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Fundamentos y Técnicas de Análisis Bioquímico. Química Clínica. Marcel Sayol Quadres

325

MARCEL SAYOL

Médico Especialista en Medicina Familiar y Comunitaria Miembro de la Sociedad Española de Medicina de Urgencias y Emergencias

Ingeniero Técnico Profesor numerario de IES

FUNDAMENTOS Y TÉCNICAS DE ANALISIS BIOQUÍMICO

QUÍMICA CLÍNICA

CICLO FORMATIVO DE GRADO SUPERIOR “LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO CLÍNICO”

CRÉDITO 4

Año 2005

Registro General de la Propiedad Intelectual. Número de asiento registral:02/2006/4401


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10 ESTUDIO DE LA FUNCIÓN GASTROINTESTINAL

CONTENIDOS

Fisiopatología gastrointestinal Procedimiento de estudio de la función intestinal: prueba de tolerancia a la

lactosa, prueba de la D-xilosa, medida del contenido fecal, detección de hemoglobina en las heces

Patrones de alteración de la función gastrointestinal

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Describir el trayecto del tubo digestivo en su totalidad Enumerar las células del estómago y describir sus funciones Enumerar los factores que intervienen en la secreción gástrica Describir el mecanismo de secreción gástrica Describir las funciones del intestino delgado y del páncreas exocrino Describir la prueba de absorción de la D-xilosa Describir la prueba de tolerancia oral a la lactosa Describir las principales pruebas para la medida del contenido de lípidos fecales Describir las principales técnicas de detección de sangre oculta en heces Definir los principales patrones analíticos de alteración de la función gástrica e

intestinal



327

1. Fisiopatología intestinal 1.1 Macroscopía del aparato digestivo Desde el punto de vista anatómico, el sistema digestivo constituye un tubo que se

extiende desde la boca hasta el ano. En su trayecto varía de diámetro y forma, y en

algunos tramos se repliega sobre sí mismo. El hígado, el páncreas, las glándulas

salivales y otras pequeñas glándulas de secreción exocrina situadas en el estómago y

en el intestino delgado, también se incluyen en el aparato digestivo, y a veces se les

agrupa bajo el nombre de órganos accesorios.

El orden natural de descripción anatómica, comienza por la boca y los dientes y sigue

por la faringe, las glándulas salivales, el esófago, el cardias, el estómago, el duodeno,

el yeyuno, el íleon, el ciego, el apéndice vermiforme, el colon ascendente, el colon

transverso, el colon descendente, el sigma, el recto y el ano.

Las glándulas salivales (glándula parótida, glándula submaxilar y glándula

sublingual), segregan sus productos a la cavidad bucal donde se mezclan con los

alimentos y participan en su digestión por acción de los enzimas.

El esófago transporta el bolo alimenticio hasta el estómago y en unión con él forma el

cardias.

El estómago es la porción más dilatada del aparato digestivo. Ocupa las áreas

abdominales del epigastrio y del hipocondrio izquierdo. Está cubierto por los arcos

costales inferiores, no siendo por ello un órgano intratorácico, ya que es totalmente

intrabdominal. Se divide en las siguientes regiones anatómicas: cardias, fundus,

cuerpo, antro y píloro y continua con el duodeno, (figura 10.1).

Destacan también las curvaturas mayor y menor, así como las incisuras cardíaca y

angular. Mide unos 25 centímetros de longitud y tiene una capacidad variable de

alrededor de 1,5 litros.



328

El duodeno empieza en el estómago y acaba en el yeyuno, en él desembocan dos

importantes conductos: el colédoco procedente de la vesícula biliar y del hígado, y el

conducto de Wirsung procedente del páncreas. Ambos conductos suelen tener un

final común, la llamada ampolla de Vater que dispone de un esfínter (esfínter de

Oddi), que abre y cierra el paso de los productos de secreción hacia la luz del

duodeno.

El yeyuno continua con el íleon formando en conjunto el intestino delgado que

ocupa toda la cavidad abdominal, replegándose sobre sí mismo en una longitud de 6

a 8 metros.

El colon rodea al intestino delgado como si fuera un marco de un cuadro por los

cuatro bordes de la región inframesocólica de la cavidad abdominal. Tiene una

longitud de 1,7 a 1,8 metros (aproximadamente la estatura de una persona), pero está

doblado a modo de acordeón formando las llamadas abolladuras colónicas. El íleon

desemboca en él a través de la válvula ileo-cecal o válvula de Bauhin.

El recto es el segmento terminal del intestino grueso y en él destacan las tres

válvulas de Houston de forma semilunar, que tienen la función de retener las heces y

evitar la incontinencia anal. Cuando el recto se distiende por la tensión que provoca

su contenido sobre las paredes, se inicia el estímulo que conlleva a la defecación.

