PROYECTO O€ CERUICIO SOCIAL

Nombre y matrícula de l o s alumnos:

Beatr iz Espínola Maza

Liara H e j í s k t t a

Jesús Zendejae Hernandez

Carrera: e i o i o g í a

Area de concentración: Hidrobiología

DivisiÓn: CBC

Trimestre: 12 Q

97327990

77327921

78214945

Títu lo de l proyecto:

.ConparaciÓn de d i ferentes d ie tas de f i toplancton para e l

cu l t ivo de semi l las de ost ión Crassostrea sp."

Lugar de rea l i zac ión :

Laboratorio de Acuicultura S-246 de l a Universidad Autbnoma

Metropolitana, Unidad Iztapalepa.

Tutor:

M. en C. Giovanni Halagrino Lumare

Adscripción :

Unidad Iztapalapa, Ddpartamento de Zootecnia, Universidad

Autónoma Metropolitana,

Fecha de i n i c i o y término de l se rv ic io soc ia l :

18 de Mayo 1981 a l 18 de Enero 1982

f

INTRODUCCION

- Antecedentes

E l conocimiento de l o s requerirnientoa nutr ic ionales d e l 08-

t i á n habis permanecido estancado debido a que todos l o s intent06

para c u l t i v a r l o fueron hechos ut i l i zando aguas eatuarinas con l a s

cuáles no tenían e l problema de al imentar los ya que e l aliment0

est6 suministrado por elementos naturales (Epifanio 1975).

E x i s t í a considerable especulación en torno a l a s fuentes e-

l iment ic ias de l o s bivalvos en l a naturalere; l a s primeras obser-

vaciones aportaron evidencias de que l o s b lva lvos tomaban com-

puestos org6nicos d e l agua de mar, o ingerfen d e t r i t o s para sa-

t i s f a c e r sus demandas nutr i c iona les , como se observó en estudioa

de contenido eatomacal (Ellegvsd 1914, op.c it . Loosenoff 1972).

Peteraen y Jensen (1911) observaron que e l p r i n c i p a l alimento

de l a os t ra europea, eran l o s d e t r i t o s de Zostera, l a s cuales

tenían asociados numerosas especies de f lagelados y c i l i a d o s .

Algunos biólogos que eatudiaron a l os t ián americano Crassoatrea

v i r p i n i c a , concluyeron que diatomeas y esporas de algas repre-.

sentaban l a base al iment ic ia de éste (Hc. Gready 1874, op.c i t .

Loossnoff 1972). Otros autores Dean (18871, Moore (1908), Ke-

l l o g (1915) y Grave (19161, concluyeron que l a s diatomeas eran

e l componente p r i n c i p a l en l a d ie ta de l o s ostiones. S in embar-

go l a presencia de c i e r t o s organismos o sus restos en e l tracto

digest ivo no s i g n i f i c a que necesariamente 6stoa formen l a die-

t a p r i n c i p a l ; por l o que se h ic ie ron estudios ut i l i zando a l fi-

- 2 -

toplancton como alimento, y 10s resultados obtenidos demostra-

ron que l o s ostiones sf eran capaces de crecer con ésta dieta

(Hartin 1927, 1928, op.cit. Epifanio 197D).

Con l a disponibilidad de técnicas para e l cul t ivo de f i t o -

plancton marino en condiciones controladas, f d fact ib le pro-

bar e l valor slimenticio de diferentea especies de algae para

los bivalvos. Dean (1957) comparó e l valor alimenticio de l e

diatomes Ckeletonema coststum, comunmente encontrada en l o s s-

n á l i s i s de contenido estomacal,,con una mezcla de slgas consti-

tuida por CrVDtomonaa sp. y ChlsmVdomonas sp.. Encontró que los

ostiones alimentados con l a mezcla depositaban considereblemen-

te maa concha que 10s otros slimmtados exclusivamente con l a

diatomea. Davis y Gui l lard (1958), Walne(1963, 1964, 1965, 1966)

y Bayne 61965) encontraron que no todas l a s especies de f i t o -

plancton tenían igua l valor nutr i t ivo; además se observó que una

dieta a base de una mezcle de especies de algae era un mejor

alimento para los ostiones, que una sola especie, be estas ob-

servaciones se desprende que ninguna especie de alga por s i sola

es una fuente alimenticia completa.

Walne (1970) determinó e l valor alimenticio de 25 especies

de algas probadas con diferentes bivalvos y concluyó que l e tasa

de crecimiento estaba influenciada directamente por l a especie

de alga y por l a concentración de ésta en e l agua.

Davis (1950, 1953) y Davis y Gui l lard (1956) determinaron

que algunos flagelados de l aa Chrysophyceae son e l mejor alimen-

to para cu l t i var larvas de ostión y otros bivalvos, como ejemplo:

- 3 -

Chromulina pleiadea, O ic ra te r ia inornata, Hemiselmis ruPesoen2,

Monochrysie l u the r i e Isochrys is qalbans.

Existe una concentracion óptima de a l ga s en l a alimentación

durante l o s tilferentes estadios de l c i c l o de v ida de los b ivs l -

vos, l o s estadoa juveni les tienen menos requerimientos d ie t&

t i cos que l a s l a rvas Ue l l i g e r , aunque requieren gran cantidad

de elirneto para BU rápido desa r ro l l o (Ukeles 1975).

- Objet ivos ;

- &ciimatacián y mantenimiento de semi l las de Grassoatrea sp.

ba jo condiciones de laborator io .

- Determinar l a mejor d ie ta para e l de sa r ro l l o de Crassostrea

a p a r t i r de l a 5 especies de Plboplancton u t i l i z a d a s . - Centar l a s bases para l a impiementación de una práct ica de

l aborator io sobre e l cu l t i vo de oest ion para l a materiaa de

Acicultura.

- Just i f icac ión . Considerarnos importante t r aba j a r con e l ost ión, ya que es

une especie con amplia d ist r ibución en ambas costas de México

y con un a l t o va l o r comercial y nutr ic iona l .

’Uno de l o s puntos para poder r e a l i z a r eü l t l voa masivos, ea

averiguar l a d i e t s óptima pars e l desar ro l lo de l o s juven i l es

y dado que en México aún no se rea l i zan éstoa, nuestro estudio

serfa una contrlbuci6n 8 futuros proyectos en éste campo.

por otro lado, creemos que nuestras experiencias s e rv i r í an

- 4 -

a futuros compatieros que cursen is materia de l cu lcu i tura en e l

de sa r ro l l o de pr6ct lcae de l aborator io slmllares a l o que noso-

t ro s vamos a r e a l i z a r , mejorandose as< BU formación profesional .

