Diapositiva 1

UNIVERSIDAD SAN PEDRODOCENTE: DEYBIS TORRES

INTEGRANTES:CHIROQUE JUAREZ ERIKA PAOLAHUANCAS VANESATUME TUME JUNIORSVILLEGAS ANDRADE CINDY

PIURA-PERU2015

Objetivo

Establecer conceptos, fundamentos y clasificacin de cromatografa.

Establecer a la cromatografa en columna en una de ellas.

Diferenciar sus clasificaciones y entender claramente el porqu y para que se utiliza este mtodo de separacin de mezclas complejas,

Establecer ventajas y desventajas al utilizar este mtodo de separacin.

Cromatografa en Columna

Definicin:Tcnica de separacin que se lleva a cabo en una columna empacada (gel de slice o almina) y con un soporte.

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Cromatografa en ColumnaFase estacionaria:

Silica gel (polar)

Carbonato de calcio

Almidn

Almina (polar)

Dimetro: 5 - 50 mm

Longitud:5 cm 1 m

Tamao40 - 63 m.63 200 m.

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Cromatografa en ColumnaFase mvil: Solventes utilizados en cromatografa en capa fina, funcionan adecuadamente.

Rubinson & Rubison Qumica Analtica ContemporneaPentanoter de petrleoHexanoCiclohexanoTetracloruro de carbonoToluenoXilenoBencenoCloroformoAcetonaAcetato de etiloAcetonitriloIso-propanolEetanolAgua5

REACTIVOS Y MATERIALES

Eluyente: etanol 96% ,Agua destilada

Absorvente: Alumina activada

Muestra: Disolucion de etanol de anaranjado de metilo y azul de metileno.

MATERIALESSOPORTECOLUMNA DE VIDRIO CON LLAVEVASO DE PRECIPITADOSVARILLAPINZASMATRAZ ERLENMEYERPIPETA PASTEURPROBETALANA DE VIDRIOTAPON ESMERILADO HEMBRA

En este tipo de cromatografa la silicagel se introduce en el interior de una pieza de vidrio denominada columna de cromatografa.

Una columna de cromatografa consta de un tubo de vidrio que termina en una llave.

El tubo de vidrio puede ser de diversos grosores (habitualmente entre 1 y 10 cm) en funcin de la cantidad de silicagel que querramos introducir.

Entre el final del tubo y la llave suelen estar equipadas con una placa filtrante o en su defecto se coloca un algodn que permita retener el gel de slice que se introduce por la parte superior de la columna.

En la parte de arriba del tubo de vidrio se suele soldar un esmerilado hembra, imprescindible si queremos acelerar la elucin utilizando aire a presin.

Fases del procedimiento experimental para realizar una separacin por cromatografa en columna

Primera fase:

Consiste en la preparacin del lecho de silicagel

Para ello, se prepara una suspensin de silicagel y eluyente lo suficientemente fluida para que pueda ser depositada con facilidad en el interior de la columna por la parte superior de la misma.

A continuacin se pasa eluyente hasta que el lecho de gel de slice quede perfectamente compactado.

Segunda fase:

Introduccin completa de la muestra en el interior del lecho de gel de slice

El procedimiento estndar consiste en disolver la muestra en la mnima cantidad posible de eluyente y aadir la disolucin resultante con sumo cuidado por la parte superior de la columna con el objeto de no distorsionar la planaridad del lecho de silicagel.

Tercera fase:

Se procede a efectuar la elucin de la columna.

Para ello se llena con eluyente la parte del tubo situado por encima del lecho de silicagel, se abre la llave inferior y el eluyente se va recogiendo en varios erlenmeyers.

Durante la elucin, los componentes de la mezcla se van desplazando a velocidades distintas por el interior del lecho de silicagel y se intenta recogerlos en fracciones separadas a medida que van saliendo por la parte inferior de la columna.

Los compuestos menos polares se retienen menos y son los primeros en eluir; mientras que los ms polares quedan ms retenidos en la fase estacionaria, su avance a lo largo del lecho de silicagel es ms lento y eluyen ms tarde.

En algunos casos, es necesario incrementar la polaridad del eluyente para lograr la elucin total de los compuestos ms polares, lo que se denomina elucin en gradiente.

La elucin de la columna puede realizarse a presin atmosfrica (por gravedad) o a presiones ms elevadas, lo que se denomina cromatografa tipo flash, en cuyo caso se conecta la columna cromatogrfica a una fuente de aire comprimido a travs del esmerilado superior.

La cromatografa de tipo flash utiliza gel de slice de tamao de partcula inferior, lo que da lugar a separaciones ms eficaces.

Por norma general, una columna de cromatografa se rellena con gel de slice hasta alcanzar una altura de unos 20 cm por trmino medio.

La altura del lecho de gel de slice se suele incrementar si los valores de Rf de los compuestos a separar son muy prximos (Rf relativos inferiores a 0,2).

El dimetro de la columna a elegir est relacionado con la cantidad de muestra a separar.

A mayor cantidad de muestra mayor cantidad de gel de slice hay que introducir en la columna para no perder eficacia en la separacin; lo que obliga a utilizar columnas de mayor dimetro.

Por norma general, se suele introducir en la columna unos 30 gramos de silicagel por cada gramo de muestra a separar