El ano posee dos importantes esfínteres: el interno y el externo. El primero está

formado por musculatura lisa de funcionamiento involuntario, mientras que en el

segundo su musculatura es estriada y de control voluntario.

Figura 10.1 Estructura de la unidad estómago-duodeno-páncreas



329

Esófago

Píloro

Cardias

Cuerpo

Antro

DuodenoYeyuno

PáncreasFundus

Incisura cardíaca

Incisura angular

Curvatura menor

Curvatura mayor

Figura 10.1

1.2 Estructura microscópica del estómago El estómago tiene doble función, la digestiva y la endocrina, por ello está constituido

por células que sintetizan sustancias relacionadas con el proceso digestivo y

sustancias que se comportan como verdaderas hormonas. El estómago tiene tres

grupos celulares según su localización, grupo de células cardiales, grupo de células

fúndicas y grupo de células antrales o pilóricas. Cada grupo está formado por

diferentes células de acuerdo con los cuadros siguientes:

Células cardiales. Son células mucosas

Células fúndicas. Se dividen en:



330

i Células mucosas

i Células parietales

i Células endocrinas

iCélulas principales

Células antrales o pilóricas. Se dividen en:

i Células mucosas

i Células endocrinas

Las funciones de cada uno de los grupos descritos se representan en el cuadro

siguiente:

Células mucosas. Segregan moco, pepsinógeno y antígenos relacionados con los

grupos sanguíneos ABO

Células parietales. Segregan ácido clorhídrico y factor intrínseco de Castle

Células endocrinas. Se dividen en:

iCélulas oxínticas, que a su vez, se dividen en dos:

iCélulas EC o enterocromafines *(1). Segregan serotonina

iCélulas SEC o similares a las enterocromafines, Segregan histamina

iCélulas G. Segregan gastrina

iCélulas D. Segregan somatostatina

Células principales. Segregan pepsinógeno

En el duodeno existen también las llamadas células de Brünner que segregan

moco y bicarbonato, la finalidad de esta secreción es amortiguar la acidez del

contenido gástrico cuando alcanza el duodeno.

1.3 Mecanismo de secreción gástrica y quimismo gástrico

El ácido clorhídrico producido por las células parietales del estómago, se encuentra a

una concentración de 150 a 160 mEq/L lo que hace que el pH del jugo gástrico se



331

sitúe alrededor del valor 1. La secreción de HCl es continua, pero el volumen

producido varia considerablemente en función del grado de estimulación. El

mecanismo de producción de HCl se describe en la figura 10.2 y se comenta más

adelante.

Los factores que estimulan la producción de HCl son:

Histamina. Segregada por las células SEC, los mastocitos y las neuronas.

Acetilcolina. Segregada por las neuronas parasimpáticas postganglionares.

Gastrina. Segregada por las células G del estómago.

Los factores que inhiben la secreción de HCl son:

La Acidez de la luz del estómago. La propia acidez del estómago produce una

inhibición para la secreción a través un proceso de retroalimentación, cuando el

pH es menor de 2,5-3

Prostaglandinas del tipo PGE2. Son sustancias que bloquean la producción de

cAMP y con ello inhiben la secreción de HCl.

Péptidos endógenos. Son un conjunto de sustancias de tipo hormonal que

también inhiben la secreción ácida. Las más importantes son: secretina,

somatostatina y glucagón entre otros.

Fármacos. Existen varios grupos de fármacos capaces de inhibir la producción de

HCl. Se utilizan como tratamiento de determinadas enfermedades relacionadas

con la secreción ácida.

Figura 10.2 Mecanismo de producción de HCl en la célula parietal



332

CaATP

K

H Cl

ProteinquinasaCalmodulina Vaso

Nervio

Célula SEC

Receptor H2Receptor M3

Gastrina HistaminaAcetilcolina

cAMP ++

+

+ -

Figura 10.2

La estimulación por parte de la histamina se consigue cuando ésta se une a su

receptor en la célula parietal, esto hace que el ATP se transforme en cAMP que activa

el enzima proteinquinasa, éste a su vez, activa la bomba de hidrógeno-potasio

haciendo que el hidrógeno salga a la luz del estómago y el potasio entre a la célula.

Por otra parte el cloro sale de la célula arrastrado por un mecanismo de

compensación de cargas eléctricas.



333

La acetilcolina segregada por las neuronas parasimpáticas se une a su receptor M3 de

la célula parietal, haciendo que entre calcio. Un aumento en la concentración de

calcio intracelular, induce a una proteína llamada calmodulina a activar la bomba de

hidrógeno antes mencionada.

La gastrina segregada por las células G del antro y del duodeno, se libera al torrente

sanguíneo y alcanza la célula parietal donde se une a su receptor. La unión gastrina-

receptor aumenta la entrada de calcio a la célula.