- 5 -

PROGRAMA DE TRABAJO

Podemos d i v i d i r nuestro t raba jo en dos partes basicamente:

I.- Cult ivo de Fitoplancton. Para e l l o se tendrgn l e a siguien-

tea act iv idades y consideraciones:

- Obtención de cepas de d i f e rentes especies de f i topiancton ma-

r ino d e l Centro Reproductor de Moluscoa de Can Elaa , Nayarit .

Las especiela tentat ivas son: Ch lo re l l a ap., Chlamvdomonaa ap.,

Cvc lo te l l a ap., MonochrVefs lu ther i , Isochrvaia Qaibana, 4- n a l i e l l a sp. y Tetraselmis sp.

- Mantenimiento de l a s cepae por medio de l e preperacián de me-

dios de cu l t i vo para f i top lancton marino "f/Z".

- Mantenimiento de l o s cu l t i vos monoespecífiaos real izando re-

siembras per iódicas y manteniendo los s iguientes volúmenes de

cu l t i vo pars cada especie :

Cepaa

vo l . c u l t i v o ( m i ) Cap. d e l Matraz

Er len Meyer ( m i )

50 125

inácuios 100

Cult ivos por 300

250

500+

duplicado 1700 2000*

Con a i reac ión

- Los c u l t i v o s serán mantenidos axénicos, pars l o cua l tanto me-

d ios de c u l t i v o como toda l a c r i s t a l e r í a re lacionada con 6s-

toB, serán es te r i l i zados .

- Los c u l t i v o s se mantendrh con un fotoperíodo de 1Zh luz/lZh

obscuridad ut i l i zando luz f r í a ; l a temperatura ambiental de l

cuarto de cu l t i vo será de 20% - 2 C. + o

- 6 -

- Se rea l izarán conteos d i a r i o s de los c u l t i v o s , empleando he-

matocitámetros, para elaborar grá f i cas de crecimiento pobla-

c iona l y con base en e l l a s se establecerá e l tiempo áptimo de

cosecha.

11.- Cult ivo de semil las de Ostión.

- Las aemil las ae obtendrán ya sea de Tuxpan,Veracruz o en e l

Centro Reproductor de Moluacos de San M a s , Nayar i t , según

sean l a a fac i l idades . Se pretende u t i l i z a r placas de a c r í i i c o

para l a f i j a c i á n de l a s semi l las y a s í poderlaa manejar ade-

cuadamente en e l experimento.

- Las semil laa en sus placas se pondrán en acuarios con f i l t r o s

biolÓgicos y se mantendrán en condiciones áptimas de tempera-

tura y aal inidad.

- Se tomarán semanalmente medidas de l a a l t u m de l a concha, ya

que éste aerá e l parámetro empleado para determinar e l c rec i -

miento,

- Tentativamente se van a probar l a s a ighientes dietas:

3.- Una s o l a especie de l f i toplancton que se obtenga.

2.- Mezcla de d i s t i n t e s especies según nuestras oonaideracio-

nea.

3.- Mezclas óptimas según reportado por l a l i keretura (Epi-

fan io , C.E., C. Logan y C. Turk 1975).

- Se piensa determinar l a s tasa8 de crecimiento semanal, g ra f i -

cando l a a l t u r a de l e concha ( y ) contra e l tiempo en semanas

( X I , para cada dieta.

- Se comparará el crecimiento obtenido con l a s di ferentes d ietas

a p a r t i r d e l tiempo cero hasta e l f i n a l d e l experimento.

- 7 -

CALENDARID DE ACTIVIDADES

Act iv idad

1

2

7

6

9

10

1 1

12

Obtención y a n á l l a i s de b i b l i o g r a f í a .

Preparación d e l equipo y mater ial para e l c u l t i v o de

Pitoplancton, así como e l acondicionamiento d e l labo-

r a t o r i o .

Obtención de l a s cepas de Pitoplancton.

Preparación de l o a medioa de c u l t i v o para l a s algas.

Estsblecimiento y contro l de l o s c u l t i v o s de algas.

Preparacibn d e l equipo y mater ia l para e l c u l t i v o de

ost ión.

Obtención de l a a semi l las de Crasaoatraa sp.

Aclimatacibn de l a s semil laa en l a a condiciones d e l

laborator io .

Establecimiento d e l c u l t i v o de ost ión con bus respac-

tivas. dietas.

Obaervaci6n de l desarro l lo d e l oat ión con l a s d i fe-

rentes dietas.

A n á l i s i a de l o a resultados obtenidos en e l experimen-

to.

E laboracibn de l reporta f i n a l .

I

, _I__-- t

. . - 8 -

BIBLIOGRAFIA

G u i l l a r d , R.L.R. Culture o f phytoplancton for feeding marine in-

vertebrates. Contribution 3233 from the Woods Hole

Ocenoqraphic Inst l tut ion , Woods Hole Msseachuseta.

36p.

Ep i fan io , C.E. 1975. Culture o f b ivalve mollusks i n r e c i r c u l a t i n g

systems: Nutr i t iona l requeriments. Proc. F i r s t .

Int . Confer. on Aqumulture Nutr i t ion. October.

p 173-194.

, C.H. Logan y C. Turk. 1975. Culture o f s i x spe-

c i e s o f b iva lves i n a rec i rcu la t ing seawater sys-

tem. 10th. European Cvmp. on Mar. B i o l . Ostend. Bel-

giun, September. p 17-23 1975. Vol. I p 97-108. l

Kinne, O. 1977. Marine Ecoloav. John Wiley 8 Sons. New Vork. V01.111

Partee 1 , 2 y 3. (Cult ivapion).

Loosenoff, V.L. 1972. Research requerimenta for development o f mo-

l luskan farming i n the United States. ProQresa i n

F ish . and Food Science Contribution.Pacif ic Marine

Stat ion Univ. o f the P a c i f i c , D i l l o n Beach, Es l i f .

24(5) 127-161, 1972.

Ukeles, R. 1975. Views on b iva lve larvae, nut r i t ion . Proc. First

Int. Confer, on.*Qqusculture N u t r i t i o n , Octeber. 1975.

p127-161

2) Y

INFORME FINAL E SERVICIO SOCIAL

1 NOMBRE Y MATRICULA DE LOS ALUMNOS:

Jesús Zendejas Hernández 78214945

Clara Graciela Mejia Motta 77327921

Beat r iz Espinola Maza 77327990

CARRERA :

Bio logía

AREA E CONCENTRACION:

I / Lic. Hidrubio log ia

D I V I S I O N :

Ciencias Biológicas y de l a Salud

JTITuLo E L TRABAJO:

"Comparación de d i ferentes d ie tas de f i top lancton para e l c u l t i v o

de semil las de os t ión Crassostrea gigas (Thunberg)"

LUGAR DE REALIZACION:

Laboratorio de Acuicultura 5-26 de l a U A M - Iztapalapa

J TUTOR :

M. en C. Giovanni Malagrino Lumare

ADSCRIFCION :

Universidad Autónoma Metrupolitana Unidad Iztapalapa, Departamento

de Zootecnia

FECHA E I N I C I O Y TERMINO DEL SERVICIO SOCIAL:

A 18 de Mayo de 1981 al

r '

I

.. . -- ..... . . .

