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INVESTIGACION EN PLANTAS MEDICINALES
METODOS Y PROCEDIMIENTOS
Q.F. MIRTHA ROQUE ALCARRAZMG en Microbiologia
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INFORMACION
POPULAR TRADICIONAL
PLANTAS MEDICINALES
Acervo cultural guardado por las generaciones a traves del tiempo
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AVANCE TECNOLOGICO
BOTANICAFITOQUIMICA
FARMACOLOGIAFARMACOGNOSIA
FARMACODINAMIATOXICOLOGIA
PLANTAS MEDICINALES
COMPROBADO
VALIDADO
GARANTIZAR UNA TERAPIA ADECUADA,EFICAZ E INOCUA
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METODOLOGIA
PLANTAS MEDICINALES
ETAPAS
ETNOBOTANICOETNOFARMACOLOGICOACTIVIDAD BIOLOGICA
FITOQUIMICOTOXICOLOGICO
DESARROLLO FITOFARMACO
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ESTUDIO ETNOBOTANICO
• Etnobotanica,estudia el uso popular de la flora de una region.
• Etnobotanica medicinal estudia el uso medicinal de la flora de una region
• ENCUESTAS en personas nativas que conocen y utilizan las plantas.
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Psidium guajava “GUAYABA”
Usos tradicionales:
Zona de recolección: cólicos y parasitosis intestinal (hojas).
Otros usos: astringente (hojas y raíces), dolor de estomago (corteza), inflamación (cocimiento de hojas),
disentería y diarrea (cocimiento de frutos y hojas), acne (pasta de semillas molidas con agua)
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ANTECEDENTES:
•2003 Navarro y col.: actividad antifungica del extracto metanólico de semillas de Annona cherimolia con CMI de 4µg/mL para T. mentagrophytes, A. niger y C. albicans y 8 µg/mL para T. rubrum.
•Nativos de la Amazonia utilizan la corteza de Annona muricata por sus propiedades antifúngicas. Acetogeninas.
•En la corteza de Annona salzmanii D.C. se encontraron 4 alcaloides bencilisoquinolinas con actividad antifungica: reticulina, anonaina, isoboldina y laurrelliptina.
•Algunas tribus amazónicas utilizan la corteza de Bidens pilosa como antimicótico para lo cual trituran 20 hojas frescas y luego aplican sobre la zona afectada.
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• El extracto de éter de petróleo de partes aéreas de Hypericum calycinum se aisló un derivado floroglucinol que posee actividad antifúngica contra Cladosporium cucumericum
• Xantonas aisladas de la raíz de Hypericum roeperanum exhiben actividad antifúngica contra Candida albicans.
• Hiperbrasilona y xantonas fueron aisladas del extracto de diclorometano de la corteza y raíz de Hypericum brasiliense y mostraron actividad contra Cladosporium cucumericum.
• Extractos cloromorficos y metanólicos de las hojas y cortezas de H. patulum e H. mysorense mostraron un efecto antifúngico comparable a la griseofulvina.
• Un estudio demostró actividad antifungica de extracto de Juglans neotropica Diels.
• Extracto de corteza de Juglans cinerea mostró actividad contra C. albicans, Saccharomices cerevisae, T. mentagrophytes, Microsporium gypseum y A. fumigatus.
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Schinus molle “MOLLE”
Usos tradicionales:
Zona de recolección: reumatismo (hojas)
Perú: fracturas y antiséptico tópico (planta entera), cicatrizante, hemostático, y para el dolor de dientes (oleorresina uso externo), reumatismo y purgante (oleorresina uso interno), bronquitis, tos (hojas y
frutos), conjuntivitis (hojas); Sudamérica y América Central, : astringente, antibacteriano, estimulante
digestivo, tónico, antiviral, y cicatrizante de heridas.
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• En 1996 se aisló aceite esencial de Piper angustifolium Lam : canfor y canfeno que mostraron actividad bacteriostática y fungistático contra T. mentagrophytes, C. albicans, Cryptococcus neoformans, A. flavus, A. fumigatus, P. aeruginosa y E. coli.
• También especies de Piper lanceafolium, P. guiniense y P. crassenervium mostraron actividad antifungica
• El extracto de hojas de Psidium guajava mostró actividad contra varias especies de Candida entre ellos C. albicans con CMI de 125 µg/mL.
• Se demostró actividad anticandida de una crema elaborada con hojas de Plantago Major según el método de difusión en agar Sabouraud.
• El Schinus molle mostró en un estudio buena a muy fuerte acción antifungica in vitro contra numerosos hongos entre ellos Candida albicans. El aceite esencial de esta especie fue mas activo que el Multifungin, una droga antifungica.
