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DESARROLLO DE CUBIERTAS VEGETALES EN BIOMEZCLAS CON RESIDUOS AGROINDUSTRIALES Y DE INVERNADERO: BALANCE DE MASAS Laura Delgado-Moreno, Esperanza Romero y Rogelio Nogales Estación Experimental del Zaidín-Consejo Superior de Investigaciones Científicas (EEZ-CSIC), Departamento de Protección Ambiental, c/ Profesor Albareda 1, 18008 Granada, España Investigación financiada por el Ministerio de Economía y Competitividad (Proyecto CTM2010-16807), cofinanciada con fondos FEDER

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DESARROLLO DE CUBIERTAS VEGETALES EN BIOMEZCLAS CON RESIDUOS

AGROINDUSTRIALES Y DE INVERNADERO: BALANCE DE MASAS

Laura Delgado-Moreno, Esperanza Romero y Rogelio Nogales

Estación Experimental del Zaidín-Consejo Superior de Investigaciones Científicas (EEZ-CSIC), Departamento de Protección Ambiental,

c/ Profesor Albareda 1, 18008 Granada, España

Investigación financiada por el Ministerio de Economía y Competitividad (Proyecto CTM2010-16807), cofinanciada con fondos FEDER

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OBJETIVOS

1. Evaluar, a escala laboratorio, el desarrollo de cubiertas vegetales

sobre biomezclas elaboradas con residuos agroindustriales y de

invernadero como materiales sustitutivos de la turba en sistemas de

biorremediacion “biobeds”.

2. Comparar la efectividad para degradar tres plaguicidas

(Tebuconazol, Metalaxil e Imidacloprid), de biomezclas producidas

con residuos vitivinícolas o con turba.

3. Realizar el balance de masas para determinar la persistencia de los

plaguicidas ensayados en los diferentes constituyentes que

intervienen en los sistemas de bioremediación “biobeds” con

cubierta vegetal.

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MATERIALES

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TURBA España: 61000 Tm (año 2012)

TURBERA DEL AGIA (PADUL, GRANADA): 9665 Tm

pH:4.3

Materia orgánica: 470-520 g kg-1

Carbono orgánico: 301 g kg-1

Densidad: 0.6-0.7 g cm3

AH/AF : 9/1

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AGROINDUSTRIA VITIVINICOLA

RESIDUOS VITIVINICOLAS 7.1 kg raspon hl-1

20 kg orujo hl-1 8.6 kg lias hl-1 0.6 m3 vinazas hl-1

España: 50.5 106 HL de vino (año 2013)

Orujos vinicolas

Orujos + Lias

Sarmientos

Lodos de vinazas

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AGROINDUSTRIA OLEÍCOLA España: 1.7 106 Tm de aceite de oliva

(campaña 2013-2014)

Hojas de olivo

Alperujo

Restos de poda Orujillo

(4-4.5 106 Tm)

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CULTIVOS DE INVERNADERO O BAJO CUBIERTA

España: 66000 Ha (70% Andalucía)

20-50 Tm ha-1 año-1 de cultivos vegetales

1.5 106 Tm residuos vegetales de invernadero

Matas de planta

Destrios de frutos

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VERMICOMPOSTAJE

Convencional

Sarmientos/ lodo de vinaza Aperujo/Estiércol

Estiércol suplementado con destrios de tomate

Alimentación continúa

VERMICOMPOST VITIVINICOLA

VERMICOMPOST OLEÍCOLA

VERMICOMPOST RVI

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TIPOS DE VERMICOMPOSTS

Castillo-Diaz y col (2013). Bioresource Technology, 149, 345-354 Romero y col (2012). http://lechosbiologicos.files.wordpress.com/2012/05/bbd-e-romero.pdf

pH 7.6 7.8 7.3

CE dS m-1 4.4 3.2 3.1

COT g kg-1 317 274 174

NKT g kg-1 28 19 22

C/N 11 14 7.9

Densidad g cm3 0.49 0.50 0.56

AH/AF 1.2 2.2 2.

