PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSAPráctica No. 2

Introducción:

La glucosa es el azúcar que el cuerpo utiliza como energía. Los niveles de glucosa en la sangre por encima de lo normal se pueden utilizar para diagnosticar diabetes tipo 2 o diabetes gestacional (altos niveles de glucemia durante el embarazo). También se pueden medir los niveles de insulina, la hormona producida por el páncreas que transporta la glucosa desde el torrente sanguíneo hasta las células. La prueba de tolerancia de la glucosa son pruebas que miden la capacidad para metabolizar la glucosa axial como también herramientas para los diagnosticos.

Los métodos más utilizados más comúnmente para evaluar la tolerancia a una sobrecarga de glucosa pueden ser:

1. Pruebas de tolerancia utilizando una dosis única oral de glucosa.2. Pruebas de tolerancia con una dosis intravenosa de glucosa.

La prueba más común de tolerancia a la glucosa es la oral. Después de una noche de ayuno (8 a 14 horas), se toma una muestra de sangre 2 horas después de ingerir una carga oral de 75 g de glucosa. Las mediciones intermedias no se realizan de manera rutinaria, a menos que sea solicitado por el médico. Por este motivo se eliminó el término "curva de tolerancia a la glucosa". Además, el paciente no puede comer durante el examen y se recomienda informar al médico acerca del uso de medicamentos que pueden afecta los resultados del examen.

Con frecuencia se solicita la medición de los niveles de insulina (hormona producida por el páncreas que permite introducir la glucosa desde la sangre hasta las cada una de las células del cuerpo).

Cuando se suministra la glucosa por boca, la absorción desde el tracto gastrointestinal hacia la sangre continúa durante un lapso variable, que depende de la cantidad de glucosa suministrada. La máxima absorción de glucosa se estima en 0,8  g/kg de peso por hora. La tolerancia a la glucosa suministrada por vía oral, mide el balance entre la velocidad de pasaje de la glucosa al fluido extracelular y su separación por la asimilación celular y la excreción urinaria, si la hubiere. Por tanto, la prueba puede influirse no sólo por aquellos factores vinculados con la utilización de la glucosa, sino también por los que influyen en  su absorción. Las pruebas intravenosas de tolerancia a la glucosa son poco comunes. Para realizar este tipo de prueba, al paciente se le inyecta por vía venosa una

cantidad conocida de glucosa durante tres minutos, previa la medición de los niveles de insulina en la sangre en el minuto uno y en el tres

Factores que pueden afectar los resultados de este examen:

Estrés agudo (por ejemplo, por una cirugía o una infección) Ejercicio vigoroso

Algunos fármacos pueden producir intolerancia a la glucosa, como:

Betabloqueadores (por ejemplo, propanolol) Ciertos medicamentos psiquiátricos Corticosteroides (por ejemplo, prednisona) Anticonceptivos orales (pastillas anticonceptivas) Diuréticos tiazídicos (por ejemplo, la hidroclorotiazida)

CASO CLINICO

Se trata de masculino de 12 años, con buena salud hasta la fecha; es llevado al servicio de urgencias por presentar crisis convulsiva generalizada tónico-clónica, generalizada, sin liberación de esfínteres, con periodo postictal de 30 min manifestado por sueño profundo. Posteriormente su recuperación neurológica fue completa. Al realizar la historia clínica en ya al ingreso al servicio de pediatria; se refiere tener el antecedente de un desarrollo psicomotor adecuado para su edad, con excelente rendimiento escolar; pertenece a un equipo de bascket-ball; se refiere durante el interrogatorio dirigido que el paciente presenta nicturia de 1 mes de evolución; con patrón de uresis durante el día el habitual para el (3-4 micciones durante el día); con polidipsia y polifagia que se atribuyo a que esta en la etapa de crecimiento y el apetito es muy “voraz”; con incremento en el cansancio y malestar general; justificado por la actividad deportiva. A la exploración física dentro del servicio de urgencias encuentro a paciente masculino de edad aparente menor a la cronológica; delgado, pálido, orientado en tiempo, espacio y persona; facies de angustia, cooperador, posición libremente escogida; movimientos libres con leve somnolencia; sin movimientos anormales, vestido adecuado para el momento y con un olor sui géneris. Presenta mucosas orales mal hidratadas, orofaringe sin alteraciones; piezas dentales completas; con tratamiento de ortodoncia. No hay alteraciones en cuello. En tórax muestra en pulmones buena entrada de aire con leve taquipnea (25/min), no encuentro estertores de ningún tipo. Precordio rítmico, choque de la punta palpable con taquicardia 115/min; Abdomen blanco, plano, depresible, lienzo humedo positivo (+); extremidades con buen tono muscular, movimientos libres, buena fuerza muscular, ROT ok, Bbabynsky dudoso, Gordon igualmente no bien valorado. Se inicia el protocolo enfocándolo como crisis convulsivas y se solicitan los siguientes estudios: toma un labstix con tira reactiva en orina y reporta: pH 8.5, densidad urinaria elevada 1,120; cetonas positivas, glucosa positiva (+++). Se solicitan estudios de lab. Glucosa sanguínea = 340 mg/dL , Hb glucosilada de 12%.ADD, Hacía 6 meses se había realizado una prueba de tolerancia a la glucosa, que reportó:Basal: 120 mg/dL, a la hora = 132 mg/dL; a las 2 hrs.= 240 mg/dL. Sin embargo al sentirse bien, no regresó al médico.