La úlcera gastroduodenal es una lesión de la mucosa con afectación de la capa

muscular de la mucosa *(2), que se mantiene en función de la actividad ácida y

péptica del jugo gástrico. Los factores causantes de las úlceras se pueden resumir en

los siguientes: secreciones ácida y péptica excesivas; causas genéticas; infección por

la bacteria Helicobacter pylori; administración de corticoides; administración de

antiinflamatorios no esteroideos; tabaquismo; estrés; infecciones de ciertos virus y

padecer el síndrome de Zollinger-Ellison que se describe más adelante. Las

localizaciones más frecuentes de las úlceras son, en primer lugar el canal pilórico o

bulbo duodenal y en segundo lugar la incisura angular del estómago, aunque las

úlceras causadas por fármacos antiinflamatorios y por el síndrome de Zollinger-

Ellison pueden localizarse en cualquier sitio.

El quimismo gástrico consiste en una serie de pruebas que actualmente se suelen

hacer en determinados laboratorios de referencia. El paciente tiene que estar en

ayunas de 12 horas y haber evitado la toma de todo tipo de fármacos 48 horas antes.

Se sonda la cavidad gástrica y se alcanza la posición correcta mediante control

radiográfico. Se aspira el contenido gástrico y se determina su volumen y su acidez

titulando con NaOH 0,1 N. Los aspirados deben obtenerse cada 15 minutos o bien

utilizando una bomba de aspiración continua durante 60 minutos.



334

A continuación se calculan los miliequivalentes de secreción gástrica, a partir del

volumen obtenido con la sonda en una hora (mEq/h), cuyo resultado se le denomina

BAO (basic acid output).

Seguidamente se inyecta pentagastrina al enfermo, que produce una secreción

máxima y se sigue extrayendo el contenido gástrico cada 15 minutos. Se suman los

miliequivalentes de los cuatro periodos de una hora y se obtiene el llamado MAO

(maximum acid output) expresado en mEq/h.

Se eligen dos intervalos con una producción mayor y se multiplica por 2. El resultado

expresa el llamado PAO (peak acid output).

Los resultados se interpretan de la manera siguiente:

a) En la aclorhídria (atrofia de la mucosa fúndica), se obtienen valores casi

inexistentes de BAO, MAO y PAO y un pH > 6.

b) En el síndrome de Zollinger-Ellison (ver apartado 3), el Bao es mayor de 15, la

relación BAO/MAO es mayor de 0,6 y si es menor de 0,4 es improbable que se

trate de esta patología.

c) En las vagotomías (seccionamiento quirúrgico del nervio vago para tratar

determinados tipos de úlceras), el BAO y el MAO se reducen un 50-70 %, de lo

contrario indican riesgo de recidiva de la úlcera.

Existe también la prueba de la comida ficticia consistente en medir la secreción basal

(BAO) después de haber producido secreción gástrica en el enfermo estimulándolo

con la visión, olor y masticación de comida durante unos 30 minutos (sin ingerirla).

La producción de ácido a la hora siguiente (mEq) se denomina SAO (sham acid

output) y su utilidad reside en la valoración del efecto del nervio vago sobre la

estimulación. En una persona normal el SAO suele ser un 40-50 % del MAO. Después

de practicar una vagotomía la relación SAO/MAO tiene que ser menor de 0,1.



335

1.4 Funcionalismo del intestino delgado

El intestino delgado tiene la función de terminar la digestión iniciada en el estómago

y absorber los nutrientes y el agua, permitiendo el paso de las demás sustancias no

absorbibles hacia el colon. Para llevar a cabo la absorción, la pared interna del

intestino delgado contiene una serie de pliegues que se hacen progresivamente más

pequeños. Macroscópicamente, en el interior del intestino delgado se observan unos

pliegues circulares, si observamos más detenidamente, por ejemplo con una lupa, se

pueden ver las vellosidades intestinales formadas por invaginaciones de la membrana

mucosa que tienen aspecto digitiforme, separados unos de otros por unos orificios

llamados criptas de Lieberkühn. Si observamos una de estas vellosidades mediante

un microscopio convencional, veremos las llamadas microvellosidades formadas

también por pequeñas digitaciones, pero ahora de la membrana celular del epitelio

digestivo. La existencia de esta peculiar estructura permite aumentar muchísimo la

superficie absorción.

En el duodeno se absorbe fundamentalmente, calcio y hierro.

En el yeyuno se absorbe sobretodo, calcio, hierro, hidratos de carbono, proteínas,

grasas, vitaminas liposolubles, ácido fólico, piridoxina, ácido nicotínico y rivoflavina.

En el íleon se absorbe fundamentalmente: vitamina B12 y sales biliares.

El factor intrínseco de Castle es una glucoproteína que tiene por función unirse a la

vitamina B12 para facilitar su absorción intestinal. La deficiencia de factor intrínseco

produce una carencia de vitamina B12 que implica un déficit en la producción de

hemoglobina. El resultado será la llamada anemia perniciosa.