COMPARACION E DIFERENTES DIETAS DE FITOPLANCTON PARA EL CULTIVO E SEMILLAS DE OSTION

Crassos t rea gigas (Thunberg)

Jesús Zendejas Hernandez

C l a r a G r a c i e l a M e j f a Mo t ta

B e a t r i z E s p i n o l a Maza

U A M - I z t a p a l a p a

Febre ro d e 1982

INDICE

I.- INTROWCCION

11.- ANTECEDENTES

111.- OBJETIVOS

1 V . - JUSTIFICACION

V.- MATERIAL Y METOWLOGIA

V I . - RESULTAWS Y OISCUSION

V I 1 . - CONCLUSIONES

V I I I . - RECOMENDACIONES

1X.- BIBLIOGRAFIA

X.- TABLAS, FIGURAS Y GRAFICAS

peg. 1

3

7

8

9

13

18

19

20

23

. ,

, ...

.

.. ...

-1-

I.- INTRODUCCION

E l os t ión es una especie ampliamente d i s t r i bu ida en México, cedida

por decreto const i tuc ional a l a s sociedades cooperativas para su explota

ción. Algunas de estas cooperativas pract ican una inc ip ien te act iv idad

de c u l t i v o que consiste, en l a mayoria de los casos, en colocar colecto-

res en campos naturales, durante l a época de reproducción para que se f i

jen l a s semillas. A continuación estas son depositadas en e l fondo o c o i

gadas en balsas o postes para su crecimiento. Técnica relativamente sim-

p l e en l a que l o s resultados obtenidos dependen en gran medida de l a o--

currencia de larvas y f a l t a de competidores.

Una manera de elevar l a producción de ost ión es mediante técnicas

de desove inducido, en condiciones controladas. Con e l l a s se asegura l a

f i j a c i 6 n de un adecuado númem de semil las en un substreto s i n competid:

res, en l a época adecuada y a p a r t i r de prugenitores seleccionados. Las

técnicas de producción a r t i f i c i a l de semil las son ampliamente u t i l i zadas

en var ios paises. Sin embargo, en México solo se efectúan, hasta donde

es de nuestro conocimiento, en e l Centro Reproductor de Moluscos de San

Elas, Nayarit , dependiente de l a Secretaria de Pesca.

E l problema inmediato que ex is te en un c u l t i v o a r t i f i c i a l de larvas

y semil las es e l suministro de alimento adecuado y abundante, hasta que

l a s semi l las alcancen l a "robustez" su f ic ien te para obtener una supervi-

vencia elevada una vez colocados en s i t i o s de engorda naturales.

En términos generales, para e l suministra de alimento se cu l t i van

diferentes especies de algas y con e l l a s se alimenta a larvas y semillas.

S in embargo, no se conoce con prec is ión l a mezcla de algas y l a concen--

t rac i6n más adecuadas para cub r i r l o s requerimientos nut r ic ionales, pun-

tos muy importantes a d e f i n i r para disminuir costos y esfuerzos.

-<.

... .

.. ,

-2-

Aunque otros factores intervienen en l a adecuada alimentación de

larvas y semillas, t a l como es l a variacidn en los parámetros fisico-qui

micos, este estudio quiere contribuir a ampliar los conocimientos sabre

concentraciones y mezclas adecuadas de algas.

-3-

11.- ANTECELENES

E l conocimiento de los requerimientos nu t r i c iona les de l ost ión ha--

b i a permanecido estancado debido a que todos los i n ten tos para cu l t i va r -

lo fuemn hechos u t i l i zando aguas estuarinas, en l a s que e l alimento es-

taba ya presente en forma natura l [Epifanio, 1975).

E x i s t i a considerable especulacidn en torno a l a s fuentes al imenti--

c ias de los bivalvos en l a naturaleza. Las primeras observaciones aport=

ron evidencias de que los bivalvos tomaban compuestos orgánicos de l agua

de mar o ingerían d e t r i t o s para sat is facer sus demandas nutr ic ionales.

Krogh, 1931 (en Ukeles, 1975) propone que los ostiones pueden absorber

sustancias n u t r i t i v a s d isuel tas y que cuando l a s sustancias están preser

tes en concentraciones elevadas pueden c o n s t i t u i r una fuente nu t r i c i ona l

s ign i f i ca t i va .

Esta suposición de Kmgh fue comprobada en 1973 por Somkin y Wysh-

kwarzeew [en Ukeles, op. c i t . ) , que detectan la captación e incorpora---

c ión de materia orgánica d isuel ta mediante e l uso de un h idml izado de

algas marcadas con C . 14

Blegvad, 1914 [en Loosanoff, 1972), observó, mediante estudios de

contenido estomacal, que los bivalvos ingerían de t r i t os para sat isfacer

sus demandas nut r ic ionalys, Petersen y Jensen, 1911, observaron que e l

p r i n c i p a l alimento de l a os t ra europea, eran los d e t r i t o s de Zoostera,

los cuales tenían asociadas numerosas especies de f lagelados y c i l iados .

Algunos biólogos que estudiaron a l ost ión americano Crassostrea v i r g i n i -

-9 ca concluyeron que diatomeas y esporas de algas representaban su base

a l iment ic ia [Mc Gready, 1874) [en Loosanoff, op. c i t . ) . Otros autores

Dean, 1887; Moore, 1908; Kellog, 1915 y Grave, 1916, concluyemn que l a s

diatomeas consti tuyen e l componente p r inc ipa l en l a d ie ta de los ostio--

-4- ,. ..

. .~.

. ..

. .. nes. S i n embargo, a l no ex i s t i r l a certeza de que l a presencia de cier--

tos organismos o de sus restos en e l tracto digestivo s igni f icara necess

riamente que éstos formaran l a dieta principal, se hiciemn estudios COI

probatorios utilizando fitoplancton como alimento. Los resultados obten;

dos demostramn que l o s ostiones si eran capáces de crecer con esta die-

t a [Martin, 1927, 1928; en Epifanio, op. c i t . ) .

Con e l desarrollo de técnicas para e l cult ivo de fitoplancton mari-

no en condiciones controladas, f u e f ac t ib l e probar e l valor alimenticio

de di ferentes especies de algas para l o s bivalvos, as i como l a s mezclas

de e l l as . Dean, 1953,compar6 e l valor alimenticio de Skeletonema costa-- - tum, comunmente encontrada en l o s anál is is de contenido estomacal, con

una mezcla de algas constituida por Cryptomonas sp. y Chlamydomonas sp.

