Facultad de Facultad de Facultad de Facultad de QQQQuímica y uímica y uímica y uímica y FFFFarmaciaarmaciaarmaciaarmacia

Departamento DeDepartamento DeDepartamento DeDepartamento De Control QuímicoControl QuímicoControl QuímicoControl Químico

Laboratorio Farmacognosia II CQ-412

Practica Nº 4

Identificación, cuantificación del grupo de las Xantinas

Catedrático: Dra. María Mercedes Arriola

Instructor: Dr. Mario J. Castillo Padilla

Grupo Nº 2

IntegrantesIntegrantesIntegrantesIntegrantes Cta.Cta.Cta.Cta.

Br. Roberto I. Esponda Velásquez 20041011007

Br. Rossana María Hernández Reyes 20021003780

Sección:Sección:Sección:Sección: Lunes 1300 – 1400

Feche: 14 de Marzo de 2011

Tegucigalpa M.D.C. Francisco Morazán Ciudad Universitaria

ANÁLISIS CUANTITATIVANÁLISIS CUANTITATIVANÁLISIS CUANTITATIVANÁLISIS CUANTITATIVOOOO

En química, análisis cuantitativo es la determinación de la abundancia absoluta o relativa (muchas veces expresada como concentración) de una, varias o todas las sustancias químicas presentes en una muestra. Una vez que se conoce la presencia de cierta sustancia en una muestra, la cuantificación o medida de su abundancia absoluta o relativa puede ayudar en la determinación de sus propiedades específicas. Por ejemplo, el análisis cuantitativo realizado por espectrometría de masas sobre muestras biológicas puede aportar, por la proporción de abundancia relativa de ciertas proteínas específicas, indicaciones de ciertas enfermedades, como el cáncer. Tipos de métodos de análisis cuantitativoTipos de métodos de análisis cuantitativoTipos de métodos de análisis cuantitativoTipos de métodos de análisis cuantitativo Los métodos y técnicas de análisis cuantitativo pueden clasificarse en:1

• GravimétricosGravimétricosGravimétricosGravimétricos: Cuantifican la masa de la sustancia a analizar (analito) o de algún compuesto químicamente relacionado con él. Un ejemplo es la argentometría

• VolumétricosVolumétricosVolumétricosVolumétricos: Cuantifican el volumen de una disolución de una sustancia químicamente equivalente al analito. Un ejemplo es la valoración ácido-base o la valoración redox.

• ÓpticosÓpticosÓpticosÓpticos: EspectroscópicosEspectroscópicosEspectroscópicosEspectroscópicos y nononono----espectroscópicosespectroscópicosespectroscópicosespectroscópicos: Cuantifican la interacción entre la radiación electromagnética con el analito o las radiaciones que emanan del mismo.3 Se pueden estudiar los espectros de absorción (como en la espectroscopia de resonancia magnética nuclear o en la espectrofotometría ultravioleta-visible), los espectros de emisión (como en la espectrofluorimetría) y los espectros Raman (en la espectroscopia Raman), u otras propiedades ópticas (como en la refractometría o la polarografía).

• ElectroanalíticosElectroanalíticosElectroanalíticosElectroanalíticos: Cuantifican ciertas magnitudes eléctricas relacionadas con la cantidad de analito. Algunos ejemplos son la potenciometría, culombimetría y la electrogravimetría.

• Otros métodos Otros métodos Otros métodos Otros métodos variadosvariadosvariadosvariados: Cuantifican propiedades térmicas (como la conductividad térmica), radiactivas, etc. Un ejemplo es la calorimetría.

OBJETIVOS GENERALES

Identificar el grupo de la xantinas en una droga.

Cuantificar el contenido de xantinas en una droga.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Cuantificar por diferentes métodos el contenido de xantinas en una muestra de café.

Determinar si el contenido de xantinas esta dentro del rango permito por los libros oficiales (1- 1.3 %).

IDENTIFICACIÓN DE LA SUSTANCIA Formula molecular: I2 Numero CAS: 7553-56-2 Sinónimos: yodo molecular o diyodo

DESCRIPCION Es un compuesto químico diatómico, formado por dos átomos de yodo y de fórmula IIII2222. En condiciones normales es un sólido negro y lustroso con ligero brillo metálico, pero volatiliza fácilmente dando un gas de color violeta y olor irritante. PROPIEDADES FÍSICAS Y TERMODINÁMICAS Punto de ebullición: 457,4 K (184,3 °C) Punto de fusión: 386,85 K (113,70 °C) Masa molecular: 253,80894 g/mol Densidad: 4940 kg/m3; 4,94 g/cm Estado de agregación: Sólido Solubilidad en agua: 0,029 g/100 mL (20 °C) Calor específico: 145 cal/g

YODO M

OLECULAR

YODO M

OLECULAR

YODO M

OLECULAR

YODO M

OLECULAR

IIII2222

IDENTIFICACIÓN DE LA SUSTANCIA Formula molecular: KI Numero CAS: 7681-11-0 Sinónimos: Acido Yódico, Sal de Potasio