El factor intrínseco se puede determinar por la técnica RIA a partir de una muestra

de jugo gástrico, pero se utiliza la prueba de Schilling que además valora el estado

de la mucosa intestinal. La prueba de Schilling consiste esencialmente en la



336

valoración de la absorción de dicha vitamina mediante la administración de vitamina

B12 radiactiva.

1.5 Funciones del páncreas exocrino

El páncreas se ubica detrás del estómago y se divide en tres partes: cabeza, cuerpo y

cola. La cabeza se encuentra en íntimo contacto con la cara lateral del duodeno. Su

secreción de enzimas digestivos permite la digestión de casi todos los alimentos y su

secreción de bicarbonato neutraliza los productos digestivos ácidos hasta alcanzar un

pH en el cual los enzimas puedan actuar de manera óptima.

En la tabla 10.1 se resumen los principales enzimas pancreáticos y los sustratos sobre

los que actúa cada uno de ellos.

TABLA 10.1

Enzima pancreático Sustrato sobre el que actúa

Amilasa Polisacáridos

Carboxipeptidasa Proteínas

Quimotripsina Proteínas

Tripsina Proteínas

Lipasa Triglicéridos

Fosfolipasa Fosfolípidos

Elastasa Elastina

2. Procedimiento de estudio de la función intestinal 2.1 Prueba de absorción de la D-xilosa La D-xilosa es un glúcido del grupo de las pentosas que se administra vía oral y se

absorbe de forma pasiva en el intestino delgado proximal sin necesidad de la

participación de enzimas pancreáticos ni de sales biliares, además no se metaboliza



337

en el hígado. La mayor parte de la que se absorbe, se elimina por vía renal. De todo lo

anterior se deduce que la cantidad de D-xilosa que se excreta en orina dentro de un

determinado tiempo después de la administración, se correlaciona de forma directa

con la cantidad que se absorbe en el intestino.

Para realizar la prueba es necesario que el paciente esté en ayunas y justo antes de la

administración de D-xilosa debe orinar. Generalmente se administra una dosis de 35

gramos. Posteriormente se recoge la orina durante las 5 horas siguientes y se toma

una muestra de sangre después de 2 horas de la administración en adultos o de 1 hora

en niños.

Pasado este tiempo se determina la concentración de D-xilosa en sangre y en orina.

La técnica empleada se basa en mezclar las muestras con p-bromoanilina en medio

ácido. En este medio la D-xilosa se deshidrata hasta convertirse en furfurol el cual se

condensa con la p-bromoanilina y forma un complejo de color rosado que se lee

espectrofotométricamente a 520 nm. Para evitar interferencias con otros

cromógenos, se suele añadir tiourea porque con su capacidad antioxidante impide la

formación de otros compuestos interferentes.

Se considera un resultado normal si se excretan aproximadamente 4 gramos de D-

xilosa en la orina de 5 horas en un adulto. En los niños se considera normal una

excreción del 16 al 33 % de la dosis ingerida. Las concentraciones plasmáticas de D-

xilosa deben ser superiores a 25 mg/dL para adultos y 30 mg/dL para niños (a las 2 y

1 horas de la ingesta respectivamente).

Los resultados de la prueba dependen sobretodo del buen estado de la mucosa

intestinal, pero también de la capacidad de excreción urinaria y por ello se podría

diagnosticar erróneamente malabsorción en pacientes con insuficiencia renal. Para

solucionar este problema se toma la muestra de sangre, si existe un aumento de la



338

concentración de D-xilosa sanguínea acompañada de una disminución de D-xilosa en

orina, el resultado sugiere la existencia de problemas renales.

Es necesario efectuar la toma de orina correctamente ya que suele ser motivo de

errores. Además se tendrá en cuenta la posible presencia de microrganismos en la

orina (infección urinaria), ya que éstos metabolizan la D-xilosa y los resultados en

orina podrían ser menores de los reales.

En caso de presencia de glucosa o de galactosa en la orina se podrían obtener valores

de D-xilosa superiores a los verdaderos, ya que estos dos compuestos interfieren en la

técnica de determinación.

Existe también la posibilidad de interferencias con determinados fármacos como por

ejemplo la aspirina, o resultados erróneos por la existencia de otras situaciones

patológicas.

Las características absortivas de la D-xilosa (absorción pasiva, no necesita enzimas ni

sales biliares), hacen de esta prueba, la ideal para valorar el estado de la mucosa

intestinal.

Un enfermo que presente esteatorrea (grasas en las heces) y una prueba de D-xilosa

disminuida, es indicativo de que el motivo de la malabsorción está en la mucosa

intestinal (enteropatía difusa). Por el contrario, si existiendo esteatorrea, la prueba de

la D-xilosa es normal, será indicativo de insuficiencia pancreática exocrina o

enfermedad hepatobiliar, ya que el problema de la malabsorción no estará en la

mucosa intestinal sino en la falta de enzimas para digerir los alimentos o bien en la

falta de sales biliares para su correcta emulsión.

