Microscopio Electrónico de transmisión

Katerin BobadillaKarina Cid

Priscila Maldonado

Un microscopio electrónico de transmisión es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto, debido a que la potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda de la luz visible. Lo característico de este microscopio es el uso de una muestra ultrafina y que la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra.

Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces.

El primer microscopio electrónico de transmisión fue desarrollado entre 1931 y 1933 por Ernst Ruska y sus colaboradores

El primer microscopio electrónico de transmisión comercial lo construyó Siemens en 1939.

Con el desarrollo del microscopio electrónico se llegó al territorio celular desconocido hasta el nivel del nanómetro para observar la ultraestructura celular y la matriz extracelular.

Historia

El primer microscopio electrónico desarrollado

por Knoll y Ruska (1931).

1) Tubo de descarga, 2) cátodo, 3) válvula, 4) espacio para lente electrostática

(opcional), 5) lente magnética objetivo, 6) lente de proyección, 7) columna de alto vacío, 8) salida a la bomba de vacío, 9) caja de Faraday para medir la

corriente del haz de electrones, 10) pantalla fluorescente o placa

fotográfica, 11) válvula para medir el vacío, 12) apertura del ánodo, 13) aperturas o diafragmas, 14) válvula de vacío, 15) ventana de observación, 16) pantalla fluorescente removible

para observación, 17) cámara. Nótese que este primer modelo carece

de condensador

Cañón de electrones, genera el barrido electrónico que proporciona la imagen.

Lentes magnéticas encargadas de enfocar el haz electrónico.

Placa fotográfica o pantalla fluorescente se coloca detrás del objeto a visualizar para registrar la imagen aumentada.

Sistema de registro que muestra la imagen que producen los electrones, que suele ser una computadora.

Partes de Microscopio electrónico de transmisión actual

Sistema de vacío es una parte muy importante del microscopio electrónico. Debido a que los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, se debe hacer un vacío casi total en el interior de un microscopio de estas características. Para conseguir este flujo constante de electrones se debe operar a bajas presiones. Esto se realiza para favorecer el contraste de carga entre cátodo y tierra sin que se produzca un arco eléctrico.

Filamento de tungsteno o cátodo: emite corriente de electrones.

Bobina electromagnética: actúa de condensador.

Segunda bobina: lente de objetivo y agranda la imagen.

Tercera lente: lente de proyección que aumenta la imagen que proviene del objetivo

Pantalla fluorescente: se ve la imagen final Placa fotográfica: registra la imagen.

Finalmente la muestra la podemos ver en una cámara de televisión, transferida a una impresora de video un analizador digital

Microscopio

electrónico de

transmisión

Si el espesor del material excede los 500nm la opacidad es casi total, lo común es que la muestra se deposita sobre una película fina (7,5 a 15nm de espesor) de colodión, carbón, etc. que actúa como material de sostén y que esta apoyado sobre una fina grilla de metal. El preparado debe estar deshidratado para ser colocado en el vacío del instrumentó.

Preparación de la muestra

La necesidad de realizar cortes ultrafinos a conducido al empleo de medios de inclusión de considerable dureza, los mas usados son la resinas epoxi que impregnan los tejidos deshidratados y posteriormente polimerizados por medio de catalizadores apropiados.

Para el corte de la muestra se utiliza un ultramicrótomo con cuchillas de vidrio o diamantes.

El aumento inicial del objetivo es 100X, se puede ampliar unas 200 veces (bobina proyectora) y equivale a 2000X.

Con instrumentos modernos se pueden lograr hasta 1000000X.

Resolución

1. Un haz de electrones se forma en el cátodo y es acelerado hacia el espécimen gracias a un potencial eléctrico positivo.

2. El haz de electrones es enfocado mediante el empleo de lentes electromagnéticas.

3. En la muestra irradiada ocurren interacciones las cuales afectan el haz de electrones.

4. Las interacciones y efectos son detectadas y transformadas en una imagen.

5. La imagen es formada en un dispositivo (pantalla fluorescente, monitor de televisión, placa fotográfica).

Como se forman las imágenes.

•Los elevados costos de los equipos e infraestructura para el buen funcionamiento hacen que esta técnica , se convierten en acceso de investigadores privilegiados ..

•Aun cuando este proceso de investigación sea costoso , proporciona resultados muy precisos de amplia resolución y magnificación.

•La técnica de preparación de las muestras son vulnerables

Ventajas y desventajas.

•La complejidad de los equipos , lo hacen susceptibles a la des calibración.

•La manipulación de reactivos se torna peligroso por la elevada condición toxica de los mismos.

•Las imágenes obtenidas son monocromáticas y planas siendo necesario, en algunos casos, un tratamiento posterior mediante análisis de imágenes con un software especializado

El descubrimiento y creación de MET ha sido importante para obtener una amplia resolución y magnificación de una muestra.Ahora vemos con mayor precisión todas las estructuras ultracelulares y hemos podido conocer estas mas a fondo.

Conclusión