Encontr6 que l o s ostiones alimentados con l a mezcla depositaban conside-

rablemente más concha que aquellos alimentados exclusivamente con =- tonema. Davis y Guillard, 1958; Walne, 1965, 1964,1965,1966 y Bayne,1965,

encontraron que no todas l a s especies de fitoplancton tenian igual valor

n u t r i t i v o . Además, observaron que una dieta a base de una mezcla de al--

gas era un mejor alimento que una dieta basada en una sola especie. De

estos resultados se desprende que ninguna especie de alga por s i sola es

una fuente alimenticia completa.

Walne, 1970 (en Epifanio, op. c i t . ) determino e l valor alimenticio

de veinticinco especies de algas probadas con diferentes bivalvos; toman

do a Isochrysis galbana como control, con un "indice de crecimiento" i--

gual a 1.00 para hacer sus comparaciones, Seg6n éste anál is is l o s resul-

tados obtenidos para - O. edulis son:

Especies Indice de valor alimenticio promedio

Monochrysis luther i i

Chaetoceras calcitrans

1.36

1.28

-5-

I .,,.

. . I.

. ..

_^.

-..

...

. ..

I

.

...

.~ ..

I.*

c

L

c

Tetraselmis suecica

Skeletonema costatum

Isochrys is galbana

Oic ra te r ia inornata

Cryptomonas sp.

Cricosphaera carterae

Ch lore l la stigmatophora

Phaeodactylum tr icornutum

Olisthodiscus sp.

Nannochloris atomus

Ch lore l la autotruDhica

Pavlova gyrans

Micrumonas p u s i l l a

Ounal ie l la euchlora

Ounal ie l la t e r t i o l e c t a

Chlamydomonas coccoides

De esta investigacibn,

1.20

1 .o1

1.00

0.94

0.64

0.62

0.60

0.59

O. 56

0.54

0.52

0.50

0.44

0.40

0.39

0.30

Walne concluye que l a tasa de crecimiento es-

t á inf luenciada directamente por l a especie de alga usada; por lo que su-

pone una diferencia a n i v e l químico como l a expl icación más obvia para

los beneficios nu t r i c iona les de algunas algas, o para l a carencia de e---

110s en otras, Pero al prac t i ca r un a n á l i s i s de l a composici6n de amino--

ácidos ent re l a s especies "buenas" y "malas", no detect6 diferencias con-

tundentes, en cuanto a le cantidad y cal idad de los mismos. En un estudio

pos ter io r (Walne, 1973; en Epifanio, op. c i t . ) , concluye que l a s diferen-

c ias residen en l a d ispon ib i l idad de los aminoácidos en l a s moléculas pro

te ícas de los di ferentes géneros de algas.

-

Davis, 1950, 1953 y Davis y Gu i l la rd , 1958 (en Loosanoff, op. c i t . ) ,

determinaron que algunos f lagelados de las Chrysophyceae (Chrumulina a

-6-

. .

. ..

._.

w, Dicrateria inornata, Hemiselmis rufescens, Monochrysis luther i i ,

e Isochrysis galbana), son e l mejor alimento para cult ivar larvas de os-

ti6n y Otms bivalvos.

Los requerimientos con respecto a las especies de algas a u t i l i za r ,

a s í como sus concentraciones óptimas, varian según 105 diferentes esta--

dios del c i c l o de vida d e l osti6n. En términos generales l a s larvas Ve--

l l i g e r necesitan algas pequeñas (Monochrysis sp., Cyclotel la sp., &--- chrysis sp., etc. ) mezcladas adecuadamente, mientras que los estadios j i

veniles tienen menos requerimientos dietét icos, aunque necesitan mayor

cantidad de alimento para su rápido desarrullo (Ukeles, op. c i t . ) .

. .

.. .

. .~ ,

....

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.. .

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.. .

.

.. .

,..

.__ ,.-

- c

-7-

111.- OBJETIVOS

- Observar e l crecimiento de semillas de c. gigas bajo condiciones de 1:

boratorio.

- Determinar l a mejor dieta para e l desarrollo de c. gigas a part i r de

las especies de fitoplancton util izadas.

- Sentar l a s bases para l a implementaci6n de una práctica de laboratorio

sobre e l cult ivo de osti6n para l a materia de Acuicultura.

-8-

Iv .- JUSTIFICACION

Consideramos importante trabajar con e l osti6n ya que es una espe--

c i e con amplia distribution en ambas costas de México y con a l t o valor

nutrit ivo y comercial.

Uno de l o s factores importantes para lograr cult ivos intensivos de

ostión es proporcionar l a dieta óptima para e l crecimiento de las semi--

l l a s recién f i jadas.

En México l os cult ivos generalmente son comenzados a part ir de lar-

< .

I

. ..

. .

vas que se f i j an en condiciones naturales, por l o que e deseable contr i

b u i r a l estudio de l a obtención y mantenimiento de semillas en laborato-

r i o para su ul ter ior envio a campos de engorda y crecimiento.

Por otra parte nuestras experiencias servirán a futums compañeros

en e l desarrollo de prácticas de Acuicultura, relacionadas a nuestro te-

ma, mejorando as í su formaci6n profesional.

-9-

MATERIAL Y METODOLOGIA

.._

r .- I

r'

r

, .

I c

1..

i I-...

F ..

r- I , .

Dividiremos este capítulo en dos partes básicamente: A, - Cultivo de

fitoplancton y B.- Cultivo de semillas de ostión.

A.- Cultivo de Pitoplancton.

Las cepas de l a s diferentes especies de algas uti l izadas en e l est! dio [TABLA 1) fueron traídas del Centro Reproductor de Moluscos de San

Blas, Nayarit dependiente d e l a Secretaría de Pesca. E l medio de cult ivo

uti l izado fué e l "h/2" (Gu i l l a rd y Ryther, 19621, cuyos componentes es--

tán expresados en l a TABLA 2. Fué preparado con agua de mar natural y/o

con agua de mar a r t i f i c i a l obtenida disolviendo sa l marina en agua desti-

lada, Se ut i l i z ó e l medio "h/2" por contener este una gama amplia de nu-

tr ientes, suficientes para cubrir l o s requerimientos nutricionales de

l a s especies empleadas, evitandose a s í l o s inconvenientes de tener que

preparar diferentes medios,

Los cult ivos se mantuvieron axénicos y monoespecíficos mediante l a

adecuada limpieza y ester i l i zación, a 20 lb/20 m i n de toda l a cristale-

r i a relacionada con los mismos. También se ester i l i zamn los nutrientes,

metales traza y medio de cult ivo f inal . E l mantenimiento de l a s cepas

se hizo en matraces Erlen Meyer de 125 m l l lenos hasta 50 m l con medio

de cult ivo. Cada quince días se renovaba e l medio, utilizando parte del

cult ivo como inóculo. A l mismo tiempo se efectuamn siembras sucesivas

en matraces de 250, 1000 y 2000 m l l lenos de medio de cult ivo hasta 100,

300 y 750 m l respectivamente. Las resiembras se realizaron antes de que

l o s cult ivos alcanzaran su máxima densidad, De estos dos Últimos matra-

ces se cosechaba l a cantidad necesaria de algas para l a alimentación de

l a s semillas. Debido a l pequeño volúmen de los cult ivos no fué necesa--

r i a l a aereación.