2.2 Prueba de tolerancia a la lactosa Sirve para detectar la malabsorción de lactosa

La prueba consiste en la administración oral de 50 gramos de lactosa y posterior

toma de muestras de sangre a los 5, 10, 15, 30, 45 y 60 minutos después de la



339

administración. Previamente a la ingesta de la lactosa se deberá tomar una muestra

de sangre para la determinación de la glucemia.

Se considera un resultado normal si se detecta un incremento de al menos 20 mg/dL

de glucosa tras la ingesta de lactosa, respecto de la glucosa basal en ayunas anterior a

la toma oral.

Un resultado menor del indicado es sugerente de deficiencia de lactasa. La deficiencia

de lactasa es la causa más frecuente de malabsorción de hidratos de carbono. Esta

deficiencia enzimática puede ser congénita o adquirida. La primera se manifiesta en

el recién nacido. Se sospecha de esta enfermedad cuando aparece dolor abdominal y

diarrea acuosa después de la ingesta de leche o derivados.

En la prueba de tolerancia a la lactosa pueden aparecer resultados falsos positivos,

por ello se debe corroborar el diagnóstico a través de una biopsia de intestino delgado

donde se determina directamente la actividad de la lactasa.

También existe la prueba del aliento consistente en administrar lactosa marcada con

el isótopo 14C y posterior detección de la radiactividad del 14CO2 en el aliento.

2.3 Medida del contenido de lípidos fecales

La presencia de grasa en las heces se pone de manifiesto por examen visual ya que

el aspecto de las mismas es pálido, espumoso y tienen mala olor. Para su valoración

semicuantitativa se puede emplear el examen microscópico. Para ello se deberá

tomar una pequeña cantidad de heces en suspensión sobre un portaobjetos, se le

añaden 2 gotas de etanol al 95% y a continuación 2 gotas más de solución etanólica

saturada del colorante Sudán-III y después se coloca un cubreobjetos. Las grasas que

pudieran haber en la muestra se observarán como gotitas de color naranja o rojo. Si

se observan un mínimo de 60 o más gotitas de grasa por cada campo óptico, se puede

definir como esteatorrea. Existe una cierta correlación entre el número de gotitas por

campo y la concentración de grasas totales.



340

La Prueba de Van de Kamer gravimétrica para la cuantificación de lípidos totales

en heces se realiza del siguiente modo:

a) Se parte de muestras de heces de 24 horas homogeneizadas.

b) Se pesan 50 g de heces y se añade el doble de agua

c) Se disponen dos tubos A y B (de unos 3-4 cm de diámetro y fondo cónico), en los

que se les ha añadido previamente 4 gotas de HCl al 50% para conseguir un

pH<2.

d) Se pesan 3 gramos de heces y se colocan en cada tubo

e) En cada tubo se añade *(3):

5 mL de etanol puro

20 mL de éter de petróleo puro

f) Se agitan durante 20 minutos

g) Se centrifugan durante 10 minutos a 3000 rpm

h) Se filtran los sobrenadantes de los tubos en dos erlenmeyer de 50 mL

previamente pesados con balanza de precisión, los cuales se han lavado con

cloroformo para eliminar todo rastro de jabón. En los filtros se espolvorea

primeramente un poco de Na2SO4

i) Al residuo de heces se le añade de nuevo:

5 mL de etanol puro

20 mL de éter de petróleo puro

j) Se agitan durante unos 15 minutos

k) Se centrifugan durante 10 minutos a 3000 rpm

l) Se vuelven a filtrar los sobrenadantes.

m) Los erlenmeyer se colocan en un baño de arena a 37°C para evaporarse

totalmente durante 24 horas.



341

n) Al día siguiente se pesan los erlenmeyer llenos y se les resta el peso de los mismos

en vacío. Los resultados se expresan con tres cifras decimales

o) Se obtiene la media aritmética de los resultados de los tubos A y B

p) Se expresa el resultado final en mg de lípidos totales/gramo de heces

Se considera normal una cifra menor de 7 g/24 h en adultos con dieta normal.

La técnica NIRS (Near InfraRed Spectroscopy) es capaz de determinar en breve

tiempo (30 segundos), la cantidad de grasa en heces. Se trata de una técnica

refractométrica que se basa en el hecho que las grasas presentan unas bandas típicas

en el rango espectral del infrarrojo cercano (800-2500 nm). La muestra es irradiada

con longitudes de onda específicas que interaccionan con ella y que son reflejadas,

dando una radiación difusa que es recogida por un lector de sulfuro de plomo en una

disposición similar a la representada en la figura 9.4 del texto citado anteriormente.

