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Consejería de Agricultura, Desarrollo Rural, Medio Ambiente y Energía Dirección General de Agricultura y Ganadería

Servicio de Sanidad Animal

JUNTA DE EXTREMADURA

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LABORATORIOS DE SANIDAD ANIMAL DE EXTREMADURA

INSTRUCCIONES PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS Y ENVÍO A LABORATORIOS DE

SANIDAD ANIMAL Rev. 4

Fecha: 11/07/2017




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ÍNDICE 1. OBJETO 2. ALCANCE 3. REFERENCIAS 4. GENERALIDADES 5. REALIZACIÓN SEGÚN TIPO DE MUESTRAS 5.1. Sueros Sanguíneos y Sangre Entera. 5.2. Heces. Análisis Parasitológicos. 5.3. Culicoides. 5.4. Pelos, Costras y Raspados Cutáneos. 5.5. Esmegma para Análisis de Tricomonas. 5.6. Muestras (ganglios) para cultivo microbiológico. 5.7. Muestras para análisis de PNIR. 5.8. Piensos para el Análisis de Proteínas Animales Elaboradas (Plan de Vigilancia de las

EETs) 5.9. Pienso, cereales, leche o subproductos para alimentación animal para análisis

físicoquímicos. 5.10. Muestras para el análisis de Encefalopatías Espongiformes Transmisibles. 5.11. Muestras para el Programa Nacional de Vigilancia y Control de determinados

serotipos de Salmonella. 5.12. Muestras para el Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente de la

Enfermedad de Newcastle, la Influenza aviar y la Salmonelosis. 5.13. Otras muestras. 6. ANEXOS Anexo 1: Modelo de Hoja de envío de muestras. Programas Nacionales de Erradicación y

Vigilancia de Enfermedades Animales Anexo 2: Patología Porcina. Modelo de hoja de remisión de muestras serológicas. Anexo 3: Modelo de Hoja de Envío de Muestras Cinegéticas. Estudio de Prevalencia en

Fauna Silvestre. Anexo 4: Envío de Muestras al Laboratorio para diagnóstico de Enfermedades No sujetas

a Programas Oficiales de Control y Erradicación. CENSYRA. Anexo 5: Hoja de Envío de muestras culicoides. Programa Entomológico de Vigilancia de

la Lengua Azul. Anexo 6: Hoja de envío para análisis parasitológicos Anexo 7: Toma de muestras cultivo microbiológico Anexo 8: Hoja de Toma de muestras: a.- Programa de Vigilancia de la EEB b.- EET en Ganado Ovino y Caprino. c.- Hoja de Toma de Muestras para Genotipado del gen PrP Anexo 9: Modelos de Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Programa

Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella. a.- Explotaciones Avícolas de Puesta b-. Explotaciones Avícolas de Carne Anexo 10: Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Programa Regional de

Vigilancia y Control en aves cinegéticas y silvestres. Anexo 11: Hoja de envío de muestras. Servicio de Sanidad Animal .




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1.- OBJETO El objeto de estas instrucciones es establecer condiciones para la recogida y el envío de muestras a los Laboratorios de Sanidad Animal de Extremadura. 2.- ALCANCE Se aplicará a todas las muestras que lleguen a los Laboratorios de Sanidad Animal de Badajoz, Zafra y Cáceres y de acuerdo a los Catálogos de Servicios de cada laboratorio. 3. REFERENCIAS 1.- Programas Nacionales de erradicación de enfermedades http://rasve.mapa.es/Publica/Programas/Normativa.asp. 2.- Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente aves cinegéticas y silvestres y otras Instrucciones del Servicio de Sanidad Animal: Portal de Sanidad Animal. 4. GENERALIDADES Las muestras se remitirán siempre PERFECTAMENTE ENVASADAS, IDENTIFICADAS Y EMBALADAS. Se recomienda envolver los envases en papel absorbente o si se trata de tubos colocarlos en gradillas de poliestireno y sus cajas e identificarlas, introducirlos en una bolsa de plástico y colocar ésta en una caja hermética, que garantice la seguridad del personal transportista y receptor. Las hojas de envío o solicitud de análisis deberán venir debidamente cumplimentadas, evitando en todo momento su contacto directo con las muestras. Se enviarán las muestras siempre junto con su documentación. LAS MUESTRAS SE ENVIARAN LO MÁS RÁPIDAMENTE POSIBLE AL LABORATORIO En caso de necesitar condiciones de refrigeración se recomienda el uso de acumuladores de frío. El laboratorio evaluará el estado de las muestras determinando si son aptas o no para realizar los análisis solicitados. Ante cualquier duda contactar previamente con el laboratorio.