DESCRIPCION El yoduro de potasio es una sal cristalina de formula KI, usada en fotografía y tratamiento por radiación. Al ser menos higroscópica que el ioduro de sodio, es más utilizada como fuente de ión ioduro. PROPIEDADES FÍSICAS Y TERMODINÁMICAS Punto de ebullición: 1420ºC Punto de fusión: 723ºC Masa molecular: 166,00 g/mol Densidad: 3.130 kg/m3; 3.13 g/cm3 Estado de agregación: Sólido Solubilidad en agua: 128 g/100 ml H2O a 6 °C

KIKIKIKI

YODURO D

E POTASIO

YODURO D

E POTASIO

YODURO D

E POTASIO

YODURO D

E POTASIO

ESQUEMATIZACIÓN DE LA PRÁCTICA TARADO DE BEAKER Pesar beaker Colocar en desecador pesar por 6 horas

* Hasta que la diferencia de 2 pesadas consecutivas no sea mayor a 0, 3mg

MÉTODO GRAVIMÉTRICO 10ml extracto BT baño

cubrir el Beaker maría con papel hasta aluminio sequedad

pesar los cristales formados

MÉTODO VOLUMÉTRICO 10mL extracto baño maría disolver con 10mL HCl de concentración conocida hasta sequedad formación de cristales Valora la solución con NaOHde concentración conocida 10mL HCl (de la misma concentración del anterior)

*En caso de ser necesario retrovalorar.

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA Preparación de la placa cromatográfico 20x20cm Activar placa 20 min a 110 ºC Hacer una marca paralela

al bordeen de la placa

2cm Marcara cada punto de sembrado *Las marcas deben estar x distante entre si

Eluyente 90ml CHCl3 10ml CH3CH2OH Homogenizar Estándar Prepara 1:1 en acido diluido 20ml Acido diluido 20mg Estándar (cafeína) Disolver y homogenizar Reveladores Revelador 1 Aforar con 1g I2 1g KI CH3CH2OH Trasvasar a atomizador Revelador 2 25mL HCl Aforar con H2Od Trasvasar a atomizador

Prepara la cuba 1cm Montaje de cromatografía El eluyente no debe sobre pasar la línea del sembrado Aplicar revelador

Eluyente hasta nivel adecuado

Tapar la cuba

4horas

Tapar la cuba

4horas

ESPECTROFOTOMETRÍA

5mL STD 25mg STD Aforar H2SO4 0, 121 3N Aforar H2S04 0, 121 3N Matraz 50mL Matraz 50mL 2mL 3mL 5mL 6mL 7mL Matraz 25mL Mta. Xmg muestra Aforar H2S04 0, 121 3N Diluir hasta concentración que este dentro del rango

CALCULOS Y RESULTADOS MÉTODO GRAVIMETRÍA (Café) Datos Peso Beaker tarado: 47, 557 1g Peso Beaker tarado + extracto desecado: 47, 676 2g

47, 692 5g – 47, 557 1g = 0, 135 4g ≡ 135, 4mg Alcaloides totales MÉTODO VOLUMÉTRICO (Café) Datos NaOH 0, 131 8N HCl 0, 179 5N Volumen gastado en la valoración: 20, 30mL Volumen exceso: 20ml

20, 3mL * 0, 131 8N = 2, 675 54meq-g NaOH≡ No reaccionan 20mL * 0, 1795N = 3, 590 00meq-g HCl ≡ Reacciona 0, 085 54meq-g Alcaloides totales

MÉTODO CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA (Café) Datos Tamaño de placa: 20x20cm Distancia recorrida por el patrón: 10, 80cm Distancia recorrida por la muestra: 10, 20cm Distancia recorrida por el solvente: 13, 20cm Rf = 10, 20cm/15, 25cm = 0, 668 852

Rx = 10, 80cm/15, 25cm = 0, 708 197

MÉTODO ESPECTROFOTOMMedio disolvente: H2SO4 0, 141 3Nλ=273nm A= 504ª 0,2/504 = 3, 968 3x10-4g/100mL = 0, 396 825mg/100mL = 0, 099 526mg/25mL 0,8/504 = 1, 587 3x10-3g/100mL = 1,587302mg/100ml = 0,396825 STD

25.3mg 50mL

5mL

2mL 3mL

Abs 0, 209 0,

y = ax+b a = 1, 861 84

0.100

0.150

0.200

0.250

0.300

0.350

0.400

0.450

0.500

0.550

0.600

0.650

0.700

0.750

0.0500 0.1000

Ab

sorb

an

cia

Curva estandar de Cafeina

MÉTODO ESPECTROFOTOMETRÍA (Cafeína) 0, 141 3N

g/100mL = 0, 396 825mg/100mL = 0, 099 526mg/25mL

g/100mL = 1,587302mg/100ml = 0,396825mg/25mL

50mL

3mL 5mL 6mL 7mL /25mL

0, 340 0, 464 0, 617 0, 691

a = 1, 861 84 b = 0, 030 83

0.1500 0.2000 0.2500 0.3000 0.3500

Concentracion (mg/25ml)