El instrumento se calibra periódicamente mediante la integración de datos que se han

obtenido aplicando la prueba de Van de Kamer, además de un programa informático

que los procesa.

2.4 Pruebas de detección de hemoglobina en heces La emisión se sangre por el ano de manera claramente visible se denomina

rectorragia; la emisión de heces oscuras, alquitranadas, grumosas y teñidas con

pigmento sanguíneo, se denomina melenas. La presencia de cantidades mínimas de

sangre en las heces, sólo detectables por medio de pruebas de laboratorio, se

denomina sangre oculta en heces.

El interés en realizar pruebas de sangre oculta consiste sobretodo en la detección

precoz del cáncer colorrectal. El cáncer colorrectal tiene una incidencia anual de más

de 600.000 casos en el mundo y es, además, el tercer tipo de cáncer más común, (en

algunos países el segundo). A partir de los 45 años de edad, un 10% de la población



342

tiene pólipos colorrectales, de los cuales un 1 % se vuelven malignos. Además hay que

tener en cuenta que en general los pólipos mayores de 0,5 cm pueden sangrar.

La prueba del guayaco para la determinación de sangre oculta se emplea con

frecuencia para el despistaje del cáncer colorrectal en la población general. Para

llevarla a cabo se necesitan los siguientes reactivos:

a) Ácido acético glacial

b) Agua oxigenada al 3 % (v/v)

c) Solución de goma de guayaco al 1:60 (p/v) en alcohol etílico al 95 % (v/v) o en

solución saturada.

Se procede del siguiente modo:

a) Se pesan 0,5 gramos de heces y se colocan en un tubo de ensayo de 1 cm de

diámetro por 10 cm de largo.

b) Se añaden 2 mL de agua y se mezcla con una varilla agitadora hasta conseguir una

buena homogenización.

c) Se añaden 0,5 mL de ácido acético glacial, mezclándolo convenientemente.

d) Se añaden 2 mL de solución de goma de guayaco y se mezcla.

e) Se añade 2 mL de agua oxigenada y se mezcla. Se empieza a contar el tiempo

desde este momento.

f) Se observa durante 2 minutos el desarrollo máximo de color azul, clasificándolo

en: trazas, 2, 3, 4 o más cruces según la intensidad del color.

g) Se comprueba periódicamente el buen estado de los reactivos mediante la

repetición del proceso a partir de una muestra de heces que contenga siempre

sangre.



343

La prueba para la detección de hemoglobina en heces constituye una técnica

inmunocromatográfica que emplea anticuerpos monoclonales altamente específicos

para la hemoglobina únicamente humana. Los anticuerpos están unidos a un

colorante formando un conjugado que se une al antígeno de hemoglobina.

El procedimiento de uso de la técnica se basa en un pequeño dispositivo de plástico

con tres orificios en forma de ventana. En el primero se colocará la muestra

vehiculizada con un disolvente, en el segundo se observará el resultado y en el tercero

se comprobará el buen funcionamiento del instrumento (figura 10.3).

Figura 10.3 Ensayo inmunocromatográfico para la detección de hemoglobina en

heces

Muestra

Resultado positivo

Resultado negativo

Figura 10.3



344

La muestra difunde a lo largo del papel poroso hasta llegar al segundo orificio, en

caso de haber hemoglobina en la muestra, ésta reaccionará con el anticuerpo y se

producirá una línea rosada que se observará en el segundo orificio, (resultado

positivo). En caso de no haber hemoglobina en la muestra, no habrá reacción y no se

observará ninguna línea en el segundo orificio, (resultado negativo). En el tercer

orificio siempre debe de observarse una línea rosada ya que cuando el anticuerpo

alcanza la zona del tercer orificio, reacciona con la hemoglobina de control que allí

existe.

La técnica tiene la ventaja de ser sencilla, sensible y rápida ya que en unos 10 minutos

después de colocar la muestra se puede leer el resultado, además cabe la posibilidad

de que el propio paciente coloque la muestra en un papel absorbente, dejándola secar

y cubriéndola con un envoltorio en forma de tarjeta especialmente diseñado y la envíe

por correo al laboratorio.

3. Patrones de alteración de la función gastrointestinal

3.1 Síndrome de Zollinger-Ellison El síndrome de Zollinger-Ellison, es una entidad patológica descrita en el año 1955

definido por un tumor de células APUD*(1) secretor de grandes cantidades de

gastrina. El tumor se suele localizar en las células no beta del páncreas y se denomina

gastrinoma.

El alto nivel de gastrina secretado por el tumor estimula la secreción de HCl en

cantidad suficientemente elevada como para producir un gran número de úlceras de

localización atípica. Además, el síndrome se caracteriza por diarreas profusas y por la

existencia de pliegues gruesos de la mucosa gástrica observables por radiología.



