METODOLOGIA

• Marcador de peso molecular

• Diluya del siguiente modo:

• 50bp DNA Step Ladder 12µl

• Blue/Orange 6X Loading Dye 4 µl

• Nuclease-Free Water

• Blue/Orange 6X Loading Gye

• Añada 2.5 µl a cada tubo de amplificación y mezcle.

• Marcador de peso molecular

• Cargue 10 µl del marcador de peso molecular diluido en el primer pocillo del gel.

• Muestra

• Cargue 10 µl/ pocillo.

• Marcador de peso molecular

• Cargue 10 µl del marcador de peso molecular en el último pocillo del gel.

• Corriente electroforetica

• Coloque el gel en TBE 1X que contenga 0.5 µg/ml de bromuro de etidio y aplique 5V/cm (medidos como la distancia entre los electrodos) hasta que el frente de tinte de azul de bromofenol migre hasta el final del gel.

• Revelado

• Fotografíe el gel con ayuda del transluminador de UV (320nm).

• Interprete los resultados

• La corrida de la muestra con respecto a el marcador de pesos moleculares.

• Reporte

• Ausencia o presencia de genes en el locus AZF y muestre su conclusión.

ELECTROFORESIS

Marcador de peso molecularDiluya del siguiente modo:50bp DNA Step Ladder 12µl

Blue/Orange 6X Loading Dye 4 µlNuclease-Free Water

Blue/Orange 6X Loading GyeAñada 2.5 µl a cada tubo de amplificación y mezcle.

Marcador de peso molecularCargue 10 µl del marcador de peso molecular diluido

en el primer pocillo del gel.

MuestraCargue 10 µl/ pocillo de cada muestra.

Marcador de peso molecularCargue 10 µl del marcador de peso

molecular en el último pocillo del gel.

Corriente electroforeticaColoque el gel en TBE 1X que contenga

0.5 µg/ml de bromuro de etidio y aplique 5V/cm (medidos como la distancia entre

los electrodos) hasta que el frente de tinte de azul de bromofenol migre hasta

el final del gel.

Revelado Fotografíe el gel con ayuda del

transluminador de UV (320nm).

Interprete los resultadosLa corrida de la muestra con respecto a el

marcador de pesos moleculares.Reporte

Ausencia o presencia de genes en el locus AZF y muestre su conclusión.