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-10-

E l manejo de l o s cult ivos, para l a s resiembras y tomas de alimento,

se hizo dentro del radio de influencia de l a llama de un mechero para e-

v i ta r contaminación.

Los cult ivos fueron mantenidos en un cuarto con temperatura contro-

lada a 23O C Z0 C ; con lámparas fluorescentes de luz f r i a Cylvania FB

4OCW-6, cuya intensidad sobre l o s cult ivos f u e de 7,700 uW/cm2, intensi-

dad medida con un Underwater Irradiometer Model 26BWA310 y e l fotoperio-

do establecido fué de 12/12, util4zándose un relevador de tiempo UL modg

l o 796.64420 [Figs. 1 y 2).

Diariamente se contó e l número de células en cada cult ivo con e l O&

j e to de elaborar l a curva de crecimiento para las diferentes especies.

Para e l l o se u t i l i z ó un hematocitometro BOECO con un volúmen de 0.1 mm . Los conteos se llevaron a cabo durante dos meses.

3

B.- Cultivo de semillas de ostión.

Antes de in i c ia r esta segunda etapa del experimento se construyeron

doce acuarios de 40 X 30 X 20 cm provistos de filtro biológico. A conti-

nuación se llenaron con agua de mar y se pusieron a funcionar para as i 5

segurar e l establecimiento de poblaciones bacterianas desnitrificantes.

Los acuarios se instalaron en un estante con se is niveles [Fig 3).

Las semillas de c. gigac empleadas en e l estudio fueron obtenidas

del Centro Reproductor de Moluscos de San Blas, Nay,; con un tiempo de

f i jac ión de aproximadamente treinta dias. Para su transporte hasta e l la

boratorio de l a U A M - I, se colocaron en hieleras con una capa de hie-

l o cubierta con un paño y encima de este se colocaron las conchas porta-

doras de l a s semillas.

Durante e l periodo de aclimatación de las semillas a las condiciones

del laboratorio, se l e s mantuvo a una salinidad de 35 % y a temperatura

ambiente. La alimentación consistió en una mezcla de las especies de al-

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-1 1-

gas obtenidas en e l mismo Centro. En e l tiempo de aclimatación, que ab-

c6 varias semanas, se l l e vó a cabo l a separación de las semillas de su

sustrato con e l f i n de f a c i l i t a r las mediciones de crecimiento. Poste---

r iomente, fueron repartidas en los doce acuarios, a razón de 38 a 51 SE

m i l l a s por acuario, manteniéndose f i j a l a disposición de l a s mismas du--

rante todo e l estudio para poder seguir con presición e l crecimiento de

cada una de e l l a s [Figs. 4 y 5 )

Para efectuar e l estudio de alimentación se establecieron doce die-

t a s experimentales, se is en forma de mezcla y se i s monoespecificas (Ta-

bla 3).

Antes de in i c ia r e l estudio se dejaron a l a s semillas sin alimenta-

ción durante s ie te dias, para que consumieran e l alimento que se encon--

traba en los acuarios e in i c ia r ac i e l experimento en condiciones de i--

gualdad.

La cantidad de células de cada dieta a añadir en l os acuarios se f i

j6 a part ir de l o mencionado por Epifanio e a l , 1975, quienes utiliza--

ron 2.5 X 10 cels/semilla/dia de Thaldassiosira pseudonana. Como no fué

posible mantener e l cult ivo de Thallassiosira sp. (sin. * lotel la sp.)

utilizamos Monochrysis sp., por guardar semejanza en tamaño con l a ante-

r i o r .

-

6

Para que l a cantidad de alimento fuera igual en cada dieta se hizo

una equivalencia no en e l ntimero de células, sino en biomasa, debido a

l as diferencias en tamaño de las células. Para e l l o se determinó e l peso

de cada una de l a s especies usadas de l a siguiente manera: se contó e l

número de células por m l en e l matráz con Monochrysis sp . , después se

f i l t r ó un vollimen conocido a traves de un filtro Whatman # 3 y l o f i ltrg

do se puso a secar en un homo hasta que e l peso dejara de variar ( se 2

t i l i z ó g e l de s i l i c e como deshidratador dentro de l a balanza).

-12-

Posteriormente se calculó e l peso de una sola célula de Monochrysis

sp. y siguiendo l a misma secuencia se calculó e l peso de l a s demes espe-

cies. A part i r del resultado obtenido para e l peso de Monochrysis se c a l

cu16 e l n6mero de células equivalentes para las otras especies.

Para conocer el crecimiento de l a s semillas se midió l a longitud de

l a concha desde e l centro de l a charnela hasta l a región distal , u t i l i - - - .

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zando un Vernier (Fig. 6J .

Se hicieron mediciones periódicas en l o s acuarios de l a temperatura

con un termómetro CMS con rango de -1 a 51' C, salinidad con refractóme-

tro American Optical, oxigeno con un oximetro YSI Modelo 51 , pH con pa-

pel indicador, amoniaco con l a técnica de Sol6rzan0, 1969 (en Contreras,

1980); con e l f i n de v i g i l a r que l o s parámetrus fisico-quimicoc estuvie-

ran dentro de los l imites aprupiados para e l estudio.

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-13-

VI. - RESULTAWS Y DISCUSION

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Los cu l t i vos de f i top lanc ton se desarrol laron satisfactoriamente

con e l medio de c u l t i v o ''h]ZIl (Gui l lard y Ryther, 1962), e l cuál d i6 los

mismos resultados cuando se u t i l i z ó agua de mar na tu ra l as í como cuando

se usó agua de mar preparada con s a l marina. Esto impl ica una gran vent:

j a para l l e v a r a cabo estudios de este t i p o en lugares alejados de l mar

o con problemas de almacenamiento de agua de mar natura l ,

Cuando se preparó e l medio de c u l t i v o con l a s vitaminas provenien--

t es de San Elas, e l crecimiento de los di ferentes cu l t i vos fué pobre. A l

usar vitaminas obtenidas de l o s (Laboratorios P f i z s r se observó un mayor

crecimiento, por lo cual suponemos que l a primera mezcla de vitaminas es

taba probablemente desnaturalizada.