345

El patrón analítico diagnóstico de la enfermedad se obtiene a través de la prueba de

la secretina consistente en la inyección intravenosa rápida de 2 U/kg de peso de

secretina. Al cabo de 30 minutos se determina la gastrinemia.

En un individuo ulceroso sin síndrome de Zollinger-Ellison, la gastrinemia disminuye

respecto de la basal, en cambio en un individuo ulceroso con gastrinoma, la

gastrinemia se eleva más de 200pg/mL respecto de la basal. Aunque la prueba es

positiva en el 90 % de los gastrinomas. Existe otra prueba de confirmación en caso de

duda, la prueba de perfusión de calcio. En ella se administra gluconato cálcico por

vía intravenosa durante 3 o 4 horas y se obtienen posteriormente muestras de sangre

en las que se determina la gastrinemia. En sujetos normales o con úlcera duodenal

existirá un ligero aumento de la gastrina, pero en sujetos con gastrinoma, la gastrina

se incrementa de forma semejante a la prueba de la secretina.

La gastrina se determina por la técnica RIA y sus valores normales son menores de

100 pg/mL.

3.2 Enfermedad de Whipple

Se debe a la infección del microrganismo Tropheryma Whippelli relacionado con la

producción de un aplanamiento de las vellosidades intestinales y otras características

anatomo-patológicas. Los enfermos presentan pérdida de peso, artritis, diarrea,

fiebre, alteraciones del SNC y dolor abdominal. La exploración física revela la

existencia de linfadenopatía, hiperpigmentación y hepatomegalia entre otros signos.

El patrón analítico pone de manifiesto como alteraciones más relevantes, las

siguientes:

a) Hipoalbuminemia

b) Esteatorrea

c) Ferropenia

d) Incremento de la AST



346

e) Hipopotasemia

f) Incremento de la FA

g) Hipocalcemia

3.3 Gastroenteropatía proteinorreica

Es en realidad un amplio grupo de enfermedades gastrointestinales que se

caracterizan por la pérdida excesiva de proteínas por el tubo digestivo. Las causas

más comunes de paso de proteínas a la luz intestinal son: a) aumento de la

permeabilidad celular con lesión de la mucosa, b) exudación por inflamación, erosión

o ulceración de la mucosa, c) obstrucción de los vasos linfáticos.

La prueba de Gordon tiene una gran validez para establecer el diagnóstico de la

pérdida de proteínas. Consiste en la administración intravenosa de albúmina

marcada con 51Cr con posterior recogida de heces en los días siguientes, en las que se

cuantifica la radiactividad.

3.4 Enfermedad celíaca

Se caracteriza fundamentalmente por diarrea, astenia y adelgazamiento. Es una

enfermedad causada por la intolerancia al gluten y más concretamente a la fracción 9

de la gliadina del gluten. La gliadina es una fracción alcohol-extraíble que contienen

péptidos N-pirrolidín-carboxílicos y que puede ser separada por electroforesis en

cuatro fracciones: α, β, δ, y ω, pero a pesar que se sabe que probablemente la única

fracción tóxica es la α, no se conoce bien el mecanismo por el cual ésta lesiona la

mucosa intestinal.

El patrón analítico de la celiaquia no es específico ya que puede observarse en todos

los procesos malabsortivos. Consiste en: anemia por déficit de ácido fólico o de hierro

en algunas ocasiones por vitamina B12; leucopenia y trombocitopenia y a veces

hipoprotrombinemia por falta de vitamina K. Si la diarrea es muy intensa puede



347

aparecer acidosis metabólica por la pérdida de bicarbonato en las heces, así como

niveles bajos de calcio, fósforo, cinc, magnesio, proteínas totales y colesterol.

Las pruebas de detección de grasa en heces también tienen su utilidad, pero la prueba

que diagnostica definitivamente la enfermedad es la biopsia de mucosa de yeyuno

donde se confirma la lesión.

El tratamiento consiste en la supresión total de aquellos alimentos que contienen

gluten (trigo, cebada, centeno y avena). Al cabo de un tiempo sin el aporte de gluten

en la dieta, se practica otra biopsia en la que se debe demostrar la regeneración de la

mucosa intestinal.

También es útil la determinación de anticuerpos antigliadina.

__________________________________________________________

APÉNDICE

*(1) Las células enterocromafines se llaman también células de Kultschitski y

pertenecen al sistema APUD (Amine Precursor Uptake Decarboxilation). Las células

APUD provienen de la cresta neural del embrión. Un ejemplo de células APUD son

las células G secretoras de gastrina ubicadas en el antro, duodeno y páncreas.

*(2) La capa muscular de la mucosa (muscularis mucosæ), está constituida por dos o

tres estratos de músculo liso y se encuentra situada internamente a la capa mucosa,

en medio de ambas se sitúa la lámina propia. La contracción de esta capa es

importante para la compresión de las glándulas del estómago y la eliminación de su

contenido.

