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Química Biológica
Seminario Enzimas
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Definición
Son catalizadores biológicos
Principalmente de naturaleza proteíca
Difieren de la actividad de otros catalizadores
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Mecanismo de acción
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Modelos de acción
Modelo llave-cerradura Modelo de ajuste inducido
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Características de la AE
• Son termolábiles
• Alta eficiencia
• Gran especificidad
• Están sujetas a una gran variedad de controles celulares, genéticos y alostéricos.
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Clasificación
Según la reacción en la que participan:
• Hidrolasas
• Oxidoreductasas
• Transferasas
• Liasas
• Isomerasas
• Ligasas
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Holoenzimas
Cofactor
Proteína +
Coenzima
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Efecto de la temperatura
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Efecto del pH
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Inhibidores
Sustancia que hace disminuir la actividad enzimática,
Esta definición excluye todos aquellos agentes desnaturalizantes
Dos tipos de inhibidores:
I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activoII. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la molécula.
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Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:
1. Inhibidor reversible:
E + I EI
2. Inhibidor irreversible:
E + I E’
ES + I ESI
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Inhibición competitiva
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Inhibición no competitiva
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Parte experimental
Objetivo:
Identificar enzimas a partir de su actividad especifica.
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Lipasa
Cataliza la hidrólisis de los TAG
Es secretada por el páncreas
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Lipasa
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Sacarasa
Cataliza la hidrólisis de sacarosa
La extraemos de levaduras
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1 g Levadura
20 ml de Acetona
Centrifugar
Filtrar y
secar
Resuspender en buffer
Agregar 5 ml de agua
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Sacarasa
Ensayo de Fehling
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Catalasa
Enzima oxidoreductasa hepática
1 g de higado
+
5 ml de Peroxido de hidrogeno
O2
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Inhibición enzimática
Inhibición de la GOD por azida de sodio
1 gr. de levadura
50 ml de buffer fosfato de sodio 0.01 M NaCl 0.1.
5 ml de glucosa 10 mM
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Inhibición
Rvo de trabajo: GOD, POD, Fenol y 4 aminofenazona
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Reacción de identificacion