Curva estandar de Cafeina

g/100mL = 0, 396 825mg/100mL = 0, 099 526mg/25mL

mg/25mL

X Y

0, 101 2 0,209 0, 151 8 0,340 0, 253 0 0,464 0, 303 6 0,617 0, 354 2 0,691

0.4000

Mta. 40, 80mg 100mL Extracto

5mL 25mL 5mL 25mL Abs = 0, 725

X= (0,725-0,03)/1,861 = 0,373455mg/25ml

0,373455mg 5mL 1,8672mg 5mL X 25mL X 100mL

X= 1, 867 275mg X= 37, 345 5mg 37, 345 65mg 10mL Extracto

112, 036 95mg 30mL

x 30mL x 65mL Extracto total x = 112, 036 95mg x = 242, 746 725mg %Cafeína = 242, 746 725mg/25000mg Dx * 100 = 0, 970 9867 %

MÉTODO GRAVIMETRÍA (Cacao) Datos Peso Beaker tarado: 50.3000g Peso Beaker tarado + extracto desecado: 50.4000g

50.4000g – 50.3000 = 0, 1000g ≡ 100.0000mg

0.1000g 10mL X 40mL

X= 0.4000g

0.4000g/25g*100 = 1.6 % teobromina MÉTODO VOLUMÉTRICO (Cacao) Datos NaOH 0, 131 8N HCl 0, 179 5N Volumen gastado en la valoración: 20, 30mL Volumen exceso: 20ml

19, 5mL * 0, 131 8N = 2.5701meq-g NaOH≡ No reaccionan 20mL * 0, 1795N = 3, 590 00meq-g HCl ≡ Reacciona 1.0199meq-g Alcaloides totales

Método cromatografía de capa fina (Café) Datos Tamaño de placa: 20x20cm Distancia recorrida por el patrón: 10, 80cm Distancia recorrida por la muestra: 10, 20cm Distancia recorrida por el solvente: 13, 20cm Rf = 10, 20cm/13, 20cm = 0.77272 Rx = 10.20cm/ 10.80cm = 0.94444

MÉTODO ESPECTROFOTOMETRÍA (Cacao) Medio disolvente: H2SO4 0, 141 3N λ=2732 A= 563 0,2/563 = 3.5524x10-4g/100mL = 0.35524mg/100mL = 0.08881mg/25mL 0,8/563 = 1.4209x10-3g/100mL = 1.4209mg/100ml = 0.3552mg/25mL STD

25.1mg 50mL X Y

0.1004 0.488 5mL 50mL 0.2008 0.563 0.3012 0.612 2mL 4mL 6mL 8mL /25mL 0.4016 0.629

Abs 0.1004mg

0.2008mg

0.3012mg

0.4016

Mta. 10ml 100mL Abs = 0.071 X= (0,071-0,03)/1,861 = 0.022031mg/25ml

0.022031mg 25mL X 100mL

X= 0.088124mg/10 ml de muestra

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45

CURVA ESTANDAR TEOBROMINA

OBSERVACIONES

Ninguna de las cromatografías de teobromina presento una señal de corrido de la muestra o el estándar.

Los cristales de los alcaloides del café poseen un tono de coloración verde.

La muestra de café debe poseer un porcentaje de cafeína entre 1 y 1.3%

CONCLUSIONES

La teobromina utilizada en la practica pudo haber estado contamina o el revelador no fue el adecuado para este principio activo.

El análisis gravimétrico no indico que la cantidad de alcaloides totales en la droga (café) es de 135, 4 (3, 520 4% alcaloides totales).

El contenido de cafeína en la droga es de 242, 746mg (0, 97%).

BIBLIOGRAFÍA Trease, G.E., y Evans, W.C. (1988). Alcaloides, TRATADO DE

FARMACOGNOSIA (12a ed., p. 646). México: INTERAMERICANA S.A. Diyodo. (2011). En Wikipedia, la enciclopedia libre. Recuperado el 11 de marzo de

2011, de http://es.wikipedia.org/wiki/Diyodo Yoduro de potasio. (2011). En Wikipedia, la enciclopedia libre. Recuperado el 11 de

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AMBIENTAL. Recuperado el 11 de marzo de 2011, de https://www.e-seia.cl/archivos/20090803.110105.pdf

HOJA DE DATOS DE SEGURIDAD PARA SUSTANCIAS QUÍMICA.

(2011). EN INSTITUTO TECNOLÓGICO SUPERIOR DE VALLADOLID. Recuperado el 11 de marzo de 2011, de http://www.itsva.edu.mx/archivos/usuarios/5/archivo712.pdf

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA. (2011). Facultad de Química Orgánica

UNAM. Recuperado el 11 de marzo de 2011, de http://organica1.org/1311/1311_6.pdf