HORARIO DE RECEPCIÓN DE MUESTRAS

EN LOS LABORATORIOS:

LUNES a VIERNES de 8.30 A 14.30H

Laboratorio Regional de Sanidad Animal de BADAJOZ

Camino Sta. Engracia s/n

06007/ BADAJOZ Tfno.: 924/012240 Fax: 924/012242

Laboratorio de Sanidad Animal de CACERES

C/Arroyo Valhondo nº 2

10800/ CACERES Tfno.: 927/006428 Fax: 927/006430

Laboratorio de Sanidad Animal de ZAFRA

C/ Extremadura s/n

06300 Zafra (Badajoz) Tfno.: 924/175813 Fax: 924/175824




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5. REALIZACIÓN SEGÚN TIPO DE MUESTRAS 5.1. Sueros Sanguíneos y Sangre Entera Las muestras se remitirán en los tubos específicos (Ver cuadro) bien identificados, en gradillas de poliespán, manteniéndolas en posición vertical. Cuando se requiera la remisión de muestra de sueros, el tubo lleno de sangre, se dejará en reposo a temperatura ambiente hasta la retracción del coágulo. En el caso de sangre recogida en tubo con anticoagulante, se volteará el tubo varias veces para facilitar la mezcla y cuidadosamente para evitar la rotura de los glóbulos rojos. Tabla 1.- Indicaciones de uso de los tubos Color tapón Anticoagulante Solicitud de Análisis Documentación de

acompañamiento Brucelosis bovina, ovina caprina

Clamidiasis Salmonelosis Perineumonía

Paratuberculosis

ANEXO 1 (*)

Leucosis, IBR, BVD, Maedi-Visna ANEXO 1 Brucelosis porcina, Enf. de Aujeszky

EVP, PPC, PPA, PRRS ANEXO 2 (*)

Leishmaniosis Toxoplasmosis ANEXO 6

Rojo

Ninguno

PNIR (A5) Acta de Toma de Muestras

Lengua Azul IBR BVD

Enfermedad de la Frontera

ANEXO 1 (*)

Violeta

EDTA

Piroplasmosis Filariosis ANEXO 6

Verde

Heparina Tuberculosis γ-interferón (**) ANEXO 1

(*) Para estas determinaciones, se cumplimenta:

- ANEXO 3 en caso de muestras cinegéticas.

- ANEXO 4 en el caso de Muestras para diagnóstico de Enfermedades No sujetas a

Programas Oficiales de Control y Erradicación del CENSYRA.

(**) No requiere refrigeración. Debe llegar al laboratorio antes de 8 h tras su extracción.




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Sangre adecuada para análisis: Ausencia de coágulos y sin signos de putrefacción Sueros adecuados para análisis: No hemolíticos y No contaminados. Suero no hemolítico: color ámbar, amarillo o rosado. Suero no contaminado: limpio traslucido y sin turbidez. CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE: Se recomienda no refrigerar inmediatamente la sangre tras su extracción, para permitir la formación del coágulo. La Temperatura de almacenamiento hasta remisión al laboratorio será Refrigeración. El transporte podrá realizarse a Temperatura ambiente, aunque deberá ser en refrigeración en días de calor. El tiempo máximo desde la toma de muestras hasta la recepción en el laboratorio será de 72 horas, excepto en muestras de Campaña de Saneamiento Ganadero de ganado bovino, ovino y caprino, que como máximo podrá ser de 7 días, siempre que se conserven adecuadamente. IDENTIFICACIÓN:

Las muestras de sangre/ suero de rumiantes se remitirán ordenadas en gradillas de poliespan. Estas gradillas se identifican de forma indeleble en las solapas de las cajas, con el código correspondiente que consta de tres partes:

a) Código de identificación del veterinario, que es constante. b) Fecha asignada a la hoja de campo (día y mes). c) Letra identificativa (de la A a la Z) de cada gradilla utilizada en esa hoja de

campo. Los tubos deberán numerarse del 1 al 50. Los sueros de porcino se identificarán individualmente con el número de crotal

del animal y se remitirán ordenados en gradillas de poliespan identificadas con nombre del Veterinario o sus iniciales y la fecha de la extracción y en caso de varias gradillas en el mismo envío indicar orden.

Las muestras de sangre para análisis parasitológicos se identificarán individualmente y se remitirán ordenadas en gradillas de poliespan.

