producción de invertasa a partir de saccharomyces cerevisiae practica 5.pptx

7/22/2019 Produccin de Invertasa a partir de Saccharomyces Cerevisiae Practica 5.pptx

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Mauricio Martnez Jurez

Juan Carlos Castillo Valadez

Produccin de Invertasa a partir deSaccharomyces Cerevisiae


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Introduccin

Desde hace unas dcadas se dispone de enzimasrelativamente puras extradas industrialmente debacterias hon!os plantas " animales con una !ran

variedad de actividades pero ho" en da se handesarrollado mas #uentes para la produccin deenzimas $ue permiten su aplicacin en diversosprocesos lo cual ha ori!inado un reainterdisciplinaria llamada in!eniera enzimtica comonuevo en#o$ue de la biotecnolo!a%


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&n la actualidad se ha lo!rado obtener enzimas ms

puras con varias venta'as( accin ms especi#ica en su#uncin cataltica) actividad predecible " controlable usode concentraciones ms elevadas del sustrato%

*a sustitucin de los procesos $umicos por naturales esel principio bsico de la biotecnolo!a la cual buscareducir el impacto ne!ativo de dichos procesos en elmedio ambiente "a $ue adems de re$uerir !raninversin de capital demandan condiciones especiales

para la obtencin de productos de !ran inters como lasenzimas%


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*os procesos de produccin de enzimas microbianas se realizanmediante cultivos aerbicos

&n !eneral las enzimas se producen en pe$ue+as cantidadesdurante la #ase de crecimiento activo pero se acumulan en

!randes cantidades en la #ase estacionaria del crecimiento%

*as enzimas inducibles se producen slo cuando en el medio seencuentra el inductor ,sustrato-


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*as enzimas $ue se producen en ma"or cantidad sonproteasas utilizadas como aditivos en los deter!entes paralavar ropa%

.ambin los deter!entes contienen amilasas lipasasreductasas " otras%

&stas enzimas tienen p/ ptimo entre 0 " 12 aspermanecen activas al p/ alcalino de las soluciones de losdeter!entes%


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3l!unos empleos de tipos de enzimas3milasas( se producen mediante #ermentacin " se

utilizan en la conversin de cereales en el producto#inal llamado 'arabe de cereales rico en #ructosa%

3l#a amilasa provoca ata$ue inicial al polmeroacortando la cadena " reduciendo la viscosidad delpolmero clari#icante%

4lucoamilasa( produce monmeros de !lucosasacari#icante%

4lucosa isomerasa( realiza la conversin #inal de!lucosa en #ructosa isomerizacin%


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Invertasa se produce a partir del cultivo de Saccharomycescerevisiae se utiliza para impedir la cristalizacin deaz5cares pues convierte sacarosa en az5cares ms solubles%

.ambin se in"ecta en el interior de los caramelos%

Pectinasas producidas por cepas de Aspergillus se utilizapara licuar 'u!os de #rutas%

6enina producida por cepas de Mucor se utiliza paracoa!ular la leche en la produccin de $uesos%

Proteasas para ablandar carnes de Bacillus"Aspergillus.

*actasa de Kluyveromyces fragilis para evitar lacristalizacin de helados%


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7b'etivo !eneral

&l alumno ser capaz de realizar el proceso deproduccin de la enzima Invertasa a travs deSaccharomyces Cerevisae


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7b'etivos espec#icos

Produccin " extraccin de Invertasa a partir de mtodos

biotecnol!icos empleando la cepa Saccharomyces Cerevisae

Determinacin de la actividad enzimtica a partir de laidenti#icacin azucares reductores por el mtodo D89


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Materiales " &$uipo&sptula

Charolas para pesar

Matraz &rlenme"er de :22m*

3!itador ma!ntico

;?@C

Micropipeta de 1A*


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Producci

n de

Invertasa

1%BPreparar 2m* de caldo

dextrosa9abouraud "esterilizar enla autoclave

%B&sterilizar el

medio decultivo

=%B6ealizaruna curva

standard de!lucosa por

D89

:%B Inocular1 m* de lasolucin dela cepa deSacharomy

ces C.

%BMantener

a EC por


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6esultadosPara la preparacin de la Dextrosa 9abouraud

9ustancia !G* ,G12-

;


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6esultados de Saccharomyces y Aspergillus,tiempo 2 " = hrs%-

Muestra de

cultivo de

Saccharomyces

Cerevisae

3bsorbancia 2 h 3bsorbancia =

h

Flanco %21: 21 2%=? 2%2:< 2%>0< 2%2>

Media 2%=>= 2%2==

Muestra de

cultivo de

Aspergillusniger

3bsorbancia 2h 3bsorbancia =

h

Flanco %20: 21 %>0 2%2?:< %=1> 2%201Media 2%=2: 2%2>


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*o $ue se hizo para ambas muestras #uerealizar una !r#ica de absorbancia ,"- vstiempo ,x- para $ue mediante la ecuacin dela recta $ue se obtuviera " sustitu"endo la

absorbancia en la ecuacin se pudieradeterminar la concentracin%


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H,"B2%2==-G2%221

CK2 ,2%2==B2%2==-G2%221 2A!G*

CK= ,2%=>=B2%2==-G2%221 =%1=A!G*


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H,"B2%2>-G2%22?

CK2 ,2%2>B2%2>-G2%22? 2A!G*

CK= ,2%=2:B2%2>-G2%22? =%2:0A!G*


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Discusin

Como se muestra en nuestros resultados la determinacinde la concentracin se obtiene de manera mu" sencilla laduda la tenemos en $ue el valor de la concentracin en=hrs% se incremento demasiado "a $ue para el tiempocero la produccin de invertasa es 2 lo cual suena l!icopero "a en = hrs% la produccin haba incrementado a=A!G* lo cual nos causa un poco de incredulidad%

3l!o $ue tambin nos causo duda es el valor de la

absorbancia de los blancos para las muestras de 2hr% "a$ue se supone $ue este debe ser 2 " en este caso marcouna cantidad superior a este valor%


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Conclusin

&n conclusin " basndonos en los ob'etivosplanteados podemos decir $ue estos se cumplieron demanera satis#actoria " en su totalidad "a $ue laproduccin de invertasa a partir de Saccharomyces

#ue un xito " se pudo ver re#le'ado en los resultados%

Concluimos tambin $ue la produccin de la enzimadeseada esta ntimamente relacionada con el sustrato

a la $ue se someta por lo $ue es necesario investi!arcual es el me'or caso para $ue los $ue buscamosrealmente suceda%


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Fiblio!ra#a

http(GGLLL%itescam%edu%mxGprincipalGs"labusG#pdbGrecursosGr?

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