Tema de estudio autodirigido: obesidad infantil, Diabetes infantil. Realizó: Dra. Ma Gpe Castillo Olivares

Objetivo del aprendizaje. El alumno determinara posterior a la ingesta de glucosa las concentraciones séricas a los 30, 60, 90,120 y 180 minutos en un individuo sano, para explicar el comportamiento decreciente de las concentraciones de la glucosa en suero.

FUNDAMENTO

La glucosa oxidasa convierte la glucosa en peróxido de hidrógeno y ácido D-glucónico. La peróxidasa cataliza la oxidación del peróxido de hidrógeno a 4-aminofenazona con la subsecuente unión con el p-hidroxibencensulfonato. El producto final es un c hidroquinoleína el cual absorbe a 500 nm. La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de la glucosa.

Preguntas Exploratorias Previas a la Práctica.

1.- ¿Cuál es tu interpretación del resultado de la curva de tolerancia a la glucosa ingerida en el caso del adolescente?R: Con respecto a los sintomas podemos sopechar de una patologia o anomalia, y con ayuda de los resultados del laboraorio la podemos confirmar, en las prueba basal nos dice que los niveles de glucosa no diminuyen conforme el paso de las horas incluso aumenta la concentración de glucosa. Sospechoso en Diabettes Mellitus tipo I.

2.- ¿Qué relación tiene la elevada concentración de glucosa con la las manifestaciones clínicas del paciente?R: Los sintomas que presenta el paciente nos hacen sospechar de Diabetes Mellitus , cuando un individuo padece de Diabetes Mellitus presenta polifagia, por que debido a que la glucosa no entra a la celula el cuerpo no registra la saciedad del hambre aun después de haber comido asi tambien como tenemos glucosa en la sangre, para poderla desechar requerimos de liquido es por eso que las celulas se deshidratan (osmosis) para eliminar la glucosa de la sangre y es por eso que se da la manifestación de la polidipsia. Con respecto a esta fisiologia podemos interpretar los resultados obtenidos en las pruebas y llega a un diagnostico.

3.- ¿Cuál sería la razón para que 6 meses atrás se le solicitó la Prueba de tolerancia a la glucosa?

4.- ¿Cuáles son las indicaciones que se le dan al paciente 3 días antes de la Prueba de tolerancia a la glucosa?

R: Ayuno de 8 a 14 horas, aunque se puede ingerir agua,Evitar restricciones en la dieta durante los 3 días previos, Las evidencias recientes sugieren conveniente consumir la noche anterior una comida con un contenido de al menos 30 a 50 g de carbohidratos.Preferiblemente, no deben existir infecciones ni otras enfermedades intercurrentes que pudieran afectar la prueba. De existir, deben quedar registradas en el informe.

Debe interrumpirse (con indicación médica) aquellos medicamentos que pudieran alterar los valores de la glicemia, al menos 12 horas antes de la realización de la misma. De lo contrario, deberá quedar consignado en el informe.Evitar cambios en la actividad física habitual durante los 3 días precedentes a la prueba.Durante el transcurso de la prueba el paciente debe mantenerse en reposo y sin fumar.

5.- ¿Cuál es la “carga” de glucosa indicada en pacientes pediátricos?

6.- ¿Define que es umbral renal?R: Cuando la sangre contiene tanta cantidad de una sustancia, como la glucosa (azúcar), que los riñones dejan que el exceso se derrame, o sea, pase a la orina. Esto se denomina también "umbral renal", "punto de derrame" y "punto de rebosamiento".

DESARROLLO DE LA PRACTICA.