-

A pesar de los cuidados tenidos se presentaron problemas de conta--

minación en los cu l t i vos por o t ras algas, debido a problemas de manejo,

Dos géneros Cyc lo te l la sp. e Isochrys is sp., que en l a b i b l i o g r a f í a se

reportan como buenas para alimentación de l a s semillas, se perdieron de-

bido a dicha contaminación. Este problema no se presentó con l a s o t ras

algas manejadas, por lo que posiblemente esto sea un i n d i c i o de lo d i f i -

c i l que es mantener Cyc lo te l la e Isochrysis puras en condiciones de la--

borator io.

En l a es te r i l i zac ión de los medios de c u l t i v o se encontró que es más

conveniente e s t e r i l i z a r por separado e l agua de mar y los nutr ientes, de-

bido a que en var ias ocasiones se present6 una prec ip i tac ión de l a s sales

cuando se e s t e r i l i z ó l a solución ya completa.

Con respecto al estudio de alimentación en cas i todas l a s gráf icas

se observa una mayor tasa de crecimiento a l p r i nc ip io (Gráficas 1 a 16 y

la ) , esto pudo deberse a que los s ie te días de suministro nulo de alimen -

-14-

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t o no fueron sugicientes, influyendo todavca las algas presentes, en for

ma notable para e l crecimiento de las semillas.

Para analizar e l crecimiento de l a s semillas con dietas a base de

una sola especie (Gráficas 13 a 18 ) , decidimos no tomar en consideración

las tasas de crecimiento por día, debido a l comportamiento t a n irregular

que se observa. Basándonos en e l aumento global en t a l l a y en e l porcen-

taje de superviwencia, que puede ser otro indicador de l a calidad de l a

dieta, se puede ver que las mejores dietas son l a "L", "K" y " J " , con un

aumento en t a l l a de 0.93, 0.73 y 0.60 mm respectivamente y un porcentaje

de supervivencia de 31%, 4G$ y 36% en e l mismo órden. Es d i f i c i l concluir

con estos resultados cual de l a s t res es l a mejor dieta; l o que s i se ob-

serva claramente es que l a s dietas "G" y "H" no son muy apropiadas, ya

que en l a primera hay una mortalidad de un 63%, casi a l a mitad del estu-

dio, y con un 6% a l f ina l . Con l a dieta "H" practicamente no se aprecia

crecimiento.

Un aná l i s i s comparativo del Crecimiento de las semillas alimentadas

exclusivamente con las mezclas de algas, nos revela que las mejores son

l a dieta "C", constituida exclusivamente por c lomf i tas ,y a continuación

l a dieta "A", formada por algas c lorof i tas, cr iso f i tas y haptoficeas

(Gráficas 7 a 12).

Con l a dieta "A" se presenta e l más a l t o porcentaje de superviven--

c ia , 52% (Gráfica 7 ) , mientras que con l a dieta "C" es de 38% (Gráfica 9 ) .

E l buen crecimiento obtenido con l a dieta "B", debe ser analizado con

cautela, ya que por l a a l ta mortalidad que se present6 alcanzando un 86%

en e l dia 28' (Gráfica 8), no quedaron suficientes individuos para poder

concluir con seguridad sobre l a bondad de l a misma, Sin embargo,al prin--

c ip io del estudio, se puede observar un crecimiento elevado, 0.91 mm, si-

milar a l obtenido con l a dieta "C" de 0.96 mm. También hay s i m i l i t u d en

-15-

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los componentes. Las causas rea les de esta a l t a mortalidad, no observada

con ninguna de l a s o t ras dietas, se desconocen, pero suponemos que fué

provocada por algún t i p o de parasitismo.

A l comparar el crecimiento de los ostiones alimentados con dietas

monoespecificas y con mezclas de algas, se puede observar un mayor me- -

cimiento en aquellos ostiones cuya dtste: es una mezcla de algas (Gráf i -

ca 19), resultado que concuerda con l a s observaciones hechas por Calabre

se y Davis, op. c i t . (en Ukeles, op. c i t . ) .

-

E l hecho de que cualquier mezcla de un mejor crecimiento, se puede

exp l i car como resultado de un enriquecimiento de l a d ie ta por un mayor

número de aminoácidos.

Es d i f i c i l exp l i car e l porque una d ie ta es mejor que otra, debido a

que entran en consideración var ios factores que pueden a fec tar l a capta-

c ion y/o l a asimi lación de l a s algas por l a s semil las como son: e l tama-

ño, l a presencia de pared ce lu lar , producción de toxinas, etc.

En términos generales se ha v i s t o que, para los estadios larva les,

l a s algas de mayor va lor a l iment ic io han sido aquellas con un diámetro

menor de 10 y como Thal lass ios i ra sp. (Calabrese y Davis, op. c i t . ) . En

e l caso de l a s semil las no encontramos información en l a que se mencione

un tamaño adecuado de algas,

Ateniéndonos a nuestros resultados con una sola especie no se puede

l l e g a r a conc lu i r algo d e f i n i t i v o respecto a l tamak de l a célula, ya

que l a s d ie tas “J“ y “L“ corresponden respectivamente a un género muy pg

queño y a o t r o muy grande,

O t r o c r i t e r i o a considerarse es l a presencia o ausencia de pared cg

l u l a r . A este respecto Calabrase y Davis, op. c i t . , reportan que ‘ I . . .

aunque algunas la rvas de bivalvos pueden as imi la r y d i g e r i r algas con pa

redes ce lu lares gruesas, como Ch lore l la sp., Chlamydomonas sp., y Duna--

-16-

l i e l l a sp., hay otras larvas de bivalvos que carecen de l a s enzimas dig-

t i vas necesarias y requieren para su alimentation, de flagelados desnudos,

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como Monochrysis sp. e Isochrysis sp.". Es importante señalar que todas

l a s larvas de bivalvos se alimentan preferentemente de células desnudas.

Tomando este punto de vista, en l a s dietas "G" y "ti" se puede notar que

Monochrysis sp. es m6s bien una dieta poco indicada, ya que a pesar de ha

ber tenido una tasa de crecimiento a l ta , e l porcentaje de mortalidad es e levado (94.2%). Esta alga no parece afectar a l mezclarse con otras (Dieta

"A" ) ,

En lo que respecta a Ow (Pseudoisochrysis sp.), usada en l a dieta "H" I

el crecimiento result6 nulo, aunque l a supervivencia es más a l t a que con

Monochrysis. A l mezclarse l o s dos géneros (Dieta "E"), se puede detectar

una mejora en l a calidad de l a dieta, a l igua l que en l a dieta "A".

