obtención de agentes de control biológico. montevideo, 21 de febrero de 2003
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Obtención de Agentes de Control Biológico .
Montevideo,
21 de febrero de 2003
Objetivos:• Transmitir la importancia de los procesos de búsqueda y selección de ACB como base del éxito de un programa de CB.
• Analizar las diferentes vías o caminos posibles en el proceso de búsqueda y selección.
•Discutir los factores que condicionan estos procesos.
• Comprender como los resultados finales pueden estar condicionados por las técnicas utilizadas.
•Analizar posibles estrategias de búsqueda y selección de ACB
Aislamiento de ACB
• Aislamiento de ACB– ¿Dónde encontrar ACB?– ¿Cómo aislar?– ¿Cualquier antagonista?– ¿Qué características deseamos encontrar?
Importancia del aislamiento y selección
• “El aislamiento y la selección de microorganismos antagonistas sustentan a todo Programa de Control Biológico determinando las chances de éxito”. (Bettiol 1991)
•El número de microorganismos en una comunidad microbiana es inmenso.
– En la rizosfera de un árbol de roble se calcula que existen 45 mil billones de m. o. (45 x 1015)
Dónde encontrar ACB
• En cualquier lugar puede existir algún microorganismo antagonista.
•Muchos m.o. valiosos se encuentran en forma azarosa.
Dónde encontrar ACB
• En cualquier lugar puede existir algún microorganismo antagonista.
•¿Existe algún lugar donde sea más probable hallarlo?
•En aquellos sitios donde coincidiendo la presencia del patógeno, la planta huésped y el ambiente favorable al desarrollo de la enfermedad esta no ocurre, es posible que allí esté funcionando naturalmente algún tipo de biocontrol.
Dónde encontrar ACB cont..
• Esto puede suceder naturalemente:– suelos supresivos
• Podemos forzar la situación:– Colocamos plantas o frutos en situaciones favorables al desarrollo de la enfermedad y seleccionamos aquellos individuos que se mantuvieron sanos.
•Monilinia fructicola en duraznos.
• Penicillium expansum en manzana.
Selección de ACB para Monilinia
Aislamiento
Algunos lugares
• Suelos supresivos
• Sobre las partes aéreas de las plantas (m.o. epifíticos, o del filoplano)
• Sobre la superficie de las raíces (rizoplano)
• Colonizando a patógenos
• Dentro de la planta (endofitos)
• Fitopatógenos (razas leves o avirulentas)
¿Por qué sobre la planta?
• Porque se ha demostrado que sobre la planta viven numerosos m.o. entre los cuales existen antagonistas de los patógenos y promotores de las defensas de las plantas.
¿Por qué sobre la planta?
• En el agua de lavado concentrada crecen solamente bacterias y levaduras
Aislamiento de frutos
¿Por qué sobre la planta?
• Porque se supone que si están allí es porque están adaptados a vivir en esas condiciones.
– Si queremos controlar a un patógeno que ingresa por heridas nos interesa que nuestro antagonistas sea un buen colonizador de heridas.
¿Por qué sobre la planta?
• Porque existe mayor aceptación por parte de los consumidores a admitir a los m.o. que naturalmente viven sobre la planta que a otros extraños.
Colonizadores de patógenos
• Se pueden encontrar antagonistas colonizando naturalmente a los patógenos de plantas.
•Se pueden utilizar a los patógenos como cebo para capturar a sus antagonistas.
Colonizadores de patógenos
Endófitos• Para superar una de las limitantes mayores del CB. Obtener antagonistas con capacidad curativa.
• Control de patógenos vasculares.Plant species Minutes in
NaOCLNaOCl dilution Reference
Lichens 1 1:5 Petrini (1986)Mosses 1 1:5 Petrini (1986)Ferns 3 1:5 Dreyfuss & Petrini (1984)Conifer needles 5 1:2 Carroll & Carroll (1978)Conifer twigs 7 1:2 Carroll & Carroll (1978)Dicots (general) 3 1:5 Petrini (1986)Erica leaves 3 1:5 Petrini (1986)Erica stems 5 1:5 Petrini (1986)Rhododendron 3 1:5 Petrini (1985)Vaccinium 3 1:5 Petrini (1985)
Aislamiento
• En medio generales
• Selectivamente– Hongos– Bacterias– Capaces de digerir al patógeno
Selección• In vitro
– Cultivos duales
• In vivo– Inoculación en plantas
• Intermedios– utilizando trozos de vegetal
Cultivos duales• Consiste en sembrar en una misma placa enfrentados al antagonista y al patógeno
Selección “in vitro”• Fácil de realizar
• Rápida
• Menor costo relativo.
• Solamente selecciona por algunos mecanismos de acción, descartando antagonistas que podrían funcionar sobre la planta.
• Tiene baja correlación con la performance a campo.
Selección “in vivo”• Consiste en inocular plantas con el patógeno y al antagonista
Selección sobre frutos
Selección “in vivo”
• Selecciona independientemente de los mecanismos de acción antagónica.
• Implica un mayor trabajo
• Mayor tiempo
• Mayor costo relativo.
• Mayor equipamiento (Plantas, invernáculo, personal, etc)
Selección combinada
• Consiste en inocular tejidos vegetales en el laboratorio.
Otras consideraciones
• ¿A quién debe enfrentar nuestro antagonista?
• ¿En qué condiciones?
•Elección de la cepa más agresiva
•Elección de la cepa más resistente a fungicidas
Resumen final
• El aislamiento y selección de antagonistas es un proceso fundamental en cualquier programa de control biológico.
• Las técnicas utilizadas pueden sesgarnos los resultados.
•No existe una única estrategia de trabajo.
• El arte está en diseñar aquella estrategia que nos conduzca en la forma más directa hacia nuestro objetivo final.