MATERIAL POR EQUIPO

1 Gradilla 8 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm1 Pipeta automática de 1.0 ml1 Pipeta automática de 10 ul1 Pipetor1 Reloj o cronómetro4 jeringas de 5 ml. desechablesPuntas para pipeta de 1.0 ml desechablesPuntas para pipeta de 10 ul desechablesTorundas con alcohol y secas Ligadura de látex Gasas y papel absorbente

MATERIAL POR GRUPO1 centrífuga1 Espectrofotómetro1 Termoblock

REACTIVO POR GRUPO

Reactivo de glucosaCalibrador de glucosa 100 mg/dL Estándar de gluc. de 100 mg/dl

EL ALUMNO TRAERA EL DIA DE LA PRACTICA (equipo)

1 paciente sano 100 gr. de azúcar 1 limón 1 vaso de grande (Aprox. 200 ml.) 1 hoja de papel milimétrico y Regla

PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA(Curva de tolerancia)

TOMA DE MUESTRA: Se indicará al paciente que se le realizarán 4-6 extracciones en 3 hrs. La extracción se realizará como ya se indicó en la primera práctica.

NOTA: Procese las muestras en un solo corrimiento.

Preparación de la “carga” de glucosa. Pacientes adultos: La disolución de glucosa se prepara disolviendo 100 gramos de glucosa en 200 ml. de agua aprox. y se le da sabor con jugo de limón. 1ª muestra (M1): En ayunas (Muestra Basal,) extraer sangre al paciente. darle la carga oral de Glucosa.

2ª Muestra (M2): A los 30 minutos de haber ingerido glucosa hacer la 2ª extracción

M3: A los 60 minutos M4: A los 90 minutos M5: A los 90 minutos …

PROCESAMIENTO DE MUESTRAS (React. Diagnósticos Deagle)

1.- Etiquetar o numerar tantos tubos como muestras a procesar tenga y agregar:

BLANCO(Tubo 1)

CALIBRADOR

(Tubo 2)

ESTANDAR (Tubo 3)

PROBLEMA(Tubo 4) …

Reactivo de color 2.0 ml. 2.0 ml. 2.0 ml. 2.0 ml.

2 .- Precaliente en baño Maria a 37º C por 5 minutos. Pasado este tiempo agregue a cada tubo lo siguiente.

Agua destilada 20 ul. ---- ---- ----Calibrador ---- 20 ul.Estandar ---- 20 ul. ----

Suero problema ---- ---- ---- 20 ul.

3.-. Mezcle bien e incube los tubos a 37º C por 10 minutos4.- Coloque a cero el espectrofotómetro a 500 nm. con el blanco (Tubo 1)

5.- L eer y registrar las absorbancias en orden: Calibrador, estándar (control) y muestras. 6.- Cálculos de la concentración de glucosa

Abs. Probl. ÷ Abs. Estándar x 100 mg/dL = ______ mg/dl

VALORES DE REFERENCIA: Suero/plasma 70 – 110 mg/dl

7.- Trazar la gráfica que muestre la respuesta a la tolerancia de la glucosa oral. colocar en el eje de las ordenadas (eje y) concentración de glucosa en suero y en el eje de las abscisas (eje x) el tiempo (minutos).8.- Analizar la gráfica y compararla con gráficas de libros consultados.

RESULTADOS (mapa cognitivo)

A término de la práctica entregará para acreditar su trabajo individual

Reporte en forma ordenada. Incluye cálculos. Si los resultados no son los esperados debes revisar los datos clínicos del paciente para buscar que pudo interferir en el desarrollo de la reacción.

P1= .231 / .346 X 100mg/dl = 66.76mg/dlP2= .388 / .346 X 100mg/dl = 112.13mg/dlP3= .214 / .346 X 100mg/dl = 61.84mg/dlP4= .134 / .346 X 100mg/dl = 38.72mg/dl(GRAFICA SE ANEXA)

DISCUSION DE RESULTADOS.(considera lo que investigaste del caso clínico, lo que sabes de teoría y correlaciona con los resultados obtenidos en esta práctica aplicando criterio médico para sugerir un probable diagnóstico) Los resultados obtenidos , fuero los esperados , ya que la paciente en esta prueba no mostraba sintoma alguno de diabtes o anomalias en las concentraciones de glucosa, a diferencia del paciente que se nos fue presentado en el caso clinco, ya que este contaba con todas las señales de Diabetes Mellitus.

CONCLUSION.

Como medicos es importante conocer nuestro cuerpo, en todo los aspectos e incluso saber como funciona el laboratorio y cual son los procedimientos en dichas pruebas ya que este es nuestro apoyo en las detecciones de varias patologias, y en este caso la Diabetes o anomalias con respecto a las concentraciones de glucosa ya sea hipoglucemia o hiperglicemia e incluso el detectar el por que estan estos valores anormales, cual es la causa de estos.

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA.

BIOQUIMICA Robert Roskoski, JrMcGrawl-Hill Interamericana.

Medline.

http://vsearch.nlm.nih.gov/vivisimo/cgi-bin/query-meta?v%3Aproject=medlineplus&query=glucosa