yodo.Ehrlich llamo al grupo Haptoforo TOXOIDE. Los aportes de Ehrlich fueron muy útiles para obtener métodos de inmunización contra las toxinas.

ESPECIFICIDAD TISULAR DE LAS TOXINAS.-especificidad de un punto muy importante por ser una característica primordial en cuanto se refiere a toxinas, por ejemplo al Clostridium Tetani cuyas toxinas se clasifican según su combinación con un tejido determinado. Este clost. Tetani libera una toxina específica hacia el tejido nervioso y el tejido sanguíneo.La toxina que se combina con el tejido nervioso se llaman NEUROTOXINAS .La toxina TETANOSPASMINA produce concretamente el tétanos.La que ataca a los Hematíes se llaman HEMOTOXINA porque lisa los glóbulos rojos con liberación de hemoglobina.La toxina Diftérica ataca los centros nerviosos del sistema vascular y produce lesiones degenerativas en el músculo cardiaco, riñones e hígado.La toxina botulínica provoca parálisis de los músculos inervados por los pares craneales.Las toxinas de Estreptococos Pyogenes pueden lisar los hematíes formando un eritema.

IV.-DETERMINACIÓN DE LA POTENCIA DE LAS TOXINAS.-Para determinar la potencia de las toxinas se hacen experimentos con animales a

fin de comparar la toxina producida por diferentes cepas de gérmenes; para esto se emplea lo siguiente:Dosis.Métodos de inyección.Tiempo de acción.Tamaño y especie del animal.

Para aplicar las dosis de una toxina a un animal se vera lo siguiente.DMM: dosis mínima mortal, esta varia según la toxina que se use y el animal por ejemplo:DMM de T. Tetánica: es la cantidad mínima que mata un cobayo de 350 gr. De peso en 96 horas.DMM de la T. Diftérica es la cantidad mínima que mata un cobayo de 250 gr. De peso en 96 horas.

Otra dosis a usar es la DMH ( Dosis mínima Hemolítica), así tenemos:DMH de la T. Estafilocócica: es la cantidad que hemolisa un mililitro de suspensión de eritrocitos de conejos al 2% en una hora a 37 ºC.

La toxina del Estreptococos Pyogenes produce un eritema. Para la titulación de esta toxina se emplean niños receptivos. La toxina se inyecta en la piel del brazo, y la unidad de medida se llama Dosis de Prueba Dérmica (DPD), o dosis de test Dérmico (DTD). La dosis mínima que da una reacción de 1.5 cm de diámetro en 24 horas, se designa con el nombre de DPD de la toxina de la escarlatina.Diversas bacterias gram-negativas, pertenecientes a varios géneros, produce endotoxinas. Los géneros representados son: NEISSERIA, ESCHERICHIA, SALMONELLA, BRUCELLA, VIBRIO, SHIGELLA, PASTEURELLA Y PSEUDOMONAS. La inducción de endotoxinas a los animales produce fiebre y depresión, pudiendo ser letal en grandes cantidades. La desintegración de los gérmenes en los tejidos o en la circulación de los animales infectados es uno de los mecanismos patogénicos.Otros productos tóxicos, que aumentan la virulencia de los gérmenes o producen determinados efectos, pero no caen dentro de la definición de exotoxinas ni endotoxinas, son: Coagulasa, que coagula el plasma.Estreptoquinasa, que lisa la fibrina ( fibrinolisina).Enterotoxinas, que es causa de intoxicación alimentaria.Hialuronidasa, que facilita la difusión de la infección de los tejidos. V.- ANTITOXINAS.-

pues estas son anticuerpos creados por la célula del organismo a causa de la inoculación de dosis subletales de una determinada toxina, esta antitoxina solo neutraliza a la toxina que fue inoculada y da origen a la misma. Claro que esto también depende de la cantidad de antitoxina que se aplique.Las antitoxinas son relativamente estables

VI.- PRODUCCIÓN DE ANTITOXINAS.-se prepara y tipifica la toxina. se inyecta un animal el caballo, para producir la

antitoxina. Se recoge el suero, se filtra y se conserva. La antitoxina se titula para determinar su potencia. La antitoxina tetánica es la mas usada en medicina veterinaria por lo que describiré someramente en este trabajo su fabricación, para dar a los alumnos de este curso una idea del método general de preparación de antitoxinas.

VII.- TOXINA TETANICA.-Se elige para producción cultivo de Clostridium Tetani, que produzca una toxina

muy potente. El microbio se cultiva en caldo-infusión de ternera, conteniendo 0.5 de cloruro sódico y 7 % de peptona. Se puede añadir glucosa al medio para activar el crecimiento del germen, pero parece ser que esto no incrementa la potencia de la toxina. Se cubre el medio con una capa de parafina liquida y se esteriliza luego para eliminar el oxigeno antes de la siembra. Se incuba el medio a 34-35 º C durante 10 a 14 días para lograr la máxima producios de toxinas. A partir de los 14 días disminuye la concentración de toxinas. La toxina soluble se separa de las bacterias vivas filtrando a través de un Berkefeld N al filtrado se puede añadir el 0.5 % de fenol, o puede precipitarse la toxina con sulfato amónico conservándola desecada. La toxina desecada se disuelve fácilmente en solución salina y puede diluirse para titularla.Seguidamente se titula el poder de la toxina, lo que se realiza haciendo una serie de diluciones al 1/ 1000, 1/5000, 1/10000,1/15000,1/20000,1/25000, e inyectando un ml de cada dilución a lotes de cobayos de 350 gr. de peso.

VIII.- ANTITOXINA TETANICA.- Para obtener antitoxina necesario un caballo en buen estado. Se inmuniza contra

el tétanos inyectándole toxoide o una mezcla toxina-antitoxina, luego se le inoculan 10-20 DMM cobayo con intervalos de 3 días, dichas dosis irán aumentando progresivamente hasta llegar a 1000 ml de cultivo filtrado.Cuando la concentración de antitoxinas a alcanzado un nivel apropiado se sangra al animal pues este antídoto se obtiene por coagulación de la sangre.