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TABLA Nº 1: PLANTAS UTILIZADAS EN LA TESIS
Especie Nombre común
Lugar de RecolecciónDpto. (Prov./Distrito)
Annona cherimolia Mill Chirimoya Amazonas (Luya/Tingo)
Annona muricata L. Guanábana Lima (Lima/San Martín de Porres)
Bidens pilosa L. Cadillo Amazonas (Luya/Tingo)
Hypericum laricifolium Chinchango Amazonas (Luya/Tingo)
Juglans neotropica Diels Nogal Amazonas (Luya/Tingo)
Piper spp. Matico Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)
Plantago major L. Llantén Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)
Psidium guajava L. Guayaba Amazonas (Luya/Tingo)
Schinus molle L. Molle Apurímac (Aymaraes/Toraya)
Spartium junceum L. Retama Amazonas (Chachapoyas/Chachapoyas)
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TABLA Nº 2: DATOS DE PLANTAS INVESTIGADASNOMBRE CIENTIFICO FAMILIA NOMBRE COMUN PARTE USADA SITIO DE
RECOLECCION
Annona cherimolia Mill. Annonaceae Chirimoya H T
Annona muricata L. Annonaceae Guanábana C,H L
Bidens pilosa L. Asteraceae Cadillo PA T
Hypericum laricifolium Hypericaceae Chinchango PA T
Juglans neotropica Diels Juglandaceae Nogal C T
Piper spp. Piperaceae Matico H C
Plantago major L Plantaginaceae Llantén H C
Psidium guajava L Myrtaceae Guayaba H T
Schinus molle L Annacardiaceae Molle C,H A
Spartium junceum L Fabaceae Retama PE C
Partes de la Planta: C, corteza, H, hojas; PA, partes aéreas (hojas, flores y tallo) PE, planta entera
Sitio de Recolección: A, Aymaraes (Toraya), Apirumac, C, Chachapoyas, Amazonas, L, Lima, Lima, T, Tingo, Amazonas.
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PROCEDIMIENTO
• TECNICAS DE COMPROBACION DE ACTIVIDAD BIOLOGICA
• EXTRACCIONES• REPRODUCIBLES• CUANTITATIVAS• ESTABLES• EFICIENTES para el
EFECTO que se desea DEMOSTRAR
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DIAGRAMA DE FLUJO DE PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
PLANTA ENTERAPLANTA ENTERA
RECOLECCIÓNRECOLECCIÓN
ESTABILIZACIÓNESTABILIZACIÓNY SECADOY SECADO
MOLIENDAMOLIENDA
CONSERVACIÓNCONSERVACIÓN
SELECCIÓNSELECCIÓN
MACERACIÓNMACERACIÓNETANÓLICAETANÓLICA
EXTRACTO SECOEXTRACTO SECOEVALUACIÓN FITOQUÍMICA EVALUACIÓN FITOQUÍMICA
PRELIMINARPRELIMINAR
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METODOLOGIA
A A
A A PLANTA CON PLANTA CON
METABOLITOS METABOLITOS ANTIMICROBIANOSANTIMICROBIANOS
OBTENCION DE EXTRACTOS
EXTRACTO ACUOSO Y ETANOLICO
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
Microorganismos de prueba
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PLANTAS CON ACTIVIDAD PLANTAS CON ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA ANTIMICROBIANA
PRUEBAS DE LABORATORIOPRUEBAS DE LABORATORIO
• Numerosas son las investigaciones que se realizan encaminadas a la busqueda de nuevos compuestos con actividades biologicas a partir de fuentes naturales
Q.F. Mirtha Roque AlcarrazMg en Microbiologia UNMSM
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Objetivos
Evaluacion actividades
Antimicrobianas:• Antibacteriana• Antifungica• Antiviral
Extractos de plantas:
• Acuoso
• Etanolico
• Aceites esenciales
Q.F. Mirtha Roque Alcarraz
Mg en Microbiologia UNMSM
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DIAGRAMA DE FLUJO DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
EXTRACTO SECOEXTRACTO SECO
PRUEBA DE PRUEBA DE DIFUSION EN AGARDIFUSION EN AGAR
PRUEBA DE PRUEBA DE DILUCION EN AGARDILUCION EN AGAR
NEGATIVANEGATIVA POSITIVAPOSITIVA
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Metodologia
• Se han utilizado diversas tecnicas microbiologicas para demostrar la actividad antimicrobiana de plantas frente a microorganismos patogenos para el hombre.
• Metodo de las diluciones seriadas en medio liquido (CMI)
• Metodo de difusion en medios solidos sobre cultivos estandarizados de microorganimos representativos.
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Metodo diluciones seriadas dobles para la determinacion CMI
• Consiste en preparar diluciones seriadas dobles del extracto de la planta a ser evaluada.
• Se adiciona luego la suspension bacteriana a una concentracion de 9 x 108 celulas/ ml
• Se incuban a 37 ºC por 24 horas.• Posteriormente se hace una resiembra en medios
selectivos de acuerdo al microorganismo de prueba.
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Metodo de difusion en medio solido
• Permite la determinacion de actividad antibacteriana y antifungica
• Consiste en inocular medios de cultivo solidos con microorganismos de prueba estandarizados.
• Se utilizan discos o excavaciones donde se inoculan los extractos o diluciones de estos.
• Se deja difundir x 30 minutos y luego se incuba a la temperatura indicada según el microorganismo.
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Staphylococcus aureusCepa muestra clinica
300 mg/ml 75 mg/ml
Escherichia coli ATCC 25922
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA del extracto metanolico de flores de Hypericum laricifolium (Chinchango)
300 mg/ml75 mg/ml