Vitivinícola Oleícola RVI

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SUELO

ESTRUCTURANTES (< 5mm)

Paja de cebada Sarmientos Restos de poda de olivar Matas de planta

Arena

(g kg - 1 )

Limo

(g kg - 1 )

Arcilla

(g kg - 1 )

pH CE

(dS m - 1 )

Carbonatos

(g kg - 1 )

130 479 391 8.1 0.3 500

CIC

cmol + kg - 1

COT

(g kg - 1 )

NKT

(g kg - 1 )

C/N 33kPa

(%)

1500kPa

(%)

15.5 22.7 2.7 8.3 33.2 17.9

Cambisol calcárico

CUBIERTA VEGETAL

Mezcla de 3 tipos de semillas

Bromus perenne halcón (25%)

Ray grass Inglés NUT (25%)

Ray grass ITAL. Serenade (50%)

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PLAGUICIDAS (TMI)

Solubilidad agua (mg L-1) Log Kow

36 3.7

0.57 610

1.75 8400

TEBUCONAZOL (Genius® WG, Saravia, S.A.)

METALAXIL (99%, Dr. Ehrenstorfer)

IMIDACLOPRID (20 LS Confidor®, Bayer

Crop Sciences)

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DESARROLLO EXPERIMENTAL

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PREPARACIÓN DE BIOMEZCLAS

V: Suelo/ Vermicompost vitivinícola/sarmiento 25/50/25

T: Suelo/Turba/paja de cebada 25/50/25

O: Suelo/ Vermicompost oleícola/restos de poda 25/50/25

I: Suelo/ Vermicompost RVI/ matas de planta 25/50/25

PREPARACIÓN DE LAS MACETAS Y SIEMBRA

Semillas cubierta vegetal (2 g)

Biomezcla (160 g)

V (6), T (6) VP (9), TP (9), OP (3), IP (3)

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SIEMBRA

APLICACIÓN DE PLAGUICIDAS (TMI) Tebuconazol, Metalaxil, Imidacloprid (50 µg g-1 )

TMI TMI

20 dias

15 dias V+TMI (6), T +TMI (6)

VP+TMI (6), TP +TMI (6)

VP (3), TP (3), OP (3), IP (3)

RECOGIDAS DE MUESTRAS Biomezclas, Parte aérea del cultivo y raíces de todas las macetas

METODOLOGÍA ANALÍTICA Optimización del método de extracción de plaguicidas TMI en diferentes matrices Aplicación del método de extracción a muestras experimentales Análisis de plaguicidas de muestras (biomezclas, parte aéra y raiz del cultivo

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DESARROLLO EXPERIMENTAL EN INVERNADERO CONTROLADO

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A los 20 días de la siembra de la cubierta vegetal

VP TP OP IP

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VP V TP T

APLICACIÓN DE PLAGUICIDAS (TMI)

Tebuconazol, Metalaxil, Imidacloprid (50 µg g-1 )

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A los 15 dias de la aplicación de plaguicidas (40 dias de la siembra)

30

20

10

0

10

20

V T O I

Parte aérea (peso fresco)

Raiz (peso fresco) (g

)

Peso seco

y = 3.3889x + 48.106 r = 0.9049

10

20

30

5 6 7 8 9 10

p < 0.001

Peso fresco (g)

C/N

IP OP TP VP

SIN PLAGUICIDAS

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A los 15 dias de la aplicación de plaguicidas (40 dias de la siembra)

30

20

10

0

10 Peso seco

Raíz (peso fresco)

Parte aérea (peso fresco)

(g)

-TMI +TMI -TMI +TMI

VP TP

TP TP+TMI VP VP+TMI

T: Tebuconazol M: Metalaxil I: Imidacloprid

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RECOGIDA DE MUESTRAS

VP+TMI

VP+TMI

Parte aérea Raíz Biomezcla

VP+TMI VP+TMI

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METODOLOGÍA ANALÍTICA

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OPTIMIZACIÓN DEL METODO DE EXTRACCIÓN DE LOS PLAGUICIDAS (TMI) EN DIFERENTES MATRICES

3 g

Fortificación 100 µg g-1 TMI

Extracción con ACN

Adición de 1g QuEChERS

Centrifugación

Eliminación de interferentes

Sobrenandante redisuelto

Dilucion

Filtro PTFE 0.2 µm

MUESTRA

Biomezcla

Fortificación 20 µg g-1 TMI

Trituración

Extracción con ACN

Adición de 0.3 g (P.A.) o 0.6 g (Raiz) de QuEChERS

Centrifugación

Sobrenandante redisuelto

Dilucion

Filtro PTFE 0.2 µm

MUESTRA MUESTRA

P. aérea Raíz 1 g 1 g

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Condiciones de Análisis Volumen de inyeccion, 10 μl velocidad de flujo, 0.2 ml min-1 Ta de columna: 40 ºC Fase móvil: ACN:Agua (pH 3) Elución en gradiente de acetonitrilo 50% (4.5 min), 70% (13,5 min) 50%, 11,5 min

