INVESTIGACION EN PLANTAS MEDICINALES

METODOS Y PROCEDIMIENTOS

Q.F. MIRTHA ROQUE ALCARRAZMG en Microbiologia

INFORMACION

POPULAR TRADICIONAL

PLANTAS MEDICINALES

Acervo cultural guardado por las generaciones a traves del tiempo

AVANCE TECNOLOGICO

BOTANICAFITOQUIMICA

FARMACOLOGIAFARMACOGNOSIA

FARMACODINAMIATOXICOLOGIA

PLANTAS MEDICINALES

COMPROBADO

VALIDADO

GARANTIZAR UNA TERAPIA ADECUADA,EFICAZ E INOCUA

METODOLOGIA

PLANTAS MEDICINALES

ETAPAS

ETNOBOTANICOETNOFARMACOLOGICOACTIVIDAD BIOLOGICA

FITOQUIMICOTOXICOLOGICO

DESARROLLO FITOFARMACO

ESTUDIO ETNOBOTANICO

• Etnobotanica,estudia el uso popular de la flora de una region.

• Etnobotanica medicinal estudia el uso medicinal de la flora de una region

• ENCUESTAS en personas nativas que conocen y utilizan las plantas.

Psidium guajava “GUAYABA”

Usos tradicionales:

Zona de recolección: cólicos y parasitosis intestinal (hojas).

Otros usos: astringente (hojas y raíces), dolor de estomago (corteza), inflamación (cocimiento de hojas),

disentería y diarrea (cocimiento de frutos y hojas), acne (pasta de semillas molidas con agua)

ANTECEDENTES:

•2003 Navarro y col.: actividad antifungica del extracto metanólico de semillas de Annona cherimolia con CMI de 4µg/mL para T. mentagrophytes, A. niger y C. albicans y 8 µg/mL para T. rubrum.

•Nativos de la Amazonia utilizan la corteza de Annona muricata por sus propiedades antifúngicas. Acetogeninas.

•En la corteza de Annona salzmanii D.C. se encontraron 4 alcaloides bencilisoquinolinas con actividad antifungica: reticulina, anonaina, isoboldina y laurrelliptina.

•Algunas tribus amazónicas utilizan la corteza de Bidens pilosa como antimicótico para lo cual trituran 20 hojas frescas y luego aplican sobre la zona afectada.

• El extracto de éter de petróleo de partes aéreas de Hypericum calycinum se aisló un derivado floroglucinol que posee actividad antifúngica contra Cladosporium cucumericum

• Xantonas aisladas de la raíz de Hypericum roeperanum exhiben actividad antifúngica contra Candida albicans.

• Hiperbrasilona y xantonas fueron aisladas del extracto de diclorometano de la corteza y raíz de Hypericum brasiliense y mostraron actividad contra Cladosporium cucumericum.

• Extractos cloromorficos y metanólicos de las hojas y cortezas de H. patulum e H. mysorense mostraron un efecto antifúngico comparable a la griseofulvina.

• Un estudio demostró actividad antifungica de extracto de Juglans neotropica Diels.

• Extracto de corteza de Juglans cinerea mostró actividad contra C. albicans, Saccharomices cerevisae, T. mentagrophytes, Microsporium gypseum y A. fumigatus.

Schinus molle “MOLLE”

Usos tradicionales:

Zona de recolección: reumatismo (hojas)

Perú: fracturas y antiséptico tópico (planta entera), cicatrizante, hemostático, y para el dolor de dientes (oleorresina uso externo), reumatismo y purgante (oleorresina uso interno), bronquitis, tos (hojas y

frutos), conjuntivitis (hojas); Sudamérica y América Central, : astringente, antibacteriano, estimulante

digestivo, tónico, antiviral, y cicatrizante de heridas.

• En 1996 se aisló aceite esencial de Piper angustifolium Lam : canfor y canfeno que mostraron actividad bacteriostática y fungistático contra T. mentagrophytes, C. albicans, Cryptococcus neoformans, A. flavus, A. fumigatus, P. aeruginosa y E. coli.

• También especies de Piper lanceafolium, P. guiniense y P. crassenervium mostraron actividad antifungica

• El extracto de hojas de Psidium guajava mostró actividad contra varias especies de Candida entre ellos C. albicans con CMI de 125 µg/mL.

• Se demostró actividad anticandida de una crema elaborada con hojas de Plantago Major según el método de difusión en agar Sabouraud.

• El Schinus molle mostró en un estudio buena a muy fuerte acción antifungica in vitro contra numerosos hongos entre ellos Candida albicans. El aceite esencial de esta especie fue mas activo que el Multifungin, una droga antifungica.