Otro punto de discusi6n es l a secreci6n de metabolitos t6xicos por

las células. Monochrysis, Isochrysis y probablemente Ow producen muy por

cos, s i no es que ningCln metabolito tóxico (Calabrese y Davis, op. cit. ) ,

con l o cual queda descartada como causa de l a mortalidad elevada de l a

dieta " G " , l a presencia de metabolitos t6xicos;suponemos que pudo haberse

debido m á s bien a l a baja calidad nutr i t i va de Monochrysis o a una canti-

dad insuficiente de células.

Chlorella (Dieta "K"), que se suponia no seria una dieta adecuada

por secretar cantidades relativamente a l t a s de toxinas a l medio; mostró

no ser tan mal alimento, ya que e l porcentaje de supervivencia fué de

4C$ y e l crecimiento fué bueno (0.73 mm). Esto concuerda con Calabrese y

Davis, op. cit., que mencionan que los bivalvos alimentados con una con-

centracidn apropiada o baja de Chlorella pueden asimilarlas o aún crecer,

ya que l a s secreciones no alcanzan niveles táxicos. Walne, 1964.(en Uke--

l es , op. cit. ) reporta Chlorella como un alimento "indiferente".

-17-

Por los resultados de crecimiento obtenidos, dudamos que la canti--

dad de alimento suministrado a los ostiones en cada una de l a s d ie tas ha

ya sido l a apropiada, y más bien nos inclinamos a pensar que fué una can

t idad de supervivencia. Una observación importante es que durante e l

transcurso de l experimento no se aumentó l a cantidad de alimento. La va-

r i a c i ó n de los parámetrns ffcico-qufmicos no afectó los resultados d e l

experimento, dado que se mantuvieron en un rango aceptable (Tabla 5).

Sólo con l a temperatura e x i s t i 6 una est rat i f icac ión, con temperaturas a l - tas en los acuarios superiores y temperaturas menores en los i n fe r i o res .

S in embargo, esto no afectó los resultados f ina les . As1 mismqla concen-

t rac ión de amoniaco estuvo muy l e j o s de los nive les tóx icos (Epifanio y

Srna, 1975).

-

Para l a determinación de l a biomasa de l a s cé lu las en peso seco, se

u t i l i z ó un papel f i l t r o Whatman # 3 (e l más chico con e l que contábamos),

se observó que se l legaban a pasar cé lu las a t ravés de él, sobre todo l a s

pequeñas, po r lo que pudo haber ermres en l a s equivalencias gravimétri--

cas establecidas.

Es muy d i f i c i l establecer un c r i t e r i o de medición de organismos tan

i r regu la res como son l a s semil las de ost ión, ya que lo i r r e g u l a r d e l sus

t r a t o de f i j a c i ó n d i f i c u l t a l a medición, a l mismo tiempo hay diferentes

c r i t e r i o s de medición mencionados por di ferentes autores. Se observó tam

bién que, debido a l manejo de l a s cemillas,se provocaba un desmorunamiec

t o de su misma concha, as í como de l sustrato. en e l que estaban f i jadas ,

Esto provocó indudablemente que hubiera datos negativos de crecimiento.

(F ig 7 J .

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-18-

vII.- CONCLUSIONES

- A excepci6n de Cyclote l la e Isochrysis, l a s algas que se cultivaran son

de f á c i l mantenimiento en e l laboratorio.

- Se obtuvieran idénticos resultados en l o s cult ivos de fitoplancton cuan

do se u t i l i z ó agua de mar natural y cuando se u t i l i z ó agua de mar prep2

rada con sal marina,

-

- E l medio de cult ivo uti l izado, "h/Z", cubre completamente l o s requeri--

mientas nutricionales de l a s algas util izadas.

- Las dietas basadas en mezclas de algas dieron lugar a un mayor creci---

miento de las semillas en comparación con las dietas basadas en una so-

l a especie.

- La cantidad de alimento proporcionada a las semillas de ostión fué insu - f i c i en te a l o largo del experimento, l o que provocó un crecimiento muy

pobre.

- La mejor de l a s dietas experimentales fué l a constituida por cuatro c l g

ro f i tas : Chlorella, Tetraselmis, Chlamydomonas y Dunaliella.

- E l f i l t r o biológico fué muy e f ic iente para mantener una a l ta calidad del

agua. Los valores de amoniaco fueron prácticamente iguales a cero.

- Es fac t ib le establecer un cult ivo de semillas de ostión bajo condiciones

de laboratorio, dada su gran resistencia y posibil idad de u t i l i z a r agua

de mar preparada con sa l marina, l o cuál implica bajo costo y acces ib i l i

dad.

- Se pueden mantener vivas las semillas a l o largo de todo e l año,

- Por todo l o antes dicho: senci l lez para cult ivar l as algas, posibil idad

de u t i l i z a r sal marina para hacer agua de mar, posibil idad de mantener

vivas a l a s semillas todo e l año, resistencia de l a s mismas, etc., con-

sideramos que es muy fac t ib l e rea l i zar prácticas de laboratorio de di-

rentes tipos con este organismo.

-19-

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V I I L -,. RECOMENDACIONES

- Ut i l i z a r papel Whatman más fino.

- Obtener semillas s i n sustrato.[uso de plestico para su f i jac i6nJ .

- Para determinar e l crecimiento es mejor probar midiendo biomasa.

- Ver i f icar l a t o t a l ausencia de células en los acuarios antes de i n i c i a r

e l experimento.

- Trabajar con un mayor nomero de semillas, posiblemente alrededor de 100

por acuario.

- Establecer duplicados oon e l f i n de obtener datos más confiables para

cada experimento.

- Tratar de hacer experimentos con cepas de algas existentes en México.

-20-

1X.- BIBLIOGRAFIA

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and larvae o f bivalve mollusk. O. Kinne (ed.). Cultivation - of

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X.- TABLAS, FIGURAS Y GRAFICAS

-23-

TABLA 1

c

ESPECIES DE ALGAS UTILIZADAS EN EL ESTUDIO

- CHLOROFHYTA - HAPTDPHYTA

Ch lore l la sp. * Isochrys is sp.

Chlamydomonas sp.

Dunal ie l la sp.

Tetraselmis sp.

- CHRYSOPHYTA

- BACILLARIOPHYTA

* Cyc lo te l la sp.

Monochrysis sp.

Ow (Pseudoisochrysis sp. )

* Estas algas no se lograron mantener en e l laborator io .

-24-

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TABLA 2

COMPOSICION DEL MEDIO E CULTIVO "h/2" (Guillard y Ryther, 1962; Woods

Hole Oceanographic Inst., 19ffl).