Longitud de onda y tiempo de retención Imidacloprid: λ = 254 nm; tr = 4.6 min Metalaxil: λ = 210 nm; tr = 8.9 min Tebuconazol: λ = 195 nm; tr = 15.89 min

Cromatógrafo liquido (series 1100, Agilent Technologies), con detector

de diodos en cadena VIS-UV

ANÁLISIS DE PLAGUICIDAS

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RESULTADOS ANALÍTICOS

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60

80

100

120

V T Parte aérea Raiz

60

70

80

90

100

60

70

80

90

100

Porcentaje de recuperación de Tebuconazol, Metalaxil e Imidacloprid

en las diferentes matrices

Biomezclas Cultivo

Rec

uper

ació

n (%

)

V T Parte aérea Raiz Biomezclas Cultivo

V T Parte aérea Raiz Biomezclas Cultivo

TEBUCONAZOL

METALAXIL

IMIDACLOPRID

Rec

uper

ació

n (%

)

Rec

uper

ació

n (%

)

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TEBUCONAZOL

METALAXIL

0

20

40

60

80

100

+P -P

V T

0

20

40

60

80

100

Con

cent

raci

on r

elat

iva

(C/C

o) x

100

Con

cent

raci

on r

elat

iva

(C/C

o) x

100

21.7% 27% 25.5%

47% 40%

IMIDACLOPRID

0

20

40

60

80

100

Con

cent

raci

on r

elat

iva

(C/C

o)x1

00

21% 33.6% 2.2%

Concentración relativa y porcentaje degradado de Tebuconazol, Metalaxil e Imidacloprid en las biomezclas con

y sin cubierta vegetal

+P -P

+P -P +P -P

+P -P +P -P

V T

V T

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Balance de masas de plaguicidas en biomezclas con cubierta vegetal

93.4±1.6

1.5±0.2 5.1±1.5

88.5±1.3

2.4±0.7 8.1±1.9

65.8±5.2

30.7±6.8

3.5±2.3

80.9±8.1

17 ±7.2 2.1±1.6

83.7±2

8.5±2.5 7.8±2.9

91.9±4

3.8±1.3 4.3±2.9

VP TP

IMIDACLOPRID

TEBUCONAZOL

METALAXIL

Biomezclas

Parte aérea

Raíz

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CONCLUSIONES

Todas las biomezclas ensayadas favorecieron el desarrollo óptimo de la cubierta vegetal

La aplicación de plaguicidas (TMI) no afectó negativamente al desarrollo de la cubierta vegetal

El método de extracción de plaguicidas (TMI) optimizado permite porcentajes de recuperación superiores al 85% en la mayoría de las matrices

En 15 días, no se observaron diferencias significativas de la degradación de los plaguicidas (TMI) entre los sistemas con o sin cubierta vegetal

Comparativamente, la biomezcla con residuos vitivinícolas fue mas efectiva para degradar Metalaxil e Imidacloprid que la biomezcla con turba

El balance de masas puso de manifiesto que el Tebuconazol e Imidacloprid permaneció (> 80%) en las biomezclas transcurridos 15 días de su aplicación. En cambió, en los sistemas con residuos vitivinícolas, una importante fracción de Metalaxil había sido translocada a la parte aérea de la cubierta vegetal.

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AGRADECIMIENTOS

Empresa colaboradoras, suministradoras de residuos

Turbera del Agia S.L. AQUALIA - EDAR Tomelloso Vinazas Romeroliva, S.L. Planta de tratamientos de Residuos Vegetales de Motril (Granada) Ros Roca Humus-Fertil, La Roda (Albacete)

Personal técnico colaborador

Xavier Dubreuil. Estudiante en prácticas del Instituto Agrícola de Carcasona (Francia). Celia Cifuentes Urien. Tecnico Superior de Actividades Técnicas y profesionales Fernando Calvo Rivas. Tecnico Superior de Actividades Técnicas y profesionales

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!!Muchas gracias por su atención!!