*(3) El etanol y el éter de petróleo, son sustancias que actuando como disolventes,

producen una extracción o fenómeno de partición de las grasas respecto al resto de

contenidos (agua y otros contenidos fecales). El fenómeno de la partición, se produce

por la distinta afinidad (representada por el coeficiente de reparto), de los solutos por

los disolventes.



348

ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN

PRUEBA OBJETIVA DE SELECCIÓN ALTERNATIVA MÚLTIPLE

Solo es válida una de las cuatro respuestas de cada pregunta.

1) Todos los siguientes factores estimulan la secreción ácida gástrica excepto:

a) acetilcolina

b) histamina

c) somatostatina

d) gastrina

2) La extracción de sangre en la prueba de la D-xilosa en niños se realiza:

a) a las 5 horas siguientes de la administración de D-xilosa oral

b) a las 2 horas siguientes de la administración de D-xilosa oral

c) a la hora siguiente de la administración de D-xilosa oral

d) a las 6 horas siguientes de la administración de D-xilosa oral

3) Una de las siguientes pruebas tiene menos validez para evaluar la deficiencia de

lactasa:

a) prueba de la tolerancia oral a la lactosa

b) prueba de Schilling

c) prueba del aliento con 14C

d) biopsia de intestino delgado y actividad de la lactasa

4) La prueba de Van de Kamer se puede clasificar dentro de uno de los siguientes

grupos de técnicas:

a) técnicas inmunocromatográficas

b) técnicas de extracción

c) técnicas densitométricas

d) técnicas refractométricas



349

5) Uno de los siguientes reactivos no intervienen en la prueba del guayaco:

a) solución de goma de guayaco en alcohol etílico

b) ácido acético glacial

c) H2O2

d) éter de petróleo

6) Uno de los siguientes elementos no forma parte de la técnica de detección de

hemoglobina en sangre:

a) disolvente

b) hemoglobina humana de control

c) conjunto de anticuerpos monoclonales anti-hemoglobina humana y colorante

d) anticuerpos antimioglobina

7) La prueba de la secretina es de utilidad en el diagnóstico de una de las siguientes

entidades patológicas:

a) síndrome de Zollinger-Ellison

b) enfermedad de Whipple

c) enfermedad celíaca

d) intolerancia a la lactosa

8) La serotonina es segregada por uno de los siguientes grupos celulares:

a) células SEC

b) células principales

c) células enterocromafines

d) células parietales

9) Para el cálculo del PAO (peak acid output):

a) se determinan los mEq de secreción gástrica en una hora

b) se eligen dos intervalos, de los 4 de una hora, con una producción mayor y se

multiplican por 2, después de la inyección de pentagastrina



350

c) se determina la acidez del contenido gástrico con NaOH 0,1N

d) se halla el cociente BAO/MAO

10) Para la determinación de la D-xilosa intervienen todos los siguientes reactivos

excepto uno:

a) desoxiuridina

b) parabromoanilina

c) furfurol

d) tiourea

CRITERIOS Y ACTIVIDADES DE EVALUACIÓN

Describir las regiones anatómicas del estómago y las localizaciones de sus grupos celulares

Describir el trayecto del intestino delgado, enumerando sus tramos y definiendo sus límites

Definir la posición del páncreas y enumerar sus regiones anatómicas Enumerar las sustancias segregadas por el estómago Definir los conceptos de BAO, MAO, PAO y SAO Enumerar los factores estimulantes e inhibidores de la secreción gástrica Describir el mecanismo de secreción gástrica Relacionar los tramos del intestino delgado con la absorción de las principales

sustancias nutritivas Enumerar los principales enzimas segregados por el páncreas exocrino Describir el proceso de realización de la prueba de la D-xilosa Describir el proceso de realización de la prueba de tolerancia de la lactosa Describir el proceso de realización de la prueba de Van de Kamer Describir la técnica NIRS para la cuantificación de grasa en heces Describir las distintas técnicas de detección de hemoglobina en heces Describir los patrones analíticos más habituales de alteraciones de la función

intestinal

PROPUESTA DE ACTIVIDAD DE REFUERZO

Contestar detalladamente a las siguientes preguntas:

¿Cuál es el lugar anatómico donde desembocan los conductos colédoco y de Wirsung?

¿ Dónde están situadas las células de Brünner? ¿Qué sintetizan? ¿En qué consiste la prueba de la comida ficticia? ¿Cómo se obtiene el furfurol? ¿Qué interferencias son las más habituales en la prueba de la D-xilosa?



351

¿Cómo se corrobora el diagnóstico de intolerancia a la lactosa? ¿Cómo se calibra el instrumento con el que se realiza la técnica NIRS para la

determinación de grasa en heces? ¿Cuál es la principal utilidad de las pruebas de detección de sangre oculta en

heces? ¿Qué es un gastrinoma?

¿Preguntas?: [email protected]


mailto:[email protected]

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