Las muestras de sangre remitidas para análisis de Tuberculosis (Gamma interferón) se enviarán ordenadas en gradillas con un máximo de 30 tubos por gradilla. Las gradillas se identificarán con el código del veterinario, la fecha (día y mes) y letra.

Documentación de acompañamiento: Dependiendo del motivo de análisis de las muestras, ver Tabla 1 . 5.2. Heces para Análisis Parasitológicos: Las heces deben ser frescas, si es posible se recogerán directamente del recto. Se enviarán en recipientes de plástico estériles, herméticamente cerrados, limpios e identificados. Se necesitan al menos 50 g de heces. Identificación de la muestra: Rotular envase con número correlativo. Documentación de acompañamiento: Hoja de envío para análisis parasitológicos (Anexo 6).




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5.3. Culicoides. Programa Entomológico de Vigilancia de la Lengua Azul.

Deberán venir en envases con alcohol de 70º adicionados de anticongelante. Identificación de la muestra: mediante pegatina adherida al recipiente, indicando que se trata de muestreo de culicoides, el nombre y/o código de la explotación, el municipio, la provincia y la fecha. Documentación de acompañamiento: Hoja de Envío de muestras culicoides. Programa Entomológico de Vigilancia de la Lengua Azul (Anexo 5). 5.4. Pelos, costras y raspados cutáneos. Análisis parasitológicos El material recogido, incluida la cuchilla de raspado, se manda al laboratorio en envases herméticamente cerrados e identificados. La cantidad de raspado debe ser suficiente. Documentación de acompañamiento: Hoja de Envío de muestras para análisis parasitológicos (Anexo 6) 5.5. Esmegma prepucial para el diagnóstico de Trichomonas foetus Se realiza un lavado prepucial que se transportará en fresco (sin refrigerar). La muestra se enviará al laboratorio el mismo día de su recogida. Para determinar la cantidad de muestra contactar con el laboratorio. Documentación de acompañamiento: Hoja de Envío de muestras para análisis parasito-lógicos (Anexo 6) 5.6. Muestras (ganglios) para cultivo microbiológico. La toma de muestras se refiere tanto a los ganglios de bovinos positivos que se toman en matadero como a los ganglios de pequeños rumiantes positivos que se toman en campo. Se enviarán los ganglios procedentes de mataderos al laboratorio Regional de Sanidad Animal de Badajoz al día siguiente de la toma de muestras, transportándose refrigerados o congelados. Requisitos para la toma de muestras de ganglios:

Se utilizarán recipientes de plástico estériles (anaclines), herméticamente cerrados, limpios e identificados. (Para aquellos ganglios que no se pueden introducir en anaclines pequeños, se usarán envases de 1/2 L.)

Los ganglios deben ir limpios, sin órganos anexos.




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No llenar los recipientes en exceso. Cerciorarse del cierre correcto del recipiente que contiene la muestra. Usar rotulador indeleble para identificar la muestra. Colocar los envases, ya identificados, en sus gradillas para evitar su derrame. Dichas gradillas se introducen en un caja de poliespan La caja de poliespan se introduce en una bolsa de plástico. Para garantizar el triple

envasado de la muestras. La hoja de toma de muestras tiene que ir en el exterior del paquete que contiene la

muestra. En el interior de las "Cajas de Poliespán" donde se introducirán las muestras se depositan acumuladores de frío en cantidad suficiente para mantenerlos refrigerados o congelados durante el transporte. Los acumuladores de frío deberán estar congelados en el momento del envío. Las Cajas de Poliespán irán identificadas externamente con pegatinas que indiquen la dirección del Laboratorio Badajoz y el estado de conservación en el que se envían los ganglios (Refrigeración o Congelación). Si por algún motivo excepcional no se pudieran enviar los ganglios al día siguiente de haberse tomado entonces se congelarían y se enviarían lo antes posible. Documentación de acompañamiento: Anexo 7 "Hoja de toma de muestras para cultivo microbiológico". 5. 7. Muestras para Programa Nacional de Investigación de Residuos (PNIR) Se realizará la recogida y envío según el Plan Nacional de Investigación de residuos en explotaciones Ganaderas de la CCAA de Extremadura establecido para el año en curso. La muestra se enviará en recipientes de polietileno que eviten derrames y mantengan la integridad de la muestra. Cada recipiente se identificará con una pegatina, donde se indicará el número de acta, la fecha, el número de precinto que se le vaya a poner a la bolsa, tipo de muestra y especie. Posteriormente, los ejemplares de la muestra se introducirán en el respectivo juego de bolsas de PNIR que serán acondicionados y precintados. En el precinto de cada bolsa se transcribirá el número del Acta al que se corresponde, así como el año en curso. Documentación de acompañamiento: Acta de Toma de Muestras del Servicio de Sanidad Animal. 5.8. Muestras de PIENSO para determinación de Proteínas animales elaboradas. La muestra será reglamentaria según artículo 15 del RD 1945/1983.Las muestras tomadas se remitirán en recipientes de 125 ml tipo anaclín, y en cantidad mínima de 100 gr por ejemplar. Serán convenientemente acondicionadas e identificadas mediante pegatina adherida al recipiente donde se indica la fecha, el número del acta, el número de precinto, el tipo de matriz y en sustancia a investigar indicar PATs e introducidas en el respectivo juego de bolsas de toma de muestras y precintadas ( en el precinto se indicará el número del acta y el año)




