LAB/NT3/Marzo 2015

PROGRAMA DE LABORATORIOS

NORMA TCNICA SECCIN 3

Mtodos de Anlisis de Biotoxinas Marinas en Moluscos de Exportacin

SUBDIRECCIN COMERCIO EXTERIOR

CHILE

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INDICE

I. ALCANCE 2

II. MTODOS DE ANLISIS 2

1. Veneno paraltico de moluscos VPM 2

2. Toxinas del Grupo de Intoxicacin diarreica o Lipoflicas 2

3. Veneno amnsico de moluscos VAM 3

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I. ALCANCE

En la presente norma se incluyen las referencias de los mtodos oficiales reconocidos por

Sernapesca, para la realizacin de anlisis de biotoxinas marinas en productos pesqueros de

exportacin.

II. MTODOS DE ANLISIS

Los anlisis que a continuacin se detallan, deben ser realizados en cuerpo entero o la parte

destinada al consumo humano, tanto para el Programa SMB como para los programas de control

de producto terminado, esto es, PAC y CER.

1. Veneno Paralizante de Moluscos (VPM)

1.1. Mtodo biolgico:

Referencia:

- AOAC Official Methods of Analysis, 18th Edition, 2005. Capitulo 49:79-81 esc. 959.08.

- Food and Drug Administration, Shellfish Laboratory Evaluation Checklist, 1994.

2. Toxinas del Grupo de Intoxicacin diarreica o lipoflicas

2.1.- Mtodo biolgico:

Referencia:

- Mtodo armonizado UE.Versin 4.0, Abril 2007 (Basado en Yasumoto et al., 1984)

2.2 Mtodo instrumental

Referencia:

- EU-Harmonizsed standard operating procedure for determination of lipophilic biotoxinas in

mollucs by LC-MS/MS. European Union Reference Laboratory for Marine Biotoxins. Version 5

junio 2015.

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Como mtodos alternativos pueden utilizarse la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

con deteccin fluorimtrica o ensayos inmunolgicos y funcionales como el de inhibicin de

fosfatasas, a condicin de que, por separado o combinados, sean, al menos igual de eficaces que

el mtodo de referencia de tal forma que su aplicacin proporcione un nivel equivalente de

proteccin de la salud pblica, y que puedan detectar como mnimo los siguientes anlogos: .

- cido okadaico (OA) y dinofisistoxinas (DTX1, DTX2 y cualquier ester acilado de OA

y/o DTXs)

- Pectenotoxinas: PTX1 y PTX2

- Yesotoxinas: YTX, 45 OH YTX, Homo YTX y 45 OH Homo YTX,

- Azaspircidos: AZA1, AZA2 y AZA3.

Si se descubren nuevos anlogos importantes en relacin con la salud pblica, debern incluirse

en los anlisis. Sin embargo, habr que disponer de patrones antes de poder hacer anlisis

qumicos. La toxicidad total se calcular mediante factores de conversin basados en los datos

sobre la toxicidad de cada toxina.

2.3.- Lista de toxinas lipoflicas.

A continuacin, se sealan las toxinas lipoflicas monitoreadas y sus Lmites de Deteccin

(LD) y Cuantificacin (LC), vigentes para el Laboratorio de Verificacin Oficial: Laboratorio

de Farmacologa Veterinaria de la Universidad de Chile (Farmavet):

Tabla 1.

Anlisis Matriz Mtodo LD

(g/kg)

LC

((g/kg)

Grupo OA

(OA/DTX1/DTX2)

Cuerpo entero o cualquier

parte comestible por

separado de Moluscos

bivalvos, equinodermos y

tunicados.

HPLC-MS/MS 40 46

Grupo PTX

(PTX1/PTX2)

Cuerpo entero o cualquier

parte comestible por

separado de Moluscos

bivalvos, equinodermos y

tunicados.

HPLC-MS/MS 40 46

Grupo AZA Cuerpo entero o cualquier HPLC-MS/MS 40 46

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Anlisis Matriz Mtodo LD

(g/kg)

LC

((g/kg)

(AZA1/AZA2/AZA3) parte comestible por

separado de Moluscos

bivalvos, equinodermos y

tunicados.

Grupo YTX

(YTX/homo YTX/ 45

OH YTX/ 45 OH

homo YTX)

Cuerpo entero o cualquier

parte comestible por

separado de Moluscos

bivalvos, equinodermos y

tunicados.

HPLC-MS/MS 40 46

3. Veneno Amnsico de Moluscos (VAM)

Mtodo HPLC: extraccin metanol-agua

Referencia: - Quilliam, M.: Journal of AOAC International, Vol. 78, N2, 1995.