- Nutrientes principales NaN03

NaHzP04mH20

NazSiO~'9H20

NH4C1

- Metales traza

Na2EOTA

FeC13 .6H2O

CuS04'5H20

ZnS04'7H20

coc12. @izo

MnC12'4H20

Na2M004'2H20

- Vitaminas

Thiamina"C1

Eiotina

B IZ

- Agua de mar

75.0 mg

5.0 rng

15.0-30.0 mg

26.5 mg

4.36 mg

3.15 mg

0.01 mg

0.02 m g

0.01 rng

0.18 mg

0.006 mg

0.1 mg

0.5 ug

0.5 ug

a un litro

-25-

TABLA 3

DIETAS EXPERIMENTALES

MEZCLAS

Dieta "A" : Monochrysis sp.

Dw (Pseudoisochrysis sp. : Chlamydomonas cp.

Dieta "E" : Tetraselmis sp.

Duna l ie l la sp.

Chlore l la sp.

Dieta "C": Chlore l la sp.

Chlamydomonas sp.

Duna l ie l la sp.

Tetraselmis sp.

Dieta "D" : Monochrysic sp.

Dunal ie l la cp.

Tetraselmis ep.

Dw (Pseudoisochrysis sp.

Dieta "E". . Monochrysis sp.

Dw (Pseudoisochrysis sp.

Dieta "F" : Monochrysis sp.

Dw (Pseudoisochrysis sp.

Chlamydomonas sp.

Chlore l la sp.

-

MONOESPECIFICAS

Dieta "G" : Monochrysis sp.

Dieta "H": Dw (Pseudoisochrysis sp. )

Dieta "I": Dunal ie l la sp.

Dieta "J" : Chlamydomonas sp.

Dieta "K": Ch lo re l la sp.

Dieta "L": Tetraselmis sp.

"B"

No. i n d - X

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"C"

No. i n d - X

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No. i .nd - X

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-26-

TABLA 4 :SULTAWS

O 7 28 52 70 93 1 o5 112

so 50 47 31 30 30 28 26

11.11 11.56 12.m 12.47 12.50 13.13 13.08 14.09

2.00 0.42 2.07 2.31 - 2.70 2.20 3.39 2.26 4.03 1 -82 4.30 5.35 7.29 4.85 11.52 5.14

0.00 0.062 O. 025 0.015 0.018 0.012 0.041 0.03t

so so 7 2 2 1 O O

10.39 10.67 11.31 12.47 12.82 13.40 2.68 3.08 1.77 0.45 O. 17 7.22 9.52 3.13 0.21 0.03

0.00 O. 066 0.025 o, O09 0.015

50 50 46 30 29 28 23 19 10.39 10.73 11.35 11.37 12.32 12.87 13-36 13.76

1 -85 1.74 1.90 2.70 1.74 1.65 1.91 2.37 3.44 3.03 3,63 7.29 3.06 2.73 3.66 5.64

0.00 0.049 O. O25 0.014 O. 025 O. 025 0.052 0.06'

50 50 43 25 21 19 15 7 9.85 10.06 10.68 10.88 10.38 11.69 11.71 11.34 2.06 2.07 1.89 2.12 2.31 2.41 2.61 1.94

4.28 4.29 3.60 4.49 5.35 5.81 6.84 3.76 0.00 0.030 0.030 0.010 0.022 0.013 O. O42 0.01:

so so 43 30 25 22 16 10

9.49 9.67 10.29 9.80 10.77 11.14 11.69 12.01

2.41 2.43 2.79 3.55 2.33 2.50 2.65 2.84 5.03 5.92 7.81 12.67 5.45 6.28 7.04 8.08 o. O0 o. 028 0.035 0,009 0.012 0.010 0.021 o. 02;

50 50 50 31 27 24 18 13

10.59 10.73 10.88 11.55 11.52 11.90 12.44 12.53 2.27 2.27 2.32 2.77 2.21 2.23 2.45 2.66

5.18 5. 15 5.39 7.70 4.90 5.00 6.04 7.11 0.00 0.020 0.007 0.013 0.012 0.007 0.017 o. 021

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-27-

TABLA 4 ( c on t . )

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51 40 35 19 5 5 3

10.71 11.04 11.08 10.52 11.3 11.23 11.1

1.91 1.84 2.02 1.49 1.36 1.2 1.62

3.65 3.40 4.10 2.23 1.85 1.44 2.64

0.00 0.052 0.014 0.007 0.017 O, O27 0.01

49 37 32 16 15 13 12

10.54 10.80 10.87 10.38 10.46 10.61 10.52

2.01 1.64 1.62 1.50 1.34 1.35 1.28

4.05 2.71 2.64 2.25 1.81 1.83 1.65

0.00 0.046 0.016 O. O05 0.010 0.007 0.00

~

49 43 40 33 22 19 13

10.52 10.52 10.57 10.90 10.59 10.82 10.81

2.49 2.18 2.06 2.38 2.19 2.34 2.14 6.20 4.78 4.26 5.66 4.80 5.47 4.60

0.00 O. 052 0.014 0.007 0.017 0.027 0.01

49 40 39 32 18 18 18

10.87 11.14 11.14 10.83 11.01 11.06 11.47

1.67 1.69 1.70 1.46 1.61 1.74 1.69

2.79 2.80 2.80 2.10 2.60 3.00 2.86

0.00 0.053 0.020 O. 005 0.009 0.011 0.02

45 45 45 30 22 18 18

- 11.56 11.48 11.43 11.74 12.10 12.29 - 2.26 2.14 2.23 2.36 2.45 2.39

- 5.15 4.61 4.99 5.61 6.04 5.74

- 0.00 0.011 O. 005 0.010 0.020 0.01

38 35 32 22 16 15 12

IO. 14 10.32 10.21 10.24 10.74 10.78 11.07

1.61 1.69 1.76 2.06 1.63 1.84 1.76

2.59 2.87 3.10 4.24 2.67 3.40 3.10

0.00 0.060 0.015 O. 006 0.011 0.018 0.01

( 1 ) T a l l a en mm (2) Tasa de c r e c i m i e n t o en mm/dia (3) Se p e r d i e r o n l os datos c o r r e s p o n d i e n t e s a l d i a "O".

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Figs. 1 y 2. Cul t i vos d e F i t op lanc ton en e l l a b o r a t o r i o .

-29-

F i g , 3. Disposición de l o s acuarios eri un estan te

F i g . 4. Semilla desprovista de l a mayor cantidad de sustrato

-30-

F i g . 5. Posic ión ordenada de l a s s e m i l l a s en cada acuario

F i g . 6 . Medic ión de :La longitud máxima de l a s s e m i l l a s

1 -

Fig . 7. Desmoronamiento d e l sustrato a consecuencia del manejo.

-32-

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