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Documentación de acompañamiento: Acta de Toma de Muestras del Servicio de Sanidad Animal. 5.9. Pienso, cereales, leche o subproductos para alimentación animal mediante

análisis físico- químicos: Las muestras de pienso, ensilado, mezclas, concentrado, etc. se recogerán con guantes desechables y se introducirán en recipientes estériles (bolsas o anaclines). La cantidad mínima para el análisis será de 300 g/ determinación. Las muestras se enviarán a temperatura ambiente salvo en el caso de que hayan pasado más de 48 horas desde su recogida. En ese caso, se mantendrán y enviaran refrigeradas al laboratorio. En el caso de muestra de leche la cantidad mínima será de 300ml. Se remitirá en envase estéril. La muestra debe proceder de un ordeño reciente y remitirse refrigerada. Documentación de acompañamiento: Acta de Toma de Muestras del Servicio de Sanidad Animal o bien Anexo 11. 5.10. Muestras para análisis de Encefalopatías Espongiformes Transmisibles La toma de muestras se realizará por personal formado específicamente para ello y de acuerdo al RD 3454/2000 y a los Programas Nacionales de Vigilancia, control y erradicación de las encefalopatías espongiformes bovina y de los pequeños rumiantes (Tembladera) . Toma de muestras en bovino: Tronco encefálico completo. Toma de muestras en ovino y caprino: Tronco encefálico completo, incluyendo el cerebelo. Las muestras se remitirán en condiciones de refrigeración al Laboratorio por un sistema que garantice su llegada en un plazo máximo de 24-48 horas desde la toma, colocadas en cajas ó en neveras estancas. Para conseguir condiciones de refrigeración se recomienda el uso de acumuladores de frío. Deben remitirse en envases individuales herméticos e irrompibles (anaclin), limpios, bien cerrados y en posición vertical para evitar posibles derrames; perfectamente identificados y acompañados de la/ s hoja/ s de toma de muestras debidamente cumplimentadas. La identificación de las muestras se hará con una etiqueta adherida en el cuerpo del envase, en la que deberán figurar:

Especie: Bov, Ov, Cap. Fecha de la toma. Identificación del animal: Nº de crotal completo.

En el caso de ovino/ caprino se identificará igual que en bovino, con Nº de crotal completo. En caso de no disponer de este se pondrá el Nº de Registro de Explotación ligado a un número correlativo asignado a los animales de ese día.




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Documentación de acompañamiento: Anexo 8 (a y b). Muestras para genotipado aleatorio de scrapie: En Extremadura la Toma de Muestras se realiza trimestralmente según lo indicado por el Servicio de Sanidad Animal, y se remiten al Laboratorio Regional de Sanidad Animal, que a su vez se encarga de enviarlas al Laboratorio Nacional de Referencia para las Encefalopatías espongiformes transmisibles de los animales. Se tomarán muestras de sangre entera de ovino en tubos venoject con anticoagulante identificados individualmente con el crotal del animal, y alojados en gradillas de poliespan. Se conservarán y remitirán al laboratorio en refrigeración. Documentación de acompañamiento: Cada muestra debe llevar asociada una Hoja de Toma de Muestras para Genotipado del gen PrP (Anexo 8 c). 5.11. Muestras para el Programa Nacional de Vigilancia y Control de determinados