TABLA Nº 1: PLANTAS UTILIZADAS EN LA TESIS

Especie Nombre común

Lugar de RecolecciónDpto. (Prov./Distrito)

Annona cherimolia Mill Chirimoya Amazonas (Luya/Tingo)

Annona muricata L. Guanábana Lima (Lima/San Martín de Porres)

Bidens pilosa L. Cadillo Amazonas (Luya/Tingo)

Hypericum laricifolium Chinchango Amazonas (Luya/Tingo)

Juglans neotropica Diels Nogal Amazonas (Luya/Tingo)

Piper spp. Matico Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)

Plantago major L. Llantén Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)

Psidium guajava L. Guayaba Amazonas (Luya/Tingo)

Schinus molle L. Molle Apurímac (Aymaraes/Toraya)

Spartium junceum L. Retama Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)

TABLA Nº 2: DATOS DE PLANTAS INVESTIGADASNOMBRE CIENTIFICO FAMILIA NOMBRE COMUN PARTE USADA SITIO DE

RECOLECCION

Annona cherimolia Mill. Annonaceae Chirimoya H T

Annona muricata L. Annonaceae Guanábana C,H L

Bidens pilosa L. Asteraceae Cadillo PA T

Hypericum laricifolium Hypericaceae Chinchango PA T

Juglans neotropica Diels Juglandaceae Nogal C T

Piper spp. Piperaceae Matico H C

Plantago major L Plantaginaceae Llantén H C

Psidium guajava L Myrtaceae Guayaba H T

Schinus molle L Annacardiaceae Molle C,H A

Spartium junceum L Fabaceae Retama PE C

Partes de la Planta: C, corteza, H, hojas; PA, partes aéreas (hojas, flores y tallo) PE, planta entera

Sitio de Recolección: A, Aymaraes (Toraya), Apirumac, C, Chachapoyas, Amazonas, L, Lima, Lima, T, Tingo, Amazonas.

PROCEDIMIENTO

• TECNICAS DE COMPROBACION DE ACTIVIDAD BIOLOGICA

• EXTRACCIONES• REPRODUCIBLES• CUANTITATIVAS• ESTABLES• EFICIENTES para el

EFECTO que se desea DEMOSTRAR

DIAGRAMA DE FLUJO DE PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

PLANTA ENTERAPLANTA ENTERA

RECOLECCIÓNRECOLECCIÓN

ESTABILIZACIÓNESTABILIZACIÓNY SECADOY SECADO

MOLIENDAMOLIENDA

CONSERVACIÓNCONSERVACIÓN

SELECCIÓNSELECCIÓN

MACERACIÓNMACERACIÓNETANÓLICAETANÓLICA

EXTRACTO SECOEXTRACTO SECOEVALUACIÓN FITOQUÍMICA EVALUACIÓN FITOQUÍMICA

PRELIMINARPRELIMINAR

METODOLOGIA

A A

A A PLANTA CON PLANTA CON

METABOLITOS METABOLITOS ANTIMICROBIANOSANTIMICROBIANOS

OBTENCION DE EXTRACTOS

EXTRACTO ACUOSO Y ETANOLICO

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

Microorganismos de prueba

PLANTAS CON ACTIVIDAD PLANTAS CON ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA ANTIMICROBIANA

PRUEBAS DE LABORATORIOPRUEBAS DE LABORATORIO

• Numerosas son las investigaciones que se realizan encaminadas a la busqueda de nuevos compuestos con actividades biologicas a partir de fuentes naturales

Q.F. Mirtha Roque AlcarrazMg en Microbiologia UNMSM

Objetivos

Evaluacion actividades

Antimicrobianas:• Antibacteriana• Antifungica• Antiviral

Extractos de plantas:

• Acuoso

• Etanolico

• Aceites esenciales

Q.F. Mirtha Roque Alcarraz

Mg en Microbiologia UNMSM

DIAGRAMA DE FLUJO DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

EXTRACTO SECOEXTRACTO SECO

PRUEBA DE PRUEBA DE DIFUSION EN AGARDIFUSION EN AGAR

PRUEBA DE PRUEBA DE DILUCION EN AGARDILUCION EN AGAR

NEGATIVANEGATIVA POSITIVAPOSITIVA

Metodologia

• Se han utilizado diversas tecnicas microbiologicas para demostrar la actividad antimicrobiana de plantas frente a microorganismos patogenos para el hombre.

• Metodo de las diluciones seriadas en medio liquido (CMI)

• Metodo de difusion en medios solidos sobre cultivos estandarizados de microorganimos representativos.

Metodo diluciones seriadas dobles para la determinacion CMI

• Consiste en preparar diluciones seriadas dobles del extracto de la planta a ser evaluada.

• Se adiciona luego la suspension bacteriana a una concentracion de 9 x 108 celulas/ ml

• Se incuban a 37 ºC por 24 horas.• Posteriormente se hace una resiembra en medios

selectivos de acuerdo al microorganismo de prueba.

Metodo de difusion en medio solido

• Permite la determinacion de actividad antibacteriana y antifungica

• Consiste en inocular medios de cultivo solidos con microorganismos de prueba estandarizados.

• Se utilizan discos o excavaciones donde se inoculan los extractos o diluciones de estos.

• Se deja difundir x 30 minutos y luego se incuba a la temperatura indicada según el microorganismo.

Staphylococcus aureusCepa muestra clinica

300 mg/ml 75 mg/ml

Escherichia coli ATCC 25922

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA del extracto metanolico de flores de Hypericum laricifolium (Chinchango)

300 mg/ml75 mg/ml