serotipos de Salmonella Muestras de Heces y calzas: Las muestras serán tomadas por Veterinarios oficiales adscritos al Servicio de Sanidad Animal, cumpliendo con lo indicado en los Programas Nacionales para la vigilancia y control de determinados serotipos de Salmonella en: - Gallinas ponedoras de la especie G. gallus - Pollos de carne, broilers, de la especie G. gallus. Así como con el Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente de la Enfermedad de Newcastle, la Influenza Aviar y la Salmonelosis por salmonella enteritidis y salmonella typhimurium en aves cinegéticas y silvestres pertenecientes a los órdenes galliformes, columbiformes y anseriformes (patos y gansos) en vigor. La muestra se transportará debidamente acondicionada en un embalaje diseñado para evitar cualquier fuga y estará constituido por tres elementos: 1.-Embalaje primario: Envase con cierre. 2.-Embalaje secundario: Estanco. 3.-Embalaje exterior suficientemente robusto. IDENTIFICACIÓN DE LAS MUESTRAS: Muestras correspondientes a aves domésticas: (Avícolas de puesta y Avícolas de carne): Los envases vendrán identificados con el código de la explotación (Código REGA) y una letra mayúscula que identifica la manada, además de la fecha (mm/aaaa). Muestras correspondientes a aves cinegéticas: Los envases vendrán identificados con Código REGA más la especie. PLAZOS Los plazos a cumplir tanto para la llegada al Laboratorio de la muestra tomada como para el inicio del análisis de la misma vendrán dados en el Programa en vigor que afecte a la explotación estudiada. Las muestras deberán entregarse en el laboratorio los lunes antes de las 14:00 horas




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NO ANÁLISIS DE LA MUESTRA El laboratorio podrá no analizar las muestras que no cumplan las condiciones que a continuación se detallan: - Una correcta identificación - Uso de envases adecuados - Cumplimentar correctamente la hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. - Mantener las condiciones de refrigeración desde la toma de muestras hasta su llegada al laboratorio. O presentar alguna incidencia adicional que pudiera indicar la no conformidad de la muestra para la realización del ensayo (roturas, derrame o materia orgánica en el exterior del envase). Muestras de piensos: Tomadas por los veterinarios adscritos al Servicio de Calidad Agropecuaria y Alimentaria y serán muestras reglamentarias según artículo 15 del RD 1945/1983 Documentación de acompañamiento: * Gallinas ponedoras: Hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. Programa

Nacional de vigilancia y control de Salmonella en explotaciones avícolas de puesta (Anexo 9a).

* Pollos de carne: Hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. Programa Nacional de vigilancia y control de Salmonella en explotaciones avícolas de carne (Anexo 9b).

* Aves cinegéticas y silvestres: Hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. Programa Regional de Vigilancia y control en aves cinegéticas y silvestres (Anexo 10).

* Piensos: Acta de Toma de Muestras del Servicio de Sanidad Animal 5.12. Muestras para el Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente de la

Enfermedad de Newcastle, la Influenza aviar y la Salmonelosis Documentación de acompañamiento: Hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. Programa Regional de Vigilancia y control en aves cinegéticas y silvestres (Anexo 10) 5.13. Otras muestras. Documentación de acompañamiento: Hoja de Envío de Muestras del Servicio de Sanidad

Animal (Anexo 11). 6. ANEXOS. Anexo 1: Modelo de Hoja de envío de muestras. Programas Nacionales de erradicación y Vigilancia de Enfermedades Animales.




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Anexo 2: Modelos Solicitud de análisis de Patología Porcina.




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Anexo 3: Modelo de Hoja de Envío de muestras Cinegéticas. Estudio de Prevalencia en Fauna Silvestre.




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Anexo 4: Envío de Muestras al Laboratorio para diagnóstico de Enfermedades No sujetas a Programas Oficiales de Control y Erradicación. CENSYRA.




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Anexo 5: Hoja de Envío de Muestras culicoides. Programa Entomológico de Vigilancia de la lengua azul.




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Anexo 6: Hoja de Envío de muestras para análisis parasitológicos




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Anexo 7: Toma de muestras cultivo microbiológico




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Anexo 8 a.- Hoja de Toma de muestras: Programa de Vigilancia de la EEB.




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Anexo 8 b.- Hoja de Toma de Muestras: Programa de Vigilancia de la EET en ovino y caprino




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Anexo 8 c- Hoja de Toma de Muestras para Genotipado del gen PrP




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Anexo 9 a.- Hoja de Toma de Muestras y envío al Laboratorio. Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella en Explotaciones Avícolas de puesta




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b.- Hoja de Toma de Muestras y envío al Laboratorio. Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella en Explotaciones Avícolas de carne.




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Anexo 10: Hoja de Toma de Muestras y envío al Laboratorio. Programa Regional de Vigilancia y Control en Aves Cinegéticas y silvestres.




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Anexo 11. Hoja de Envío de Muestras al Laboratorio.

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